不同鋅源及添加水平對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響及其生物學(xué)利用率評(píng)價(jià)

虞龍飛 易 江 黃明星 陳 艷 朱年華

(江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，南昌330045)

鋅是肉仔雞生長(zhǎng)發(fā)育所必需的微量元素，參與體內(nèi)200多種酶和輔酶的組成，同時(shí)參與體內(nèi)碳水化合物和蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的代謝，對(duì)提高動(dòng)物免疫機(jī)能、生產(chǎn)性能和繁殖性能具有重要作用[1]。飼料中的鋅主要通過(guò)有機(jī)鋅或以硫酸鋅為主的無(wú)機(jī)鋅來(lái)添加。一般認(rèn)為，硫酸鋅溶水性高，在飼料貯存或在腸道消化過(guò)程中易與其他營(yíng)養(yǎng)素產(chǎn)生拮抗，在畜禽腸道中吸收少、排泄多，生物學(xué)利用率不高[2]；而有機(jī)鋅通過(guò)鋅與有機(jī)分子形成絡(luò)合物后進(jìn)入腸道，其性質(zhì)穩(wěn)定，不與其他營(yíng)養(yǎng)素發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，并可能經(jīng)過(guò)不同的吸收通道[3]，因此表現(xiàn)出相對(duì)較高的生物學(xué)利用率[4]。研究表明，低水平的有機(jī)鋅在對(duì)肉雞[5-6]和生長(zhǎng)豬[7]生產(chǎn)性能及血液指標(biāo)的提升作用方面均優(yōu)于高水平硫酸鋅，但有機(jī)鋅生產(chǎn)工藝復(fù)雜、使用成本過(guò)高[8]，限制了其的應(yīng)用。因此，尋求一種生物學(xué)利用率高、成本低的新型鋅源對(duì)綠色畜牧生產(chǎn)具有重要的意義。

堿式氯化鋅(basic zinc chloride，BZC)是一種新型的無(wú)機(jī)鋅源，通過(guò)金屬的高純形式與水、鹽酸反應(yīng)制成[9]。BZC的晶體結(jié)構(gòu)是由可溶性金屬離子、多個(gè)羥基和氯離子之間的共價(jià)鍵形成的[10]，在水中溶解度低，在酸性溶液中溶解度高，與飼料中與其他成分的反應(yīng)較小[11]。本試驗(yàn)旨在探究不同鋅源及添加水平對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響，并以生長(zhǎng)性能、血液指標(biāo)和胰臟金屬硫蛋白(metallothionein，MT)mRNA表達(dá)量為指標(biāo)，評(píng)定其相對(duì)生物學(xué)利用率，為開(kāi)發(fā)新型飼料鋅源添加劑提供理論基礎(chǔ)和實(shí)踐參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

本試驗(yàn)所用3種鋅源分別為一水合硫酸鋅(zinc sulfate monohydrate，ZSM)、BZC和蛋白鋅(protein zinc，PRZ)。其中ZSM為化學(xué)純，鋅含量為34%；BZC是由市場(chǎng)購(gòu)得產(chǎn)自廣州某公司的堿式鹽，鋅含量為58%；PRZ是由市場(chǎng)購(gòu)得產(chǎn)自某國(guó)外企業(yè)的蛋白鋅鹽，鋅含量為12%。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)采用雙因素(3×3+1)完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選取720只1日齡健康雄性愛(ài)拔益加(AA)肉仔雞，隨機(jī)分為10個(gè)組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)12只雞。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，3個(gè)ZSM組分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧基礎(chǔ)上添加20、40和80 mg/kg ZSM的飼糧，3個(gè)BZC組分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧基礎(chǔ)上添加20、40和80 mg/kg BZC的飼糧，3個(gè)PRZ組分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧基礎(chǔ)上添加20、40和80 mg/kg PRZ的飼糧。各組不同鋅源添加量均以鋅計(jì)。試驗(yàn)在中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院昌平區(qū)南口試驗(yàn)基地進(jìn)行；試驗(yàn)期42 d，分為1～14日齡、15～28日齡和29～42日齡3個(gè)階段。

