基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)與分子對接探討五味子治療急性肝損傷的作用機(jī)制

沈朝壯，王曉虎#，李 超，沈萍萍，謝海棠

(1.皖南醫(yī)學(xué)院 研究生院，安徽 蕪湖 241002；2.皖南醫(yī)學(xué)院 醫(yī)學(xué)信息學(xué)院，安徽 蕪湖 241002；3.皖南醫(yī)學(xué)院弋磯山醫(yī)院 安徽省藥物臨床評(píng)價(jià)中心，安徽 蕪湖 241001)

五味子始記于《神農(nóng)本草經(jīng)》，為木蘭科植物五味子〔Schisandrachinensis(Turcz.) Baill.〕成熟的干燥果實(shí)，含有木脂素類、多糖類、揮發(fā)油類、有機(jī)酸類等多種活性成分.現(xiàn)代藥理學(xué)研究顯示五味子及其化學(xué)成分具有多種生物活性，包括保肝[3]、止咳[4]、抗氧化[5]、抗腫瘤[6]、鎮(zhèn)靜催眠[7]、抗癌[8]等作用.已有較多研究表明，五味子對多種肝臟疾病均具有較好的防治作用，且臨床上已有多種含五味子的中成藥或中藥制劑如五酯膠囊、五味子顆粒等，廣泛用于預(yù)防和治療肝臟疾病.

中藥具有“多組分，多靶點(diǎn)”的特點(diǎn)，傳統(tǒng)方法很難對其進(jìn)行系統(tǒng)的探討.網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)概念由Andrew L Hopkins首次提出[9]，其強(qiáng)調(diào)從系統(tǒng)層次和網(wǎng)絡(luò)大數(shù)據(jù)的整體角度出發(fā)，分析藥物對疾病潛在的治療機(jī)制，為中藥復(fù)雜體系研究提供了新思路.我國在最新發(fā)布的首個(gè)《網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)評(píng)價(jià)方法指南》[10]中對網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的具體評(píng)價(jià)要求作出詳細(xì)的闡述.現(xiàn)已有使用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)技術(shù)針對五味子中有效成分抗癌機(jī)制的研究[8]，本文利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)合分子對接的方法探討五味子治療急性肝損傷的分子作用機(jī)制，為五味子進(jìn)一步開發(fā)提供參考.

1 材料與方法

1.1 藥物有效成分及靶點(diǎn)篩選

利用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺(tái)(TCMSP，https://tcmsp-e.com)檢索五味子全部有效成分，并根據(jù)口服生物利用度(OB)≥30%初步篩選，再將初步篩選結(jié)果導(dǎo)入SwissADME(http://www.swissadme.ch)數(shù)據(jù)庫預(yù)測類藥性(DL)，并選取GI absorption為“High”且符合Lipinski’s五規(guī)則[11]的成分，最終結(jié)合文獻(xiàn)確定納入研究的有效成分，并在Pubchem(https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov)數(shù)據(jù)庫中校準(zhǔn)名稱.

將篩選的有效成分導(dǎo)入PharmMapper(http://www.lilab-ecust.cn/pharmmapper)數(shù)據(jù)庫，以Norm Fit≥0.9為閾值篩選潛在靶點(diǎn)，并與TCMSP數(shù)據(jù)庫靶點(diǎn)合并，導(dǎo)入U(xiǎn)niprot(https://www.uniprot.org)數(shù)據(jù)庫中匹配基因名.

1.2 ALI疾病靶點(diǎn)篩選

以“acute liver injury”為關(guān)鍵詞，挖掘OMIM(https://omim.org)、Genecards(https://www.genecards.org)、NCBI(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/search)數(shù)據(jù)庫中ALI相關(guān)靶點(diǎn).其中Genecards數(shù)據(jù)庫靶點(diǎn)根據(jù)Score值進(jìn)行排序，Score值越大代表靶點(diǎn)與疾病越相關(guān)，并以Score≥10為閾值篩選靶點(diǎn).將3個(gè)數(shù)據(jù)庫中所篩選得到的靶點(diǎn)匯總并刪去重復(fù)值.

