類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血清及關(guān)節(jié)液ANGPTL4和IL-17及RANKL的表達(dá)及意義

張南廷，高琴，吳記平

（1.東莞市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 東莞 523000；2.東莞市人民醫(yī)院腎內(nèi)科，廣東 東莞 523000；3.東莞市人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，廣東 東莞 523000）

類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種病因不明的自身免疫性疾病，以滑膜炎為病理基礎(chǔ)，以侵蝕性關(guān)節(jié)炎為典型表現(xiàn)，患者早期主要表現(xiàn)為晨僵、關(guān)節(jié)疼痛及腫脹等，但隨著疾病的進(jìn)展，部分患者可發(fā)展為關(guān)節(jié)畸形，影響患者正常功能[1]。血管生成素樣蛋白（angiopoietin1ikeprotein，ANGPTL）是一種新型蛋白因子，雖與血管生成素有相似的結(jié)構(gòu)域，表現(xiàn)出一定程度的同源性，但由于ANGPTL不與酪氨酸受體結(jié)合，在功能方面具有多樣性，可調(diào)節(jié)糖、脂代謝，抑制血管發(fā)生。近年來(lái)，部分研究學(xué)者發(fā)現(xiàn)，ANGPTL-4 參與系統(tǒng)性硬化病的病程進(jìn)展，且與RA 炎癥因子具有相關(guān)性[2]。劉秀嬋等[3]研究發(fā)現(xiàn)，RA 患者血清及滑液ANGPTL-4 水平呈高表達(dá)狀態(tài)。核因子κB 受體活化因子配體（receptoractivatorof NF-κB ligand，RANKL）對(duì)破骨細(xì)胞分化成熟至關(guān)重要，而RA致病過(guò)程中，滑膜炎癥會(huì)破壞關(guān)節(jié)骨質(zhì)，參與破骨細(xì)胞的激活與分化[4]。白細(xì)胞介素-17（interleukin-17，IL-17）是由活化的T細(xì)胞產(chǎn)生的炎性細(xì)胞因子，可參與炎癥反應(yīng)[5]?；诖?，本研究旨在探究RA患者血清及關(guān)節(jié)液ANGPTL4、IL-17、RANKL表達(dá)情況及意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取 2019 年 11 月至 2020 年 11 月本院收治的50例類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者作為研究組，另選取同期收治的50 例骨傷患者作為對(duì)照組。研究組男 17 例，女 33 例；年齡 30～65 歲，平均（50.24±5.69）歲；體重指數(shù) 18.00～24.00 kg/m2，平均（21.04±2.27）kg/m2。對(duì)照組男22例，女28例；年齡25～60 歲，平均（49.58±5.49）歲；體重指數(shù)18.50～24.50 kg/m2，平均（21.43±2.31）kg/m2。 兩組臨床資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均符合2010 年ACR/EULAR[6]中RA 的診斷標(biāo)準(zhǔn)；入院前未接受其他治療；精神、意識(shí)正常，治療依從性高，配合完成研究者。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)重心、肺、肝、腎功能不全者；合并系統(tǒng)性紅斑狼瘡、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性硬化病、原發(fā)性干燥綜合征等其他風(fēng)濕類(lèi)疾病者；有嚴(yán)重抑郁、狂躁、焦慮等精神或心理問(wèn)題，不能配合完成臨床診療工作者。

1.2 方法 于清晨取患者空腹靜脈血5～8 ml，以3 000 r/min離心5 min，取上層清液用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清ANGPTL4、IL-17、RANKL水平，同時(shí)測(cè)定RA患者關(guān)節(jié)液ANGPTL4、IL-17、RANKL水平。

1.3 觀(guān)察指標(biāo) 比較兩組血清及關(guān)節(jié)液ANGPTL4、IL-17、RANKL 水平；采用RA 病情活動(dòng)度表（DAS28-3）評(píng)估RA患者病情活動(dòng)度，低活動(dòng)度：2.6＜DAS28≤3.2；中度活動(dòng)度：3.2＜DAS28≤5.1；重度活動(dòng)度：DAS28＞5.1。依據(jù)DAS28 評(píng)估低、中、重度活動(dòng)度，將 RA 患者依次分為 L 組、M 組、H 組，并比較 3 組血清及關(guān)節(jié)液ANGPTL4、IL-17、RANKL 水平。并用 Spearman 分析血清 ANGPTL4、IL-17、RANKL 水平與血清抗環(huán)瓜氨酸多肽抗體（抗CCP）、類(lèi)風(fēng)濕性因子（RF）、C反應(yīng)蛋白（CRP）、血沉（ESR）及DAS28-3相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以“”表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，用Spearman 進(jìn)行相關(guān)性分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清及關(guān)節(jié)液ANGPTL4、IL-17、RANKL水平比較 研究組血清及關(guān)節(jié)液ANGPTL4、IL-17、RANKL水平均高于對(duì)照組，且研究組關(guān)節(jié)液ANGPTL4、IL-17、RANKL水平高于血清水平，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩組血清及關(guān)節(jié)液ANGPTL4、IL-17、RANKL水平比較（）

