3種清風(fēng)藤屬植物低極性部位GC-MS分析及抗炎活性

崔仁杰 胡丹 鄧璐璐 李江 穆淑珍

中圖分類(lèi)號(hào) R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號(hào) 1001-0408（2022）04-0446-06

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2022.04.11

摘 要 目的 探究鄂西清風(fēng)藤、灰背清風(fēng)藤和小花清風(fēng)藤低極性部位成分特點(diǎn)及其抗炎活性。方法 運(yùn)用氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)對(duì)鄂西清風(fēng)藤、灰背清風(fēng)藤和小花清風(fēng)藤干燥莖葉石油醚萃取液中經(jīng)石油醚洗脫所得的低極性部位進(jìn)行成分分析，采用NIST 17和Wiley 275數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)色譜峰進(jìn)行檢索，人工比對(duì)鑒定各化合物的結(jié)構(gòu)，并采用峰面積歸一化法計(jì)算各成分的相對(duì)百分含量。以吲哚美辛為陽(yáng)性對(duì)照，以一氧化氮（NO）生成抑制率為指標(biāo)，比較上述3種清風(fēng)藤屬植物低極性部位對(duì)脂多糖誘導(dǎo)人類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞RA-FLS、小鼠單核巨噬細(xì)胞RAW264.7生成NO的影響，并計(jì)算半數(shù)抑制濃度（IC50）。結(jié)果 從鄂西清風(fēng)藤、灰背清風(fēng)藤和小花清風(fēng)藤低極性部位中分別確認(rèn)了70、40、33種成分，均包含長(zhǎng)鏈脂肪烴、長(zhǎng)鏈醇/醛/酯、單萜等成分，但三者共有成分僅有正十二烷、正二十二烷等5種。鄂西清風(fēng)藤中萜類(lèi)成分豐富（40.89%），灰背清風(fēng)藤中三萜成分的相對(duì)百分含量較高（30.29%），小花清風(fēng)藤中長(zhǎng)鏈脂肪烴成分的相對(duì)百分含量較高（87.70%）。上述3種清風(fēng)藤屬植物低極性部位對(duì)RA-FLS細(xì)胞NO生成的IC50分別為2.22、1.69、4.15 μg/mL，對(duì)RAW264.7細(xì)胞NO生成的IC50分別為1.23、4.02、3.05 μg/mL，均低于吲哚美辛（12.97、10.66 μg/mL）。結(jié)論 上述3種清風(fēng)藤屬植物低極性部位均含有長(zhǎng)鏈脂肪烴、單萜、長(zhǎng)鏈醇/醛/酯等成分，且三者均具有一定的抗炎活性。

關(guān)鍵詞 清風(fēng)藤屬;鄂西清風(fēng)藤;灰背清風(fēng)藤;小花清風(fēng)藤;低極性部位;氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù);成分分析;抗炎活性

GC-MS analysis and anti-inflammatory activity of low polarity parts from 3 species of Sabia genus

CUI Renjie1，2，HU Dan3，DENG Lulu2，3，LI Jiang2，3，MU Shuzhen2，3（1. College of Pharmacy， Guizhou University of Traditional Chinese Medicine， Guiyang 550025， China; 2. Key Laboratory of Chemistry for Natural Products of Guizhou Province and Chinese Academy of Sciences， Guiyang 550014， China; 3. State Key Laboratory of Functions and Applications of Medicinal Plants， Guizhou Medical University， Guiyang 550014， China）