1.3 藥物-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

將藥物靶點(diǎn)與ALI靶點(diǎn)取交集，并將藥物有效成分、交集靶點(diǎn)、疾病等信息進(jìn)行匯總分類構(gòu)建藥物-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò).將其導(dǎo)入Cytoscape 3.8.2軟件進(jìn)行分析，根據(jù)各節(jié)點(diǎn)度值對網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行可視性優(yōu)化.

1.4 PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

將交集靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING11.0(https://www.string-db.org)數(shù)據(jù)庫構(gòu)建蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用(protein-protein interaction,PPI)網(wǎng)絡(luò).物種類別設(shè)置為“Homo sapiens”，閾值為“medium confidence(0.400)”，構(gòu)建出PPI網(wǎng)絡(luò)并隱藏網(wǎng)絡(luò)中無連接的節(jié)點(diǎn).將構(gòu)建好的PPI網(wǎng)絡(luò)導(dǎo)入Cytoscape 3.8.2軟件進(jìn)行可視性優(yōu)化，并使用MCODE插件找出網(wǎng)絡(luò)中的核心靶點(diǎn)子網(wǎng)絡(luò)，根據(jù)Score值進(jìn)行排序，選取Score值最大的核心靶點(diǎn)子網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行可視化，并將選取的子網(wǎng)絡(luò)中所有基因在藥物-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)中找出相關(guān)聯(lián)的所有有效成分進(jìn)行分析.

表1 五味子主要有效成分Tab.1 The main active ingredients of Schisandra chinensis

圖1 維恩圖Fig.1 Venn map

1.5 KEGG、GO富集分析

為進(jìn)一步探討交集靶點(diǎn)可能涉及的信號(hào)通路、生物進(jìn)程(Biological Process，BP)、細(xì)胞組分(Cellular Component，CC)、分子功能(Molecular Function，MF)等信息，將交集靶點(diǎn)導(dǎo)入DAVID(https://david.ncifcrf.gov)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行KEGG和GO富集分析.設(shè)置標(biāo)識(shí)符為“OFFICIAL_GENE_SYMBOL”,物種為“Homo sapiens”進(jìn)行分析并下載分析文件，將數(shù)據(jù)按Pvalue值進(jìn)行排序，最終設(shè)定閾值為P<0.001，篩選相關(guān)信息.

2018年12月12日，北京—2018加拿大木材中國論壇暨現(xiàn)代木結(jié)構(gòu)建筑在健康養(yǎng)生產(chǎn)業(yè)的應(yīng)用活動(dòng)在北京朝陽悠唐皇冠假日酒店舉行，此次活動(dòng)由加拿大木業(yè)主辦。活動(dòng)吸引了超過250名專業(yè)人士的熱情參與。出席此次論壇的演講嘉賓包括：中國木材及木制品流通協(xié)會(huì)首席專家朱光前先生，來自加拿大溫哥華沿海健康家庭護(hù)理區(qū)域主管Jo-Ann G. Tait女士以及加拿大Equilibrium工程咨詢公司聯(lián)合創(chuàng)始人Robert Malczyk先生等。

1.6 藥物-靶點(diǎn)-通路-疾病網(wǎng)絡(luò)

將處理后的藥物有效成分、靶點(diǎn)、信號(hào)通路、疾病數(shù)據(jù)文件導(dǎo)入Cytoscape 3.8.2軟件進(jìn)行分析，根據(jù)各節(jié)點(diǎn)度值、介度及緊密度等網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)參數(shù)篩選出起主要藥效作用的成分.并將結(jié)果與藥物-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)、PPI網(wǎng)絡(luò)結(jié)果進(jìn)行對比，找出兩網(wǎng)絡(luò)篩選出的共同的有效成分及靶點(diǎn).

