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    性病門診女性就診者及性伴口腔、生殖器HPV感染情況

    2022-03-14 07:55:08王建彬梁春梅廖玉英陳惠茹賴嘉希柯吳堅
    皮膚病與性病 2022年1期
    關鍵詞:就診者性伴侶生殖器

    王建彬,梁春梅,廖玉英,陳惠茹,賴嘉希,柯吳堅

    (1.汕頭市澄海區(qū)人民醫(yī)院,廣東 汕頭 515800;2. 南方醫(yī)科大學皮膚病醫(yī)院,廣東 廣州 510009)

    人類乳頭瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)感染是全球最常見的性傳播感染之一[1]。HPV可在多個部位(如生殖器、口腔、肛門、直腸等)出現良性、潛在惡性或惡性腫瘤等病變,對患者身體和心理造成極大的危害[2]。雖然HPV疫苗近年來在國內外得到廣泛接種,使得HPV檢出率出現大幅下降,然而對于未接種HPV疫苗者或疫苗無法保護的其他HPV型別而言,其檢出率卻出現不斷增加的趨勢[3、4]。通過生殖器與生殖器的直接性接觸導致男女雙方HPV交叉感染的傳播途徑已獲得足夠認識[5],但男女雙方是否通過口—口和口—生殖器等其他部位的直接接觸導致HPV傳播的認識,相關臨床研究則相對不多[6]。為進一步明確性病門診女性就診者口腔和生殖器HPV的感染情況,以及其性伴HPV的感染能否造成女性就診者口腔和生殖器的感染,我們招募200名性病門診女性就診者及其男性性伴侶,對男女雙方口腔和生殖器進行HPV核酸檢測和臨床危險因素分析,報告如下。

    1 材料與方法

    1.1 患者招募 自2016年1月至2018年1月期間,我們共招募性病門診女性就診者200名,其中167對女/男性伴共同完成口腔和生殖器部位的HPV標本采集。入組標準:男女雙方在過去1年內為固定性伴侶關系,且每月發(fā)生性行為次數平均超過1次。排除標準:年齡均小于18歲、孕婦、無固定性伴侶者、確診HIV或性病者、長期服用糖皮質激素或免疫抑制劑者、合并其他系統(tǒng)并發(fā)癥者。

    1.2 樣本采集[7]囑咐女性就診者及其男性性伴侶在采集樣本前的24小時內禁止性行為。醫(yī)務人員采用專用的HPV取樣細胞刷,分別對入組者口腔、女性外陰和陰道壁內、男性包皮和龜頭等部位取樣。每個部位用細胞刷反復10次,以獲得足夠多的脫落上皮細胞標本。將細胞刷放入提前編號且含有專門細胞保存液的取樣管中。所有樣本低溫保存或直接進行檢測。

    1.3 DNA提取[7]樣本的HPV DNA提取采用HybriBio公司的細胞裂解液進行提取。具體方法如下:① 移液槍吸取臨床樣本500ul,置于離心機中14000 rpm離心1min后,去除離心管中的上清液體;② 溶液I在45℃水浴鍋中提前預熱并振蕩混勻。在去除上清的離心管中加入400 ul溶液I,100℃水浴鍋中加熱15min后,常溫下靜置2min;③ 點動離心加熱后的離心管。取振蕩混勻的溶液II 400ul加到離心管中,常溫下靜置2min。再次將離心管置于離心機中14000 rpm離心5min后,去除離心管中的上清液體;重復該步驟2次后,常溫靜置2min;④ 取溶液III 60ul加入離心管中,常溫放置10min,置于離心機中14000 rpm離心1min;⑤ 采用紫外分光光度計檢測離心后的上清液OD 260/280比值,當OD 260/280比值介于1.7~2.0時則達到所需檢查純度,將符合檢測純度的DNA低溫保存或進行PCR檢測。

