外泌體長(zhǎng)鏈非編碼RNA在肝癌中的研究進(jìn)展

葛子強(qiáng)，張顯赫，黃子越，夏浩明，徐藝，王志東

哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院膽胰外科，黑龍江 哈爾濱 150086

作為世界上第六大常見的癌癥及全球癌癥死亡率的第二大原因[1]，肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma， HCC)占原發(fā)性肝癌(primary liver cancer， PLC)的85%～90%[2]。HCC的危險(xiǎn)因素包括肝硬化、乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒的慢性感染、非酒精性脂肪肝、過(guò)度飲酒、遺傳因素、肥胖及吸煙等[3]。目前HCC的診斷方法仍然存在許多局限，血清甲胎蛋白(AFP)被廣泛用于HCC的早期篩查，但在肝炎、肝硬化等非惡性腫瘤的肝臟疾病中也會(huì)出現(xiàn)不同程度的升高[4]；且肝臟CT及磁共振成像(MRI)對(duì)<2 cm的結(jié)節(jié)顯示不清[5]。由于缺乏特異性高的生物標(biāo)志物和不良臨床癥狀，大多數(shù)HCC病人發(fā)現(xiàn)時(shí)已出現(xiàn)肝內(nèi)或肝外轉(zhuǎn)移，根治性手術(shù)治療仍為HCC的有效治療手段，但術(shù)后高復(fù)發(fā)率導(dǎo)致HCC病人總體5年生存率僅為50%～70%，而晚期HCC病人5年生存率則不到15%[5]。

外泌體(exosome)是由機(jī)體內(nèi)活細(xì)胞分泌的廣泛存在于各種體液中大小約40～160 nm、具有脂質(zhì)雙層膜的細(xì)胞外囊泡，通過(guò)跨膜蛋白與靶細(xì)胞受體直接作用、質(zhì)膜融合或直接接觸將內(nèi)含DNA、RNA、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)及小分子代謝物等生物信息分子傳遞至靶細(xì)胞內(nèi)，建立細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng)，介導(dǎo)并參與抗原呈遞、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)、腫瘤中的免疫反應(yīng)、腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲等過(guò)程從而調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)行為[6-7]。外泌體最初被認(rèn)為是清除細(xì)胞中降解的和不需要的細(xì)胞成分的垃圾箱?；谄洫?dú)特分子結(jié)構(gòu)及其低免疫原性與細(xì)胞毒性，外泌體攜帶的非編碼RNA(non-coding RNA，ncRNA)可免受核糖核酸酶誘導(dǎo)的降解呈穩(wěn)定表達(dá)，表明它們可能是細(xì)胞間交流的載體[8]；其次外泌體ncRNA的組織特異性與空間特異性提示其可以體現(xiàn)不同腫瘤的特征或在腫瘤發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮作用[9]。長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long non-coding RNA， lncRNA)是一類無(wú)蛋白編碼能力的、長(zhǎng)度超過(guò)200個(gè)核苷酸的RNA分子，研究顯示外泌體lncRNA參與介導(dǎo)包括HCC、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、膀胱癌等惡性腫瘤的生物學(xué)行為。此文將對(duì)外泌體lncRNA調(diào)節(jié)HCC發(fā)生發(fā)展及其在HCC診治、預(yù)后中的作用加以綜述。