1.7 分子對接驗(yàn)證

綜合上述所構(gòu)建網(wǎng)絡(luò)篩選出成分和靶點(diǎn)進(jìn)行分子對接，使用RCSB PDB(https://www.rcsb.org)數(shù)據(jù)庫根據(jù)分辨率(Resolution)及相關(guān)性排名選取基因蛋白骨架下載其“pdb”文件，使用TCMSP數(shù)據(jù)庫下載代表成分的分子結(jié)構(gòu)“mol2”文件.用AutoDock Vina進(jìn)行分子對接并計(jì)算每種構(gòu)象的結(jié)合能，選取結(jié)合能最優(yōu)的構(gòu)象與靶點(diǎn)蛋白對接并保存對接后的復(fù)合物文件，將復(fù)合物文件導(dǎo)入Python-Pymol 2.5.0軟件進(jìn)行最終可視化.

2 結(jié)果

2.1 五味子有效成分及靶點(diǎn)篩選

通過TCMSP及SwissADME數(shù)據(jù)庫并結(jié)合文獻(xiàn)篩選，有17種有效成分納入研究(表1).其中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素為文獻(xiàn)報(bào)道對急性肝損傷有治療作用的有效成分[12-13].通過PharmMapper數(shù)據(jù)庫預(yù)測潛在靶點(diǎn)，根據(jù)閾值篩選，去除重復(fù)值后共得到103個(gè)靶點(diǎn)并導(dǎo)入U(xiǎn)niprot數(shù)據(jù)庫匹配基因名及化學(xué)文摘服務(wù)社(Chemical Abstracts Service，CAS)號(hào)碼.

2.2 五味子治療ALI靶點(diǎn)篩選

挖掘OMIM、Genecards、NCBI數(shù)據(jù)庫中ALI靶點(diǎn)，篩選匯總并刪除重復(fù)值后得到1 870個(gè)靶點(diǎn)，將篩選出的藥物靶點(diǎn)與疾病靶點(diǎn)取交集并作圖(圖1).結(jié)果得到交集靶點(diǎn)50個(gè)，其中包含CA2、GSTP1、PIM1等.

圖2 藥物-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)Fig.2 Drug-target-disease network

2.3 藥物-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

將藥物、有效成分、預(yù)測靶點(diǎn)、疾病等信息導(dǎo)入Cytoscape 3.8.2軟件構(gòu)建藥物-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)(圖2).該網(wǎng)絡(luò)由96個(gè)節(jié)點(diǎn)(Nodes)和404條邊(Edges)構(gòu)成，經(jīng)軟件分析后，按照度值進(jìn)行排序，前三位為去氧紫草素(度值=45)，鄰苯二甲酸二丁酯(度值=35)，蠶豆酮(度值=28).網(wǎng)絡(luò)中所有成分均對應(yīng)2個(gè)以上靶點(diǎn)，說明五味子治療ALI是“多成分，多靶點(diǎn)”共同作用的結(jié)果.

2.4 PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

將交集靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING11.0數(shù)據(jù)庫構(gòu)建初始PPI網(wǎng)絡(luò)(a)，隱藏?zé)o相互作用的節(jié)點(diǎn)(RORA、TREM1)后導(dǎo)入Cytoscape 3.8.2軟件進(jìn)行優(yōu)化.優(yōu)化后的網(wǎng)絡(luò)(b)由48個(gè)節(jié)點(diǎn)，246條邊組成，利用MCODE插件找出網(wǎng)絡(luò)中的核心子網(wǎng)絡(luò)，選擇Score值最大(11.00)的子網(wǎng)絡(luò)(c)進(jìn)行分析(圖3).該核心子網(wǎng)絡(luò)由13個(gè)節(jié)點(diǎn)，66條邊組成，對應(yīng)著13個(gè)核心靶點(diǎn)，分別為：ALB、EGFR、HSP90AA1、CASP3、MAPK1、PTGS2、PPARG、NOS3、MAPK8、MAPK14、AR、KDR、CHEK1.