ABSTRACT?  OBJECTIVE To investigate the component characteristics and anti-inflammatory activities of the low polarity parts from Sabia campanulata， S. discolor and S. parviflora. METHODS Gas chromatography-mass spectrometry was used to analyze the components of low polarity parts eluted by petroleum ether from petroleum ether extract of dried stems and leaves of S. campanulata， S. discolor and S. parviflora. The chromatographic peaks were retrieved by both NIST 17 and Wiley 275 database， and their structures of each compound were compared and identified manually. The relative percentage content of each component was calculated by peak area normalization method. With indomethacin as positive control and the inhibition rate of nitric oxide （NO） production as the index， the effects of the low polarity parts of the above three species of Sabia genus on the production of NO in lipopolysaccharide-induced human rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes （RA-FLS） and mouse mononuclear macrophage RAW264.7 were compared; the half inhibitory concentration （IC50） was calculated. RESULTS Totally 70， 40 and 33 chemical components were identified respectively from the low polarity parts of S. campanulata， S. discolor and S. parviflora， including long-chain fatty hydrocarbons， long-chain alcohol/aldehyde/ester， monoterpenes; but there were only 5 common components in the three species， such as dodecane and docosane， etc. S. campanulata contained abundant terpenoids （40.89%）; the relative percentage content of triterpenoids was high in S. discolor （30.29%）; the relative percentage content of long-chain fatty hydrocarbons was high in S. parviflora （87.70%）. The values of IC50 of the low polarity parts of the above three species of Sabia genus to the production of NO in RA-FLS cells were 2.22， 1.69 and 4.15 μg/mL， respectively. The values of IC50 of them to the production of NO in RAW264.7 cells were 1.23， 4.02 and 3.05 μg/mL respectively， and all of them were lower than indomethacin （12.97， 10.66 μg/mL）. CONCLUSIONS The components of the low polarity parts from the above three species of Sabia genus are mainly long-chain fatty hydrocarbons， monoterpenes and long-chain alcohol/aldehyde/ester， and all of them have certain anti-inflammatory activities.

KEYWORDS? Sabia genus; Sabia campanulata; Sabia discolor;? Sabia parviflora; low polarity part; Gas chromato- graphy-mass spectrometry; component analysis; anti-inflam- matory activity

清風(fēng)藤科（Sabiaceae）清風(fēng)藤屬（Sabia）植物，全世界約有63種，在我國(guó)主要分布于西南部，西北和東部地區(qū)亦有少量分布，包括鄂西清風(fēng)藤Sabia campanulata Wall. ex Roxb. subsp. ritchieae（Rehd. et Wils.）Y. F. Wu、灰背清風(fēng)藤S. discolor Dunn、小花清風(fēng)藤S. parviflora Wall. ex Roxb.、清風(fēng)藤S. japonica Maxim.等25種。清風(fēng)藤屬植物易與防己科中藥青風(fēng)藤混淆[1]，而前者絕大多數(shù)植物也均有一定的藥用價(jià)值[2]，但有關(guān)化學(xué)成分和生物活性的研究有限。其中，小花清風(fēng)藤是一種布依族藥，具有清熱利濕、利膽、止血等功效，主治黃疸濕熱癥、外傷出血[3]，已報(bào)道的化學(xué)成分主要為阿樸菲類(lèi)生物堿、五環(huán)三萜、黃酮醇和木脂素等[4]。研究表明，小花清風(fēng)藤提取物可改善類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎模型大鼠足跖的溶骨、腫脹癥狀，減輕其滑膜組織炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和血管翳增生[5]，作用機(jī)制可能與下調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶9和腫瘤壞死因子α等炎癥因子的表達(dá)有關(guān)[6]。而鄂西清風(fēng)藤和灰背清風(fēng)藤尚無(wú)系統(tǒng)的化學(xué)成分及藥理作用研究，有進(jìn)一步開(kāi)發(fā)的潛力。

植物提取物中的低極性成分多集中在石油醚萃取部位，主要結(jié)構(gòu)類(lèi)型多為長(zhǎng)鏈脂肪烴、單萜、倍半萜等，種類(lèi)眾多且結(jié)構(gòu)差異小。低極性成分在清風(fēng)藤屬植物中大量存在，但尚未被研究與利用。筆者在研究鄂西清風(fēng)藤、灰背清風(fēng)藤、小花清風(fēng)藤化學(xué)成分的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，三者低極性部位的化學(xué)成分組成各不相同?；诖?，本研究采用氣相色譜-質(zhì)譜（gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS）技術(shù)，分析比較了鄂西清風(fēng)藤、灰背清風(fēng)藤、小花清風(fēng)藤石油醚低極性部位的成分特點(diǎn)，并評(píng)價(jià)了三者對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的人類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞RA-FLS和小鼠單核巨噬細(xì)胞RAW264.7炎癥模型中一氧化氮（nitric oxide，NO）生成的影響，以期為清風(fēng)藤屬植物資源的綜合利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料