1.3 飼養(yǎng)管理

試雞飼養(yǎng)于不銹鋼鍍塑肉雞籠內(nèi)，采用3層籠養(yǎng)，自由采食和飲水。試驗(yàn)前對(duì)雞舍及周圍環(huán)境進(jìn)行熏蒸消毒。雞舍溫度第1周為33～35 ℃，之后每周下降2 ℃，直至室溫26 ℃；采用24 h光照，常規(guī)免疫。試驗(yàn)前3 d飼喂粉料，3 d后飼喂顆粒料。

1.4 基礎(chǔ)飼糧

基礎(chǔ)飼糧參照NRC(1994)肉仔雞營(yíng)養(yǎng)需要配制，為玉米-豆粕型飼糧，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.5 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.5.1 生長(zhǎng)性能

分別于14、28和42日齡08：00對(duì)每組每重復(fù)雞進(jìn)行空腹稱重，記錄各個(gè)重復(fù)的飼喂量和剩余量，計(jì)算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

續(xù)表1項(xiàng)目 Items1～14日齡1 to 14 days of age15～28日齡15 to 28 days of age29～42日齡29 to 42 days of age磷酸氫鈣 CaHPO42.272.001.82石粉 Limestone0.820.720.70食鹽 NaCl0.350.350.35DL-蛋氨酸 DL-Met0.340.260.20L-賴氨酸鹽酸鹽 L-Lys·HCl0.300.150.04維生素預(yù)混料 Vitamin premix1)0.020.020.02礦物質(zhì)預(yù)混料 Mineral premix2)0.200.200.20氯化膽堿 Choline chloride (50%)0.100.100.10合計(jì) Total100.00100.00100.00營(yíng)養(yǎng)水平 Nutrient levels3)代謝能 ME/(MJ/kg)12.1312.8912.84粗蛋白質(zhì) CP20.1419.2018.44鈣 Ca1.110.990.92有效磷 AP0.640.580.54賴氨酸 Lys1.081.030.98蛋氨酸 Met0.590.430.31蘇氨酸 Thr0.770.730.70色氨酸 Try0.230.220.21鋅 Zn/(mg/kg)32.2031.5029.20

1.5.2 樣品采集和制備

分別于第14和28日齡，各重復(fù)選取1只體重接近平均體重的肉仔雞(即每組6只)，脫臼致死后采取血樣(肝素鈉抗凝)，離心獲取血漿以備分析血漿鋅含量及其他生理生化和抗氧化指標(biāo)。立即采集胰臟、脾臟、腎臟和左右2側(cè)腿脛骨。其中，腎臟、胰臟于-20 ℃保存；剪取黃豆粒大小胰臟于凍存管中置于-196 ℃液氮中保存，以備測(cè)定胰臟鋅相關(guān)蛋白mRNA表達(dá)量；留取部分脾臟和腎臟于-20 ℃凍存，以備后續(xù)進(jìn)行腎臟和脾臟鋅含量的測(cè)定。肉仔雞雙側(cè)腿脛骨處理：去離子水沖洗后，煮沸，剝除干凈外層附著物，再次沖洗，550 ℃下灰化至恒重，用于后續(xù)分析脛骨灰鋅含量。

1.5.3 樣品鋅含量和血液指標(biāo)

飼糧、脛骨、胰臟、腎臟和脾臟鋅含量采用濃硝酸和高氯酸進(jìn)行濕消化前處理，使用Agilent 7900電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)儀測(cè)定；血漿鋅含量采用鋅離子測(cè)定試劑盒(PAPS顯色劑法，南京建成生物工程研究所)，使用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定；血漿5′-核苷酸酶(5′-NT)活性采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)試劑盒(梅里亞公司，法國(guó))，采用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定；血漿谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)、堿性磷酸酶(ALP)活性以及白蛋白(ALB)、丙二醛(MDA)含量采用試劑盒(南京建成生物工程研究所)測(cè)定；血漿銅鋅超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性，采用超氧化物歧化酶(SOD)分型測(cè)定試劑盒(南京建成生物工程研究所)測(cè)定。測(cè)定操作方法嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

