仔兔腸道菌群早期定植特征及其調(diào)控的研究進(jìn)展

祝元婷 郭海英 周 君 左 勇

(四川師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，成都610000)

近年來(lái)，兔養(yǎng)殖業(yè)在許多國(guó)家快速發(fā)展，其中中國(guó)是世界第一大生產(chǎn)國(guó)和出口國(guó)，兔肉年生產(chǎn)量為849 150 t，出口量占全球總產(chǎn)量的27%[1]。根據(jù)有關(guān)兔的疫情統(tǒng)計(jì)，在平均死亡率為24%的兔群中，就有75%以上的兔是因腹瀉所致[2]，而腸道菌群紊亂是兔腹瀉的主要原因。大量研究顯示，健康的腸道菌群對(duì)于提高兔生長(zhǎng)性能和免疫能力具有積極作用，主要原因包括腸道菌群可產(chǎn)生促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)成分消化吸收的酶類(lèi)如淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶等[3]，分泌促進(jìn)免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)和發(fā)育的短鏈脂肪酸(short chain fatty acids，SCFAs)等物質(zhì)[4]；腸道菌群之間的拮抗作用還可在一定程度上抑制有害菌的生長(zhǎng)，調(diào)節(jié)和促進(jìn)腸道微生物的動(dòng)態(tài)平衡[5]。我們可通過(guò)正確的飼糧配方以及科學(xué)的人工管理來(lái)調(diào)節(jié)仔兔腸道菌群，以降低兔死亡率和發(fā)病率。因此，本文將從仔兔腸道菌群早期結(jié)構(gòu)特征和調(diào)控措施加以綜述。

1 仔兔腸道菌群早期定植過(guò)程

兔各腸段的菌群結(jié)構(gòu)及其優(yōu)勢(shì)菌群會(huì)隨其定植部位和生長(zhǎng)階段的不同而呈現(xiàn)不同的變化規(guī)律。兔腸道菌群的豐富性和多樣性會(huì)隨日齡的增加而顯著增加，其優(yōu)勢(shì)菌門(mén)包括厚壁菌門(mén)(Firmicutes)、擬桿菌門(mén)(Bacteroidetes)、疣狀菌門(mén)(Verrucomicrobia)和藍(lán)藻門(mén)(Cyanobacteria)等，其相對(duì)豐度會(huì)顯著變化[6]，直至兔成年，腸道菌群會(huì)逐漸趨于穩(wěn)定、平衡。

胚胎期的兔腸道被認(rèn)為幾乎是無(wú)菌的，但晚期胚胎腸道內(nèi)有微生物定植，數(shù)量為0.8×102～1.2×102CFU/g，主要包括棒桿菌屬(Corynebacterium)、微球菌屬(Micrococcus)、蠟樣芽孢桿菌(Bacilluscereus)和葡萄球菌屬(Staphylococcus)等細(xì)菌[7]。剛出生的仔兔由于從母乳中獲得抗菌物質(zhì)，故具有與胚胎期相似的腸道菌群結(jié)構(gòu)[8]。但剛出生的仔兔所接觸的母兔糞便及飼養(yǎng)環(huán)境中的細(xì)菌會(huì)在腸道中定植[9]。隨著母兔的哺乳行為等因素的影響，兔腸道菌群逐漸豐富。7日齡時(shí)，可在仔兔盲腸中檢測(cè)到古細(xì)菌群落，并在35日齡達(dá)到最大值[10]。14日齡盲腸細(xì)菌群落以擬桿菌門(mén)、擬桿菌科和細(xì)菌素屬為主[11]，其中，擬桿菌門(mén)在兔腸道消化過(guò)程中起著重要作用[12]，且此時(shí)兔盲腸厚壁菌門(mén)數(shù)量達(dá)到最大值[10]。

