金標(biāo)法抗-HIV 測(cè)定在初篩檢測(cè)點(diǎn)中的應(yīng)用價(jià)值

張忠貴 左莉

摘要：目的：運(yùn)用在我院健康體檢人群進(jìn)行HIV篩查，歸納總結(jié)出金標(biāo)法抗-HIV檢測(cè)快速、高效、準(zhǔn)確的測(cè)定價(jià)值。方法：用我院2020年03月—2021年03月期間接受健康體檢的1200例受檢者血液標(biāo)本，用金標(biāo)法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性的標(biāo)本送縣疾控中心采用酶聯(lián)免疫法復(fù)檢，經(jīng)復(fù)檢是陽(yáng)性再送上級(jí)疾控中心用免疫印跡法確診試驗(yàn)，確診陽(yáng)性后返回信息納入管理。結(jié)果：金標(biāo)法陽(yáng)性率0.17%，酶聯(lián)免疫法復(fù)檢陽(yáng)性率100%，兩種檢測(cè)方法的結(jié)果對(duì)比差異?。≒>0.05）。結(jié)論：金標(biāo)法抗-HIV檢測(cè)效益高，操作簡(jiǎn)單、成本廉價(jià)，對(duì)群體篩查檢測(cè)結(jié)果快速便捷，實(shí)用檢測(cè)點(diǎn)篩查檢測(cè)。

關(guān)鍵詞：金標(biāo)法;抗—HIV;初篩檢測(cè)點(diǎn);應(yīng)用價(jià)值

【中圖分類號(hào)】F763 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1673-9026（2022）06--01

艾滋病是由人體感染了人類免疫缺陷病毒引起一種的免疫缺陷類疾病，又叫獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS），當(dāng)HIV病毒侵入到人體免疫系統(tǒng)，直接攻擊人體的T淋巴細(xì)胞，導(dǎo)致機(jī)體免疫功能越來越差，呈現(xiàn)出高傳染性，其傳播方式多樣化、病死率高，對(duì)人類面臨著嚴(yán)峻的健康威脅。據(jù)報(bào)道，全球艾滋病已經(jīng)造成3500多萬人喪命，我國(guó)艾滋病病毒攜帶者大約125萬例，發(fā)病率0.9%左右，增長(zhǎng)趨勢(shì)明顯[1]。目前還未研究出艾滋病有效疫苗和特效治愈藥物，所以早篩查、早診斷是發(fā)現(xiàn)HIV病毒感染者的有效手段。我國(guó)已對(duì)HIV流行采取擴(kuò)大篩查檢測(cè)和治療等多種措施，2021年全國(guó)約有1.43萬人接受HIV檢測(cè)，占總?cè)丝诘?0%左右，所以早篩查、早診斷能夠?yàn)轭A(yù)防和提供治療方案可靠依據(jù)，抑制病情惡化，爭(zhēng)取延長(zhǎng)生存時(shí)間[2]。對(duì)此，本研究運(yùn)用金標(biāo)法對(duì)人群進(jìn)行篩查，結(jié)合初篩陽(yáng)性的進(jìn)一步檢查，總結(jié)分析初篩檢查重要性，

1資料與方法

1.1臨床資料

從我院2020年03月—2021年03期間接受健康檢查的1200例受檢者血液標(biāo)本，男女比例為550：650;年齡區(qū)間45～65歲，平均年齡（56.2±2.8）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）全部人群均接受金標(biāo)法檢測(cè);（2）能表達(dá)自身實(shí)際需求，無溝通交流障礙，自愿參與本研究，簽訂知情同意書。以下方面排除篩查：（1）患有精神或心理疾病者;（2）合并惡性腫瘤、嚴(yán)重感染、肝腎功能不全者;（3）對(duì)治療和干預(yù)均不配合者。

1.2方法

抽取篩受檢者空腹靜脈血3～5mL，對(duì)其進(jìn)行離心，分離處理，取上清液進(jìn)行檢測(cè)，嚴(yán)格遵照無菌操作規(guī)范，確保血液標(biāo)本不污染。