    1.4 PCR檢測[7]HPV PCR檢測采用HPV通用L1引物:MY 09/11(MY09:5’-CGT CCM ARR GGA WAC TGA TC-3’;MY11:5’-GCM CAG GGW CAT AAY AAT GG-3’;M:A/C;R:A/G;W:A/T;Y:C/T),引物由上海生工合成并經PAGE純化。PCR反應體系:樣本DNA、上海生工HPV通用引物、Promega Go Taq Polymerase、Promega Go Taq Buffer、Thermo dNTP、Sigma MgCl2、Sigma H2O。PCR反應條件:95℃加熱2min;95℃變性1min,55℃退火1min,72℃延伸1min,共40個循環(huán);72℃延伸10min。擴增片段大小450 bp。擴增產物置于70V的1.5%瓊脂糖凝膠電泳40min,將電泳后的瓊脂糖凝膠置于凝膠成像儀中觀察HPV PCR擴增結果。

    1.5 統(tǒng)計分析 采用SPSS 26.0對數據進行統(tǒng)計學分析,采用配對t檢驗對性病門診女性就診者及其性伴侶年齡進行比較,采用兩個獨立樣本t檢驗分別對男女雙方口腔和生殖器HPV的檢出率、就診者年齡進行比較,采用χ2檢驗分別對女性就診者口腔和生殖器HPV的檢出率、口交的危險因素、性伴侶口腔或生殖器HPV的檢出率進行比較,當P<0.05有統(tǒng)計學差異。

    2 結果

    2.1 性病門診女性就診者及其性伴侶口腔和生殖器HPV檢出率 入組167位性病門診女性就診者的平均年齡為(30.62±8.21)歲,低于其男性性伴侶平均年齡的(32.57±8.86)歲(P<0.001)。女性167份口腔樣本中有8份HPV DNA陽性,陽性率為4.79%。女性167份生殖器樣本中有95份HPV DNA陽性,陽性率為56.89%。男性性伴侶167份口腔樣本中有14份HPV DNA陽性,陽性率為8.38%。男性性伴侶167份生殖器樣本中有97份HPV DNA陽性,陽性率為58.08%。性病門診女性口腔HPV為低于男性口腔HPV檢出率(χ2=25.066,P<0.001)。性病門診女性生殖器HPV檢出率低于男性生殖器HPV檢出率(χ2=9.671,P=0.002)。詳見表1。

    表1 性病門診女性患者及其男性性伴口腔、生殖器HPV感染情況

    2.2 年齡、主動口交和男性性伴侶口/生殖器HPV的感染情況對性病門診女性就診者口腔HPV檢出率的影響 性病門診女性就診者口腔HPV陽性組平均年齡為(36.25±7.48)歲,高于陰性組的(30.34±8.16)歲,(t=2.005,P=0.047)。性病門診女性患者口腔HPV陽性組中有主動口交史為62.50%高于陰性組的54.72%(χ2=0.186,P=0.666)。性病門診女性患者口腔HPV陽性組中性伴生殖器HPV感染為87.50%高于陰性組的56.60%(χ2=2.986,P=0.084)。性病門診女性患者口腔HPV陽性組中性伴口腔HPV感染為62.50%高于對照組的5.66%(χ2=32.040,P<0.001)。以上結果表明女性口腔HPV的感染情況與女性主動口交史和男性性伴侶生殖器HPV感染無明顯關系,而與女性年齡和男性性伴口腔HPV感染有關。提示女性口腔的HPV感染情況可能通過男女雙方的口—口直接接觸途徑傳播,且隨著年齡增大感染幾率增加。詳見表2。