成長(zhǎng)中兔的消化系統(tǒng)必須經(jīng)歷一段從乳汁喂養(yǎng)到完全依賴(lài)固體飼糧的適應(yīng)期，這種適應(yīng)過(guò)程不僅影響消化系統(tǒng)，而且還會(huì)影響腸道微生物群的定植和保護(hù)動(dòng)物免受消化道疾病侵害的腸道屏障[13]。15日齡后，仔兔開(kāi)始進(jìn)食含有纖維的固體飼糧，纖維基質(zhì)進(jìn)入盲腸，與此同時(shí)，與纖維分解相關(guān)的細(xì)菌包括纖維素分解細(xì)菌、淀粉分解細(xì)菌、果膠和木糖降解細(xì)菌等在腸道中開(kāi)始定植[2]。21日齡時(shí)，母兔的泌乳能力下降，通過(guò)補(bǔ)飼固體飼糧，可以增加仔兔存活率[14]，且此時(shí)仔兔盲腸總菌數(shù)量和擬桿菌屬-普雷沃菌屬(Bacteroides-Prevotella)數(shù)量達(dá)到最高值[10]。25日齡時(shí)，兔腸道中纖維降解菌群數(shù)量緩慢增加至107CFU/g[15]，但若仔兔僅攝入母乳，即使35～42日齡兔子的腸道菌群也不會(huì)出現(xiàn)纖維素分解菌群[16]。28日齡時(shí)，仔兔胃中開(kāi)始出現(xiàn)軟糞[17]，軟糞中有益菌對(duì)兔腸道菌群的構(gòu)建具有極其重要的作用。

大多數(shù)農(nóng)場(chǎng)的仔兔在28～35日齡斷奶[2]。剛斷奶時(shí)，由于飼糧的改變，仔兔腸道乳酸桿菌和腸球菌數(shù)量減少，而大腸桿菌數(shù)量增加，并高于乳酸桿菌數(shù)量[18]，再加上仔兔自身免疫及消化系統(tǒng)發(fā)育不全，斷奶仔兔極容易腹瀉。事實(shí)上，盲腸微生物區(qū)系在健康仔兔斷奶時(shí)已基本建立，且其多樣性會(huì)隨日齡的增長(zhǎng)有增加的趨勢(shì)。30日齡時(shí)，仔兔盲腸中有較高的產(chǎn)乙酸菌和產(chǎn)甲烷菌含量，并隨著日齡的增長(zhǎng)，盲腸中的產(chǎn)乙酸菌含量會(huì)因宿主非飲食的因素而發(fā)生變化，最終趨于穩(wěn)定[19]。60日齡時(shí)，仔兔腸道微生物群落以厚壁菌門(mén)、變形菌門(mén)、擬桿菌門(mén)、疣微菌門(mén)和放線菌門(mén)為主[20]。80日齡時(shí)，仔兔盲腸菌群以厚壁菌門(mén)、毛螺菌科和瘤胃科為主[11]。

2 仔兔腸道菌群的調(diào)控

2.1 飼糧

飼糧是腸道菌群所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的主要來(lái)源，其營(yíng)養(yǎng)素的組成及比例的不同都直接或間接地影響兔腸道菌群結(jié)構(gòu)。飼糧降解產(chǎn)物不僅可通過(guò)提供營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)直接影響腸道微生物的生長(zhǎng)繁殖，還可通過(guò)改善腸道環(huán)境如腸道pH、氧化還原電位等指標(biāo)間接調(diào)控腸道微生態(tài)。

飼糧組成類(lèi)型是引起腸道菌群變化的主要因素之一。例如，兔斷奶前后攝入脫水苜蓿，可顯著提高瘤胃球菌科(Ruminococcaceae)/毛螺菌科(Lachinospiraceae)的比值，對(duì)兔腸道消化微生物群有利[21]。一些農(nóng)業(yè)副產(chǎn)品如發(fā)酵玉米秸稈、越橘果渣和花生秧等也被用作仔兔高營(yíng)養(yǎng)低成本的飼料來(lái)源，對(duì)腸道菌群的調(diào)節(jié)發(fā)揮著重要作用。發(fā)酵玉米秸稈作為仔兔的粗飼料可顯著提高兔盲腸中雙歧桿菌、乳酸菌及芽孢桿菌等有益菌的數(shù)量，并降低有害菌的數(shù)量，促進(jìn)仔兔的生長(zhǎng)繁殖[22]。越橘果渣可增加梭狀芽胞桿菌、螺旋體、瘤胃球菌和瘤胃球菌科的相對(duì)豐度[23]。在飼糧中添加一定量的花生秧可降低變形菌門(mén)中一些致病菌的數(shù)量，從而降低腸道炎癥等疾病的發(fā)生率[24]。