一、外泌體lncRNA參與HCC惡性生物學(xué)行為

1.外泌體lncRNA參與增殖與抗凋亡 腫瘤細(xì)胞通過(guò)獲得持續(xù)增殖信號(hào)達(dá)成細(xì)胞無(wú)限增殖及逃逸程序性的細(xì)胞凋亡，最終實(shí)現(xiàn)癌細(xì)胞的長(zhǎng)久存活，但其分子發(fā)生機(jī)制不盡相同。Kogure等[10]研究證實(shí)HCC腫瘤細(xì)胞(Hep3B、PLC/PRF/5)衍生的外泌體可被相鄰細(xì)胞吸收，且相比于供體細(xì)胞，共有14個(gè)超級(jí)保守的lncRNA在外泌體中表達(dá)發(fā)生顯著變化，其中TUC339在外泌體中高度富集。利用小干擾RNA外源性沉默lncRNA TUC339可抑制腫瘤細(xì)胞的增殖以及對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)的黏附能力，提示外泌體介導(dǎo)的lncRNA TUC339可充當(dāng)細(xì)胞間信號(hào)傳導(dǎo)介質(zhì)，調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞局部微環(huán)境，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)發(fā)育。不同的是，Huang等[11]研究證實(shí)外泌體lncRNA RP11-85G21.1(lnc85)可靶向吸附miR-324-5p，從而阻礙其發(fā)揮功能，間接促進(jìn)下游增殖蛋白與基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase， MMP)2和MMP9的表達(dá)，進(jìn)而誘導(dǎo)HCC腫瘤細(xì)胞的增殖、抗凋亡及侵襲遷移能力，且lnc85在AFP陽(yáng)性和AFP陰性的HCC病人中均呈顯著上調(diào)表達(dá)，表明其可作為區(qū)分AFP陰性的HCC與健康對(duì)照和肝硬化的獨(dú)立生物標(biāo)志物(靈敏度為80.0%，特異度為76.5%)，或與其他腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合以優(yōu)化HCC的診斷。Cao等[12]除證實(shí)肝癌高表達(dá)轉(zhuǎn)錄本(highly up-regulated in liver cancer，HULC)在HCC的病理組織和腫瘤細(xì)胞系(HepG2、SMMC7721)中表達(dá)異常上調(diào)外，還發(fā)現(xiàn)HCC病人相比于健康對(duì)照組lncRNA HULC在血清外泌體中呈異常高表達(dá)。體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中利用siRNA-lncRNA HULC轉(zhuǎn)染HCC細(xì)胞系實(shí)現(xiàn)了腫瘤細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移侵襲抑制效應(yīng)并誘導(dǎo)凋亡發(fā)生。進(jìn)一步研究揭示了該現(xiàn)象的潛在機(jī)制：lncRNA HULC通過(guò)靶向吸附miR-372-3p，解除其與下游靶基因Rab11a3′-非翻譯區(qū)(untranslated region， UTR)的結(jié)合，從而阻礙其發(fā)揮功能，間接上調(diào)Rab11a基因的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)發(fā)育。此研究為HULC在肝癌中的作用機(jī)制提供了新的見解。另外，Wang等[13]研究顯示外泌體內(nèi)高表達(dá)的lncRNA H19可靶向吸附miR-520a-3p，解除其與下游靶基因LIM結(jié)構(gòu)域激酶1(LIM domain kinase 1， LIMK1) 3′-UTR的結(jié)合，實(shí)現(xiàn)LIMK1的上調(diào)表達(dá)效應(yīng)，加速丙泊酚處理HCC細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移并抑制凋亡發(fā)生。這些研究描述了肝癌中外泌體lncRNA的表達(dá)特征，同時(shí)確定了其在細(xì)胞增殖與抗凋亡調(diào)控中起的重要作用，并促進(jìn)了外泌體lncRNA相關(guān)生物標(biāo)志物或治療靶點(diǎn)的開發(fā)。