1.1 主要儀器

本研究所用主要儀器包括HP6890/5975C型GC-MS儀（美國(guó)Agilent公司）、EPOCH型多功能酶標(biāo)儀（美國(guó)Bio-Tek公司）、3111型二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱（美國(guó)Thermo Fisher Scientific公司）、CX23型生物顯微鏡（日本Olympus公司）、HFsafe-1200LC型生物安全柜[力新儀器（上海）有限公司]、300 mm真空干燥器（重慶欣維爾玻璃有限公司）等。

1.2 主要藥品與試劑

鄂西清風(fēng)藤于2019年5月采自湖北省恩施市芭蕉鄉(xiāng)，由云南中醫(yī)藥大學(xué)張君副教授鑒定為清風(fēng)藤科清風(fēng)藤屬植物鄂西清風(fēng)藤S. campanulata Wall. ex Roxb. subsp. ritchieae（Rehd. et Wils.）Y. F. Wu的干燥莖葉;灰背清風(fēng)藤于2018年12月采自廣西省荔浦市新坪鎮(zhèn)豬頭山，小花清風(fēng)藤于2019年7月采自貴州省黔西南州安龍縣，由貴州中醫(yī)藥大學(xué)孫慶文教授鑒定分別為清風(fēng)藤科清風(fēng)藤屬植物灰背清風(fēng)藤S. discolor Dunn的干燥莖葉和小花清風(fēng)藤S. parviflora Wall. ex Roxb.的干燥莖葉。以上藥材標(biāo)本均存放于貴州省中國(guó)科學(xué)院天然產(chǎn)物化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。

吲哚美辛對(duì)照品（批號(hào)1000258-201905，純度≥99.9%）購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院;脂多糖購(gòu)自上海碧云天生物技術(shù)有限公司;NO檢測(cè)試劑盒（批號(hào)20210114）購(gòu)自南京建成生物工程研究所;胎牛血清（批號(hào)BC20201204）和DMEM培養(yǎng)基（批號(hào)10113624）均購(gòu)自美國(guó)Gibco公司;細(xì)胞培養(yǎng)皿、96孔細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞培養(yǎng)瓶均購(gòu)自美國(guó)Corning公司;GF254硅膠板（規(guī)格50 mm×100 mm，批號(hào)20200713）和柱層析硅膠（200～300目，批號(hào)2055）均購(gòu)自青島海洋化工有限公司;正己烷（分析純）和二甲基亞砜（分析純）均購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;乙醇（分析純）和石油醚（沸程60～90 ℃，分析純）均購(gòu)自天津富宇精細(xì)化工有限公司;其余試劑均為分析純或?qū)嶒?yàn)室常用規(guī)格，水為純化水。

1.3 細(xì)胞

人類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞RA-FLS、小鼠單核巨噬細(xì)胞RAW264.7均購(gòu)自上海博壘生物科技有限公司。

2 方法

2.1 供試品溶液的制備

取鄂西清風(fēng)藤、灰背清風(fēng)藤、小花清風(fēng)藤樣品，粉碎后，分別用10倍量（L/kg）的80%乙醇回流提取3次，每次3 h，合并提取液，減壓濃縮至無(wú)醇味后加水混懸，用等體積石油醚萃取3次，合并石油醚萃取液并濃縮至浸膏狀。采用常壓硅膠柱色譜對(duì)石油醚萃取部位進(jìn)行分離，以石油醚-二氯甲烷（100 ∶ 0、99 ∶ 1、95 ∶ 5、90 ∶ 10、80 ∶ 20、50 ∶ 50、0 ∶ 100，V/V）進(jìn)行梯度洗脫，合并其中首段由石油醚洗脫的部分并濃縮，于真空干燥器中干燥，得低極性部位樣品。稱(chēng)取上述低極性部位樣品10 mg，以正己烷溶解并用0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