飼糧纖維在動(dòng)物飼養(yǎng)中的重要性在于對(duì)腸道菌群的調(diào)控以及對(duì)消化系統(tǒng)健康的影響。兔作為小型單胃食草動(dòng)物，其盲腸菌群中存在高效的纖維素酶[25]，對(duì)減少膳食纖維的攝入非常敏感，以缺乏纖維的飼糧喂養(yǎng)仔兔2周，其厚壁菌/擬桿菌比值極大下降[26]。因此，在兔飼糧組分中飼糧纖維占有重要地位，其包括中性洗滌纖維(neutral detergent fibre，NDF)和酸性洗滌纖維(acid detergent fibre，ADF)[27]。用NDF含量為350 g/kg的飼糧飼喂仔兔，菌群多樣性顯著增加，厚壁菌門(mén)以及產(chǎn)SCFAs的瘤胃球菌數(shù)量較高，該飼糧能通過(guò)調(diào)控盲腸微生物菌群有效預(yù)防胃腸道損傷并提高仔兔生長(zhǎng)性能[28]。中性洗滌可溶性纖維(neutral detergent soluble fibre，NDSF)能夠降低胃pH和影響盲腸微生物菌群，在斷奶后和整個(gè)育肥期兔死亡率隨NDSF水平的升高呈線性下降[29]；且較高水平的NDSF可降低兔盲腸彎曲桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌的檢出率[30]，改善斷奶兔的腸屏障功能。ADF可改善腸道形態(tài)，且隨著ADF日攝入量的增加，氨氮(NH3-N)含量下降，飼糧日攝入量、揮發(fā)性脂肪酸含量以及盲腸內(nèi)容物中纖維分解酶活性均增加[31]。除此之外，高纖維飼糧還可以預(yù)防與腸道菌群失調(diào)有關(guān)的疾病。但是，對(duì)于生長(zhǎng)肉兔，高纖維水平飼糧并不能提高兔生長(zhǎng)率[32]。因此，可將纖維與淀粉配合飼用，以增加飼糧能量，優(yōu)化飼料效率并控制生長(zhǎng)中兔的氮排泄，從而提高兔生長(zhǎng)性能[33]。此外，纖維與淀粉的比例會(huì)顯著改變兔盲腸微生物菌群的組成[34]，但其對(duì)兔盲腸古菌群落的多樣性和相對(duì)豐度沒(méi)有顯著影響[35]。

飼糧中蛋白質(zhì)和氨基酸的來(lái)源與組成也可導(dǎo)致兔腸道微生物的變化，特別是對(duì)早期斷奶兔的健康有影響。飼糧中粗蛋白質(zhì)的含量從209 g/kg降至179 g/kg時(shí)，會(huì)影響回腸微生物群的組成，降低氮化合物的回腸流量和仔兔的死亡率，尤其降低產(chǎn)氣莢膜梭菌的檢出率[36]。而將飼糧中粗蛋白質(zhì)的含量從172 g/kg降至139 g/kg時(shí)，會(huì)線性降低盲腸中揮發(fā)性脂肪酸含量，同時(shí)降低斷奶仔兔的生長(zhǎng)性能和盲腸發(fā)酵活性[37]。因此適當(dāng)降低粗蛋白質(zhì)的飲食調(diào)節(jié)應(yīng)被視為一種促進(jìn)兔腸道健康的策略。氨基酸的作用不僅僅是為動(dòng)物本身提供營(yíng)養(yǎng)，也可被腸道菌群利用[38]。飼糧中添加1%的谷氨酰胺可降低兔死亡率、產(chǎn)氣莢膜梭菌和幽門(mén)螺桿菌的檢出率[39]。添加精氨酸(L-arginine，L-Arg)和N-氨基甲?；劝彼?N-carbamylglutamate，NCG)可改變兔腸道微生物群落和相對(duì)豐度[40]，而且補(bǔ)充L-Arg和NCG還能促進(jìn)仔豬盲腸乳酸菌和厭氧菌的生長(zhǎng)[41-42]。因此，我們可以推測(cè)L-Arg和NCG對(duì)維持兔腸道健康和功能，以及腸道菌群平衡起著重要作用。

2.2 益生菌

益生菌具有補(bǔ)充有益菌群、預(yù)防胃腸道疾病、產(chǎn)生多種酶類(lèi)并促進(jìn)生長(zhǎng)等功能，能夠促進(jìn)腸內(nèi)菌群生態(tài)平衡，且無(wú)毒副作用、安全可靠、環(huán)境友好，因此可作為“替抗物”用于兔養(yǎng)殖行業(yè)，成為了當(dāng)前的研究熱點(diǎn)。