1.5.4 胰臟鋅相關(guān)蛋白mRNA表達(dá)量

胰臟鋅相關(guān)蛋白mRNA表達(dá)量采用SYBR Green實(shí)時(shí)熒光定量(qRT-PCR)法測(cè)定。按照SuperScript ⅢTMFirst-Strand Synthesis System for RT-PCR試劑盒(購(gòu)自Invitrogen公司)合成cDNA模板，根據(jù)雞MT、鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-2(zinc transporter-2，ZnT-2)、鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-5(zinc transporter-5，ZnT-5)、金屬調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子1(metal regulatory transcription factor 1，MTF1)、二價(jià)金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(divalent metal transport 1，DMT1)和管家基因——磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)序列，分別設(shè)計(jì)合成其擴(kuò)增引物，引物序列見(jiàn)表2。

表2 引物序列

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用two-way ANOVA程序進(jìn)行雙因素方差分析，統(tǒng)計(jì)模型包括鋅源、鋅水平及互作效應(yīng)。方差分析差異顯著者(P<0.05)，以Duncan氏法進(jìn)行多重比較檢驗(yàn)，結(jié)果以平均值和均值標(biāo)準(zhǔn)誤(SEM)表示，以P<0.05為差異顯著，0.05

采用線性回歸方法，以各個(gè)階段鋅真實(shí)攝入量(采食量×實(shí)際鋅含量)為自變量，相關(guān)評(píng)測(cè)指標(biāo)為因變量擬合相關(guān)直線，以ZSM(100.00%)為標(biāo)準(zhǔn)，用斜率比法計(jì)算BZC和PRZ的相對(duì)生物學(xué)利用率。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同鋅源及添加水平對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響

不同鋅源及添加水平對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響見(jiàn)表3。由表可知，1～14日齡，與對(duì)照組相比，飼糧添加不同鋅源和添加不同水平鋅顯著提高肉仔雞ADG和14日齡體重(P<0.05)，顯著降低F/G(P<0.05)。在不同添加水平之間，40 mg/kg添加組ADG(27.59 g/d)顯著高于20 mg/kg添加組(26.69 g/d)和對(duì)照組(25.39 g/d)(P<0.05)，F(xiàn)/G也顯著低于其他添加組(P<0.05)。在不同鋅源之間，BZC組ADG(27.72 g/d)顯著高于ZSM組(26.93 g/d)和PRZ組(27.04 g/d)(P<0.05)，F(xiàn)/G(1.19)顯著低于ZSM組(1.23)(P<0.05)。各組之間，以40 mg/kg BZC組ADG最高(28.11 g/d)、F/G最低(1.13)。15～28日齡，隨著飼糧鋅添加水平的提高，肉仔雞ADG有提高的趨勢(shì)(P=0.096)。與對(duì)照組相比，飼糧添加不同鋅源對(duì)ADG和F/G無(wú)顯著影響(P>0.05)；在不同鋅源之間，BZC組ADFI(112.01 g/d)顯著高于PRZ組(106.65 g/d)(P<0.05)。29～42日齡，隨著飼糧鋅添加水平的提高，肉仔雞ADG有提高的趨勢(shì)(P=0.081)，F(xiàn)/G有降低的趨勢(shì)(P=0.070)。1～42日齡，與對(duì)照組相比，飼糧添加不同鋅源和添加不同水平鋅對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響(P>0.05)。此外，各試驗(yàn)組試雞的死淘率較低，但各組間均無(wú)顯著差異(數(shù)據(jù)未列出)(P>0.05)。

以上結(jié)果表明，飼糧添加不同鋅源和添加不同水平鋅對(duì)本試驗(yàn)條件下肉仔雞生長(zhǎng)前期(1～14日齡)ADG和F/G有顯著影響，且以添加40 mg/kg BZC效果最佳。