2.外泌體lncRNA參與侵襲與轉(zhuǎn)移 癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移往往是惡性腫瘤不良預(yù)后的主要原因。長(zhǎng)期以來(lái)，對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制的研究主要集中在腫瘤與機(jī)體的相互作用上。然而，近年來(lái)發(fā)現(xiàn)，腫瘤微環(huán)境中的外泌體通過(guò)在細(xì)胞間傳遞特異性信息，在腫瘤轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。Li等[14]研究發(fā)現(xiàn)lncRNA ATP-dependent RNA helicase FAL1在HCC組織及HCC腫瘤細(xì)胞衍生外泌體內(nèi)高表達(dá)，且高表達(dá)組病人總體生存期(overall survival， OS)明顯縮短，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)lncRNA FAL1可作為競(jìng)爭(zhēng)性內(nèi)源RNA(competing endogenous RNA， ceRNA)直接結(jié)合miR-1236來(lái)阻斷其與下游靶標(biāo)鋅指E-盒結(jié)合同源異形盒(zinc finger E-box binding homebox， ZEB1)和AFP 3′-UTR的結(jié)合，抑制miR-1236對(duì)ZEB1和AFP表達(dá)的負(fù)向調(diào)控，而高表達(dá)的ZEB1和AFP可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞增殖和上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition， EMT)的發(fā)生，進(jìn)而增強(qiáng)其轉(zhuǎn)移侵襲能力。這些發(fā)現(xiàn)提示lncRNA FAL1在HCC中起致癌作用，并可能對(duì)未來(lái)新的診斷生物標(biāo)志物或新的治療靶點(diǎn)的開發(fā)有重要價(jià)值。同樣，Gramantieri等[15]研究顯示HCC細(xì)胞衍生的外泌體lncRNA LUCAT1通過(guò)靶向吸附miR-181d-5p從而阻礙其發(fā)揮功能，抑制癌細(xì)胞的EMT發(fā)生，進(jìn)而降低腫瘤細(xì)胞的侵襲潛能，且較高的lncRNA CASC9和lncRNA LUCAT1水平與HCC術(shù)后更低的復(fù)發(fā)率和更長(zhǎng)的復(fù)發(fā)時(shí)間相關(guān)。Wang等[16]研究發(fā)現(xiàn)lncRNA SENP3-EIF4A在HCC組織和血漿外泌體內(nèi)表達(dá)下調(diào)，并且其表達(dá)水平與腫瘤大小、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。正常肝細(xì)胞分泌的外泌體SENP3-EIF4A可轉(zhuǎn)移至HCC細(xì)胞，通過(guò)ceRNA機(jī)制競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miR-9-5p，解除其對(duì)下游靶基因鋅指蛋白36(zinc finger protein 36， ZFP36)的表達(dá)抑制，而高表達(dá)的ZFP36可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡并抑制侵襲和遷移。其結(jié)果表明，SENP3-EIF4A1通過(guò)外泌體直接從正常細(xì)胞轉(zhuǎn)移到HCC細(xì)胞，在體外和體內(nèi)調(diào)節(jié)HCC的生物學(xué)功能。并且，它參與正常細(xì)胞和癌細(xì)胞在HCC發(fā)生期間的通信過(guò)程，是臨床檢測(cè)肝癌的一種新的有利生物標(biāo)志物。

3.外泌體lncRNA參與免疫調(diào)節(jié) 腫瘤的發(fā)生與發(fā)展與腫瘤微環(huán)境的免疫狀態(tài)密切相關(guān)，外泌體可攜帶lncRNA參與調(diào)控腫瘤免疫微環(huán)境，在腫瘤細(xì)胞、免疫細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞之間傳遞生物活性分子，幫助癌細(xì)胞躲避機(jī)體自身的免疫監(jiān)視，誘導(dǎo)免疫耐受。巨噬細(xì)胞是先天性免疫防御的關(guān)鍵角色，在腫瘤微環(huán)境中越來(lái)越受到重視。外源性沉默lncRNA TUC339可增加巨噬細(xì)胞中促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生并增強(qiáng)共刺激分子表達(dá)及其吞噬作用，且lncRNA TUC339表達(dá)與M(IL-4)巨噬細(xì)胞極化正相關(guān)，表明lncRNA TUC339可通過(guò)外泌體介導(dǎo)轉(zhuǎn)移至HCC腫瘤微環(huán)境內(nèi)巨噬細(xì)胞，參與調(diào)控巨噬細(xì)胞活化和M1/M2極化，進(jìn)而誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞逃避免疫監(jiān)視并終止免疫攻擊[17]。這項(xiàng)研究不僅加深了我們對(duì)lncRNA調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞功能的理解，而且還揭示了腫瘤細(xì)胞與天然免疫之間復(fù)雜的相互作用關(guān)系。不同于巨噬細(xì)胞參與免疫調(diào)節(jié)，程序性死亡蛋白-1(programmed death-1， PD-1)是一種免疫檢查點(diǎn)受體，表達(dá)于免疫細(xì)胞表面，而程序性死亡蛋白配體-1(programmed death-ligand1， PD-L1)和PD-L2是PD-1的配體(PD-Ls)，在多種腫瘤中呈高水平表達(dá)。Fan等[18]利用癌癥基因組圖譜(TCGA)數(shù)據(jù)庫(kù)篩選HCC腫瘤組織和正常肝組織中與PD-L1和PD-L2相關(guān)的lncRNAs，其中PCED1B-AS1與其密切相關(guān)且豐度最高，同時(shí)其在血漿外泌體中也呈上調(diào)表達(dá)。臨床病理數(shù)據(jù)分析結(jié)果顯示PCED1B-AS1表達(dá)水平與腫瘤數(shù)量、癌腫大小、晚期TNM分期(Ⅲ期、Ⅳ期)以及病人不良預(yù)后密切相關(guān)。進(jìn)一步研究顯示HCC細(xì)胞釋放的外泌體PCED1B-AS1通過(guò)靶向吸附hsa-miR-194-5p，以解除其與下游靶基因mRNA3′-UTR的結(jié)合，間接促進(jìn)PD-L1和PD-L2的高表達(dá)，實(shí)現(xiàn)PCED1B-AS1與PD-L1和PD-L2的同趨勢(shì)表達(dá)，進(jìn)而誘導(dǎo)受體HCC細(xì)胞中PD-Ls介導(dǎo)的免疫抑制并損害受體T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的細(xì)胞活性。免疫調(diào)節(jié)機(jī)制的研究幫助我們從另一個(gè)角度理解腫瘤的發(fā)生過(guò)程，從而發(fā)現(xiàn)更多潛在生物標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)。