目前關(guān)于兔用微生態(tài)制劑的產(chǎn)品及研發(fā)相對(duì)較少，其中已有研究報(bào)道中涉及的乳酸菌類(lèi)益生菌主要有嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidophilus)、植物乳桿菌(Lactobacillusplantarum)、干酪乳桿菌(Lactobacilluscasei)及糞鏈球菌(Enterococcusfaecium)等，它們均可代謝產(chǎn)生具有抑菌活性的物質(zhì)[43]、促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收、提高免疫力、降低因應(yīng)激引起的腸道疾病的作用[44]。研究表明，給兔服用干酪乳桿菌可以增加腸道乳酸菌的相對(duì)豐度，降低腸埃希氏菌、志賀氏菌的相對(duì)豐度，促進(jìn)蚓突的生長(zhǎng)，刺激窗格細(xì)胞脫粒并誘導(dǎo)防御素-7樣(DEFEN)和溶菌酶(LYS)的基因表達(dá)[45]。嗜酸乳桿菌添加到28日齡斷奶仔兔的飼糧中，體增重顯著增加[46]。給35日齡斷奶仔兔飼喂糞腸球菌CCM7420，其平均日增重、空腸絨毛高度及表面積、絨毛高度/隱窩深度比值均增加，其中平均日增重增加了9.5%[47-48]。此外，布氏乳桿菌會(huì)使所有腸組織中的Toll樣受體(TLR)2和TLR4基因表達(dá)下調(diào)，減少炎癥細(xì)胞因子和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)分泌，上調(diào)抗炎細(xì)胞因子白細(xì)胞介素(IL)-4基因和腸屏障相關(guān)基因的表達(dá)[49]，提高斷奶仔兔的日增重和成活率以及降低其腹瀉發(fā)生率。

具有益生作用的芽孢桿菌主要有枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、蠟樣芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)和丁酸梭菌(Clostridiumbutyricum)，均可以改善腸道菌群、提高免疫力，部分菌還可以增強(qiáng)消化酶的活性。而且，部分芽孢桿菌之間具有協(xié)同增效作用，如蠟樣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌三者共同組合較單獨(dú)飼喂對(duì)提高兔健康的效果更佳[50]；106CFU/g混合枯草芽孢桿菌也使仔兔表現(xiàn)出更好的生長(zhǎng)性能，并能顯著提高兔感染大腸桿菌后的存活率[51]。此外，枯草芽孢桿菌HH2還可降低疾病活動(dòng)指數(shù)、組織學(xué)損傷評(píng)分及TNF-α和IL-1β的基因表達(dá)，增強(qiáng)IL-10和緊密連接蛋白基因如閉合蛋白(Occludin)的mRNA表達(dá)，維持腸黏膜屏障功能，增加雙歧桿菌科的相對(duì)豐度，降低類(lèi)桿菌和變形桿菌的相對(duì)豐度[52]。1.0×105CFU/g的丁酸梭菌也可顯著提高35日齡仔兔的平均日增重，進(jìn)一步的研究還表明了丁酸梭菌可增加腸道中的厚壁菌門(mén)、擬桿菌門(mén)、雙歧桿菌等有益菌的相對(duì)豐度，并改善黏膜形態(tài)和抗氧化狀態(tài)，維持小腸屏障功能，同時(shí)上調(diào)緊密連接蛋白基因的mRNA表達(dá)水平以及增加分泌型免疫球蛋白A(sIgA)的產(chǎn)生，降低包括IL-6、干擾素-γ(INF-γ)和TNF-α的促炎細(xì)胞因子數(shù)量，提高髓樣分化初級(jí)反應(yīng)基因88(MyD88)以及TLR2、TLR4基因的表達(dá)水平[53]。

釀酒酵母也是一種益生菌，而且具有可用性、安全性和廉價(jià)性三大特點(diǎn)，這為釀酒酵母培養(yǎng)物替代抗生素在生產(chǎn)上的應(yīng)用提供了可能[54]。研究發(fā)現(xiàn)酵母類(lèi)微生態(tài)制劑的添加量應(yīng)適宜，并且其活菌數(shù)須達(dá)到一定數(shù)量才能形成微生物的生物屏障[55]。相對(duì)于0.08和0.16 g/kg劑量，在兔飼糧添加中0.12 g/kg的釀酒酵母可以更好地保持良好的健康狀況，獲得最高增重[(1.025+0.006) kg]以及最高飼料利用率(57.20%)，并能顯著增高機(jī)體淋巴細(xì)胞和白細(xì)胞數(shù)量[56]。