表3 不同鋅源及添加水平對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響

2.2 不同鋅源及添加水平對(duì)肉仔雞血液指標(biāo)的影響

不同鋅源及添加水平對(duì)肉仔雞血液指標(biāo)的影響見(jiàn)表4和表5。由表4可知，14日齡，飼糧添加不同鋅源和添加不同水平鋅顯著影響肉仔雞血漿鋅含量(P<0.05)；其中，80 mg/kg添加組血漿鋅含量顯著高于其他添加組(P<0.05)，PRZ組顯著高于ZSM組和BZC組(P<0.05)。飼糧添加不同鋅源顯著影響肉仔雞血漿ALP、T-SOD和CuZn-SOD活性(P<0.05)；其中，BZC組血漿ALP活性顯著高于ZSM組(P<0.05)，PRZ組血漿T-SOD和CuZn-SOD活性顯著高于ZSM組和BZC組(P<0.05)。由表5可知，28日齡，飼糧添加不同鋅源和添加不同水平鋅及其互作效應(yīng)對(duì)肉仔雞血液指標(biāo)均未產(chǎn)生顯著影響(P>0.05)。

表4 不同鋅源及添加水平對(duì)14日齡肉仔雞血液指標(biāo)的影響

表5 不同鋅源及添加水平對(duì)28日齡肉仔雞血液指標(biāo)的影響

2.3 不同鋅源及添加水平對(duì)肉仔雞組織鋅含量的影響

不同鋅源及添加水平對(duì)肉仔雞組織鋅含量的影響見(jiàn)表6(PRZ組未測(cè)定)。由表可知，飼糧添加不同水平鋅顯著影響14和28日齡肉仔雞脛骨鋅含量(P<0.05)，且隨著鋅水平的提高，脛骨鋅含量逐漸提高；其中，80 mg/kg添加組脛骨鋅含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。飼糧添加不同鋅源對(duì)肉仔雞脛骨鋅含量無(wú)顯著影響(P>0.05)，飼糧添加不同鋅源和添加不同水平鋅及其互作效應(yīng)對(duì)肉仔雞胰臟和腎臟鋅含量均無(wú)顯著影響(P>0.05)。

2.4 不同鋅源及添加水平對(duì)肉仔雞胰臟鋅相關(guān)蛋白mRNA表達(dá)量的影響

不同鋅源及添加水平對(duì)肉仔雞胰臟鋅相關(guān)蛋白mRNA表達(dá)量的影響見(jiàn)表8和表9。由表可知，與對(duì)照組相比，飼糧添加不同鋅源和添加不同水平鋅顯著提高14日齡肉仔雞胰臟MTmRNA表達(dá)量(P<0.05)，且PRZ組14日齡胰臟MTmRNA表達(dá)量顯著高于ZSM組和BZC組(P<0.05)，PRZ組28日齡胰臟MTmRNA表達(dá)量顯著高于ZSM組(P<0.05)。飼糧添加不同鋅源和添加不同水平鋅及其互作效應(yīng)對(duì)肉仔雞胰臟DMT1、MTF1、ZnT-2和ZnT-5 mRNA表達(dá)量均無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表6 不同鋅源及添加水平對(duì)肉仔雞組織鋅含量的影響

表7 不同鋅源及添加水平對(duì)14日齡肉仔雞胰臟鋅相關(guān)蛋白mRNA表達(dá)量的影響

續(xù)表7項(xiàng)目Items鋅添加水平Zinc supplemental levels/(mg/kg)金屬硫蛋白 MT二價(jià)金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1 DMT1金屬調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子1 MTF1鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-2 ZnT-2鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-5 ZnT-5鋅源 Zinc sourcesZSM1.70b1.371.341.431.78BZC1.85b1.371.261.501.66PRZ2.28a1.261.341.531.57鋅添加水平 Zinc supplemental levels/(mg/kg)01.52c1.481.211.431.52201.82a1.301.281.481.64401.90ab1.261.301.481.68802.10a1.451.351.501.70P值 P-value鋅源 Zinc source<0.0010.4420.6540.6760.834鋅添加水平 Zinc supplemental level0.0270.2020.6570.9700.122鋅源×鋅添加水平Zinc source×zinc supplemental level0.8610.1630.9950.9990.911

