磷酸化Tau181聯(lián)合血脂指標對急性腦梗死患者發(fā)生血管性癡呆的預測價值分析

楊超祺，陳薇，劉艷源，黎安玲，劉松梅

血管性癡呆（vascular dementia，VaD）是指由缺血性腦卒中、出血性腦卒中及其他腦血管疾病導致的腦血管損傷，繼而引起的以腦組織缺血缺氧壞死、認知功能區(qū)域神經(jīng)損傷為主要癥狀的臨床綜合征［1］。作為發(fā)病率僅次于阿爾茨海默?。ˋlzheimer's disease，AD）的癡呆類型，VaD占所有癡呆患者的15%～20%［2］。目前，全世界約有5 000萬癡呆患者，隨著人口老齡化程度的加劇，VaD的發(fā)病率也相應(yīng)增長［3-4］。研究表明，我國60歲以上人群中癡呆患者約有1 507萬，其中VaD患者超過392萬［5］。相關(guān)研究證實，VaD在缺血性腦梗死后較為常見［6］。腦梗死后的腦供血供氧障礙及再灌注損傷常伴隨一定程度的神經(jīng)損傷，存在誘發(fā)VaD的風險［7-8］。大多數(shù)腦梗死后發(fā)生VaD的患者會歷經(jīng)皮質(zhì)下血管性認知障礙的病理過程，此過程中血脂指標的變化常早于臨床癥狀變化。近年來，基于血液檢查的腦血管病生物標志物與癡呆的關(guān)聯(lián)研究已成為熱點。Tau是一種成熟神經(jīng)元的主要微管相關(guān)蛋白，血清磷酸化Tau181（phosphorylated Tau181，pTau181）在癡呆的發(fā)病機制中起重要作用，其能夠聚集形成神經(jīng)元纖維纏結(jié)并沉積于細胞內(nèi)，導致神經(jīng)退行性病變，造成癡呆［9-12］。但pTau181與VaD的發(fā)病是否有關(guān)，目前研究較少。本研究旨在分析pTau181聯(lián)合血脂指標對急性腦梗死患者發(fā)生VaD的預測價值，以期為VaD的早期防治提供新的思路。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2019年9月至2021年6月武漢大學中南醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科收治住院的急性腦梗死患者114例為研究對象。納入標準：通過CT或MRI等影像學檢查證實為新發(fā)腦梗死，符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》中急性腦梗死的診斷標準［13］；無精神疾病史和溝通交流障礙；對本研究知情同意并簽署知情同意書。排除標準：蛛網(wǎng)膜下腔出血、顱內(nèi)腫瘤、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、精神疾病以及使用精神藥品者。根據(jù)患者是否發(fā)生VaD，將其分為VaD組（n=38）和非VaD組（n=76）。VaD的診斷參考美國精神病學會的《精神疾病診斷與統(tǒng)計手冊第4版（Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders，4th edition，DSM-Ⅳ）》［14］中的相關(guān)標準，且Hachinski缺血指數(shù)量表（Hachinski Ischemic Scale，HIS）評分＞7分。患者的疾病診斷由本院神經(jīng)內(nèi)科的臨床醫(yī)師完成。本研究獲得武漢大學中南醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準。

1.2 研究方法

1.2.1 一般資料收集 收集患者一般資料，包括性別、年齡、糖尿病發(fā)生情況、高血壓發(fā)生情況、吸煙史和飲酒史。

1.2.2 pTau181及血脂指標檢測 采集患者清晨空腹靜脈血2 ml，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測血清pTau181；采用全自動生化分析儀檢測血脂指標，包括總膽固醇（total cholesterol，TC）、三酰甘油（triglyceride，TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、載脂蛋白A1（apolipoprotein A1，ApoA1）、載脂蛋白B（apolipoprotein B，ApoB）及脂蛋白（a）〔lipoprotein（a），Lp（a）〕。其中pTau181參考范圍為≤30.0 ng/L，TC參考范圍為≤5.18 mmol/L，TG參考范圍為0.45～1.69 mmol/L，HDL-C參考范圍為＞1.04 mmol/L，LDL-C參考范圍為≤3.37 mmol/L，ApoA1參考范圍為1.0～1.5 g/L，ApoB參考范圍為0.5～1.1 g/L，Lp（a）參考范圍為≤300.0 mg/L。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 25.0軟件進行數(shù)據(jù)處理。正態(tài)分布的計量資料以（±s）表示，組間比較采用兩獨立樣本t檢驗；非正態(tài)分布的計量資料以M（QR）表示，組間比較采用Mann-Whitney U檢驗；計數(shù)資料以相對數(shù)表示，組間比較采用χ2檢驗；急性腦梗死患者發(fā)生VaD的影響因素分析采用多因素Logistic回歸分析；采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線評估pTau181、pTau181聯(lián)合血脂指標對急性腦梗死患者發(fā)生VaD的預測價值。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者一般資料、pTau181及血脂指標比較兩組患者性別、年齡、TG、HDL-C、ApoA1、ApoB、Lp（a），糖尿病、高血壓發(fā)生率，有吸煙史、飲酒史者占比，TG、HDL-C、ApoA1、Lp（a）異常發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；VaD組患者pTau181、TC、LDL-C及TC、LDL-C、ApoB異常發(fā)生率高于非VaD組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 VaD組與非VaD組患者一般資料、pTau181及血脂指標比較Table 1 Comparison of general data，pTau181 and blood lipid indexes between VaD group and non-VaD group