2.3 益生元

益生元是不易被動(dòng)物或人體消化的但可被腸道微生物發(fā)酵的碳水化合物，主要包括糖醇、低聚糖(如菊粉型果糖、低聚半乳糖等)和多糖等。它們可以作為后腸發(fā)酵劑，選擇性促進(jìn)一些有益菌的生長(zhǎng)，改善營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率，有助于通便，降低管腔的pH并擴(kuò)展壁組織，提高氮在盲腸營(yíng)養(yǎng)動(dòng)物體內(nèi)存留等[57-58]。總而言之，益生元在改善兔生長(zhǎng)性能方面發(fā)揮著重要作用，且因其綠色、安全、高效等優(yōu)點(diǎn)成為了當(dāng)前飼料工業(yè)鄰域的研究熱點(diǎn)之一。

經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，甘露寡糖、異麥芽寡糖、阿拉伯木聚糖寡糖和魔芋甘露寡糖均可以使兔體重增加、改善料重比，提高經(jīng)濟(jì)效益。甘露寡糖和異麥芽寡糖均可顯著誘導(dǎo)不同組織中調(diào)控營(yíng)養(yǎng)代謝、免疫和生長(zhǎng)的一些主要關(guān)鍵基因的表達(dá)[57]。甘露寡糖和阿拉伯木聚糖寡糖都可以增加回腸絨毛長(zhǎng)度，顯示出更好的生長(zhǎng)和腸道形態(tài)[59]。此外，通過(guò)比較研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加100 mg/kg魔芋甘露寡糖促進(jìn)兔健康生長(zhǎng)的效果最好，盲腸pH顯著降低，雙歧桿菌和乳酸桿菌數(shù)量分別增加了5.28%和4.90%，大腸桿菌數(shù)量減少了5.73%，總揮發(fā)性脂肪酸、乙酸和丁酸含量分別升高了27.28%、14.95%和57.14%，絨毛高度增加了36.19%，隱窩深度降低了22.98%[60]。益生元還可以預(yù)防球蟲(chóng)感染，可用于最大程度減少兔球蟲(chóng)病的不良反應(yīng)，限制體重減輕[61]。大量證據(jù)表明了益生元對(duì)于兔的生長(zhǎng)有很大的益處，可大力發(fā)展益生元類(lèi)微生態(tài)制劑，作為綠色飼料添加劑應(yīng)用到兔養(yǎng)殖業(yè)中。

2.4 酸化劑

飼料酸化劑是一種非營(yíng)養(yǎng)類(lèi)飼料添加劑，具有降低腸道pH、影響腸道菌群和提高動(dòng)物生長(zhǎng)及免疫性能等作用。它可分為無(wú)機(jī)和有機(jī)酸化劑，無(wú)機(jī)酸化劑包括磷酸、鹽酸和硫酸等；有機(jī)酸化劑主要包括蘋(píng)果酸、甲酸、山梨酸等?，F(xiàn)多以有機(jī)酸和無(wú)機(jī)酸配合使用為主，從而可達(dá)到互補(bǔ)協(xié)同作用，克服單一酸化劑的不足與缺陷。