2.2 GC-MS分析

2.2.1 鄂西清風(fēng)藤的檢測(cè)條件 （1）GC條件：色譜柱為HP-5MS彈性石英毛細(xì)管柱（60 m×0.25 mm，0.25 μm）;初始溫度為40 ℃并保持2 min，以3.5 ℃/min升溫至180 ℃，再以10 ℃/min升溫至310 ℃并保持15 min;運(yùn)行時(shí)間為70 min;汽化室溫度為250 ℃;載氣為高純氦氣（99.999%），流速為1.0 mL/min;柱前壓為15.96 psi;溶劑延遲時(shí)間為6 min;分流比為50 ∶ 1;進(jìn)樣量為0.2 μL。（2）MS條件：離子源為電子轟擊源，離子源溫度為230 ℃;四極桿溫度為150 ℃;電離能量為70 eV;發(fā)射電流為34.6 μA;倍增器電壓為1 847 V;接口溫度為280 ℃;質(zhì)量掃描范圍為29～500 amu。

2.2.2 灰背清風(fēng)藤和小花清風(fēng)藤的檢測(cè)條件 （1）GC條件：色譜柱為HP-5MS彈性石英毛細(xì)管柱（60 m×0.25 mm，0.25 μm）;初始溫度為40 ℃并保持2 min，以3.5 ℃/min升溫至180 ℃，再以8 ℃/min升溫至308 ℃并保持20 min;運(yùn)行時(shí)間為78 min;汽化室溫度為250 ℃;載氣為高純氦氣（99.999%），流速為1.0 mL/min;柱前壓為16.03 psi;溶劑延遲時(shí)間為6 min;分流比為9.97 ∶ 1;進(jìn)樣量為0.2 μL。（2）MS條件：離子源為電子轟擊源，離子源溫度為230 ℃;四極桿溫度為150 ℃;電離能量為70 eV;發(fā)射電流為34.6 μA;倍增器電壓為1 941 V;接口溫度為280 ℃;質(zhì)量掃描范圍為29～500 amu。

2.2.3 數(shù)據(jù)分析 分別精密吸取“2.1”項(xiàng)下鄂西清風(fēng)藤、灰背清風(fēng)藤、小花清風(fēng)藤低極性部位供試品溶液，按“2.2.1”“2.2.2”項(xiàng)下檢測(cè)條件進(jìn)樣分析，得總離子流圖。根據(jù)所得總離子流圖，用NIST 17和Wiley 275數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)色譜峰進(jìn)行檢索，人工比對(duì)鑒定各化合物的結(jié)構(gòu)，并采用峰面積歸一化法計(jì)算各成分的相對(duì)百分含量。

2.3 抗炎活性測(cè)定

參考文獻(xiàn)[7]的方法，利用脂多糖誘導(dǎo)RA-FLS細(xì)胞和RAW264.7細(xì)胞建立炎癥模型，以NO生成抑制率評(píng)價(jià)鄂西清風(fēng)藤、灰背清風(fēng)藤、小花清風(fēng)藤低極性部位的抗炎活性。將細(xì)胞接種于含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基中，置于37 ℃、5%二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。分別取處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的上述兩種細(xì)胞，按2×104個(gè)/孔接種于96孔板中，于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12 h，棄去上清液，將細(xì)胞分為模型組、鄂西清風(fēng)藤組、灰背清風(fēng)藤組、小花清風(fēng)藤組和吲哚美辛組（陽(yáng)性對(duì)照）。模型組加入二甲基亞砜，藥物組加入含相應(yīng)藥物的二甲基亞砜溶液，每孔100 μL，上述藥物的質(zhì)量濃度均分別為0.1、0.3、1、3、10、30 μg/mL（按低極性部位質(zhì)量計(jì)），每組設(shè)置3個(gè)復(fù)孔。繼續(xù)培養(yǎng)2 h后，按10 μL/孔加入100 μg/mL的脂多糖（溶劑為含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基）;繼續(xù)培養(yǎng)8 h后，棄去上清液，按NO檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，使用多功能酶標(biāo)儀于540 nm波長(zhǎng)下檢測(cè)各孔的光密度（optical density，OD）值，按下式計(jì)算NO生成抑制率：NO生成抑制率（%）=（模型組OD值-藥物組OD值）/模型組OD值×100%。數(shù)據(jù)以x±s表示，并通過(guò)Grphpad Prism 5.0軟件計(jì)算各藥物組的半數(shù)抑制濃度（median inhibitory concentration，IC50）。

