一例副豬嗜血桿菌病的防治

劉燕云，段倫濤，王少娟，匡寶曉*

（1.山東華辰制藥有限公司，山東 濰坊 261205；2.亞太中慧疾病預(yù)防控制中心，山東 濰坊）

副豬嗜血桿菌病是由副豬嗜血桿菌引起的。該病可引起豬的多發(fā)性漿膜炎、關(guān)節(jié)炎、腦膜炎及敗血癥等癥狀[1]。副豬嗜血桿菌是一種革蘭氏陰性短桿菌，形態(tài)多樣，有15種以上的血清型[2-4]，其中5、4和13型是最常見的，不同血清型菌株之間缺乏交叉保護(hù)，并且還具有明顯的地方性特征。病豬和帶菌豬均可經(jīng)過呼吸道和消化道傳播本病。若豬群存在豬繁殖與呼吸綜合征病毒、圓環(huán)病毒、豬肺炎支原體等呼吸道病原體與副豬嗜血桿菌混合感染或繼發(fā)感染時，會使豬只病情加重，死亡率增高[5-6]。

近年來有很多關(guān)于如何治療副豬嗜血桿菌病的報道，同時也提出了很多對該病治療的合理方案，但由于該病的多發(fā)性、病原的復(fù)雜性等問題，使得治療困難，治療效果也不佳，且治療之后的預(yù)防效果多不好。隨著抗生素使用時間的不斷加長，會出現(xiàn)了不同程度的耐藥性，從而導(dǎo)致用量的不斷增大，可用量越加越大，治療效果卻逐步的降低，效果也越發(fā)不明顯。泰地羅新具備 動物專用、用量少、一次給藥全程治療、吸收迅速、超長的消除半衰期、生物利用度高、低殘留、使用安全等優(yōu)點(diǎn)[7-9]，特別適用與豬、牛、羊呼吸道疾病的預(yù)防性治療。

本文針對一豬場發(fā)現(xiàn)疑似副豬嗜血桿菌病，從豬場發(fā)病情況、診斷以及使用泰地羅新治療后治療效果評價等方面進(jìn)行闡述，為泰地羅新的臨床使用提供參考。

1 豬場情況及癥狀表現(xiàn)

2021年5月17日，接市場部反饋，位于濰坊市昌邑市的一客戶豬群出現(xiàn)發(fā)病情況。走訪發(fā)現(xiàn)，該客戶存欄45頭母豬，保育豬存欄200頭左右，發(fā)病的豬主要是保育豬群，發(fā)病豬日齡在斷奶后10～50 d，共有15頭保育豬發(fā)病。病豬癥狀為喘，張口呼吸，普遍發(fā)燒在40～41.5℃，有3頭已經(jīng)出現(xiàn)后驅(qū)站立不穩(wěn)和變紅的嚴(yán)重表現(xiàn)。從豬只開始發(fā)病至獸醫(yī)現(xiàn)場診斷已有5 d，期間使用氟苯尼考、恩諾沙星等藥物配合黃芪多糖拌料使用，效果不佳，并有病情擴(kuò)散趨勢。

2 剖檢變化

將后驅(qū)不穩(wěn)和身體表面變紅的2頭豬帶離豬場進(jìn)行解剖，剖檢可見胸腔內(nèi)有較多的淡黃色液體，血液稀薄、未凝結(jié)；心臟和肝臟周圍的區(qū)域有白膜；“包心”（圖1）、“包肝”（圖2） 病變明顯；腹腔內(nèi)腹膜與腸粘連；以漿液性、纖維素性滲出（嚴(yán)重的呈豆腐渣樣）為炎癥特征。各關(guān)節(jié)腫大，其他器官無明顯的變化。

圖1 豬副豬嗜血桿菌病“包心”病變

圖2 豬副豬嗜血桿菌病“包肝”病變

3 常見實(shí)驗(yàn)室診斷方法及分析

3.1 病原體檢測

病原體的檢測是副豬嗜血桿菌病的經(jīng)典診斷方法[10-11]。細(xì)菌的分離培養(yǎng)和鑒定，檢測結(jié)果直觀，但需要判斷經(jīng)驗(yàn)、檢測周期長，并且此方法基于臨床癥狀和剖檢變化。顯微鏡下觀察可見革蘭氏陰性短桿菌，脲酶試驗(yàn)陰性，氧化酶試驗(yàn)陰性，接觸酶試驗(yàn)陽性，可發(fā)酵葡萄糖、蔗糖、果糖等。

3.2 血清學(xué)檢查

臨床上用于檢測抗副豬嗜血桿菌抗體的方法包括補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CF）、間接血凝試驗(yàn)（IHA）和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）等[12]。血清學(xué)檢測只能用于確定豬是否感染了副豬嗜血桿菌，不能作為診斷該疾病的基礎(chǔ)。

3.3 分子生物學(xué)檢測

常規(guī)PCR方法是實(shí)驗(yàn)室常用的分子生物學(xué)診斷方法。由于它的高靈敏度、高特異性、速度快和簡便性，已被廣泛用于副豬嗜血桿菌病的診斷。實(shí)時熒光定量PCR檢測是一項(xiàng)新興技術(shù)，是一種結(jié)合了光譜學(xué)和PCR技術(shù)的定量核酸檢測技術(shù)[13]。可以定量加入模板DNA的拷貝數(shù)，反應(yīng)時間短、靈敏度高，可以減少假陽性的可能性，特異性更高、檢測結(jié)果更直觀。環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增技術(shù)（LAMP）靈敏度高、反應(yīng)時間短、無需專用設(shè)備、操作簡單，特別適合普通人員使用。

