氣相色譜法測定蔬菜中的辛硫磷農(nóng)藥殘留量

張開志 劉宏程 梅文泉 方海仙 陳興連 耿慧春

摘 要：目的：建立蔬菜中辛硫磷農(nóng)藥殘留量的氣相色譜測定方法。方法：樣品采用乙腈提取，經(jīng)濃縮用丙酮定容，在優(yōu)化的氣相色譜條件下進行測定。結(jié)果：標準曲線線性相關(guān)性好，相關(guān)系數(shù)r為0.999 95，添加量在0.02 mg/kg、0.10 mg/kg和0.50 mg/kg，即添加低、中、高3個水平濃度下，平均回收率為97.4%～99.9%，相對標準偏差0.36%～3.80%，檢出限0.01 mg/kg，定量限0.03 mg/kg。結(jié)論：該方法具有靈敏度高、分析速度快、重現(xiàn)性好等特點，滿足蔬菜中對辛硫磷農(nóng)藥殘留分析要求。

關(guān)鍵詞：蔬菜;辛硫磷;氣相色譜法;農(nóng)藥殘留

Determination of Phoxim Pesticide Residues in Vegetables by Gas Chromatography

ZHANG Kaizhi1， LIU Hongcheng2，3， MEI Wenquan2，3， FANG Haixian2，3， CHEN Xinglian2，3， GENG Huichun2，3

（1.Ruili Agricultural Products Quality and Safety Inspection Station of Yunnan Province， Ruili 678600， China; 2.Quality Standardizing and Testing Technology Institute， Yunnan Academy of Agricultural Science， Kunming 650223， China; 3.Supervision & Testing Center for Farm Products Quality， Ministry of Agriculture Kunming Section， Kunming 650223， China）

Abstract： objective： To establish a method for determination of phoxim pesticide residue in vegetables. Methods： The sample was extracted with actonitrile， purified with acetone， and injected into the gas chromatography for determination of phoxim. Result： Under the condition of optimum gas chromatography， the standard curve of good linear correlation obtained， and the correlation coefficient（r） was 0.999 95. At the adding lever of 0.02 mg/kg， 0.10 mg/kg and 0.50 mg/kg， the average recoveries was 97.4%～99.9%， the relative standard deviations were 0.36%～3.80%， the detection limits （LODs） of method was 0.01 mg/kg，and the quantification limits （LOQs） 0.03 mg/kg. Conclusion： This method has the? characteristics of high sensitivity， fast analysis speed and good reproducibility， and can meet the requirements for the analysis? of phoxim pesticide residue in vegetables.

Keywords： vegetable; phoxim; gas chromatography; pesticide residues

辛硫磷又稱肟硫磷、倍腈松和快殺光等，化學名稱O，O-二乙基-O-α-氰基亞芐基氨基硫逐磷酸酯，分子式C12H15N2O3PS。國家標準《食品安全國家標準 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2021）[1]規(guī)定了大蒜、普通白菜和結(jié)球甘藍中辛硫磷最大殘留限量為0.1 mg/kg，其他蔬菜中辛硫磷的最大殘留限量為0.05 mg/kg。建立高效、快速、精準、靈敏度高的蔬菜中辛硫磷農(nóng)藥殘留量的氣相色譜測定方法具有重要意義。已報道的辛硫磷的測定方法主要有高效液相色譜法[2]、酶抑制法[3]、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[4]、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[5]等。高效液相色譜法檢測靈敏度較低;酶抑制法存在假陽性;氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法，儀器價格比較昂貴，不利于在基層檢測機構(gòu)推廣。本文通過反復(fù)試驗，優(yōu)化了氣相色譜條件，建立了蔬菜中辛硫磷農(nóng)藥殘留量的氣相色譜測定方法。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

1.1.1 試劑與材料

氯化鈉，乙腈（分析純，國藥集團化學試劑有限公司）;丙酮（色譜純，默克股份兩合公司）;0.2 μm有機相濾膜（天津市津騰實驗設(shè)備有限公司）;辛硫磷標準儲備液（1 000 mg/L，國家標準物質(zhì)研究中心）。