4.外泌體lncRNA參與化學(xué)耐藥性 腫瘤的耐藥性是導(dǎo)致治療失敗的常見原因，腫瘤病人在化療過(guò)程中產(chǎn)生耐藥性而導(dǎo)致效果欠佳和腫瘤高復(fù)發(fā)率仍然是亟待解決的問(wèn)題。近年來(lái)，越來(lái)越多的研究表明，腫瘤細(xì)胞通過(guò)分泌含有耐藥性lncRNA的外泌體，從而誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生對(duì)化療藥物的抗性。Takahashi等[19]研究顯示轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β可降低HCC細(xì)胞對(duì)索拉非尼或阿霉素的敏感性，并選擇性富集HCC細(xì)胞源性的外泌體內(nèi)長(zhǎng)鏈非編碼RNA-重編碼調(diào)控因子(linc-ROR)導(dǎo)致其高表達(dá)，同時(shí)使具有干細(xì)胞表型的腫瘤起始細(xì)胞內(nèi)CD133+表達(dá)增加和部分群落生長(zhǎng)，進(jìn)而誘導(dǎo)HCC細(xì)胞的化學(xué)耐受性。利用siRNA外源性敲低linc-ROR可增加化療誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性和細(xì)胞凋亡并抑制肝臟腫瘤干細(xì)胞的自我更新、自我分化及成球能力。這些發(fā)現(xiàn)確定了可能針對(duì)HCC的部分介質(zhì)及其發(fā)生機(jī)制，有助于增強(qiáng)這些細(xì)胞間信號(hào)機(jī)制和介質(zhì)的敏感性，并改善其對(duì)用于治療HCC的常規(guī)治療劑的反應(yīng)。該團(tuán)隊(duì)還發(fā)現(xiàn)外泌體linc-ROR可作為缺氧反應(yīng)性lncRNA，可通過(guò)miR-145/缺氧誘導(dǎo)因子-1α亞單位(hypoxia-inducible factor-1α， HIF-1α)信號(hào)傳導(dǎo)軸與HCC中的缺氧信號(hào)傳導(dǎo)通路功能性連接，增加下游靶基因miR-145的表達(dá)，抑制核糖體s6蛋白激酶1的磷酸化及下調(diào)3-磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1和HIF-1α的表達(dá)，進(jìn)而在缺氧應(yīng)激中延長(zhǎng)細(xì)胞存活時(shí)間[20]。另有研究[21]證實(shí)在化療應(yīng)激期間，HCC細(xì)胞及其分泌的外泌體內(nèi)linc-VLDLR表達(dá)增加，RNA干擾介導(dǎo)的linc-VLDLR基因敲除可抑制三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2(ATP-binding cassette superfamily G member 2， ABCG2)的表達(dá)并誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯及降低細(xì)胞生存能力，而ABCG2的過(guò)度表達(dá)可恢復(fù)HCC細(xì)胞的化療耐受性。了解化療耐藥機(jī)制對(duì)于HCC等對(duì)化療藥物反應(yīng)非常差的癌癥尤其重要。索拉非尼是一種多激酶抑制劑，通過(guò)阻斷多種生長(zhǎng)因子發(fā)揮抗血管生成和抗腫瘤作用[22]。該化療藥物是美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)批準(zhǔn)的治療晚期肝癌的唯一藥物，但由于獲得性耐藥率高，該藥物的有效性受到極大限制[23]，確定HCC的化療耐藥機(jī)制有可能改善使用索拉非尼等藥物治療肝癌的療效。