金標(biāo)法：采用膠體金免疫技術(shù)和層析原理，定性檢測(cè)全血、血清或血漿樣本中的人類免疫缺陷病毒（HIV）1/2型抗體。選擇金標(biāo)法檢測(cè)試劑盒（英科新創(chuàng)科技有限公司生產(chǎn)），按照試劑操作說明書開展檢測(cè)：將待測(cè)標(biāo)本平行室溫編號(hào)，取出試條/卡從包裝中取出平衡至室溫，打開包裝平衡至室溫，用微量加樣器取60μL血清樣本，滴加到試劑加樣處，30分鐘內(nèi)觀察并記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ ELISA ）：主要檢測(cè)流程為添加酶反應(yīng)的底物?？h疾控中心選擇使用 Thermo MK3 全自動(dòng)酶標(biāo)儀及配套酶聯(lián)免疫試劑，嚴(yán)格按照說明書開展規(guī)范操作，檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)為波長(zhǎng)（檢測(cè)波長(zhǎng) 450nm，參考波長(zhǎng) 630nm）A值。

用金標(biāo)法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)為陽(yáng)性的標(biāo)本，進(jìn)行復(fù)查陽(yáng)性的標(biāo)本及時(shí)送縣疾控中心用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性再?gòu)?fù)查是陽(yáng)性，迅速送上級(jí)疾控中心開展免疫印跡檢測(cè)確診試驗(yàn)。在檢測(cè)過程中，嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)試劑及儀器相關(guān)操作說明開展實(shí)驗(yàn)檢測(cè)，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性和精準(zhǔn)度。

1.3觀察指標(biāo)

金標(biāo)法：放置半小時(shí)內(nèi)，肉眼觀察樣品。若測(cè)試條/卡在檢測(cè)線和對(duì)照線位置各出現(xiàn)一條（即兩條）紫紅色條帶可確定為陽(yáng)性，但如檢測(cè)線紫紅色條帶隱約可見，建議重查或更換試劑復(fù)查;若試條/卡在對(duì)照線位置呈現(xiàn)出一條紫紅色條帶，那么結(jié)果可確定為陰性，并如實(shí)記錄。如試條/卡在對(duì)照線位置未呈現(xiàn)出紫紅色條帶應(yīng)停止使用，查找原因。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)：以A值為檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，當(dāng)A值≥1時(shí)，血樣檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性;若A值<1時(shí)，那么血樣檢測(cè)結(jié)果為陰性[3]。如實(shí)檢測(cè)兩種方法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，對(duì)比分析。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS22.0行數(shù)據(jù)的分析處理，以率（%）表示計(jì)數(shù)資料，若P<0.05即表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

對(duì)比分析兩種檢測(cè)方法檢測(cè)結(jié)果，在第一次檢驗(yàn)中，1200例血清標(biāo)本金標(biāo)法檢測(cè)陽(yáng)性例數(shù)2例，陽(yáng)性率0.17%，立即復(fù)查2例陽(yáng)性結(jié)果吻合，陽(yáng)性率100%;;2例陽(yáng)性標(biāo)本送縣疾

控中心酶聯(lián)免疫法檢測(cè)陽(yáng)性，陽(yáng)性率100%。復(fù)查2例陽(yáng)性標(biāo)本結(jié)果吻合，陽(yáng)性率100%，由縣繼2例陽(yáng)性標(biāo)本向上級(jí)疾控用免疫印跡確診2例陽(yáng)性結(jié)果一致，確診陽(yáng)性率為100%。通過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組檢測(cè)方法結(jié)果差異不明顯（P>0.05），詳見表1。