表1 兩組血清及關(guān)節(jié)液ANGPTL4、IL-17、RANKL水平比較（）

注：ANGPTL4，血管生成素樣蛋白4；IL-17，白細(xì)胞介素-17；RANKL，核因子κB受體活化因子配體。與血清比較，aP＜0.05

組別研究組（n=50）對(duì)照組（n=50）t值P值關(guān)節(jié)液0.27±0.04a 0.08±0.01a 34.381＜0.05 ANGPTL4（μg/L）血清5.24±1.04 2.87±0.36 16.020＜0.05關(guān)節(jié)液7.69±1.11a 2.87±0.36a 30.749＜0.05 IL-17（pg/ml）血清89.69±12.26 16.89±3.15 42.601＜0.05關(guān)節(jié)液124.51±18.54a 16.89±3.15a 42.776＜0.05 RANKL（μg/L）血清0.12±0.02 0.08±0.01 13.233＜0.05

2.2 不同疾病活動(dòng)度RA 患者血清及關(guān)節(jié)液ANGPTL4、IL-17、RANKL 水平比較 隨著病情活動(dòng)度逐漸加重，RA患者血清及關(guān)節(jié)液ANGPTL4、IL-17、RANKL 水平依次呈上升趨勢(shì)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 不同疾病活動(dòng)度RA患者血清及關(guān)節(jié)液ANGPTL4、IL-17、RANKL水平比較（）

表2 不同疾病活動(dòng)度RA患者血清及關(guān)節(jié)液ANGPTL4、IL-17、RANKL水平比較（）

注：ANGPTL4，血管生成素樣蛋白4；IL-17，白細(xì)胞介素-17；RANKL，核因子κB受體活化因子配體

疾病活動(dòng)度L組（n=16）M組（n=14）H組（n=20）F值P值關(guān)節(jié)液0.21±0.03 0.26±0.05 0.33±0.06 26.869＜0.05 ANGPTL4（μg/L）血清4.26±0.81 5.14±1.00 6.09±1.20 14.023＜0.05關(guān)節(jié)液6.69±1.01 7.58±1.08 8.57±1.15 13.382＜0.05 IL-17（pg/ml）血清78.14±11.48 88.58±11.98 99.71±12.84 14.015＜0.05關(guān)節(jié)液102.69±17.84 124.89±18.03 141.70±19.57 19.534＜0.05 RANKL（μg/L）血清0.09±0.01 0.12±0.02 0.15±0.03 31.707＜0.05

2.3 血清ANGPTL4、IL-17、RANKL 水平與 RA 各項(xiàng)疾病各項(xiàng)指標(biāo)相關(guān)性 血清ANGPTL4、IL-17、RANKL 水平與 RA 患者 ESR、抗 CCP、DAS28-3、CRP、關(guān)節(jié)壓痛數(shù)成顯著正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 血清和關(guān)節(jié)液ANGPTL4、IL-17、RANKL水平與RA各項(xiàng)疾病各項(xiàng)指標(biāo)相關(guān)性

3 討論

RA是以手、足小關(guān)節(jié)呈對(duì)稱(chēng)性，且多關(guān)節(jié)病變?yōu)橹饕卣鞯淖陨砻庖咝约膊?，常累及關(guān)節(jié)外器官，易引起關(guān)節(jié)畸形，甚至導(dǎo)致功能喪失，嚴(yán)重影響患者的正常工作及生活。RA關(guān)節(jié)炎主要病理變化為大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)間質(zhì)，微血管新生、血管翳形成，軟骨、骨組織破壞等[7-8]。RANKL參與破骨細(xì)胞的激活、分化、存活等過(guò)程，對(duì)破骨細(xì)胞的增殖、活化具有重要意義，早期國(guó)外研究發(fā)現(xiàn)，通過(guò)去除小鼠RANKL 基因的血清轉(zhuǎn)移模型誘發(fā)關(guān)節(jié)炎，炎癥仍繼續(xù)發(fā)展，但經(jīng)CT和病理學(xué)檢測(cè)判定，基因組小鼠骨質(zhì)損傷明顯輕于對(duì)照組，可見(jiàn)，RANKL 在RA關(guān)節(jié)破壞和骨侵蝕中起重要作用[9]。劉洪江等[10]研究發(fā)現(xiàn)，關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞和活化T細(xì)胞產(chǎn)生的RANKL是促使破骨細(xì)胞分化，導(dǎo)致骨侵蝕的關(guān)鍵原因。ANGPTL4分布較為廣泛，但主要在白色脂肪組織、肝臟中表達(dá)，對(duì)調(diào)節(jié)脂代謝有重要作用，聶華翎等[11]研究發(fā)現(xiàn)，RA 患者血清ANGPTL4 水平高于健康人，提示ANGPTL4 可能參與RA 致病過(guò)程。IL-17可誘導(dǎo)并驅(qū)化炎癥因子，進(jìn)而招募大量免疫細(xì)胞到達(dá)關(guān)節(jié)炎癥部位，加劇機(jī)體炎癥反應(yīng)。

本研究結(jié)果顯示，RA患者血清及關(guān)節(jié)液ANGPTL4、IL-17、RANKL水平顯著高于骨傷患者，且隨著RA 患者病情活動(dòng)度加劇，血清及關(guān)節(jié)液ANGPTL4、IL-17、RANKL 水平依次呈上升趨勢(shì)；血清ANGPTL4、IL-17、RANKL 水平與RA 患者ESR、抗CCP、DAS28-3、CRP、關(guān)節(jié)壓痛數(shù)成顯著正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），王玉梅等[12]研究結(jié)果一致。

綜上所述，RA 患者血清及關(guān)節(jié)液水平顯著升高，參與RA 致病機(jī)制，與疾病活動(dòng)度密切相關(guān)，可為臨床防治RA提供重要依據(jù)。