5.外泌體lncRNA參與血管生成 血管生成被認(rèn)為是腫瘤生長(zhǎng)迅速、早期轉(zhuǎn)移和生存不良的主要原因[24]。由于靶向腫瘤血管生成是治療肝癌的關(guān)鍵，所以研究肝癌血管生成的潛在機(jī)制具有重要意義。肝癌干細(xì)胞通過(guò)分泌外泌體激活信號(hào)通路，誘導(dǎo)血管生成使其抵抗低氧環(huán)境，而血管微環(huán)境又可以分泌生長(zhǎng)因子經(jīng)內(nèi)分泌途徑正反饋?zhàn)饔糜诟伟└杉?xì)胞，加速血管的生成，最終促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖與侵襲性細(xì)胞表型的形成。Conigliaro等[25]研究顯示CD90+腫瘤干細(xì)胞樣肝細(xì)胞(CD90+Huh7)可通過(guò)分泌富含lncRNA H19的外泌體實(shí)現(xiàn)細(xì)胞間基因轉(zhuǎn)移，進(jìn)而影響受體細(xì)胞表型。內(nèi)皮細(xì)胞將CD90+Huh7釋放的外泌體吸收內(nèi)化，過(guò)表達(dá)的lncRNA H19可促進(jìn)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及其受體、細(xì)胞間黏附因子的表達(dá)，刺激內(nèi)皮細(xì)胞血管生成并通過(guò)促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞和CD90+Huh7異型黏附來(lái)加速兩者的結(jié)合。故外泌體可能通過(guò)調(diào)控靶細(xì)胞相關(guān)mRNA的轉(zhuǎn)錄以促進(jìn)血管生成，這可能成為減少肝癌復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的新治療靶點(diǎn)。另外，除了上述通路，Li等[26]研究表明：外泌體SNHG16(long noncoding RNA small nucleolar RNA host gene 16)通過(guò)PI3K/Akt/mTOR通路分泌miR-4500來(lái)促進(jìn)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞活化，并調(diào)節(jié)GalNT1表達(dá)，從而促進(jìn)腫瘤血管生成。這項(xiàng)研究強(qiáng)調(diào)了外泌體在肝癌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞之間通信中的重要作用，并提出外泌體SNHG16可作為肝癌抗血管生成的治療靶點(diǎn)。

二、外泌體lncRNA作為HCC診斷標(biāo)志物

隱匿性發(fā)病和缺乏準(zhǔn)確有效的早期診斷性生物標(biāo)志物是HCC病人低OS的主要原因。傳統(tǒng)的診斷標(biāo)志物，如AFP、AFP-L3、鋁巖藻糖苷酶(AFU)和維生素K缺乏或拮抗Ⅱ誘導(dǎo)蛋白質(zhì)(PIVKA-Ⅱ)，對(duì)肝癌的診斷具有較低的敏感性和特異性。而外泌體lncRNA對(duì)腫瘤微環(huán)境影響廣泛，有特異性高、穩(wěn)定性強(qiáng)、檢測(cè)便捷等特點(diǎn)，其非創(chuàng)傷性檢測(cè)方式可作為未來(lái)診斷及治療的理想生物標(biāo)志物。在外泌體中，發(fā)現(xiàn)了10個(gè)上調(diào)的lncRNA，即LINC00161、ENSG00000248932.1、ENST00000440688.1、ENST00000457302.2、lncRNA-RP11-583F2.2、lncRNA FAM72D-3、lncRNA Jpx、lncRNA ENSG00000258332.1、lncRNA LINC00635、lncRNA HEIH[27-33]，構(gòu)成HCC中潛在的診斷生物標(biāo)志物。其中，前9個(gè)lncRNA的受試者工作特征曲線下面積(AUC)分別為0.794、0.776、0.612、0.720、0.965、0.584、0.865、0.719、0.750。同時(shí)，Matboli等[29]研究證實(shí)外泌體lncRNA-RP11-583F2.2(96.7%， 91.7%)在HCC診斷中比AFP(90%，85%)具有更高的靈敏度和特異度，而lncRNA Jpx的靈敏度和特異度分別為91.5%和72.7%，相對(duì)較差。外泌體中l(wèi)ncRNA的下調(diào)表達(dá)也具有很高的診斷價(jià)值。Yao等[30]研究顯示外泌體中l(wèi)ncRNA EPC1-4表達(dá)下調(diào)，過(guò)表達(dá)后可抑制細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，其AUC為0.852，表明其可作為HCC診斷的非侵入性循環(huán)生物標(biāo)志物。雖然單個(gè)外泌體lncRNA可作為HCC的診斷依據(jù)，但對(duì)于高危人群，聯(lián)合生物標(biāo)志物檢測(cè)將比單個(gè)生物標(biāo)志物更準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)HCC。Xu等[31]比較了55例HCC病人、60例慢性乙型肝炎病人、60例健康對(duì)照者的血清外泌體lncRNA ENSG00000258332.1和LINC00635的表達(dá)水平：HCC組的lncRNA ENSG00000258332.1和LINC00635的水平顯著高于其他組，且術(shù)后兩種lncRNA均明顯降低，ENSG00000258332.1、LINC00635和AFP的組合區(qū)分HCC病人與慢性丙型肝炎病人的AUC為0.894，靈敏度為83.6%，特異度為87.7%。