3 結(jié)果

3.1 3種清風(fēng)藤屬植物低極性部位成分GC-MS分析結(jié)果

鄂西清風(fēng)藤、灰背清風(fēng)藤、小花清風(fēng)藤低極性部位的總離子流圖見(jiàn)圖1。經(jīng)NIST 17和Wiley 275數(shù)據(jù)庫(kù)檢索，并分析比對(duì)其中相似度≥80%的結(jié)構(gòu)，分別確定了鄂西清風(fēng)藤低極性部位中的70種成分、灰背清風(fēng)藤中的40種成分和小花清風(fēng)藤中的33種成分，結(jié)果見(jiàn)表1～表3。按出峰順序編號(hào)并按化合物類(lèi)型統(tǒng)計(jì)各類(lèi)成分的相對(duì)百分含量，結(jié)果見(jiàn)表4。

其他：包括苯系物、苯丙素和鄰苯二甲酸酯3類(lèi)成分

其他：包括苯系物、苯丙素和鄰苯二甲酸酯3類(lèi)成分

其他：包括苯系物、苯丙素和鄰苯二甲酸酯3類(lèi)成分;-：未檢測(cè)到

GC-MS分析結(jié)果顯示，鄂西清風(fēng)藤、灰背清風(fēng)藤、小花清風(fēng)藤低極性部位均含有長(zhǎng)鏈脂肪烴、長(zhǎng)鏈醇/醛/酯、單萜等成分。小花清風(fēng)藤與鄂西清風(fēng)藤共有成分相對(duì)較多，有19種;鄂西清風(fēng)藤和灰背清風(fēng)藤的共有成分有9種;小花清風(fēng)藤和灰背清風(fēng)藤的共有成分有7種;這些共有成分中除了香樹(shù)烯外，其余均為長(zhǎng)鏈脂肪烴或苯系物。而三者均共有的成分較少，僅有5種，分別為1-十二烯、正十二烷、正二十二烷、正二十四烷和正二十六烷。在含量分布上，鄂西清風(fēng)藤低極性部位中有58.95%的成分屬于長(zhǎng)鏈脂肪烴，小花清風(fēng)藤低極性部位中有87.70%的成分屬于長(zhǎng)鏈脂肪烴，而灰背清風(fēng)藤低極性部位中的長(zhǎng)鏈脂肪烴成分僅占16.74%，且均為偶碳數(shù)脂肪烴。此外，鄂西清風(fēng)藤低極性部位還含有33種萜類(lèi)成分，相對(duì)百分含量為40.89%;灰背清風(fēng)藤低極性部位的成分最為多樣，主要包括長(zhǎng)鏈脂肪烴、二萜、三萜及其他（如苯丙素、鄰苯二甲酸酯等）成分，其中三萜成分的相對(duì)百分含量較高（30.29%）。

3.2 3種清風(fēng)藤屬植物低極性部位的抗炎活性

鄂西清風(fēng)藤、灰背清風(fēng)藤、小花清風(fēng)藤低極性部位對(duì)RA-FLS細(xì)胞和RAW264.7細(xì)胞的NO生成抑制率均高于相同質(zhì)量濃度的吲哚美辛。對(duì)于RA-FLS細(xì)胞，鄂西清風(fēng)藤、灰背清風(fēng)藤、小花清風(fēng)藤低極性部位對(duì)NO生成的IC50分別為2.22、1.69、4.15 μg/mL，均遠(yuǎn)低于吲哚美辛的12.97 μg/mL，其中灰背清風(fēng)藤低極性部位的抑制作用最強(qiáng)。對(duì)于RAW264.7細(xì)胞，鄂西清風(fēng)藤、灰背清風(fēng)藤、小花清風(fēng)藤低極性部位對(duì)NO生成的IC50分別為1.23、4.02、3.05 μg/mL，仍均低于陽(yáng)性對(duì)照吲哚美辛的10.66 μg/mL，其中鄂西清風(fēng)藤低極性部位的抑制作用最強(qiáng)。結(jié)果見(jiàn)表5。

