血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶、S100β蛋白、腦紅蛋白對(duì)早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷的診斷價(jià)值

李曉菲

在近年來對(duì)我國(guó)女性孕產(chǎn)情況的調(diào)查中，發(fā)現(xiàn)在分娩總數(shù)中，早產(chǎn)例數(shù)占15%左右[1]。早產(chǎn)兒的身體素質(zhì)對(duì)比正常的新生兒更差，特別是在顱腦的發(fā)育方面，早產(chǎn)兒更容易出現(xiàn)的腦損傷，給早產(chǎn)兒的健康成長(zhǎng)以及生命安全帶來了嚴(yán)重的負(fù)面影響[2]。因此，針對(duì)早產(chǎn)兒腦損傷問題，?？漆t(yī)生需要積極研究如何減少腦損傷給早產(chǎn)兒造成的智力發(fā)育等方面的障礙問題，提升早產(chǎn)兒生存率以及未來的生活質(zhì)量[3,4]。當(dāng)前的研究階段，對(duì)新生兒的腦損傷進(jìn)行診斷排查，主要的診斷方式包括顱腦B超、CT和MRI等。CT和MRI檢查方式，劣勢(shì)在于輻射量較大，對(duì)兒童身體造成傷害。使用顱腦B超或影像學(xué)檢查，觀察范圍的受限較大[5]。而通過對(duì)血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、S100鈣結(jié)合蛋白β(S100β)蛋白、腦紅蛋白值的檢測(cè)，可以明確早產(chǎn)兒的腦損傷情況，對(duì)早產(chǎn)兒的身體不會(huì)造成傷害[6,7]。為此現(xiàn)對(duì)血清NSE、S100β蛋白、腦紅蛋白對(duì)早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷的臨床診斷價(jià)值進(jìn)行分析，為對(duì)早產(chǎn)兒的早期腦損傷的診斷提供切實(shí)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2016年12月至2019年12月入住我科室的早產(chǎn)兒60例，作為本次研究對(duì)象。在出生72 h對(duì)所有早產(chǎn)兒進(jìn)行顱腦B超或影像學(xué)檢查。顱腦B超或影像學(xué)檢查結(jié)果反映出現(xiàn)了顱內(nèi)出血、局限性缺血缺氧、彌漫性腦水腫，可診斷為腦損傷。根據(jù)顱腦B超或影像學(xué)檢查結(jié)果，將60例早產(chǎn)兒分為腦損傷組(n=29)及非腦損傷組(n=31)。腦損傷組中，男18例，女11例；孕周34～29周，平均孕周(31.86±1.75)周。非腦損傷組中，其中男17例，女14例；孕周36～28周，平均孕周(33.12±2.51)周。2組早產(chǎn)兒的性別比、孕周等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)：①新生兒的胎齡均在28～37周；②所有產(chǎn)婦知曉本次研究的方法、目的，簽署了知情同意書；③本次研究經(jīng)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)：①母親患嚴(yán)重心血管疾病的早產(chǎn)兒；②母親有肝腎功能障礙的早產(chǎn)兒；③排除機(jī)械性損傷以及胎位異常的早產(chǎn)兒。

1.3 檢驗(yàn)方法

1.3.1 標(biāo)本采集：在早產(chǎn)兒出生24 h后，抽取靜脈血3～5 ml，放置于帶促凝的無菌管中，靜置30 min。血液凝固后，對(duì)血液樣本進(jìn)行離心(離心半徑10 cm，時(shí)長(zhǎng)為10 min，速率為3 000 r/min)。取得到的上清液，置于-20℃環(huán)境下冰凍保存。在抽血過程中，嚴(yán)格按照無菌規(guī)范操作。

1.3.2 檢測(cè)方法：采用電化學(xué)發(fā)光儀(羅氏E601)，對(duì)血清NSE、S100β蛋白進(jìn)行測(cè)定。采用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)腦紅蛋白值。

1.4 觀察指標(biāo) (1)對(duì)2組血清NSE、S100β蛋白、腦紅蛋白值進(jìn)行測(cè)定。(2)觀察血清NSE、S100β蛋白、腦紅蛋白值對(duì)腦損傷的診斷效果，包括靈敏度與特異度。(3)觀察血清NSE、S100β蛋白、腦紅蛋白值與腦損傷程度的相關(guān)性。

2 結(jié)果

2.1 2組血清NSE、S100β蛋白水平和腦紅蛋白比較 腦損傷組的血清NSE值、S100β蛋白水平和腦紅蛋白值明顯高于非腦損傷組(P<0.05)。見表1。

表1 2組血清NSE、S100β蛋白水平和腦紅蛋白水平比較

2.2 3種指標(biāo)單獨(dú)與聯(lián)合診斷早產(chǎn)兒腦損傷的效能比較 3種指標(biāo)聯(lián)合對(duì)早產(chǎn)兒腦損傷的診斷效能高于三種指標(biāo)的單項(xiàng)診斷效能。見表2。

