農(nóng)藥殘留前處理操作技術(shù)

李 喆

（本溪市國家糧油質(zhì)量監(jiān)測站，遼寧 本溪 117000）

近年來由于利益驅(qū)使，企業(yè)及個別農(nóng)戶追求利益擴張增產(chǎn)，導(dǎo)致農(nóng)藥、生物改良劑及對農(nóng)作物生長控制干預(yù)的藥品使用泛濫和不規(guī)范，間接導(dǎo)致農(nóng)作物農(nóng)藥殘留嚴(yán)重超標(biāo)。在不知情的情況下食用了農(nóng)藥殘留超標(biāo)的農(nóng)產(chǎn)品導(dǎo)致中毒逐年上升，為了避免或杜絕此類事件的發(fā)生，有效控制、跟蹤排查農(nóng)藥及相關(guān)生物改良劑使用后的農(nóng)藥殘留情況，農(nóng)產(chǎn)品前處理操作的技術(shù)規(guī)范性是非常必要的。農(nóng)藥殘留實驗的前處理是整個農(nóng)藥殘留檢測的第一步，如果操作不規(guī)范會間接導(dǎo)致整個檢測實驗的數(shù)據(jù)跟實際結(jié)果相差甚遠(yuǎn)。所以農(nóng)藥殘留上機檢測之前必須有完善的，適合于各種樣品理化性質(zhì)的萃取、濃縮、凈化等前處理步驟及實施條件。這些步驟和處理過程對農(nóng)藥殘留檢測的結(jié)果、精度、準(zhǔn)確性有著及其重要的影響。

隨著農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)的不斷更新，涉及樣品的組成和濃度的復(fù)雜性，樣品物理形態(tài)會隨著外界因素的不確定性發(fā)生變化（溫度、濕度、微生物）。因此需要我們在對樣品前處理時需要選擇科學(xué)有效的前處理方法，經(jīng)過多次的實驗檢測人員摸索出的規(guī)律，每次操作前處理實驗時，農(nóng)藥殘留檢測樣品的前處理過程占整個用藥殘留檢測實驗的2/3。首先改善和優(yōu)化樣品制備是農(nóng)藥殘留樣品制備的重要環(huán)節(jié)，現(xiàn)有樣品制備方法基本上已經(jīng)能夠滿足實驗要求，達(dá)到部分凈化或者完全凈化標(biāo)準(zhǔn)。而且一部分新的實驗方法能夠有效快速的減輕時間成本跟實驗人員的勞動強度，提高檢測效率，減少樣品用量、試劑耗材，短時間內(nèi)提高提取率或者精化率和自動化水平。當(dāng)前應(yīng)用比較廣泛的方法有，微波輔助萃取、固相萃取、膠滲透色譜、基質(zhì)固相分散萃取等，果蔬中大部分的農(nóng)藥殘留其中只有少數(shù)農(nóng)藥回收率比較低，其余絕大部分農(nóng)藥的回收率都大于75%。

前處理實驗時準(zhǔn)備工作極為重要，對實驗中所需器皿、盛具、儀器都需要認(rèn)真檢查，如果前處理實驗容器清理不夠徹底，或者有部分物質(zhì)、化學(xué)試劑殘留的話，將直接影響整個檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，所獲得的數(shù)據(jù)也會大概率偏離，無法對檢測結(jié)果準(zhǔn)確判斷。用肥皂先洗手，清理容器、實驗器皿時應(yīng)先用自來水沖去灰塵，用專用毛刷蘸專用洗滌劑刷洗，然后用清水沖掉洗滌劑，反復(fù)用清水沖洗3～5次，去離子水沖洗3次。不便用毛刷刷洗的器皿可先用洗滌劑浸泡或者放入超聲波清洗器當(dāng)中超聲清洗，清洗后依舊用清水反復(fù)沖洗涼干，洗滌劑、去污粉不得用于對容器器皿內(nèi)部刻度洗滌，防止劃傷玻璃器皿刻度或標(biāo)識。金屬器皿可用1∶3稀鹽酸浸泡后用清水沖洗，塑料、陶瓷類器皿可用洗滌劑去污粉浸泡后沖洗，再倒掛架空涼干即可。砂芯漏鉻酸洗液一邊抽濾一邊沖洗，然后再用自來水、蒸餾水抽洗，清洗過程結(jié)束后將砂漏表面水珠擦拭干凈放入120℃的烘干器中烘干。成套的玻璃器皿清洗可先拆解分離后用水蒸氣清洗，污漬較重的容器清洗比較困難，比如結(jié)晶和沉淀物的洗滌，可通過加長浸泡時間、對浸泡容器內(nèi)的洗液加溫或放入超聲波內(nèi)反復(fù)超聲波清洗。油漆、干性油、油脂首先考慮氨水或者氨仿，未長時間放置硬化的油脂可考慮用有機試劑清洗（選擇無毒化學(xué)試劑），煤油優(yōu)先考慮用加溫的肥皂水清洗，黏性油脂用加熱后的氫氧化鈉浸泡洗滌。器皿上污斑最難清洗，長期儲存堿性物質(zhì)被腐蝕形成。玻璃器皿上黃褐色的鐵銹斑點可用鹽酸溶液洗滌，電解乙酸鉛時可用乙酸洗滌，平時也需要注意實驗室衛(wèi)生，有條件的實驗室通過新風(fēng)系統(tǒng)來控制實驗室的溫、濕度所。儀器應(yīng)該有相應(yīng)的防塵罩覆蓋，以免滋生細(xì)菌、發(fā)霉、生銹或者被屋內(nèi)空氣中揮發(fā)的有機試劑所腐蝕。