4 討論

本研究運(yùn)用GC-MS技術(shù)分析比較了鄂西清風(fēng)藤、灰背清風(fēng)藤和小花清風(fēng)藤3種清風(fēng)藤屬植物低極性部位成分并評(píng)價(jià)了其抗炎活性。結(jié)果顯示，分別從上述3種清風(fēng)藤屬植物低極性部位中分析確定了70、40、33種成分，均包含長(zhǎng)鏈脂肪烴、長(zhǎng)鏈醇/醛/酯、單萜等成分，但這3種清風(fēng)藤屬植物低極性部位中的共有成分較少;此外，鄂西清風(fēng)藤中有多種長(zhǎng)鏈脂肪烴和倍半萜成分，灰背清風(fēng)藤中三萜成分的含量較高，小花清風(fēng)藤中長(zhǎng)鏈脂肪烴成分的含量較高。

本研究從小花清風(fēng)藤低極性部位中發(fā)現(xiàn)了角鯊烯，其是三萜成分的前體[8]，這也間接提示了該屬植物中五環(huán)三萜成分的潛在生源途徑。從鄂西清風(fēng)藤低極性部位中檢出了微量甲苯和乙苯等苯系物，其可能來(lái)源于石油醚和正己烷溶劑中所含的雜質(zhì)而非來(lái)源于植物[9]，但尚需進(jìn)一步確認(rèn)。從灰背清風(fēng)藤低極性部位中檢出了D-α-生育酚和γ-生育酚，其是維生素E的兩種類(lèi)型，相對(duì)百分含量為9.15%，提示灰背清風(fēng)藤可能有一定的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，在食品保健品方面具有開(kāi)發(fā)潛力。

吲哚美辛是一種臨床常用的抗炎藥物[10]，本研究以其作為陽(yáng)性對(duì)照，比較鄂西清風(fēng)藤、灰背清風(fēng)藤和小花清風(fēng)藤3種清風(fēng)藤屬植物低極性部位的體外抗炎活性。結(jié)果顯示，上述3種清風(fēng)藤屬植物低極性部位均能較好地抑制脂多糖誘導(dǎo)的RA-FLS細(xì)胞和RAW264.7細(xì)胞生成炎癥介質(zhì)NO，且IC50均低于吲哚美辛。對(duì)于RA-FLS細(xì)胞，抗炎活性強(qiáng)弱排序?yàn)榛冶城屣L(fēng)藤>鄂西清風(fēng)藤>小花清風(fēng)藤;對(duì)于RAW264.7細(xì)胞，抗炎活性強(qiáng)弱排序?yàn)槎跷髑屣L(fēng)藤>小花清風(fēng)藤>灰背清風(fēng)藤。

有研究顯示，鄂西清風(fēng)藤中的單萜、倍半萜、二萜成分具有抗炎作用[11-15]。小花清風(fēng)藤中的脂肪酸成分棕櫚酸乙酯能減少脂多糖介導(dǎo)的內(nèi)毒素血癥模型大鼠血漿中炎癥因子腫瘤壞死因子α和白細(xì)胞介素6的釋放[16]?；冶城屣L(fēng)藤中的D-α-生育酚和γ-生育酚可能是其主要的抗炎成分[17];此外，灰背清風(fēng)藤中的五環(huán)三萜成分莫雷亭醇也被證實(shí)具有較好的抗炎活性[18]。由此可見(jiàn)，鄂西清風(fēng)藤、灰背清風(fēng)藤、小花清風(fēng)藤低極性部位的抗炎活性均可能是由多種成分協(xié)同而成。

綜上所述，本研究初步分析了鄂西清風(fēng)藤、灰背清風(fēng)藤、小花清風(fēng)藤低極性部位成分，主要為長(zhǎng)鏈脂肪烴、長(zhǎng)鏈醇/醛/酯、單萜、倍半萜等成分;且3種植物的低極性部位均具有抗炎活性，為清風(fēng)藤屬植物的深入研究提供了科學(xué)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[ 1 ] 楊華，熊興耀，仇萍.中藥青風(fēng)藤種質(zhì)資源研究進(jìn)展[J].生物技術(shù)世界，2015，12（9）：255-256.