(a) 初始PPI網(wǎng)絡(luò) (b) 優(yōu)化網(wǎng)絡(luò) (c) 核心子網(wǎng)絡(luò)圖3 PPI網(wǎng)絡(luò) Fig.3 PPI network

2.5 KEGG、GO富集分析

將交集靶點(diǎn)導(dǎo)入DAVID數(shù)據(jù)庫進(jìn)行KEGG、GO富集分析.分析數(shù)據(jù)結(jié)果按Pvalue值進(jìn)行排序，并以P<0.001作為閾值進(jìn)行篩選并分析作圖(圖4).經(jīng)過篩選，KEGG富集分析(a)中共有20條信號(hào)通路滿足要求，結(jié)果顯示主要涉及PI3K-Akt、FoxO、TNF等信號(hào)通路.GO_BP(b)結(jié)果共有26個(gè)條目，主要涉及對藥物的反應(yīng)、肽基蘇氨酸磷酸化、RNA聚合酶II啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控等生物進(jìn)程；GO_CC(c)結(jié)果共有9個(gè)條目，主要與細(xì)胞外間隙、胞外區(qū)、核質(zhì)等細(xì)胞組分有關(guān)；GO_MF(d)結(jié)果共有12個(gè)條目，主要涉及RNA 聚合酶 II 轉(zhuǎn)錄因子活性、酶結(jié)合、類固醇激素受體活性等分子功能，GO結(jié)果均取前10個(gè)條目作圖.

圖4 KEGG和GO(Top10)富集圖Fig.4 Enrichment map of KEGG and GO (Top10)

2.6 藥物-靶點(diǎn)-通路-疾病網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

圖5 藥物-靶點(diǎn)-通路-疾病網(wǎng)絡(luò)Fig.5 Drug-target-pathway-disease network

圖6 分子對接結(jié)果 圖7 分子對接模式Fig.6 Results of molecular docking Fig.7 Molecular docking mode

表2 有效成分網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)參數(shù)Tab.2 Active ingredient network topology parameters

表3 靶點(diǎn)(前10)網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)參數(shù)Tab.3 Target (top 10) network topology parameters

根據(jù)KEGG結(jié)果綜合分析，構(gòu)建藥物-靶點(diǎn)-通路-疾病網(wǎng)絡(luò).找出通路對應(yīng)靶點(diǎn)，以及靶點(diǎn)對應(yīng)有效成分，匯總建立網(wǎng)絡(luò)文件.導(dǎo)入Cytoscape 3.8.2軟件進(jìn)行可視性優(yōu)化(圖5).該網(wǎng)絡(luò)有67個(gè)節(jié)點(diǎn)和297條邊，根據(jù)度值、介度及緊密度進(jìn)行分析，找出起藥效作用的主要成分及核心靶點(diǎn)(表2、3).結(jié)果顯示起藥效作用的主要成分為去氧紫草素，蠶豆酮等.核心靶點(diǎn)前10個(gè)為：MAPK1、MAPK10、MAPK8、MAPK14、CASP3、GSTP1、AR、GSK3B、BMP2、PTGS2.與PPI網(wǎng)絡(luò)的前10個(gè)核心靶點(diǎn)對比，有6個(gè)共同靶點(diǎn)(MAPK1、MAPK8、MAPK14、CASP3、PTGS2、AR).

2.7 分子對接驗(yàn)證

網(wǎng)絡(luò)互作結(jié)果綜合分析，選取核心有效成分和靶點(diǎn)進(jìn)行分子對接(圖6、7).一般認(rèn)為受體和配體的結(jié)合能≤-20.92 kJ/mol(-5.0 kcal/mol)說明兩者有較好的結(jié)合活性，結(jié)合能≤-29.288 kJ/mol(-7.0 kcal/mol)可認(rèn)為其有較強(qiáng)的結(jié)合活性[14].將對接結(jié)果導(dǎo)入Python-Pymol 2.5.0進(jìn)行最終的可視化.