3討論

艾滋病是全球感染性疾病，HIV病毒是誘發(fā)因素，HIV病毒可攻擊人體免疫系統(tǒng)，抑制CD4T淋巴細(xì)胞生長(zhǎng)，導(dǎo)致人體漸漸失去了免疫功能，抵抗力差感染疾病而致死亡[4]。所以，在這一疾病影響下，人體感染其他疾病的風(fēng)險(xiǎn)高，并逐漸惡化成惡性腫瘤，病死率居高不下，成為了人類主要?dú)⑹种?。由于其傳播特征和死亡率高，艾滋病已是全球醫(yī)學(xué)攻克的難題，影響到社會(huì)的和諧與發(fā)展，已引起社會(huì)關(guān)注。隨著我國(guó)社會(huì)經(jīng)濟(jì)高速發(fā)展，改革開放步伐加快，國(guó)外文化的引進(jìn)與國(guó)內(nèi)文化共同沖擊著傳統(tǒng)觀念，導(dǎo)致社會(huì)性觀念越來越開放，艾滋病患病率在持續(xù)增長(zhǎng)。加之艾滋病病毒攜帶者潛伏期各不相同，部分還會(huì)合并罕見感染及腫瘤疾病，這是因?yàn)榘滩∪巳好庖呦到y(tǒng)被嚴(yán)重破壞而導(dǎo)致，人體關(guān)鍵性免疫系統(tǒng)一旦被破壞，對(duì)于感染者便會(huì)是一種災(zāi)難[5]。另外，因社會(huì)大眾對(duì)艾滋病整體上存在錯(cuò)誤認(rèn)知，導(dǎo)致患者內(nèi)心承受巨大的痛楚與壓力，患上該疾病的患者往往難以啟齒，再加上該疾病初期癥狀不明顯，臨床診療難度較大，這也是造成很多確診艾滋病患者病情進(jìn)一步惡化的原因，未及時(shí)得到接受管理治療，使得病死率持續(xù)增長(zhǎng)。為了能夠有效防控艾滋病流行，我國(guó)已采取高效、便捷的篩查手段擴(kuò)大檢測(cè)目標(biāo)人群，及時(shí)發(fā)現(xiàn)潛在艾滋病感染人群，探索疫苗和有效藥物的研究，為HIV防治工作具有重要意義。

目前對(duì)于艾滋病診斷，主要采取HIV 抗體檢測(cè)方法（金標(biāo)法、酶聯(lián)免疫吸附法、明膠顆粒凝集試驗(yàn)、免疫熒光檢測(cè)法、免疫印跡蛋白印跡檢測(cè)法、放射免疫沉淀法等），其中，金標(biāo)法是一種常見的初篩試驗(yàn)檢測(cè)方法，靈敏性好、特異性高，操作便捷，快速、準(zhǔn)確率較高，無需特殊設(shè)備 ，可用于批量檢測(cè) ，也可用于少量標(biāo)本的檢測(cè) 。有報(bào)告篩查試劑方法的不同其結(jié)果也有所差異 ，曾篩查試驗(yàn)的假陽(yáng)性率為 0.08 ～0.12，假陽(yáng)性反應(yīng)的原因可能是與篩查試劑敏感高及一些傳染病病原體和某些自身免疫性疾病患者自身抗原與HIV某些抗原決定簇有交反應(yīng)有關(guān)[6-7]，假陽(yáng)性標(biāo)本存在于WB試驗(yàn)抗體陰性與不確定標(biāo)本中，且GICA顯色較弱 ，因此篩查弱陽(yáng)性結(jié)果尤其要慎重，必須經(jīng)確證試驗(yàn)才能報(bào)告結(jié)果。 金標(biāo)法檢測(cè)方法在短時(shí)間內(nèi)可獲取結(jié)果，操作流程簡(jiǎn)單，可迅速獲取準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果，而酶聯(lián)免疫法則是以酶免疫測(cè)定原理為基礎(chǔ)，積極改良的一種新型技術(shù)，主要包括了雙抗原夾心法、間接法以及抗體競(jìng)爭(zhēng)法三種類型，本次使用第三代雙抗原夾心法試劑檢測(cè)（萬泰公司提供）。