1.1.2 儀器

Agilent 7890B氣相色譜儀，帶火焰光度檢測器（625 nm磷濾光片），自動進樣器，分流/不分流進樣器（美國安捷倫公司）;JD500-2型電子天平（沈陽龍騰電子有限公司）;飛利浦三合一攪拌機（中國珠海經(jīng)濟特區(qū)飛利浦家庭電器有限公司）;QL-861型旋渦混合器（海門市其林貝爾儀器制造有限公司）;T25型高速勻漿機（德國IKA公司）;Advantage ML型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（德國海道爾夫）。

1.2 試驗方法

1.2.1 試樣制備

本次試驗所使用蔬菜樣品為番茄，樣品購于昆明市大爾多超市，取可食部分切碎，充分混勻放入攪拌機中搗碎，制成待測樣，放入樣品盒中，于-20～-16 ℃條件下保存，備用。

1.2.2 提取

準確稱取25.0 g試樣放入150 mL具塞三角瓶中，加入50.0 mL乙腈，在高速勻漿機中勻漿2 min后用濾紙過濾，濾液收集在裝有5～7 g氯化鈉的100 mL具塞量筒中，收集濾液40～50 mL，塞上蓋子，劇烈振蕩1 min，在室溫下靜置30 min，使乙腈相和水相分層。

1.2.3 凈化

從具塞量筒中吸取10.0 mL乙腈溶液，放入100 mL具塞三角瓶中，在設(shè)定加熱溫度為40 ℃的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸發(fā)近干，準確加入5.0 mL丙酮混勻，用0.2 μm有機溶劑濾膜過濾后移入2 mL自動進樣器樣品瓶中，待測定。

1.3 氣相色譜條件

采用50%聚苯基甲基硅氧烷（DB-17）色譜柱（30 m×0.53 mm，1.0 μm）作為分離柱;檢測器溫度250 ℃;進樣口溫度180 ℃，不分流進樣;吹掃流量20 mL/min，吹掃時間0.75 min;柱箱溫度采用程序升溫：210 ℃保持1 min;以10 ℃/min升至250 ℃，保持5 min;燃燒氣氫氣流量80 mL/min;空氣流量120 mL/min;載氣為高純氮氣，純度≥99.999%;色譜柱流量15 mL/min;隔墊吹掃流量5 mL/min;尾吹氣90 mL/min。

2 結(jié)果與分析

2.1 氣相色譜條件試驗

2.1.1 色譜柱的選擇

對測定農(nóng)藥殘留常用的3根色譜柱即100%聚甲基硅氧烷（DB-1）柱（30 m×0.53 mm，1.0 μm）、50%聚苯基甲基硅氧烷（DB-17）柱（30 m×0.53 mm，1.0 μm）和（DB-1701）柱（30 m×0.32 mm，0.1 μm）進行比較試驗。DB-1701柱測定辛硫磷的峰型扁平，響應(yīng)低;DB-1柱和DB-17柱峰型都好，但相同濃度標液下DB-1柱峰高和峰面積均比DB-17柱小，因此本次試驗采用50%聚苯基甲基硅氧烷（DB-17）柱作為分離柱。

2.1.2 柱箱初始溫度試驗

柱溫直接影響分離效能和分析時間[6]。對不同的柱箱初始溫度進行了試驗，設(shè)置柱箱初始溫度為150 ℃、160 ℃、170 ℃、180 ℃、190 ℃、200 ℃、210 ℃和220 ℃，測定濃度為0.20 μg/mL辛硫磷。結(jié)果表明，柱箱初始溫度對辛硫磷峰面積影響大。當柱箱初始溫度為210 ℃時，峰型最好，峰面積最大，因此本試驗選擇柱箱初始溫度為210 ℃。

2.1.3 進樣口溫度試驗

對不同的進樣口溫度進行試驗，設(shè)置進樣口溫度為170 ℃、180 ℃、190 ℃、200 ℃和210℃，測定濃度為0.20 μg/mL辛硫磷。結(jié)果表明，進樣口溫度180 ℃時，峰面積最大，因此本試驗選擇進樣口溫度為180 ℃。

2.1.4 尾吹流量試驗

對不同的尾吹流量進行了試驗，設(shè)置尾吹流量30 mL/min、50 mL/min、70 mL/min、90 mL/min、110 mL/min和130 mL/min，測定濃度為0.20 μg/mL辛硫磷。結(jié)果表明，尾吹流量為90 mL/min時，峰面積最大，因此本次試驗選擇尾吹流量為90 mL/min。

