克百威快檢試劑盒質(zhì)量評(píng)價(jià)樣品的分析

葉雅真 駱和東

摘 要：為保證克百威膠體金快檢試劑盒質(zhì)量評(píng)價(jià)工作的順利開展，本研究依據(jù)《食品快速檢測(cè)方法評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》制定制樣方案，對(duì)克百威制備樣品進(jìn)行均一性和穩(wěn)定性考察?？疾旖Y(jié)果顯示，克百威制備樣品的均勻性和穩(wěn)定性均符合要求，在制備完成的10 d內(nèi)可用于克百威快檢試劑盒的質(zhì)量評(píng)價(jià)。

關(guān)鍵詞：克百威;膠體金免疫層析;質(zhì)量評(píng)價(jià);食品安全快速檢測(cè)

Analysis of Evaluation Samples for the Quality Assessment of Kits for Rapid Detection of Carbofuran

YE Yazhen1， LUO Hedong1，2*

（1.Xiamen Institute for Food and Drug Quality Control， Xiamen 361012， China; 2.RayKol Group （Xiamen） Co.， Ltd.， Xiamen 361015， China）

Abstract： In order to ensure the smooth development of the quality evaluation of carbofuran colloidal gold rapid detection kit， the sample preparation scheme was formulated according to the Technical Specification on the Assessment of Food Rapid Detection， and the homogeneity and stability of carbofuran prepared samples were investigated. The investigation results showed that the stability and uniformity of the samples prepared by carbofuran were all meet the requirements， which could be used in 10 days after prepared.

Keywords： carbofuran; colloidal gold immunochromatography; quality assessment; rapid detection for food safety

克百威是一種氨基甲酸酯類農(nóng)藥，對(duì)人體具有膽堿神經(jīng)毒性，中毒表現(xiàn)有流涎、流淚、瞳孔縮小及肌束震顫等，廣泛用于果蔬中蚜蟲、地老虎、線蟲等病蟲害的防治[1-2]。食用克百威農(nóng)藥殘留量超標(biāo)的食品將危害身體健康[3-5]?！妒称钒踩珖?guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2021）中規(guī)定了食品中克百威的最大殘留限量，其中果蔬中克百威的最大殘留限量為0.02 mg/kg[6]。收集國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局網(wǎng)站發(fā)布的不合格公告，發(fā)現(xiàn)在對(duì)食用農(nóng)產(chǎn)品的監(jiān)督抽檢過程中，砂糖桔、橙、長(zhǎng)豆、豇豆、茄子和芹菜等多種果蔬中常檢出克百威農(nóng)藥殘留超過最大殘留限量值的問題。調(diào)研中發(fā)現(xiàn)，不合格食用農(nóng)產(chǎn)品的召回是目前一大監(jiān)管難題。因此，全國(guó)各地監(jiān)管部門正逐步推行運(yùn)用快檢技術(shù)進(jìn)行食用農(nóng)產(chǎn)品的快檢監(jiān)管?？税偻z體金快速檢測(cè)技術(shù)

20 min內(nèi)可以出具準(zhǔn)確快檢結(jié)果，已逐步替代傳統(tǒng)的酶抑制率法快檢方法，廣泛應(yīng)用于市場(chǎng)監(jiān)管部門對(duì)果蔬中克百威農(nóng)藥殘留的快檢監(jiān)管。但由于國(guó)內(nèi)快速檢測(cè)產(chǎn)品生產(chǎn)門檻低，監(jiān)管部門難以監(jiān)管，市場(chǎng)上流通的快速檢測(cè)產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊，符合監(jiān)管需求的合格快檢產(chǎn)品較少[7-14]?！蛾P(guān)于規(guī)范食品快速檢測(cè)方法使用管理的意見》（食藥監(jiān)科〔2017〕49號(hào)）文件中要求：正在使用和擬采購(gòu)的快檢產(chǎn)品應(yīng)經(jīng)過評(píng)價(jià)，評(píng)價(jià)結(jié)果顯示不符合國(guó)家相應(yīng)要求的，要立即停止使用或者不得采購(gòu)[15]。為保證克百威膠體金快檢試劑盒質(zhì)量評(píng)價(jià)工作的順利開展，本研究依據(jù)《食品快速檢測(cè)方法評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》（食藥監(jiān)辦科〔2017〕43號(hào)）制定制樣方案，對(duì)克百威制備樣品進(jìn)行均一性和穩(wěn)定性考察[16]。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