2.5 BZC相對(duì)生物學(xué)利用率評(píng)價(jià)

根據(jù)以上試驗(yàn)結(jié)果，以ZSM生物學(xué)利用率為參照標(biāo)準(zhǔn)(100.00%)，分別選擇肉仔雞生長(zhǎng)前期(1～14日齡)ADG和F/G、14日齡血漿鋅含量和ALP、T-SOD、CuZn-SOD活性以及胰臟MTmRNA表達(dá)量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)BZC相對(duì)生物學(xué)利用率進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果見(jiàn)表9。由表可知，以ADG、F/G和MTmRNA表達(dá)量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，BZC的相對(duì)生物學(xué)利用率分別為110.82%、113.55%和107.87%；以血漿鋅含量和ALP、T-SOD、CuZn-SOD活性為評(píng)價(jià)指標(biāo)，BZC的相對(duì)生物學(xué)利用率分別為97.55%、113.26%、98.90%和111.58%；以ADG、F/G和MTmRNA表達(dá)量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，RPZ的相對(duì)生物學(xué)利用率分別為102.90%、113.38%和130.56%；以血漿鋅含量和ALP、T-SOD、CuZn-SOD活性為評(píng)價(jià)指標(biāo)，PRZ的相對(duì)生物學(xué)利用率分別136.68%、109.64%、113.86%和96.56%。

表9 基于肉仔雞1～14日齡生長(zhǎng)性能、14日齡血液指標(biāo)和胰臟MT mRNA表達(dá)量評(píng)價(jià)BZC相對(duì)生物學(xué)利用率

以ZSM生物學(xué)利用率為參照標(biāo)準(zhǔn)(100.00%)，分別選擇選擇肉仔雞14和28日齡脛骨、胰臟和腎臟鋅含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)BZC相對(duì)生物學(xué)利用率進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果見(jiàn)表10。由表可知，以14日齡肉仔雞脛骨、胰臟和腎臟鋅含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，BZC的相對(duì)生物學(xué)利用率分別為119.93%、113.30%和95.81%；以28日齡肉仔雞脛骨、胰臟和腎臟鋅含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，BZC的相對(duì)生物學(xué)利用率分別為109.27%、94.95%和95.61%。由此可見(jiàn)，以脛骨鋅含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，BZC的相對(duì)生物學(xué)利用率高于ZSM；而以腎臟鋅含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，BZC的相對(duì)生物學(xué)利用率低于ZSM。

表10 基于肉仔雞組織鋅含量評(píng)價(jià)BZC相對(duì)生物學(xué)利用率

3 討 論

3.1 不同鋅源及添加水平對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響

BZC對(duì)豬雞生長(zhǎng)性能的影響有較多的報(bào)道，早期Batal等[12]報(bào)道在肉仔雞飼糧中添加BZC，肉仔雞ADG、ADFI和飼料轉(zhuǎn)化率隨著鋅添加水平的提高呈二次曲線提高，雛雞(8～22日齡)ADG隨著鋅添加水平的提高呈線性提高。Olukosi等[13-14]在2次肉雞試驗(yàn)中研究表明，BZC能提高肉雞的生長(zhǎng)性能，其中1次試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其還可以改善肉雞胴體品質(zhì)。近期，M’Sadeq等[15]和Van Kuijk等[7]的報(bào)道顯示，與飼喂硫酸鋅相比，飼喂BZC對(duì)肉雞的生長(zhǎng)性能有積極的影響。用BZC代替硫酸鋅在豬上的試驗(yàn)也證明，飼糧添加BZC替代硫酸鋅可以改善育肥豬的生長(zhǎng)性能[11]。Cemin等[16]研究發(fā)現(xiàn)，鋅添加量為50 mg/kg時(shí)，育肥豬ADG最高，但鋅添加量為125 mg/kg時(shí)，F(xiàn)/G有所提高。本試驗(yàn)中，飼糧添加不同鋅源和添加不同水平鋅對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)前期(1～14日齡)ADG和F/G有顯著促進(jìn)作用，且以添加40 mg/kg BZC效果最佳。由此可見(jiàn)，BZC作為一種新型無(wú)機(jī)鋅源，在提高豬雞生長(zhǎng)性能方面較傳統(tǒng)硫酸鋅更有優(yōu)勢(shì)，其部分原因是認(rèn)為其晶體結(jié)構(gòu)由可溶性金屬離子、多個(gè)羥基和氯離子之間的共價(jià)鍵形成[17]，在水中溶解度低，在酸性溶液中溶解度高，飼糧中其他營(yíng)養(yǎng)成分對(duì)其活性的影響較小[11]，而有關(guān)其促生長(zhǎng)的分子機(jī)理還有待進(jìn)一步研究。