    表2 年齡、主動口交及性伴HPV感染情況對女性口腔HPV檢出率的影響

    2.3 年齡、被動口交和男性性伴侶口腔/生殖器HPV的感染對性病門診女性就診者生殖器HPV感染的影響 性病門診女性就診者生殖器HPV陽性組平均年齡為(30.93±8.49)歲,與性病門診女性生殖器HPV陰性組的(30.22±7.84)歲無顯著性差異(t=0.548,P=0.585)。性病門診女性生殖器HPV陽性組中有被動口交史為69.47%高于陰性組的36.11%(χ2=18.426,P<0.001)。性病門診女性就診者生殖器部位HPV陽性組中性伴生殖器HPV感染為68.42%高于陰性組的44.44%(χ2=9.671,P=0.002)。性病門診女性生殖器HPV陽性組中性伴口腔HPV感染為13.68%高于對照組的1.38%(χ2=8.062,P=0.005)。以上結果表明性病門診女性就診者生殖器部位的HPV感染情況與年齡無關,而與被動口交史、性伴口腔/生殖器HPV感染有關。表明女性生殖器HPV感染可能通過男女雙方的口-生殖器、口-口和生殖器-生殖器途徑傳播。詳見表3。

    表3 年齡、被動口交及性伴HPV感染情況對女性生殖器HPV檢出率的影響

    3 討論

    HPV是全球性病病原體中檢出率最高的雙鏈環(huán)狀閉合DNA病毒,臨床可分離出出200多種亞型[1]。可根據HPV致癌性的高低分為高危型和低危型[1],其中HPV低危型與發(fā)生在肛門、生殖器、口腔等部位的良性病變相關,而HPV高危型可引起宿主細胞過度增殖,從而與肛門、生殖器、口腔等部位的潛在惡性或惡性腫瘤高度相關[2]。HPV可感染人體的肛門生殖器、咽喉、口腔、鼻腔等部位的皮膚和黏膜[6]。國外學者為明確男女雙方口腔HPV感染情況對5579位參與者進行檢測,結果發(fā)現年齡在(14~69)歲的男女雙方口腔HPV的總檢出率6.9%,其中女性HPV檢出率為3.6%低于男性的10.1%[8]。該研究結果與我們本次研究發(fā)現的性病門診就診者中男女雙方口腔HPV的總檢出率6.6%結果接近,其中性病門診女性就診者口腔HPV檢出率為4.79%,低于其男性性伴侶的8.38%,與上述研究發(fā)現基本相同。性伴侶HPV的交叉?zhèn)鞑ナ窃斐蒆PV感染增加的重要原因之一[1、2]。Pickard等[9]對1000位年齡介于(18~30)歲的研究者進行長達3月的隨訪中發(fā)現,口腔HPV檢出率的增加與是否有口交和舌吻高度相關。我們研究顯示,在8例女性性病門診就診者口腔HPV的感染者中,其62.50%的男性性伴侶口腔檢測出HPV,其結果明顯高于陰性對照組;同時,在95例女性性病門診就診者生殖器HPV感染者中,69.47%有被動口交史,且其男性性伴侶口腔HPV檢出率明顯高于陰性組。通過我們的研究發(fā)現口腔HPV的感染或許增加性伴侶間口腔或生殖器HPV的檢出率,結果顯示HPV不僅可通過生殖器-生殖器的直接接觸傳播,或許還可以經由口腔和口腔或口腔和生殖器的直接接觸傳播。

    綜上所述,女性口腔HPV感染與主動口交史和男性性伴侶生殖器HPV的感染無關,與年齡和性伴口腔HPV感染有關;女性生殖器HPV感染與年齡無關,與被動口交史、性伴口腔/生殖器HPV感染有關。性伴侶之間或夫妻雙方HPV的交叉?zhèn)鞑ナ窃斐刹煌?/p>

    部位HPV感染的原因之一,提示HPV可經由多種性行為途徑傳播。因此,成功預防HPV通過性行為交叉感染的關鍵,除了做到避免多性伴侶的同時,在多種性行為方式(包括口交等)的過程中全程使用安全套,這樣才能更好的在HPV的性傳播上進行預防,從而最大化的減少HPV的性傳播。此外,隨著HPV疫苗在我國的普及和推廣,積極接種HPV疫苗,尤其尚未有性行為時接種,也有一種有效的預防和減少HPV感染的防治辦法。

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