三、外泌體lncRNA與HCC預(yù)后及復(fù)發(fā)

外泌體lncRNA表達(dá)失調(diào)與HCC病人的臨床病理特征密切相關(guān)。準(zhǔn)確預(yù)測(cè)肝癌病人的臨床預(yù)后有助于指導(dǎo)肝癌治療決策，從而有效提高病人的生存效益。在外泌體中，有5種與預(yù)后相關(guān)的lncRNA顯著上調(diào)，即lncRNA-ATB、lncRNA CTD-2116N20.1、lncRNA RP11538D16.2、lncRNA CRNDE、lncRNA ASMTL-AS1[34-37]，所有這些高表達(dá)的lncRNA已被證實(shí)是肝癌預(yù)后不良的潛在生物標(biāo)志物。臨床上，外泌體中l(wèi)ncRNA-ATB的表達(dá)水平與TNM分期及門靜脈血栓形成密切相關(guān)[34]，而lncRNA CRNDE過(guò)表達(dá)在腫瘤較大、分化較差、TNM分期晚期的HCC病人中更為常見[36]，ASMTL-AS1表達(dá)與肝癌分期、轉(zhuǎn)移及預(yù)后有關(guān)[37]。其中Lee等[34]報(bào)道更高的lncRNA-ATB表達(dá)提示更短的OS和無(wú)進(jìn)展生存期(progress free survival， PFS)，進(jìn)一步Cox回歸多因素分析顯示：lncRNA-ATB表達(dá)上調(diào)、腫瘤體積增大、C-反應(yīng)蛋白升高可作為腫瘤進(jìn)展或死亡的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子。同樣，Hou等[35]研究的Kaplan-Meier生存曲線表明lncRNA CTD-2116N20.1和lncRNA RP11538D16.2過(guò)度表達(dá)的病人OS和PFS較短(P<0.05)，二者可通過(guò)調(diào)節(jié)外泌體中蛋白質(zhì)的表達(dá)水平導(dǎo)致HCC病人預(yù)后不良。此外，血清外泌體lncRNA CRNDE表達(dá)較低的病人的OS和 DFS顯著延長(zhǎng)，進(jìn)一步的單因素和多因素分析表明，高血清外泌體lncRNA CRNDE表達(dá)是預(yù)后不良的獨(dú)立指標(biāo)[36]。Ma等[37]研究表明，外泌體lncRNA ASMTL-AS1通過(guò)miR-342-3p/NLK/YAP信號(hào)軸加重射頻消融不足后殘留HCC的惡性程度，為射頻消融不足后肝癌的治療和預(yù)防殘留肝癌的復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移提供了新思路。

四、小結(jié)與展望

綜上所述，外泌體可通過(guò)攜帶各種lncRNA參與介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞與周圍細(xì)胞的信息交流，進(jìn)而不同程度地影響腫瘤的發(fā)生發(fā)展，同時(shí)外泌體lncRNA通過(guò)調(diào)控細(xì)胞信號(hào)通路促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖與侵襲遷移能力，刺激血管生成及化療耐受性的產(chǎn)生，并可作為HCC診斷和預(yù)后的評(píng)估指標(biāo)。然而外泌體lncRNA在HCC中的研究仍較少：當(dāng)前已發(fā)現(xiàn)的外泌體攜帶的lncRNA較少，且外泌體裝載lncRNA的機(jī)制未清晰；關(guān)于外泌體lncRNA應(yīng)用于臨床的研究仍處于起步階段，且外泌體lncRNA作為HCC新型生物標(biāo)志物的特異性還需進(jìn)一步提高。不過(guò)相信隨著新技術(shù)的不斷出現(xiàn)及對(duì)外泌體研究的深入，人類對(duì)HCC的治療效果將大大改善。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突