表2 3種指標(biāo)單獨(dú)與聯(lián)合診斷早產(chǎn)兒腦損傷的效能比較 %

2.3 3種指標(biāo)與早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷的相關(guān)性 血清NSE、S100β和腦紅蛋白測(cè)定值與早產(chǎn)兒的腦損傷程度呈正相關(guān)(P<0.05)。見表3。

表3 NSE、S100β和腦紅蛋白與腦損傷程度的相關(guān)性分析

3 討論

在現(xiàn)代神經(jīng)影像學(xué)、發(fā)育生物學(xué)不斷發(fā)展的過程中，研究者對(duì)于早產(chǎn)兒腦損傷的相關(guān)研究取得了越來越多的進(jìn)展，在對(duì)早產(chǎn)兒腦損傷的病因、病理及發(fā)病機(jī)制研究中，有了更深入的認(rèn)識(shí)[8]。早產(chǎn)是造成新生兒死亡的最重要因素之一，早產(chǎn)兒的腦結(jié)構(gòu)其他功能發(fā)育情況欠佳，且容易缺氧缺血、感染，出現(xiàn)嚴(yán)重的功能結(jié)構(gòu)受損，身體發(fā)育會(huì)進(jìn)一步出現(xiàn)偏差[9]。最終，早產(chǎn)兒的認(rèn)知、運(yùn)動(dòng)將出現(xiàn)明顯的障礙。在臨床醫(yī)學(xué)發(fā)展過程中，針對(duì)早產(chǎn)兒腦損傷的檢查，主要是采用影像學(xué)檢查的方式，通過對(duì)振幅的觀察，并整合腦電圖結(jié)果，可以起到對(duì)新生兒早期的腦損傷進(jìn)行診斷[10]。顱腦B超檢查，在診斷早產(chǎn)兒的腦白質(zhì)損傷中，具有操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)支出較低、輻射低的優(yōu)勢(shì)。特別是后來發(fā)展出的床旁顱腦B超檢查，能夠直接反映出患兒腦白質(zhì)損傷情況的動(dòng)態(tài)圖像，提升了腦白質(zhì)損傷檢測(cè)的有效性。但是動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)后需要更高操作技術(shù)、更高讀片能力的醫(yī)生來完成，可能不利于該檢測(cè)技術(shù)的臨床推廣應(yīng)用。此外該檢測(cè)方式要想取得較為精準(zhǔn)的結(jié)果，需要透過患兒的囟門操作，如果患兒囟門的面積較小，則會(huì)給檢查帶來一定的不便。受到視野盲區(qū)的影響，檢測(cè)容易出現(xiàn)漏診問題。

另外還有顱腦核磁共振檢查，能夠有效可定性和定量地評(píng)價(jià)腦白質(zhì)的髓鞘化,還可用于腦功能和代謝的評(píng)價(jià)。 對(duì)微小性非囊性腦白質(zhì)損傷的評(píng)價(jià)明顯優(yōu)于超聲學(xué)方法,目前臨床將顱腦核磁共振檢查作為腦損傷診斷以及不良神經(jīng)發(fā)育結(jié)局預(yù)測(cè)的重要方法。事實(shí)上患兒腦白質(zhì)的損傷是一個(gè)逐漸加深的過程，腦損傷的程度并不是一成不變的。病程逐漸加深，顱腦核磁共振檢查結(jié)果的精準(zhǔn)性將受到嚴(yán)重不良影響，容易出現(xiàn)假陰性的問題。振幅整合腦電圖(aEEG) 在檢測(cè)新生兒腦損傷中具有操作方便、可在床旁操作、結(jié)果容易讀取等優(yōu)勢(shì)。該檢測(cè)技術(shù)在國(guó)外臨床檢測(cè)中已得到初步應(yīng)用，但國(guó)內(nèi)對(duì)其研究?jī)?nèi)容較少，應(yīng)用范圍也不夠廣。有研究發(fā)現(xiàn)對(duì)患兒采用振幅整合腦電圖的檢測(cè)方式診斷腦白質(zhì)損傷，檢測(cè)過程受到大功率電源和其他電器設(shè)備的干擾較大。對(duì)處于重癥監(jiān)護(hù)病房的患兒而言，周圍監(jiān)護(hù)儀及呼吸機(jī)等設(shè)備眾多，振幅整合腦電圖檢測(cè)的有效性無法得到保障。由上述內(nèi)容可以發(fā)現(xiàn)，傳統(tǒng)的對(duì)新生兒腦白質(zhì)損傷的檢查方式受到一定外在條件的限制，并不適用于所有情況下的早產(chǎn)兒腦損傷診斷。