2.1.5 色譜柱流量試驗

對不同的色譜柱流量進行試驗，設(shè)置色譜柱流量為10 mL/min、11 mL/min、12 mL/min、13 mL/min、14 mL/min、15 mL/min、16 mL/min和17 mL/min，測定濃度為0.20 μg/mL辛硫磷。結(jié)果表明，色譜柱流量為15 mL/min時，峰面積最大，因此本次試驗選擇色譜柱流量為15 mL/min。

綜上所述，色譜條件中選擇柱箱初始溫度為210 ℃，進樣口溫度為180 ℃，尾吹流量為90 mL/min，色譜柱流量為15 mL/min，辛硫磷峰型最好，峰面積最大。

2.2 標準曲線繪制

配制濃度為0.01 μg/mL、0.02 μg/mL、0.10 μg/mL、0.50 μg/mL和1.00 μg/mL的辛硫磷標準溶液，測定對應(yīng)的峰面積，以進樣濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，作圖，得到標準曲線見圖1。辛硫磷標準曲線回歸方程為Y=4.04×103X-5.09，相關(guān)系數(shù)r為0.999 95。

2.3 方法檢出限、定量限和加標回收率測定

2.3.1 方法的檢出限、定量限以3倍信噪比（S/N=3）確定方法檢出限，以10倍（S/N=10）信噪比確定方法定量限，辛硫磷的檢出限為0.01 mg/kg，定量限為0.03 mg/kg。

2.3.2 加標回收率和相對標準偏差測定

在優(yōu)化的氣相色譜條件下，空白樣品中基線平穩(wěn)，辛硫磷保留時間4.755 min，辛硫磷色譜峰峰形尖銳，有利于高靈敏度測定樣品中的辛硫磷含量。由表1可知，在添加0.02 mg/kg、0.10 mg/kg和0.50 mg/kg，即添加低、中、高3個水平濃度下，加標樣品回收率平均值為97.4%～99.9%，相對標準偏差0.36%～3.80%，符合《實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測》（GB/T 27404—2008）[7]的回收率和精密度要求（回收率80%～110%，相對標準偏差小于11%），說明方法準確度和精密度好，分析速度快，適用于測定蔬菜中辛硫磷農(nóng)藥殘留量。

3 結(jié)論

采用優(yōu)化色譜條件后的氣相色譜法測定蔬菜中辛硫磷的殘留量，在添加0.02 mg/kg、0.10 mg/kg和0.50 mg/kg，即添加低、中、高3個水平濃度下，平均回收率97.4%～99.9%，相對標準偏差0.36%～3.80%，符合有機磷農(nóng)藥殘留分析要求。本文建立的方法具有準確度、精密度和靈敏度高、分析速度快等優(yōu)點，適用于蔬菜中辛硫磷農(nóng)藥殘留量的測定。

參考文獻

[1]國家衛(wèi)生健康委員會，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部，國家市場監(jiān)督管理總局.食品安全國家標準 食品中農(nóng)藥最大殘留限量：GB 2763—2021[S].北京：中國標準出版社，2021.

[2]王運儒，秦玉燕，農(nóng)耀京，等.高效液相色譜法測定馬鈴薯和土壤的辛硫磷殘留[J].食品安全質(zhì)量檢測學報，2017，8（2）：421-427.

[3]王文，劉瑾，盛偉楠，等.采用酶抑制法檢測大蒜中農(nóng)藥殘留的改進方法[J].食品科學，2013，34（12）：135-139.

[4]潘金菊，梁林，劉偉.分散固相萃取-氣相色譜質(zhì)譜法測定花生中辛硫磷的殘留[J].農(nóng)藥科學與管理，2013，34（6）：26-31.

[5]張冬冬，孫佳鵬，張忠寶，等.液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜法測定人參中辛硫磷殘留量[J].吉林農(nóng)業(yè)科技學院學報，2015，24（2）：12-14.

[6]華東理工大學分析化學教研組，四川大學工科化學基礎(chǔ)課程教學基地.分析化學[M].第六版.北京：高等教育出版社，2009.

[7]中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局，中國國家標準化管理委員會.實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測：GB/T 27404—2008[S].北京：中國標準出版社，2008.