2.2 急性腦梗死患者發(fā)生VaD影響因素的多因素Logistic回歸分析 以表1中P＜0.05的指標（pTau181、TC、ApoB）（由于ApoB和LDL-C有很強的共線性，所以只納入ApoB）及ApoA1為自變量（賦值：實測值），急性腦梗死患者是否發(fā)生VaD為因變量（賦值：未發(fā)生=0，發(fā)生=1），進行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，pTau181、TC、ApoA1、ApoB為急性腦梗死患者發(fā)生VaD的影響因素（P＜0.05），見表2。

表2 急性腦梗死患者發(fā)生VaD影響因素的多因素Logistic回歸分析Table 2 Multivariate Logistic regression analysis of influencing factors of VaD in patients with acute cerebral infarction

2.3 pTau181及pTau181聯(lián)合TC、ApoA1、ApoB對急性腦梗死患者發(fā)生VaD的預測價值 ROC曲線分析結(jié)果顯示，pTau181預測急性腦梗死患者發(fā)生VaD的曲線下面積（area under curve，AUC）為0.630〔95%CI（0.526，0.734）〕，最佳截斷值為18.7 ng/L，靈敏度為0.842，特異度為0.408；pTau181聯(lián)合TC、ApoA1、ApoB預測急性腦梗死患者發(fā)生VaD的AUC為0.791〔95%CI（0.700，0.882）〕，最佳截斷值為0.231，靈敏度為0.895，特異度為0.618，見圖1。

圖1 pTau181及pTau181聯(lián)合TC、ApoA1、ApoB預測急性腦梗死患者發(fā)生VaD的ROC曲線Figure 1 ROC curve of pTau181 and pTau181 combined with TC，ApoA1 and ApoB for predicting VaD in patients with acute cerebral infarction

3 討論

VaD是由腦血管損傷引起的以大腦認知、記憶功能受損為主要癥狀的臨床綜合征，是僅次于AD的第二大癡呆病因。作為腦梗死最常見的并發(fā)癥之一，VaD患者的腦內(nèi)認知功能區(qū)域組織受到損傷，治療難度大，致殘、致死率極高［15］?；谘褐笜藱z測具有方便快捷、非侵入性和成本低廉等優(yōu)勢，尋找VaD的早期篩查、診斷及預后評估等血清標志物已成為近年來的研究熱點。Tau蛋白與細胞有絲分裂、細胞內(nèi)物質(zhì)轉(zhuǎn)運等多種功能有關(guān)，而磷酸化Tau蛋白可破壞微管結(jié)構(gòu)，導致神經(jīng)元損傷［16-17］。然而，磷酸化Tau蛋白對腦血管疾病后VaD的發(fā)生是否起作用，目前研究較少。本研究旨在分析pTau181聯(lián)合血脂指標對急性腦梗死患者發(fā)生VaD的預測價值。

