6種殺菌劑對馬鈴薯黑痣病菌的毒力和拌種防效

侯作鵬 惠娜娜 李繼平 鄭果 王立

摘要 為了探索馬鈴薯黑痣病高效防控技術(shù)，本研究選擇240 g/L噻呋酰胺SC、20%嘧菌酯WG、10%苯醚甲環(huán)唑ME、0.3%四霉素AS、100萬孢子/g寡雄腐霉WP、1%申嗪霉素SC等6種殺菌劑進(jìn)行室內(nèi)毒力測定和田間拌種防效試驗。結(jié)果顯示，6種殺菌劑對馬鈴薯黑痣病菌均有抑菌作用，其中1%申嗪霉素SC、20%嘧菌酯WG、0.3%四霉素AS、100 萬孢子/g寡雄腐霉WP等4種殺菌劑的抑菌作用較強(qiáng)，EC50分別為0.004 4、0.233 6、0.256 2 μg/mL和0.475 2 μg/mL。田間拌種結(jié)果顯示，0.3%四霉素AS 100 mL拌100 kg種薯，對馬鈴薯出苗略有抑制作用;3種生物殺菌劑拌種，均能促進(jìn)馬鈴薯植株生長; 6種殺菌劑對馬鈴薯地中莖黑痣病和薯塊黑痣病均有明顯的防效，除0.3%四霉素AS處理外，其他5種處理均有顯著的增產(chǎn)功效，其中100 萬孢子/g寡雄腐霉WP 處理的防效和增產(chǎn)率最高，對馬鈴薯地中莖黑痣病和薯塊黑痣病的防效分別為69.18%和50.04%;增產(chǎn)率為17.13%。

關(guān)鍵詞 馬鈴薯; 黑痣病菌; 殺菌劑; 毒力測定; 拌種; 防效

中圖分類號： S435.32

文獻(xiàn)標(biāo)識碼： B

DOI： 10.16688/j.zwbh.2021052

Abstract In order to explore the highly effective control technology of potato black scurf caused by Rhizoctonia solani，six fungicides， including thifluzamide 240 g/L SC， azoxystrobin 20% WG， difenoconazole 10% ME， tetramycin 0.3% AS， Pythium oligandrum 1×106/g WP and shenqinmycin 1% SC， were selected to test toxicity in laboratory and control effect of seed tuber dressing in the field. The results showed that the six fungicides had inhibitory effect on R.solani of potato. The EC50 of shenqinmycin 1% SC， azoxystrobin 20% WG， tetramycin 0.3% AS and P.oligandrum 1×106/g WP were 0.004 4，0.233 6，0.256 2 μg/mL and 0.475 2 μg/mL， respectively. The experiment of seed tuber dressing in the field showed that 100 kg seed potato tubers mixed with 100 mL tetramycin 0.3% AS had a slight inhibitory effect on the emergence of potato seedlings， and three kinds of biological fungicides could promote the growth of potato plants. The results showed that all the six fungicides had significant control effects on potato stem base black scurf and potato tuber black scurf caused by R.solani. Except for tetramycin 0.3% AS， the other five treatments had significant yield increasing effects. The control efficacy and yield increasing rate of P.oligandrum 1×106/g WP treatment were the highest， and the control efficacies on potato stem base black scurf and potato tuber black scurf were 69.18% and 50.04%， respectively， and the yield increasing rate was 17.13%.

Key words potato; Rhizoctonia solani; fungicide; toxicity; seed tuber dressing; control effect