3.2 不同鋅源及添加水平對(duì)肉仔雞血液指標(biāo)和組織鋅含量的影響

鋅通過(guò)飼糧被動(dòng)物采食，經(jīng)過(guò)血液運(yùn)往全身從而發(fā)揮其生理作用，動(dòng)物機(jī)體對(duì)鋅的吸收利用可以直接或者間接的通過(guò)血液鋅含量反映出來(lái)。本試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，飼糧添加不同鋅源和添加不同水平鋅顯著影響肉仔雞14日齡血漿鋅含量，其中，80 mg/kg添加組血漿鋅含量顯著高于其他添加組，PRZ組顯著高于ZSM和BZC組；但對(duì)28日齡血漿鋅含量沒(méi)有顯著影響。肉仔雞前期生長(zhǎng)速度快，對(duì)鋅需求量較高；隨著日齡的增長(zhǎng)，對(duì)鋅的需求量下降，低水平鋅就能滿足其需要量，而過(guò)高的鋅并不會(huì)促進(jìn)生長(zhǎng)，甚至超過(guò)一定劑量會(huì)出現(xiàn)鋅中毒。李杰等[5]研究表明，血液鋅含量隨飼糧鋅添加水平的提高而提高，當(dāng)鋅添加水平為50 mg/kg時(shí)，繼續(xù)提高添加水平對(duì)血液鋅含量沒(méi)有顯著影響。Wang等[6]研究表明，飼糧中添加低水平有機(jī)甘氨酸鋅和高水平無(wú)機(jī)氧化鋅對(duì)斷奶仔豬血清鋅含量均具有促進(jìn)作用。牛現(xiàn)琇[18]在30～60 kg育肥豬的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，低水平有機(jī)蛋氨酸鋅組血清鋅含量顯著高于高水平硫酸鋅組。添加有機(jī)鋅提高血液鋅含量的原因可能是由于有機(jī)鋅與無(wú)機(jī)鋅的吸收機(jī)制不同導(dǎo)致吸收率不同，離子鋅不能穿過(guò)消化道細(xì)胞膜，只有與有機(jī)分子結(jié)合成絡(luò)合物才能通過(guò)[19]，從而更接近吸收機(jī)制的有機(jī)鋅即使添加水平低也能對(duì)肉仔雞血漿鋅含量產(chǎn)生較大影響。

鋅作為動(dòng)物機(jī)體組織結(jié)構(gòu)參與體內(nèi)300多種酶的構(gòu)成，ALP為其中一種，通常被用做評(píng)價(jià)礦物質(zhì)在動(dòng)物體內(nèi)的吸收情況。ALP能將核酸去磷酸化，其活性與含量能側(cè)面反映血液鋅含量的高低。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼糧添加不同鋅源能顯著提高14日齡肉仔雞血漿ALP活性，且BZC組顯著高于ZSM組；此外，與ZSM組和BZC組相比，PRZ組14日齡肉仔雞血漿CuZn-SOD活性顯著提高。徐振華[20]和王中成[21]的報(bào)道與本試驗(yàn)結(jié)果相同，飼糧添加各種形式的鋅(有機(jī)和無(wú)機(jī))均能提高動(dòng)物機(jī)體血清CuZn-SOD活性，且有機(jī)鋅的添加要優(yōu)于無(wú)機(jī)鋅。Van等[7]報(bào)道，無(wú)機(jī)鋅BZC等羥基氯化物可能通過(guò)維持維生素E來(lái)維持其機(jī)體抗氧化能力。

組織中微量元素的含量可以反映鋅源的生物學(xué)利用率。動(dòng)物機(jī)體組織中的鋅含量會(huì)因飼糧中鋅的缺乏或過(guò)量以及動(dòng)物機(jī)體對(duì)鋅的吸收情況而發(fā)生相應(yīng)改變。肉仔雞中鋅主要沉積在腿脛骨之中，只有少數(shù)鋅沉積在肌肉和腦等組織中。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼糧添加不同水平鋅顯著影響肉仔雞14和28日齡脛骨鋅含量，且隨著鋅水平的提高，脛骨鋅含量逐漸提高。