本次研究選取 1200例血清標(biāo)品，采用金標(biāo)法檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)2例陽(yáng)性患者，說明基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)設(shè)置HIV檢測(cè)點(diǎn)的必要性，實(shí)施金標(biāo)法HIV檢測(cè)篩查是當(dāng)前艾滋病防治的重要手段，中老年群體預(yù)防不能忽視。在本次抗 HIV檢測(cè)人群中，經(jīng)過陽(yáng)性率發(fā)金標(biāo)法與酶聯(lián)免疫法的檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果一致，說明金標(biāo)法抗 HIV檢測(cè)可普及性，方法簡(jiǎn)單，準(zhǔn)確率高，通過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩種檢測(cè)方法結(jié)果未發(fā)現(xiàn)明顯差異（P>0.05）。當(dāng)然兩種檢測(cè)方法具有較高的準(zhǔn)確性，運(yùn)用價(jià)值相對(duì)較高，值得在臨床推廣與使用。然而，兩種檢測(cè)方法均存在一定的優(yōu)劣勢(shì)，作為常規(guī)篩查方法的金標(biāo)法準(zhǔn)確度高，操作便捷，經(jīng)濟(jì)實(shí)惠，只需要使用金標(biāo)試紙便可完成檢測(cè)，成本投入較低，且只需半小時(shí)便能夠獲取檢測(cè)結(jié)果，酶聯(lián)免疫檢測(cè)法則需要使用十分精密的儀器才可完成診斷，操作較為復(fù)雜，且成本投入較高，是艾滋病臨床診斷的基礎(chǔ)性方法，準(zhǔn)確率較高，但有存在客觀影響因素，檢測(cè)需要時(shí)間較長(zhǎng)。對(duì)于急診危急病人檢測(cè)不適用，甚則會(huì)延誤病人病情[8]。如急診手術(shù)會(huì)增加艾滋病傳播風(fēng)險(xiǎn)，所以，借助金標(biāo)法可解決急診病人檢測(cè)的這種情況，讓臨床醫(yī)生掌握病情，科學(xué)判斷，科學(xué)合理制定治療方案?？傊?，金標(biāo)法和酶聯(lián)免疫檢測(cè)法在抗HIV中準(zhǔn)確率較高，相比之下金標(biāo)法有很多優(yōu)勢(shì)，節(jié)省成本，對(duì)診斷結(jié)果的客觀因素影響小，操作便捷，適合大范圍人群范圍篩查檢測(cè)，尤其是急診病人能及時(shí)解決檢測(cè)結(jié)果，可根據(jù)實(shí)際推廣使用。當(dāng)然，也不能忽視金標(biāo)法局限性，診斷特異性和敏感性應(yīng)相對(duì)較低，這得在將來學(xué)者在臨床研究中怎樣提高金標(biāo)法檢測(cè)特異性與敏感度是個(gè)深思考慮課題。目前，在大規(guī)模人群HIV篩查診斷方面，金標(biāo)法抗HIV檢測(cè)是及時(shí)有效可行的方法，及時(shí)早發(fā)現(xiàn)病人，納入規(guī)范管理，為篩查出患者及時(shí)制定可行的方案，延長(zhǎng)其生存價(jià)值。

綜上所述可見，金標(biāo)法、酶聯(lián)免疫檢測(cè)法均具有較高準(zhǔn)確性，然而金標(biāo)法優(yōu)勢(shì)更為明顯，檢測(cè)效益高，操作簡(jiǎn)單、成本廉價(jià)、操作簡(jiǎn)單，對(duì)群體篩查檢測(cè)結(jié)果快速便捷，實(shí)用檢測(cè)點(diǎn)篩查檢測(cè)。同時(shí)，這一檢測(cè)方法適用人群較廣，特別是對(duì)于病情危急的患者診斷價(jià)值更為明顯，因此可在臨床上廣泛推廣運(yùn)用。值得注意的是，金標(biāo)法使用也存在一定局限性，由于該檢測(cè)方法發(fā)展相對(duì)較晚，診斷技術(shù)尚未完全成熟，特異性、敏感度相對(duì)較低，對(duì)此將來臨床研究的重點(diǎn)在于怎樣提高金標(biāo)法特異性與敏感度。

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