3 討論

ALI具有發(fā)病快、病因機(jī)理復(fù)雜等特點(diǎn)，常見的誘因有化學(xué)物質(zhì)、藥物、酒精、自身免疫等，長期發(fā)病會(huì)導(dǎo)致肝硬化、肝衰竭、肝癌等嚴(yán)重的肝功能疾病.五味子具有悠久的藥用歷史，是臨床常用的保肝藥物，現(xiàn)研究已經(jīng)從五味子中分離了木脂素、多糖、揮發(fā)油、三萜等多種化學(xué)成分，對五味子治療ALI方面研究逐漸深入.本研究采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)合分子對接的方法，以中藥成分靶點(diǎn)和疾病靶點(diǎn)為主要研究對象，探索其治療過程中可能的活性成分、關(guān)鍵靶點(diǎn)、潛在通路等分子機(jī)制，為五味子治療ALI提供科學(xué)依據(jù).

3.1 活性成分分析

篩選出的成分均具有良好的成藥性能，共納入17個(gè)活性成分，其中五味子醇甲、醇乙、甲素、乙素、丙素等單體成分均已有相關(guān)研究表明其對肝損傷具有保護(hù)作用[12-13,15-16]，但在此次篩選中整體重要性靠后，所以本文主要以去氧紫草素和蠶豆酮網(wǎng)絡(luò)提示關(guān)鍵活性成分進(jìn)行探討，鄰苯二甲酸二丁酯雖相關(guān)程度靠前，但相關(guān)研究表明其會(huì)導(dǎo)致肝損傷，而非治療作用[17-18]，所以本研究沒有將其納入討論，這也提示使用五味子保肝時(shí)，可能需要對其進(jìn)行血藥濃度檢測，注意鄰苯二甲酸二丁酯的入血量及在肝臟組織中的濃度.去氧紫草素屬于萘醌類化合物，具有愈傷抗炎、抗菌抗病毒、抗腫瘤、保肝、降血糖、鎮(zhèn)靜和調(diào)節(jié)免疫等作用.現(xiàn)研究表明去氧紫草素可通過作用于PI3K-Akt信號(hào)通路，在治療結(jié)腸癌、非小細(xì)胞肺癌、急性髓系白血病等方面有顯著作用[19-21]，篩選發(fā)現(xiàn)五味子治療ALI可能與PI3K-Akt信號(hào)通路顯著相關(guān)，所以去氧紫草素可能通過此途徑對ALI發(fā)揮治療作用.蠶豆酮為呋喃乙炔化合物，是豆科植物蠶豆中的植物抗毒素，具有顯著的抗菌活性，對肝損傷也具有潛在治療作用.

分子對接結(jié)果顯示去氧紫草素和蠶豆酮與關(guān)鍵靶點(diǎn)的結(jié)合程度較強(qiáng)，說明本網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測可靠性較好，去氧紫草素和蠶豆酮可作為今后相關(guān)基礎(chǔ)及臨床研究的對象.