本病例采用PCR及RT-PCR技術(shù)，分別對副豬嗜血桿菌（HPS）、鏈球菌（SS）、經(jīng)典豬瘟病毒（CSFV）、豬藍(lán)耳病毒（PRRSV）、豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）、豬偽狂犬病毒（PRV-gE）6種常發(fā)病的病原微生物進(jìn)行了核酸檢測，PCR結(jié)果顯示，檢測的6種疾病中只有副豬嗜血桿菌為陽性，其他均為陰性，排除與這5種病的混合感染情況，該實(shí)驗(yàn)室診斷使用HPS引物序列，HPS-F（5-GTGATGAGGAAGGGTGGTGT-3）、HPS-R（5-GGCTTCGTCACCCTCTGT-3），反應(yīng)條件54 ℃ 5 min，54 ℃ 30 s，59 30℃ s，72 ℃ 1 min，72 10℃ min，4 ℃保存，目的條帶為822 bp。結(jié)果如圖3。

圖3 副豬嗜血桿菌病原PCR檢測結(jié)果 M：DL2000；1：HPS；2：陽性對照；3：陰性對照

4 治療

該病例經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測并結(jié)合臨床癥狀、剖檢變化，最終確診為副豬嗜血桿菌感染。確診后緊急與客戶溝通制定治療方案。

4.1 緊急隔離

挑選發(fā)病豬，緊急隔離，避免副豬嗜血桿菌的傳播。

4.2 徹底清潔及消毒

區(qū)分好潔凈區(qū)及污染區(qū)，分工飼養(yǎng)，做好工具專用，走道及舍外區(qū)域使用火堿覆蓋消殺，帶豬區(qū)域可使用過硫酸氫鉀復(fù)合粉噴灑消毒，消殺工作要徹底，第1天上午、晚上各一次，第3天重復(fù)消殺，以后每3 d消殺一次；

4.3 藥物治療

對隔離出的13頭病豬使用泰地羅新注射液治療，按照本產(chǎn)品1 ml/10 kg體重的量一次肌注，相當(dāng)于按泰地羅新量4 mg/kg體重使用，觀察使用效果。

5 治療效果及分析

該豬場使用該方案后，一頭45日齡病豬，因?yàn)楹篁?qū)不能站立和嚴(yán)重感染最終不可逆死亡，其他病豬第1天呼吸道癥狀普遍減輕，只有3頭仍體溫在39.8 ℃左右，身體微紅；第2天，11頭豬無明顯癥狀，仍有1頭體溫39.8 ℃，但身體紅色褪去；第3天，12頭豬均趨于穩(wěn)定；第4天，又出現(xiàn)一頭高燒身體發(fā)紅個體，建議緊急使用氟尼辛葡甲胺注射液。最終12頭病豬體溫、體表、采食量均恢復(fù)正常。

由于該病例只是副豬嗜血桿菌的單一感染，沒有混合繼發(fā)其他病毒病，因此在使用泰地羅新后效果明顯（混合感染藍(lán)耳病毒、圓環(huán)病毒的豬場使用效果正在試驗(yàn)中），但是發(fā)病前期使用阿莫西林和恩諾沙星等抗生素時效果較差，這是副豬嗜血桿菌嚴(yán)重的耐藥性造成的。

泰地羅新對引起豬呼吸系統(tǒng)疾病的病原菌尤其敏感，如胸膜肺炎放線桿菌、多殺性巴氏桿菌、支氣管敗血波氏桿菌、副豬嗜血桿菌等[14-15]。對從歐洲各國（德國、法國、荷蘭、匈牙利、西班牙、比利時、丹麥、波蘭和英國）2005-2010年分離的349株豬呼吸系統(tǒng)病原菌和256株牛呼吸系統(tǒng)病原菌進(jìn)行泰地羅新體外抗菌活性測定[16-17]，結(jié)果見表1。

表1 泰地羅新對豬、牛呼吸系統(tǒng)病原菌的 體外抗菌活性 （μg/ml）

6 結(jié)語

毋庸置疑，副豬嗜血桿菌病是當(dāng)今養(yǎng)豬業(yè)面臨的一大難題，其血清型多樣，且各血清型之間交叉保護(hù)性較差。目前對于副豬嗜血桿菌感染壓力較小的區(qū)域，可單純使用藥物預(yù)防，但是感染壓力較大的豬場建議使用疫苗+藥物的預(yù)防方案。在使用藥物治療時，建議對該豬場的致病菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，選擇敏感度高的藥物使用。致病菌的嚴(yán)重耐藥性是抗生素大量濫用造成的，泰地羅新作為一種新獸藥在豬場使用，雖然該病例取得了良好的治療效果，但是也建議在以后的治療中進(jìn)行對應(yīng)的藥敏試驗(yàn)。針對本病例的治療進(jìn)一步驗(yàn)證泰地羅新的臨床給藥推薦方案為：按照4mg/kg體重劑量單次肌內(nèi)注射給藥。泰地羅新注射液作為本公司的新產(chǎn)品，更多的田間試驗(yàn)數(shù)據(jù)正在整理中，但其初步成效已經(jīng)顯現(xiàn)。