[ 2 ] 李朝斗.貴州產(chǎn)清風(fēng)藤科入藥植物[J].中藥通報(bào)，1987，12（8）：5-6.

[ 3 ] 貴州省藥品監(jiān)督管理局.貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[S].貴陽(yáng)：貴州科技出版社，2003：57.

[ 4 ] 李曼姝，柯銀鉛，張紫琴，等.小花清風(fēng)藤莖葉化學(xué)成分及其保肝活性研究[J].中草藥，2021，52（23）：7096-7104.

[ 5 ] 許歡，潘書(shū)涵，王永萍，等.小花清風(fēng)藤醇提液對(duì)RA大鼠相關(guān)蛋白的影響[J].中藥藥理與臨床，2018，34（6）：87-92.

[ 6 ] 王茂林，王永萍，楊奕櫻，等.小花清風(fēng)藤對(duì)類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠TNF-α和MMP-9表達(dá)的影響[J].湖南中醫(yī)雜志，2018，34（3）：154-157.

[ 7 ] 楊曉露，劉朵，卞卡，等.甘草總黃酮及其成分體外抗炎活性及機(jī)制研究[J].中國(guó)中藥雜志，2013，38（1）：99-104.

[ 8 ] 謝琴鼎，陳瑤，唐亞琴，等.植物三萜代謝途徑中角鯊烯合成酶研究進(jìn)展[J].分子植物育種，2018，16（9）：2997- 3005.

[ 9 ] 向亞林，余細(xì)紅，趙曉峰，等.白千層精油的化學(xué)成分與抑菌活性研究[J].熱帶作物學(xué)報(bào)，2019，40（2）：388-395.

[10] 余玲，康倩，劉葭，等.雷公藤紅素與吲哚美辛對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞的協(xié)同抗炎作用研究[J].中南藥學(xué)，2020，18（11）：1807-1813.

[11] 張樹(shù)臣，葉金梅.對(duì)-傘花烴祛痰作用的研究[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，1979，14（4）：152-154.

[12] 姜瑋，劉靜波，盧靜，等.杜香揮發(fā)油研究概述[J].食品科學(xué)，2010，31（13）：337-341.

[13] TAMBE Y，TSUJIUCHI H，HONDA G，et al. Gastric cytoprotection of the non-steroidal anti-inflammatory sesquiterpene，beta-caryophyllene[J]. Planta Med，1996，62（5）：469-470.

[14] CHO J Y，CHANG H J，LEE S K，et al. Amelioration of dextran sulfate sodium-induced colitis in mice by oral administration of beta-caryophyllene，a sesquiterpene[J]. Life Sci，2007，80（10）：932-939.

[15] TUNGCHAROEN P，WATTANAPIROMSAKUL C，TANSAKUL P，et al. Anti-inflammatory effect of isopimarane diterpenoids from Kaempferia galanga[J]. Phytother Res，2020，34（3）：612-623.

[16] SAEED N M，EL-DEMERDASH E，ABDEL-RAHMAN H M，et al. Anti-inflammatory activity of methyl palmitate and ethyl palmitate in different experimental rat mo- dels[J]. Toxicol Appl Pharmacol，2012，264（1）：84-93.

[17] 程兆明，王蘇芹，莊祿昌，等.維生素E對(duì)骨性關(guān)節(jié)炎氧自由基水平的影響及意義[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)刊，2018，45（1）：17-19.

[18] PéREZ-GONZáLEZ M Z，GUTIéRREZ-REBOLLEDO G A，YéPEZ-MULIA L，et al. Antiprotozoal，antimycobacterial，and anti-inflammatory evaluation of Cnidoscolus chayamansa（Mc Vaugh）extract and the isolated compounds[J]. Biomed Pharmacother，2017，89：89-97.

（收稿日期：2021-10-09 修回日期：2021-12-26）

（編輯：鄒麗娟）