健康人腦中的Tau蛋白不斷進行磷酸化和去磷酸化這兩種修飾，處于一種動態(tài)平衡狀態(tài)。而過度磷酸化的Tau蛋白生理功能發(fā)生改變，會影響微管形成，促進正常微管相關(guān)蛋白與微管的分離，使微管崩解并形成各種沉積物滯留于神經(jīng)元內(nèi)，對神經(jīng)元造成損傷［18］。中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷時，過度磷酸化的Tau蛋白可從損傷部位進入腦脊液，經(jīng)血-腦脊液屏障進入血液，因此血清pTau181可反映VaD患者的神經(jīng)毒性和腦損傷程度［19］。研究表明，血脂指標是評估心腦血管疾病風險的重要標志物，其中TC是公認的心腦血管疾病危險因素，TC水平過高將沉積于動脈壁內(nèi)，逐漸形成動脈粥樣硬化斑塊［20］。MA等［21］對1 159例60歲以上中國老年人進行的研究發(fā)現(xiàn)，TC水平升高與認知功能下降程度明顯相關(guān)。WILLIAMS等［22］研究發(fā)現(xiàn)，TC水平升高會引起腦組織結(jié)構(gòu)尤其是腦白質(zhì)發(fā)生改變，造成認知功能損傷，從而引發(fā)癡呆。ApoB是導致動脈粥樣硬化的低密度脂蛋白（low density lipoprotein，LDL）顆粒的主要構(gòu)成成分，約有90%以上的ApoB分布于LDL-C中，對LDL-C的吸收和分解代謝至關(guān)重要［23］。SüLE等［24］通過ApoB轉(zhuǎn)基因小鼠實驗發(fā)現(xiàn)，ApoB過表達可改變微血管網(wǎng)絡(luò)的密度和毛細血管的直徑，可能影響缺血期間的腦血管反應(yīng)性。QIAN等［25］研究顯示，ApoB/LDL與癡呆患者的簡明精神狀態(tài)檢查（Minor-Mental State Examination，MMSE）量表評分呈正相關(guān)，因而ApoB/LDL可作為預測腦梗死患者發(fā)生癡呆的一個潛在臨床指標。ApoA1作為高密度脂蛋白（high density lipoprotein，HDL）顆粒的主要成分，在抗動脈粥樣硬化的過程中發(fā)揮重要作用，與炎癥因子的產(chǎn)生密不可分［26］。SARUKHANI等［27］研究報道，ApoA1/HDL在一定程度上可反映患者的腦血管受損程度。本研究結(jié)果顯示，VaD組患者pTau181、TC、LDL-C及TC、LDL-C、ApoB異常發(fā)生率高于非VaD組；且多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，pTau181、TC、ApoA1、ApoB為急性腦梗死患者發(fā)生VaD的影響因素，與既往研究結(jié)果［28-30］基本一致，提示pTau181、TC、ApoA1、ApoB可能作為預測腦梗死患者發(fā)生VaD的臨床指標。

VaD是唯一可以提前預防的癡呆，特別是早期干預可能會使VaD發(fā)生可逆性改變［31］，因而尋找合適的標志物對VaD的早期防治具有重要意義。本研究結(jié)果顯示，pTau181預測急性腦梗死患者發(fā)生VaD的AUC為0.630，pTau181聯(lián)合TC、ApoA1、ApoB預測急性腦梗死患者發(fā)生VaD的AUC為0.791，提示pTau181聯(lián)合TC、ApoA1、ApoB預測急性腦梗死患者發(fā)生VaD的價值更高，其可為臨床評估急性腦梗死后VaD的發(fā)生風險提供參考，對臨床更好地預防和合理治療VaD具有積極作用。

綜上所述，pTau181、TC、ApoA1、ApoB為急性腦梗死患者發(fā)生VaD的影響因素，pTau181對急性腦梗死患者發(fā)生VaD有一定的預測價值，且其聯(lián)合TC、ApoA1、ApoB的預測價值更高，這有助于臨床醫(yī)生早期預測患者發(fā)生VaD的風險并進行早期干預，以改善患者預后。但本研究尚存在一定局限性：首先，本研究為單中心研究，樣本量較小，不足以代表所有患者的情況；其次，臨床癡呆患者的病因復雜，類型繁多，對癥治療至關(guān)重要，而本研究并未對患者的治療及預后情況進行隨訪。今后仍需要進行大樣本量、多中心聯(lián)合的前瞻性研究以進一步探討pTau181、血脂指標及其他潛在血清標志物在癡呆發(fā)生發(fā)展中的作用機制；同時，將血液標志物同CT、MRI等檢查結(jié)果相聯(lián)系，以進一步提高對急性腦梗死患者發(fā)生VaD的預測價值。

作者貢獻：楊超祺進行文章的構(gòu)思與設(shè)計、數(shù)據(jù)的收集、資料的整理、統(tǒng)計學處理及結(jié)果的分析與解釋，撰寫、修訂論文；陳薇、劉艷源進行研究的實施與可行性分析；黎安玲、劉松梅負責文章的質(zhì)量控制及審校，對文章整體負責、監(jiān)督管理。

本文無利益沖突。