關(guān)于有機(jī)酸對(duì)仔兔腸道微生物、黏膜免疫和生長(zhǎng)性能影響的研究報(bào)道很少，而且部分結(jié)論存在矛盾[62]。研究表明，有機(jī)酸對(duì)盲腸細(xì)菌細(xì)胞完整性起直接作用，但是其作用方式尚不完全清楚[63]。此外，SCFAs還可能作為部分腸道微生物的生長(zhǎng)底物[64]，提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，但尚需進(jìn)一步研究。部分有機(jī)酸具有抗菌活性，可以減少革蘭氏陰性和陽(yáng)性致病菌造成的損害[65]。短鏈酸(C1～C7)一般具有特異抗菌活性[66]，但是也有研究指出丁酸、富馬酸和甲酸沒(méi)有顯示出抗菌活性[67]。不管有機(jī)酸在食物、飼糧或腸道內(nèi)的作用如何，其抗菌活性機(jī)理基本相同[68]，未解離的有機(jī)酸很容易穿過(guò)細(xì)胞膜，當(dāng)進(jìn)入微生物呈中性pH的細(xì)胞質(zhì)中時(shí)，往往會(huì)解離。這樣釋放出來(lái)的質(zhì)子可以通過(guò)抑制酶和/或運(yùn)輸系統(tǒng)來(lái)擾亂微生物的代謝[62]，從而降低有害菌數(shù)量。如辛酸經(jīng)常被添加到飼養(yǎng)仔兔的飲食中以減少胃和盲腸中大腸桿菌的數(shù)量，降低死亡率，還可降低盲腸中的厭氧菌總數(shù)[69]。富馬酸雖無(wú)抗菌活性[70]，但飼糧中添加10 g/kg富馬酸，對(duì)飼糧消化率和微生物氮攝入量有積極作用，并且兔盲腸淀粉酶降解菌數(shù)量會(huì)隨著富馬酸添加水平的增加而明顯增加[71]。此外，飲水中添加有機(jī)酸對(duì)兔胃蛋白酶活性、平均日增重呈二次函數(shù)增加效應(yīng)；總細(xì)菌中大腸桿菌的比例呈線性降低，乳酸菌的相對(duì)比例呈線性增加趨勢(shì)，胃底和胃中食糜酸度呈線性降低[72]。

2.5 天然提取物

天然提取物常指來(lái)源于動(dòng)植物的天然物質(zhì)，相較于抗生素和無(wú)機(jī)化學(xué)藥品其毒性較低、無(wú)有害殘留物質(zhì)，可作為飼料添加劑促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)。此外，它還具有抗菌、消炎、提高動(dòng)物免疫力和調(diào)節(jié)腸道菌群等作用，近年來(lái)受到飼料工業(yè)界的廣泛關(guān)注。表1是已報(bào)道的用于調(diào)節(jié)仔兔腸道菌群的天然提取物及其功能。

百里香油、昆蟲(chóng)脂肪、魚(yú)油、乳香樹(shù)脂和冷榨豆瓣菜油和椰子油混合物均能改善腸道菌群，提高兔宿主免疫力和生長(zhǎng)性能。百里香油可降低十二指腸組織中丙二醛含量[73]；從黑水虻幼蟲(chóng)(HermitiaillucensL.，HI)和黃粉虱幼蟲(chóng)(TenebriomolitorL.，TM)中提取的2種脂肪可提高盲腸揮發(fā)性脂肪酸的含量，增加與NH3-N含量相關(guān)的艾克曼菌屬(Akkermansia)和瘤胃球菌的相對(duì)豐度[74]；魚(yú)油可提高兔肉和脂肪中有益的長(zhǎng)鏈n-3脂肪酸含量，降低脂肪n-6/n-3的比例，但是早期斷奶仔兔的飼糧中加入魚(yú)油的生長(zhǎng)性能略有下降[75]；乳香樹(shù)脂、冷榨豆瓣菜油和椰子油混合物均具有抗氧化作用，且乳香樹(shù)脂可將盲腸致病菌數(shù)量降至最低[76-77]。

黑醋栗渣提取物中花青素和黃酮醇含量較高，分別為48.9%和17.9%，將其添加于飼糧中可降低后腸消化道中SCFAs的含量和β-葡萄糖醛酸酶的活性[78]。原花青素B2和辣木提取物均能調(diào)節(jié)腸道菌群，對(duì)兔的生長(zhǎng)發(fā)育和免疫功能均有明顯的改善作用。原花青素B2通過(guò)顯著提高擬桿菌門(mén)和艾克曼菌屬的比例來(lái)調(diào)節(jié)兔腸道菌群[79]。辣木提取物能夠提高盲腸總揮發(fā)性脂肪酸含量，降低丁酸酯的摩爾比例，并提高丙酸酯的摩爾比例[80]。單獨(dú)或聯(lián)合使用腸球菌素和鼠尾草提取物可改善兔子的空腸形態(tài)，降低糞便中大腸桿菌數(shù)量[81]。

表1 常見(jiàn)天然提取物及相關(guān)功能

3 小 結(jié)