3.3 不同鋅源及添加水平對(duì)肉仔雞胰臟鋅相關(guān)蛋白mRNA表達(dá)量的影響

MT對(duì)鋅離子具有高度親和力，參與鋅離子貯存、運(yùn)輸以及代謝，在動(dòng)物機(jī)體鋅穩(wěn)衡的調(diào)節(jié)機(jī)制中發(fā)揮著極其重要的作用[22]。MT的表達(dá)受鋅離子的轉(zhuǎn)入及機(jī)體對(duì)鋅的吸收影響。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼糧添加不同鋅源和添加不同水平鋅顯著影響14日齡肉仔雞胰臟MTmRNA表達(dá)量，廖秀冬[23]和曹家銀等[24]的試驗(yàn)結(jié)果與本試驗(yàn)一致，即隨著飼糧鋅添加水平的提高，肉雞胰臟MTmRNA表達(dá)量呈線性提高。此外，本試驗(yàn)結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，PRZ組14日齡胰臟MTmRNA表達(dá)量顯著高于ZSM組和BZC組，PRZ組28日齡胰臟MTmRNA表達(dá)量顯著高于ZSM組。Huang等[25]在研究鋅源和鋅水平對(duì)肉仔雞胰臟MTmRNA表達(dá)量的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，加鋅組胰臟MTmRNA表達(dá)量均顯著高于空白對(duì)照組，并隨著鋅水平提高線性提高，不同鋅源組的胰臟MTmRNA表達(dá)量也存在顯著差異。

3.4 BZC相對(duì)生物學(xué)利用率評(píng)價(jià)

本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，以ZSM為參照(100.00%)，以肉仔雞1～14日齡ADG為評(píng)價(jià)指標(biāo)，BZC的相對(duì)生物學(xué)利用率較高，平均值為110.82%。這與國(guó)內(nèi)外相關(guān)報(bào)道類似，Batal等[12]研究發(fā)現(xiàn)，在肉仔雞中，BZC較硫酸鋅的相對(duì)生物學(xué)利用率高；Cao等[26]研究表明，當(dāng)鋅水平高于雛雞的需求量時(shí)，BZC的相對(duì)生物學(xué)利用率估計(jì)值為107%；Huang等[27]以石斑魚為研究對(duì)象，基于增重率(WGR)、血清過(guò)氧化氫酶(CAT)、T-SOD和CuZn-SOD活性以及整體鋅含量和椎骨鋅含量分析，以硫酸鋅(100%)為參考，BZC的相對(duì)生物學(xué)利用率分別為169%、208%、214%、149%、124%和152%，BZC相對(duì)于硫酸鋅的相對(duì)生物學(xué)利用率平均值為169.33%。由此可見(jiàn)，對(duì)所試驗(yàn)的動(dòng)物來(lái)說(shuō)，BZC的相對(duì)生物學(xué)利用率高于硫酸鋅。

4 結(jié) 論

① 在玉米-豆粕型飼糧條件下，飼糧添加不同鋅源和添加不同水平鋅對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)前期(1～14日齡)ADG和F/G有顯著影響，且以添加40 mg/kg BZC(總鋅含量為68.2～72.2 mg/kg)效果最佳。

② 在玉米-豆粕型飼糧條件下，鋅通過(guò)影響鋅相關(guān)酶活性和鋅相關(guān)蛋白mRNA的表達(dá)來(lái)控制鋅的沉積與代謝，飼糧添加BZC顯著提高血漿ALP活性和脛骨中鋅的沉積，而飼糧添加PRZ顯著提高血漿T-SOD和CuZn-SOD活性以及胰臟MTmRNA表達(dá)量。

③ 以ZSM生物學(xué)利用率為參照標(biāo)準(zhǔn)(100.00%)，采用不同評(píng)價(jià)指標(biāo)，BZC的相對(duì)生物學(xué)利用率為94.95%～119.93%，PRZ的相對(duì)生物學(xué)利用率為96.59%～130.68%，BZC與PRZ效果相當(dāng)。