丙酮中克百威溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（BePure-20953YB，1 000 μg/mL，BePure）;乙腈（色譜純，德國(guó)MERCK）;甲酸（優(yōu)級(jí)純，德國(guó)MERCK）;氯化鈉（分析純，滬試）;GCB/NH2固相萃取小柱（德國(guó)CNWBOND）;有機(jī)過濾頭（0.22 μm，津騰）。

1.2 儀器與設(shè)備

三重串聯(lián)四極桿液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（Agilent 6470）;色譜柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm，Agilent?UPLC C18）;Milli-Q超純水處理系統(tǒng)（美國(guó)Millipore）;電子天平（德國(guó)Sartorius）;移液槍（德國(guó)Eppendorf）;全自動(dòng)均質(zhì)機(jī)（Reeko AH-30）;臺(tái)式離心機(jī)（美國(guó)Sigma）;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（瑞士BUCHI）;固相萃取儀（Lab Tech）;全自動(dòng)氮吹濃縮儀（Reeko）。

1.3 評(píng)價(jià)方案

依據(jù)《食品快速檢測(cè)方法評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》（食藥監(jiān)辦科〔2017〕43號(hào)）制定制樣方案，制備樣品并進(jìn)行穩(wěn)定性考察，再統(tǒng)一制備評(píng)價(jià)樣品，同時(shí)進(jìn)行均勻性考察。參比方法為《水果和蔬菜中450種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》（GB/T 20769—2008）[17]。

使用經(jīng)參比方法確證的陰性樣為空白蔬菜樣。濃度水平為0 mg/kg、0.01 mg/kg的樣品用于考察試劑盒產(chǎn)品的假陽(yáng)性率;濃度水平為0.02 mg/kg的樣品用于考察試劑盒產(chǎn)品的假陰性率。因此，以空白蔬菜為基質(zhì)，添加克百威標(biāo)準(zhǔn)溶液制成0 mg/kg、0.01 mg/kg 、0.02 mg/kg 3個(gè)添加水平的樣品。用參比方法對(duì)制備樣品進(jìn)行均勻性和穩(wěn)定性驗(yàn)證，穩(wěn)定性考察指標(biāo)t值和均勻性考察指標(biāo)F值均符合要求的制備樣品方可用于試劑盒質(zhì)量評(píng)價(jià)。

2 結(jié)果與分析

2.1 制備樣品的穩(wěn)定性檢驗(yàn)

用參比方法對(duì)制備樣品進(jìn)行穩(wěn)定性檢驗(yàn)，參照《能力驗(yàn)證樣品均勻性和穩(wěn)定性評(píng)價(jià)指南》（CNAS—GL 003：2018）中穩(wěn)定性檢驗(yàn)——t檢驗(yàn)法分析制備的克百威加標(biāo)樣品的穩(wěn)定性[18]。穩(wěn)定性檢驗(yàn)t臨界值t0.05（10）=1.812 5。如表1和表2所示，0.01 mg/kg和0.02 mg/kg 2個(gè)濃度梯度的克百威加標(biāo)樣品在10 d內(nèi)的測(cè)量含量與第1 d的測(cè)量含量比較的t值均<1.812 5，說明在10 d考察期間內(nèi)，克百威含量均無明顯差異。因此，用于試劑盒質(zhì)量評(píng)價(jià)的制備樣品在制備完成的10 d內(nèi)可用于試劑盒質(zhì)量評(píng)價(jià)。

2.2 制備樣品的均勻性檢驗(yàn)

用參比方法對(duì)制備樣品分別進(jìn)行均勻性檢驗(yàn)，參照《能力驗(yàn)證樣品均勻性和穩(wěn)定性評(píng)價(jià)指南》（CNAS—GL 003：2018）中均勻性檢驗(yàn)-單因子方差分析法分析制備的腐霉利加標(biāo)樣品的均勻性。如表3～表6所示，0.01 mg/kg和0.02 mg/kg 2個(gè)濃度梯度的克百威加標(biāo)樣品F值分別為2.79和1.46，均

3 結(jié)論

經(jīng)考察，克百威制備樣品的樣品穩(wěn)定性考察指標(biāo)t值和均勻性考察指標(biāo)F值均符合考察要求，在制備完成的10 d內(nèi)可用于克百威快檢試劑盒的質(zhì)量評(píng)價(jià)。

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作者簡(jiǎn)介：葉雅真（1982—），女，福建廈門人，碩士，高級(jí)工程師。研究方向：食品檢驗(yàn)與食品安全。

通信作者：駱和東（1967—），男，福建廈門人，本科，主任技師。研究方向：食品衛(wèi)生與安全。E-mail：luohedong@126.com。