兔既可作食品也可用作科研試驗(yàn)?zāi)Ｐ?，具有非常高的?yīng)用及經(jīng)濟(jì)價(jià)值。近年來(lái)關(guān)于兔腸道菌群的研究很多，現(xiàn)已基本清楚兔生命早期腸道菌群的基本構(gòu)成，這些研究主要集中于運(yùn)用活菌計(jì)數(shù)法、16S rRNA基因高通量測(cè)序來(lái)探究兔腸道微生物組成，但是采用宏基因組測(cè)序等手段研究兔腸道微生物基因及其功能的文獻(xiàn)報(bào)道還相對(duì)較少[83]。由于兔容易發(fā)生腸道疾病，尤其是在斷奶期，因此，以前常在飼糧中添加抗生素來(lái)預(yù)防和治療相關(guān)疾病，但是使用抗生素不僅容易產(chǎn)生耐藥性，引起盲腸菌群的顯著變化，增加生長(zhǎng)兔的消化障礙和死亡率，而且容易造成食品安全問(wèn)題，對(duì)人的身體健康有害。因此，歐盟和中國(guó)都已經(jīng)禁止了非治療性使用抗生素，但是抗生素治療兔腸道相關(guān)疾病依然是一種常見(jiàn)且被允許的方式。為減少抗生素的使用，需要調(diào)節(jié)兔腸道菌群，減少其腸道疾病發(fā)生。目前常見(jiàn)的調(diào)節(jié)仔兔腸道菌群的方式有飼喂益生菌、益生元、合生元和飼糧纖維等。其中，益生菌與益生元干預(yù)仔兔腸道菌群報(bào)道較多，根據(jù)現(xiàn)有相關(guān)文獻(xiàn)，給兔飼喂益生菌、益生元可以顯著地促進(jìn)兔腸道有益菌的生長(zhǎng)繁殖，抑制一些致病菌的生長(zhǎng)，但是現(xiàn)有報(bào)道對(duì)于其具體的調(diào)節(jié)機(jī)制研究較少。同時(shí)，兔源益生菌的篩選與應(yīng)用研究，以及菌群間、菌群與宿主間的相互作用機(jī)制等還鮮見(jiàn)報(bào)道。此外，研究表明同時(shí)飼喂益生元和益生菌，兔回腸絨毛比單獨(dú)飼喂益生菌更長(zhǎng)，更好地改善了兔的生長(zhǎng)和腸道形態(tài)[59]。因此，在理想情況下，合生元的健康益處應(yīng)該是超加性的[84]，在飼糧中添加合生元能夠顯著改善兔生長(zhǎng)性能，增強(qiáng)腸道健康[85]。但是，目前關(guān)于兔用合生元的研究還較少。此外，兔是單胃食草動(dòng)物，飼糧纖維的正確使用也可改善兔腸道菌群，如在兔生命早期飼喂固體飼糧，能促進(jìn)兔腸道形態(tài)成熟[86]，且有時(shí)調(diào)節(jié)腸道菌群的效果比益生元補(bǔ)充劑更強(qiáng)[87]。值得關(guān)注的是，除了飼糧以外，也可通過(guò)其他方式調(diào)控仔兔腸道菌群，例如，改善飼養(yǎng)環(huán)境的衛(wèi)生水平對(duì)調(diào)節(jié)兔腸道菌群也具有重要作用，當(dāng)兔住房衛(wèi)生狀況惡化時(shí)，其腸道菌群瘤胃科/毛螺菌科的比例會(huì)變高，這會(huì)對(duì)盲腸生物區(qū)參數(shù)(揮發(fā)性脂肪酸、氨、pH等)以及兔的免疫狀態(tài)產(chǎn)生負(fù)面影響[88]；在冬季斷奶后早期，飲用溫水能通過(guò)增加糞球菌屬_1(Coprococcus_1)、糞球菌屬_3(Coprococcus_3)和紡錘鏈桿菌屬(Fusicatenibacter)的相對(duì)豐度來(lái)促進(jìn)兔的腸道健康，使仔兔的平均日增重和飼料轉(zhuǎn)化率顯著提高[89]。綜上所述，仔兔腸道菌群的早期定植對(duì)兔的健康有重要影響，而影響兔腸道菌群的因素又較多，故在預(yù)防仔兔腸道疾病時(shí)可結(jié)合多種手段使用，同時(shí)在研究基礎(chǔ)上開(kāi)發(fā)出綠色、安全、健康的飼料添加劑以推動(dòng)兔養(yǎng)殖行業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展。