馬鈴薯作為世界第四大糧食作物，具有較強(qiáng)的適應(yīng)性和豐富的營養(yǎng)，在世界各地廣泛種植[1]。甘肅為馬鈴薯種植大省，全省種植面積約66.67萬hm2[2]。近年來，隨著各地種植面積不斷增加，輪作倒茬受限，馬鈴薯黑痣病呈逐年加重趨勢。該病害由立枯絲核菌Rhizoctonia solani Kühn引起，又稱馬鈴薯莖潰瘍，為土傳兼種傳真菌性病害[3]，主要侵染馬鈴薯幼芽、莖基部及塊莖，嚴(yán)重時導(dǎo)致植株死亡，造成缺苗斷壟，薯塊染病，形成黑痣狀斑點，嚴(yán)重影響馬鈴薯商品性和產(chǎn)值[4]。目前，馬鈴薯黑痣病的防控技術(shù)主要采用化學(xué)農(nóng)藥撒施土壤、種薯拌種和苗期灌根[59]?；瘜W(xué)農(nóng)藥撒施土壤和苗期灌根存在農(nóng)藥用量大、人工費(fèi)用高等問題，種薯拌種是最佳的防控途徑。為此，本研究選擇20%嘧菌酯水分散粒劑、10%苯醚甲環(huán)唑微乳劑、240 g/L噻呋酰胺懸浮劑等3種化學(xué)農(nóng)藥和100萬孢子/g寡雄腐霉可濕性粉劑、1%申嗪霉素懸浮劑、0.3%四霉素水劑等3種生物農(nóng)藥，針對馬鈴薯黑痣病開展了室內(nèi)毒力測定和大田拌種防效對比試驗，以期為生產(chǎn)中馬鈴薯黑痣病拌種防控提供技術(shù)支持。gzslib202204041600

1 材料與方法

1.1 材料

供試菌株：馬鈴薯黑痣病菌Rhizoctonia solani，采自甘肅省永昌縣東寨鎮(zhèn)上四壩村，分離保存在甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所經(jīng)濟(jì)作物病害研究室。

培養(yǎng)基：馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。

供試藥劑及用量：見表1。

供試作物：馬鈴薯，品種為‘大西洋（原種，切塊種薯）。

試驗地塊：試驗地選擇在甘肅省永昌縣東寨鎮(zhèn)上四壩村，海拔2 100 m，晝夜溫差大，年平均氣溫4.8℃，年平均降雨量188 mm，無霜期135 d左右。試驗地前茬為馬鈴薯，水澆地，土質(zhì)為黃黏土，肥力中等。

1.2 方法

1.2.1 含藥培養(yǎng)基的配制

在預(yù)試驗的基礎(chǔ)上，根據(jù)培養(yǎng)基的用量，用移液槍吸取一定量的藥劑母液，將其加入熔化并冷卻至50℃左右的PDA培養(yǎng)基中，充分搖勻后等量倒入直徑為9 cm的培養(yǎng)皿中，配制成含系列濃度藥劑的培養(yǎng)基。每個處理重復(fù) 4 次，以加入等量的清水處理為空白對照。

1.2.2 供試藥劑對馬鈴薯黑痣病菌的毒力測定

采用菌絲生長速率法。用直徑為4.0 mm的打孔器從活化5 d的菌落邊緣打取菌餅，分別移接到含有藥劑5個梯度濃度 （0.05、0.25、1.25、6.25、31.25 μg/mL）的培養(yǎng)基平板上，置（25±0.5）℃恒溫培養(yǎng)箱黑暗培養(yǎng)7 d后，十字交叉法測定菌落直徑（mm），求平均值，計算相對抑制率。

菌絲生長抑制率=[（對照菌落生長直徑-處理菌落生長直徑）/（對照菌落生長直徑-4）]×100%。

1.2.3 馬鈴薯播種方法

白膜微壟溝穴播種植模式（壟高15 cm，壟寬60 cm，溝寬60 cm），株行距為35 cm×60 cm，使用手動穴播機(jī)開穴點播。

1.2.4 種薯處理方法

按每100 kg種薯用0.5 L水，分別按表1加入各藥劑，配成藥液，與切好的種薯充分?jǐn)嚢杌靹?，自然陰干后播種。

1.2.5 試驗設(shè)計

試驗共7個處理，每處理3次重復(fù)，每重復(fù)小區(qū)面積36 m2（3.6 m×10 m），小區(qū)間隔1 m，完全隨機(jī)排列。

1.2.6 調(diào)查方法

出苗時間和出苗率：記錄各處理50%出苗的時間，齊苗后記錄全部出苗數(shù)。

出苗率=（出苗數(shù)/調(diào)查總株數(shù)）×100%。

葉色：在苗期目測每小區(qū)馬鈴薯的葉色情況。采收前每小區(qū)任選5點，每點測5株馬鈴薯株高。統(tǒng)計分析不同處理對馬鈴薯出苗及生長的影響。

產(chǎn)量調(diào)查：采收期每小區(qū)選中間1壟，即1.2 m×10 m，人工采收測產(chǎn)。

增產(chǎn)率=（處理區(qū)產(chǎn)量-空白對照區(qū)產(chǎn)量）/對照區(qū)產(chǎn)量×100%。

馬鈴薯黑痣病調(diào)查方法： 每小區(qū)隨機(jī)選5點，每點調(diào)查10株地中莖發(fā)病級別，計算病情指數(shù)和防效（分級標(biāo)準(zhǔn)見表2）。收獲后每小區(qū)隨機(jī)選出50個薯塊，清洗后統(tǒng)計發(fā)病級別，計算病情指數(shù)及防效（分級標(biāo)準(zhǔn)見表2）。