微波萃取法：是由1986年匈牙利學(xué)者等科研人員研究發(fā)現(xiàn)，利用微波萃取被檢測物固體中的有機物，是一種新的少溶劑、樣品量少無需萃取溶劑適用于易發(fā)揮性和非揮發(fā)性物質(zhì)的樣品處理方式。這種技術(shù)是利用微波加熱極性分子可迅速吸收微波能量的特性用來加熱一些具有極性的溶劑，萃取樣品中的帶目標(biāo)化合物。這種方法的優(yōu)點是重現(xiàn)性好快速、節(jié)省溶劑、對環(huán)境污染較小，缺點是不能達(dá)到自動化的要求，實驗步驟時間不能跨越，一般情況下都用于有機氯類的農(nóng)藥檢測。

勻漿萃取法：把所需檢驗的樣品盛放在器皿中，放入所需計量的提取液，按照不同物質(zhì)所需勻漿時間的不同對所檢測的樣品進(jìn)行相應(yīng)時間的勻漿，勻漿后用通過對過濾出的試劑進(jìn)行凈化后依次按照順序進(jìn)行逐步操作直至最后獲取上機實驗的提取液，勻漿萃取法最大的特點是操作步驟簡便，方法簡單整個實驗流程相對快捷。

索氏萃取法：目前上市場上主要流通的農(nóng)藥絕大部分都是脂溶性的，所以提取脂肪進(jìn)行檢測是比較普遍的檢測方法，把干燥的樣品用無水乙醚或石油醚等溶劑進(jìn)行脂肪的提取使脂肪和農(nóng)殘進(jìn)入溶劑中，凈化、濃縮后即可使用分析，可用于大部分的谷類、干果、飼料等，無水乙醚或石油醚提取效率較高操作也相對其他檢驗方法簡便，氏萃取法的優(yōu)點是操作較為簡便，缺點是不能用于新鮮（含水量過高）水果蔬菜的檢測。

固相萃取法：充分利用了吸附劑將液體樣品中的目標(biāo)化合物吸附，能使樣品的基體和干擾化合物分離，再將洗脫液洗脫或加熱吸附，能夠得到分離和富集目標(biāo)化合物的目的，這種方法有很多明顯的特點，處理過程中不易產(chǎn)生乳化現(xiàn)象萃取樣品量小、能顯著減少溶劑使用的計量、簡化樣品的預(yù)處理過程，固相萃取的整個過程是液處理的1/2，時間上僅是液處理的1/5，且不容易產(chǎn)生乳化、樣品處理步驟少。能夠減少檢測費用，降低檢測成本。

凝膠滲透色譜法：這項技術(shù)是根據(jù)分子量的不同，最初是用在篩選分離蛋白質(zhì)的，但是隨著農(nóng)藥種類的增加技術(shù)的進(jìn)步，有許多農(nóng)藥對檢測方法進(jìn)行了針對性的技術(shù)規(guī)避，但凝膠滲透色譜技術(shù)確依然對農(nóng)藥有著無法繞開的特殊性質(zhì)。該方法檢測靈敏度極高、準(zhǔn)確度相對較為精密，操作較為復(fù)雜、能夠很好地分離和萃取基子，操作難度較高，初學(xué)者必須經(jīng)過長時間的理論學(xué)習(xí)、觀察、實踐，才能夠逐漸掌握操作要領(lǐng)。