車前子多糖的分離純化及其功能性質(zhì)研究

陳天麗

【摘要】本文基于車前子多糖特點(diǎn)，對(duì)其分離純化及功能性質(zhì)進(jìn)行初步探究，以期為相關(guān)應(yīng)用研究提供一定的參考。

【關(guān)鍵詞】車前子；多糖；分離純化；功能性質(zhì)

車前子為車前科車前屬植物，藥食兩用，其主要有效成分為車前子多糖，目前國(guó)內(nèi)外對(duì)車前子多糖的提取、純化、生物活性的研究均取得了實(shí)質(zhì)性進(jìn)展，含量測(cè)定方法和制備工藝己漸趨成熟，現(xiàn)對(duì)其分離純化及其功能性質(zhì)介紹如下。

1車前子多糖分離純化分析

1.1資料與方法

1.1.1資料

實(shí)驗(yàn)所用儀器包括紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、超聲波清洗器、電子天平、冰箱、恒溫水浴鍋及高效液相色譜儀，試劑有氯化鈉、氫氧化鈉、三氯甲烷、乙醚等，均為分析純，乙醇為食用級(jí)，自選車前子樣品。

1.1.2方法

取樣本15g，置于乙醇容器內(nèi)浸泡，過(guò)濾后入烘箱內(nèi)揮干，先制備車前子粗多糖，再配制多糖液，規(guī)格為10mg/ml，采用Sevage法（單法）和酶法-Sevage法（聯(lián)用法）獲取多糖，溶解粗多糖和兩種已脫離蛋白多糖并測(cè)定各自含量，計(jì)算蛋白質(zhì)脫除率和多糖得率，觀察多糖示差及紫外峰形變化；柱層析純化車前子多糖，并以HPGPC法測(cè)定復(fù)合物分子量。

1.2結(jié)果與討論

1.2.1兩種脫蛋白方法比較

先后采用酶法和Sevage法脫蛋白，可減少脫除次數(shù)，其中聯(lián)用法蛋白質(zhì)脫除率和多糖得率均高于單法，見(jiàn)表1。

1.2.2柱層析純化結(jié)果及多糖分子量

柱層析純化結(jié)果顯示，多糖吸收峰最大值位置與紫外檢測(cè)到的蛋白質(zhì)特征吸收峰基本一致，組分即為糖與蛋白的復(fù)合物，葡萄糖系列測(cè)得的保留時(shí)間和分配系數(shù)如表2，標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)得多糖分子量為1898584Da。

2車前子多糖功能性質(zhì)分析

2.1資料與方法

2.1.1資料

實(shí)驗(yàn)所用儀器包括旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、冷凍干燥機(jī)、離心沉淀機(jī)、物性測(cè)試儀和程序流變儀，試劑有氯化鈉、三氯甲烷、乙醚、正丁醇等，均為分析純，乙醇為工業(yè)級(jí)，自選車前子樣品。

2.1.2方法

制取車前子精制多糖，采用減壓干燥法、灼燒法、苯酚-硫酸法、咔唑-硫酸法和考馬斯亮藍(lán)法，分別測(cè)定多糖水分、灰分、總糖、糖醛酸和蛋白質(zhì)含量，以粗多糖溶液為樣本，觀察剪切速率、溫度、濃度、pH、水化時(shí)間、凍融及鹽對(duì)多糖溶液黏度、凝膠和熱穩(wěn)定性的影響，多糖溶液凝膠點(diǎn)和熔化點(diǎn)均從差熱曲線中獲得。

2.2結(jié)果與討論

2.2.1多糖初級(jí)結(jié)構(gòu)及化學(xué)成分分析

車前子粗多糖成分組成見(jiàn)表3。

2.2.2多糖流變、凝膠特性及熱穩(wěn)定性分析

多糖溶液為剪切變稀的假塑性流體，保形性較好，溶液粘度隨著溫度的升高而降低，對(duì)鹽有較好的兼容性，在pH5～10之間較為穩(wěn)定；為熱可逆行凝膠，凝膠強(qiáng)度隨著濃度的增加而增強(qiáng)，pH<4及加入鹽后，凝膠強(qiáng)度會(huì)有所增大；DSC檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，多糖溶液在加熱和冷卻過(guò)程中均未見(jiàn)明顯相變，說(shuō)明其無(wú)明顯凝固點(diǎn)和熔化點(diǎn)，且熱穩(wěn)定性較好。

3小結(jié)

綜上所述，車前子多糖以木糖和阿拉伯糖為主，目前國(guó)內(nèi)對(duì)車前子多糖的開(kāi)發(fā)和利用還局限在中醫(yī)藥領(lǐng)域，對(duì)車前子多糖功能性質(zhì)的研究還不夠深入，鑒于車前子多糖功具有高粘度、耐堿、耐鹽等諸多特性，制備工藝正在從簡(jiǎn)單加工向深加工過(guò)渡，其在食品、醫(yī)藥等行業(yè)應(yīng)用潛力巨大，發(fā)展前景備受看好。