薯塊病情指數(shù)=Σ（各級薯塊數(shù)×對應(yīng)級別值）/（調(diào)查薯塊數(shù)×5）×100;

地中莖病情指數(shù)=Σ（各病級株數(shù)×對應(yīng)級別值）/（總株數(shù)×5）×100;

防效=（對照病情指數(shù)-處理病情指數(shù)）/（對照病情指數(shù)）×100%。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)利用Excel 2007、DPS 2005.12.26軟件， 采用鄧肯氏新復(fù)極差法（DMRT）對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析， 并對試驗結(jié)果進(jìn)行評價。

2 結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)毒力測定

從表3可見，采用DPS 2005.12.26軟件分析，各供試殺菌劑卡方測驗值均小于7.815（χ20.05，3=7.815，r0.05=0.878），表明6種供試殺菌劑各自的概率分析模型擬合度較好。各供試殺菌劑的P值均大于0.05，表明誤差均方同質(zhì)性較好。1%申嗪霉素AS、20%嘧菌酯WG、0.3%四霉素AS和100萬孢子/g寡雄腐霉菌WP等4種殺菌劑對馬鈴薯黑痣病菌有較強(qiáng)的抑菌作用，其EC50依次為0.004 4、0.233 6、0.256 2 μg/mL和0.475 2 μg/mL。10%苯醚甲環(huán)唑ME和 240 g/L噻呋酰胺SC對馬鈴薯黑痣病菌的抑菌作用相對較弱，EC50依次為11.388 9 μg/mL和6.070 8 μg/mL。

2.2 田間拌種防效

2.2.1 6種殺菌劑對馬鈴薯出苗及長勢的影響

2020年4月28日播種馬鈴薯，6月16日調(diào)查出苗率，7月20日調(diào)查根莖部黑痣病危害情況，9月 21日調(diào)查馬鈴薯株高，9月 23日調(diào)查薯塊黑痣病發(fā)病情況。

田間馬鈴薯出苗及長勢統(tǒng)計顯示，20%嘧菌酯WG、10%苯醚甲環(huán)唑ME、240 g/L噻呋酰胺SC、100萬孢子/g寡雄腐霉WP、1%申嗪霉素SC拌種馬鈴薯切塊種薯，馬鈴薯出苗率均在97%以上，相互間無顯著差異，與對照出苗率（97.25%）亦無顯著差異。0.3%四霉素AS拌種馬鈴薯，出苗率較低，為92.39%，顯著低于其他處理。100萬孢子/g寡雄腐霉菌WP、1%申嗪霉素SC拌種，馬鈴薯成株期株高為74.62～76.38 cm，與0.3%四霉素AS拌種處理無顯著差異，但顯著高于對照（株高69.82 cm）和其他處理（株高69.77～71.26 cm），其他處理及對照之間無顯著差異。苗期葉色觀察顯示，3種生物殺菌劑拌種處理的馬鈴薯葉片顏色較深，其他處理與對照葉色基本一致（表4）。該結(jié)果表明，0.3%四霉素AS 100 mL拌種100 kg切塊種薯，對種薯出苗略有抑制，拌種濃度偏大;100萬孢子/g寡雄腐霉WP、1%申嗪霉素SC、0.3%四霉素AS拌種切塊種薯，具有促進(jìn)馬鈴薯植株生長的功效;20%嘧菌酯WG、10%苯醚甲環(huán)唑ME、240 g/L噻呋酰胺SC拌種切塊種薯，所用劑量對切塊種薯出苗和長勢均無影響。gzslib202204041600