而采取血生化檢查的方式，可以明確得出可以反眏腦損傷程度的生化指標(biāo)，起到輔助檢查的作用。NSE和 S100蛋白、腦紅蛋白是目前常用的腦損傷生化標(biāo)志物。重點(diǎn)檢測(cè)這三項(xiàng)指標(biāo)對(duì)于早產(chǎn)兒早期腦損傷的發(fā)現(xiàn)和干預(yù)具有突出效果，有利于提升早產(chǎn)兒的生存率以及未來的生活質(zhì)量。但上述的三項(xiàng)標(biāo)志物的特異性不高,腦梗死、腦膜炎、多發(fā)性硬化、顱內(nèi)出血等其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病，通過各自不同的發(fā)病機(jī)制都可能導(dǎo)致這三種標(biāo)志物的升高。另外,這三項(xiàng)標(biāo)志物在檢測(cè)方法、標(biāo)準(zhǔn)值的設(shè)定、血液濃度會(huì)在病程變化的過程、采血時(shí)間的變化等方面受到的影響，仍需要進(jìn)一步研究明確。

血清NSE主要存在于大腦神經(jīng)元及神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞中。其在大腦神經(jīng)元、神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞中的含量，是它在神經(jīng)內(nèi)皮來源細(xì)胞、非神經(jīng)組織細(xì)胞中含量的上百倍之多。血清NSE是相關(guān)研究領(lǐng)域公認(rèn)的僅存在于神經(jīng)元內(nèi)及神經(jīng)元分泌細(xì)胞胞質(zhì)中的一種酸性可溶性蛋白，可以作為檢測(cè)神經(jīng)元受損的一項(xiàng)敏感標(biāo)記物。血清NSE在早產(chǎn)兒出現(xiàn)腦部缺氧癥狀時(shí)，會(huì)從胞質(zhì)中進(jìn)入腦脊液，再通過血腦屏障進(jìn)入人體血液循環(huán)中，由此可以通過測(cè)定血液中的NSE含量，來有效判斷早產(chǎn)兒的腦內(nèi)神經(jīng)元是否出現(xiàn)損傷或壞死及壞死的程度如何。本研究中，對(duì)2組血清NSE進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)腦損傷組的血清NSE值明顯高于非腦損傷組(P<0.05)。在孫鳳杰等[11]研究中，發(fā)現(xiàn)在腦細(xì)胞受損時(shí)，血清NSE含量與腦損傷程度呈正相關(guān)，與本研究結(jié)果一致，早產(chǎn)新生兒的血清NSE水平高于足月新生兒，腦損傷新生兒的血清NSE水平高于健康新生兒。

S100β蛋白是一種酸性鈣蛋白，在神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、星形細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞等中，S100β蛋白作為高濃度鈣結(jié)合蛋白而存在。S100β具有兩面性，在濃度較低的情況下，S100β蛋白對(duì)人體的營(yíng)養(yǎng)功能較高。當(dāng)S100β蛋白的濃度升至較高水平時(shí)，則對(duì)人體會(huì)造成神經(jīng)毒性效果。本次研究結(jié)果反映腦損傷組S100β蛋白水平明顯高于非腦損傷組(P<0.05)。在李宏穎等[12]研究中發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)腦損傷的早產(chǎn)兒，其S100β蛋白明顯高于非腦損傷的早產(chǎn)兒。表明在對(duì)新生兒腦損傷的早期診斷和損傷程度的判斷中，S100β蛋白可以成為診斷的特異指標(biāo)之一。

腦紅蛋白對(duì)氧具有高度的親和性，與肌紅蛋白、血紅蛋白均屬于攜氧球蛋白，主要在腦組織中表達(dá)，可特異性向腦組織供氧。腦紅蛋白將參與到中樞系統(tǒng)的氧傳輸過程中，當(dāng)腦處于缺氧缺血狀態(tài)時(shí)，腦紅蛋白表達(dá)增加，對(duì)腦缺血、缺氧具有重要的保護(hù)作用[13]。在腦供血、供氧正常的情況下，腦紅蛋白在腦脊液和血清中的含量較低。在姚妹[14]的研究中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)腦組織受損時(shí)，血腦脊液屏障的通透性得到增加，大分子蛋白泄露，腦紅蛋白在腦脊液、血清中的含量增高。本研究也說明其水平升高可以反應(yīng)腦損傷的水平。本次研究中，腦損傷組的血清S100β蛋白、NSE及NGβ水平，均明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。血清NSE、S100β蛋白、腦紅蛋白值與腦損傷呈線性正相關(guān)。綜上所述，血清NSE、S100β蛋白、腦紅蛋白值的測(cè)定，可以判斷神經(jīng)細(xì)胞是否損傷，評(píng)定神經(jīng)細(xì)胞的受損程度?？梢詫?duì)于診斷早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值。