3.2 靶點(diǎn)分析

現(xiàn)有研究表明，五味子可能通過抗炎、抗氧化、調(diào)控核受體、抑制肝星狀細(xì)胞活化、抑制肝細(xì)胞凋亡，促進(jìn)肝再生、調(diào)節(jié)細(xì)胞色素P450酶、調(diào)節(jié)免疫等機(jī)制，作用于相關(guān)靶點(diǎn)防治肝臟疾病.預(yù)測的關(guān)鍵靶點(diǎn)包含絲裂原活化蛋白激酶1/8/14(MAPK1/8/14)、胱天蛋白酶3(CASP3)及環(huán)氧合酶2(PTGS2).MAPK信號(hào)通路是一種重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，是哺乳動(dòng)物體內(nèi)廣泛存在的信號(hào)通路，其能將細(xì)胞外刺激信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)至細(xì)胞核內(nèi)，誘導(dǎo)基因轉(zhuǎn)錄并引起一系列病理生理變化[22]，MAPK通路中各個(gè)亞組在急性肝損傷發(fā)病過程中均起重要的中間作用[23].相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，保肝中藥活性成分白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、藤茶總黃酮等均可通過調(diào)控MAPK通路，從而減輕不同程度的肝損傷，改善肝功能[24-25]；CASP3屬Caspases家族蛋白，與細(xì)胞凋亡有關(guān)，Thapaliya S等[26]在研究飲食誘導(dǎo)的非酒精性脂肪性肝炎模型中，發(fā)現(xiàn)CASP3失活可防止肝細(xì)胞死亡并改善肝纖維化，Ma等[27]研究發(fā)現(xiàn)熊果酸在體內(nèi)通過不可逆地抑制CASP3從而減輕酒精性肝損傷；PTGS2是前列腺素生物合成中的關(guān)鍵酶，可促進(jìn)血管生成，抑制細(xì)胞凋亡，研究發(fā)現(xiàn)保肝藥扶正養(yǎng)肝合劑治療藥物性肝損傷時(shí)會(huì)下調(diào)PTGS2 mRNA水平[28]，白芍-甘草藥對配伍可能發(fā)揮協(xié)同作用，可通過靶蛋白PTGS2調(diào)節(jié)脂解脂肪細(xì)胞，在非酒精性脂肪肝的發(fā)展進(jìn)程中具有保護(hù)肝臟的作用[29].AR又稱雄激素受體，屬于核受體超家族中的類固醇受體，有研究表明AR高表達(dá)與CCL4誘導(dǎo)的急性肝損傷密切相關(guān)，其作用可能依賴于雄激素水平[30].

3.3 富集通路分析

KEGG富集通路結(jié)果顯示五味子治療ALI的過程可能與PI3K-Akt、FoxO、TNF等信號(hào)通路有關(guān).PI3K-Akt信號(hào)通路是細(xì)胞內(nèi)非常重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，在細(xì)胞的生長、存活、增殖、凋亡、血管生成、自吞噬等過程中發(fā)揮著極其重要的生物學(xué)功能，Wang等[31]在對丹酚酸A減輕CCl4誘導(dǎo)的肝損傷的研究中發(fā)現(xiàn)，在修復(fù)肝損傷的過程中，PI3K/AKT/mTOR通路信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)會(huì)被抑制.FoxO屬于叉形頭轉(zhuǎn)錄因子的O亞型，可響應(yīng)多種外部刺激(如生長因子、胰島素、營養(yǎng)水平和氧化應(yīng)激)而激活，能夠控制多種特定的基因表達(dá)程序.同時(shí)，F(xiàn)oxO也是PI3K-Akt信號(hào)通路的下游轉(zhuǎn)錄因子之一，可被PI3K-Akt信號(hào)通路中相關(guān)蛋白磷酸化，從而被不可逆的抑制并移出細(xì)胞核，相關(guān)研究[32]表明FoxOs在維持肝臟代謝和細(xì)胞穩(wěn)態(tài)方面起著關(guān)鍵作用，F(xiàn)oxOs的失調(diào)可能與肝細(xì)胞凋亡進(jìn)而引起肝損傷有關(guān).TNF又稱腫瘤壞死因子，它參與全身炎癥反應(yīng)，是組成急性期反應(yīng)的細(xì)胞因子之一，Lopetuso等[33]綜述了TNF-α對肝臟的有害作用及潛在益處，表明其在治療肝臟疾病時(shí)起到重要的調(diào)控作用.

綜上所述，通過使用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)聯(lián)合分子對接的方法，并將各網(wǎng)絡(luò)及數(shù)據(jù)庫進(jìn)行綜合討論分析，對五味子通過“多成分、多靶點(diǎn)、多途徑”治療ALI的分子作用機(jī)制進(jìn)行了充分的探討，方法較為完整，且篩選結(jié)果大多有相關(guān)文獻(xiàn)支持，后續(xù)還需對預(yù)測結(jié)果進(jìn)行細(xì)胞或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，為相關(guān)基礎(chǔ)及臨床研究提供新的思路與參考.