2.2.2 6種殺菌劑拌種對馬鈴薯地中莖和薯塊黑痣病的防效

6種殺菌劑拌種，對馬鈴薯地中莖黑痣病均有明顯的防控效果，其中100萬孢子/g寡雄腐霉WP、240 g/L噻呋酰胺SC、0.3%四霉素AS、20%嘧菌酯WG拌種處理防效較高，依次為69.18%、67.36%、66.05%、65.69%，相互間無顯著差異，顯著高于10%苯醚甲環(huán)唑ME拌種處理的防效（55.83%）。1%申嗪霉素SC拌種處理的防效為58.59%，顯著低于100萬孢子/g寡雄腐霉WP拌種處理，與其他拌種處理無顯著差異（表5）。

比較不同藥劑拌種對馬鈴薯薯塊黑痣病防控效果（表5），100萬孢子/g寡雄腐霉WP拌種處理防效最高，為50.04%，顯著高于20%嘧菌酯WG、240 g/L噻呋酰胺SC、10%苯醚甲環(huán)唑ME 拌種處理（防效依次為45.90%、44.49%、39.51%），與1%申嗪霉素SC、0.3%四霉素AS拌種處理（防效分別為46.73%、47.66%）無顯著差異。

該結(jié)果表明，100萬孢子/g寡雄腐霉WP、0.3%四霉素AS拌種處理對馬鈴薯地中莖黑痣病和薯塊黑痣病均有較好的防控效果;20%嘧菌酯WG、240 g/L噻呋酰胺SC拌種處理對馬鈴薯地中莖黑痣病的防控效果較好，但對馬鈴薯薯塊黑痣病的防控效果略低于100萬孢子/g寡雄腐霉WP處理;1%申嗪霉素SC拌種處理對馬鈴薯地中莖黑痣病的防控效果較低，但對馬鈴薯薯塊黑痣病的防控效果較好;10%苯醚甲環(huán)唑ME拌種對馬鈴薯地中莖黑痣病和薯塊黑痣病的防控效果均顯著低于其他處理。

2.3 田間產(chǎn)量對比

由表6可見，100萬孢子/g寡雄腐霉WP拌種處理增產(chǎn)率最高，為17.13%，顯著高于其他拌種處理;其次為20%嘧菌酯WG、240 g/L噻呋酰胺SC、1%申嗪霉素SC處理，增產(chǎn)率依次為15.26%、14.52%、14.25%，相互間無顯著差異;10%苯醚甲環(huán)唑ME處理增產(chǎn)率為11.01%，顯著低于上述處理;0.3%四霉素AS處理產(chǎn)量顯著低于空白對照，該結(jié)果主要由出苗率低于對照引起。

3 討論

室內(nèi)毒力測定結(jié)果顯示，20%嘧菌酯WG和100萬孢子/g寡雄腐霉WP、1%申嗪霉素SC、0.3%四霉素AS等3種生物殺菌劑對馬鈴薯黑痣病菌的EC50低于10%苯醚甲環(huán)唑ME、240 g/L噻呋酰胺SC等2種化學(xué)殺菌劑，表明該4種殺菌劑對馬鈴薯黑痣病菌抑菌活力高于其他2種殺菌劑，尤其1%申嗪霉素SC抑菌活力最高，該結(jié)果與馬鈴薯地中莖黑痣病防效以及薯塊黑痣病防效不一致，主要原因在于馬鈴薯黑痣病菌對各殺菌劑的敏感度不同，敏感度主要由毒力回歸方程的斜率反映，斜率越大，說明病原菌對藥劑的敏感度越高，即隨著藥劑濃度增加抑制率明顯增加[11]。1%申嗪霉素SC對馬鈴薯黑痣病菌EC50最低，為0.004 4 μg/mL，但其斜率最小，為0.556 6，表明1%申嗪霉素SC隨著使用濃度的增加其防效增加幅度較小。100萬孢子/g寡雄腐霉WP對馬鈴薯黑痣病菌EC50為0.475 2 μg/mL，但其斜率較大，為1.035 8，表明100萬孢子/g寡雄腐霉WP隨著使用濃度增加其防效增加幅度較大。

王銀鈺等[12]測定240 g/L噻呋酰胺SC對馬鈴薯黑痣病菌的EC50為0.73 μg/mL，斜率為1.3。該結(jié)果與本試驗測定的斜率（1.463 6）相近，EC50（6.070 8 μg/mL）差距較大，在馬鈴薯地中莖黑痣病的防效方面差距亦較大，前者防效為12.24%，本試驗為67.36%。對比分析，主要原因或與采集分離的馬鈴薯黑痣病病原菌及田間馬鈴薯地中莖黑痣病發(fā)病嚴(yán)重度差異有關(guān)。

喬廣行等[13]報道， 100萬孢子/g寡雄腐霉WP對馬鈴薯黑痣病菌的EC50為0.549 7 μg/mL，斜率為0.459。該結(jié)果與本試驗測定的EC50 0.475 2 μg/mL基本一致，但與本試驗測定的斜率1.035 8差距較大，主要原因或與采集的馬鈴薯黑痣病菌菌種差異有關(guān)，具體有待進(jìn)一步研究。

100萬孢子/g寡雄腐霉WP拌種，對馬鈴薯黑痣病地中莖和薯塊防控效果均較高，增產(chǎn)顯著，表現(xiàn)了較好的安全性和促進(jìn)馬鈴薯生長的功效;0.3%四霉素AS 100 mL拌種100 kg種薯，對馬鈴薯出苗略有抑制。該結(jié)果與鄭果[14]在甘肅省定西市安定區(qū)馬鈴薯‘新大坪品種上的試驗結(jié)果一致，具有一定的生產(chǎn)參考價值。本研究結(jié)果表明，馬鈴薯黑痣病拌種的最佳藥劑為100萬孢子/g寡雄腐霉WP，最佳拌種劑量為35 g/100 kg種薯。

參考文獻(xiàn)

[1] 謝從華. 馬鈴薯產(chǎn)業(yè)的現(xiàn)狀與發(fā)展[J]. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報（社會科學(xué)版）， 2012（1）：14.

[2] 齊恩芳，劉石，賈小霞，等.甘肅省馬鈴薯主要病毒病發(fā)生情況調(diào)查[J].植物保護(hù)，2018，44（4）：171176.

[3] 王洪凱， 劉開啟， 吳洵恥. 絲核菌分類研究進(jìn)展[J].山東農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版）， 1997， 28（3）： 375382.

[4] KUHN J G. Die Krankheiten der kulturgewchse， ihre ursachen und ihre verhutung， gustav bosselmann [M]. Berlin： Universittsbiliothek Johann Christian Senckenberg， 1858： 312317.

[5] 孟潤杰，王文橋，吳杰，等. 噻呋酰胺與嘧菌酯混配對馬鈴薯黑痣病菌增效作用及其田間防效[J].植物保護(hù)學(xué)報，2018，45（2）：367372.

[6] 郭成瑾，張麗榮，王喜剛，等. 寧夏馬鈴薯黑痣病發(fā)生特點及綜合防控技術(shù)[J].寧夏農(nóng)林科技，2018，59（6）：12.

[7] 陳雯廷， 蒙美蓮， 曲延軍，等. 馬鈴薯黑痣病綜合防控技術(shù)的集成[J].中國馬鈴薯， 2015，29（2）： 103106.

[8] 陳愛昌，魏周全， 駱得功，等.甘肅省定西市馬鈴薯黑痣病菌菌絲融合群的鑒定及藥劑篩選[J].植物保護(hù)，2016，42（1）：197202.

[9] 張建平，哈斯，程玉臣，等. 幾種殺菌劑對馬鈴薯黑痣病的防效[J].中國馬鈴薯，2014，28（1）：5356.

[10]劉寶玉，蒙美蓮，胡俊，等. 5 種殺菌劑對馬鈴薯黑痣病的病菌毒力及田間防效[J]. 中國馬鈴薯，2010，24（5）：306310.

[11]胡秀榮， 鹿連明， 蒲占湑， 等. 7種殺菌劑對柑橘炭疽病菌的室內(nèi)毒力測定[J]. 中國農(nóng)學(xué)通報， 2010， 26（11）： 272275.

[12]王銀鈺，崔凌霄，李統(tǒng)華，等.幾種殺菌劑對馬鈴薯黑痣病的室內(nèi)毒力及田間藥效測定[J]. 中國馬鈴薯，2020，34（6）：359365.

[13]喬廣行，黃金寶，劉梅，等.10種殺菌劑對馬鈴薯黑痣病病菌的室內(nèi)毒力測定[J]. 中國植保導(dǎo)刊，2016，36（12）：6465.

[14]鄭果，惠娜娜，聶江山，等. 5種生物殺菌劑拌種防治馬鈴薯黑痣病的效果[J].中國植保導(dǎo)刊，2019，39（12）：7375.