射干的研究進展及其質量標志物的預測分析

凌 悅，陳金鵬，葉 晴，劉怡妙，徐 旭，田成旺*

射干的研究進展及其質量標志物的預測分析

凌 悅1，陳金鵬2, 3, 4，葉 晴1，劉怡妙1，徐 旭2, 3, 4，田成旺2, 3, 4*

1.天津中醫(yī)藥大學，天津 300193 2.天津藥物研究院，天津 300301 3.天津市中藥質量標志物重點實驗室，天津 300301 4.釋藥技術與藥代動力學國家重點實驗室，天津 300301

射干是我國常用的中藥材，資源豐富，分布較廣，具有廣闊的開發(fā)利用前景。射干中化學成分類型較為豐富，主要為黃酮類、三萜類、揮發(fā)油、甾體類等，一般認為異黃酮為其主要藥效成分。在射干化學成分、藥理作用綜述的基礎上，根據中藥質量標志物（quality marker，Q-Marker）理論，從化學成分與傳統(tǒng)功效、傳統(tǒng)藥性、可測成分、不同產地和采收時期、入血成分及不同配伍環(huán)境幾方面對射干Q-Marker成分進行預測分析，發(fā)現以鳶尾苷、鳶尾黃素、野鳶尾黃素、白射干素、芒果苷表現最為顯著，為明確射干Q-Marker和制定科學的質量標準提供理論基礎。

射干；異黃酮；質量標志物；鳶尾苷；鳶尾黃素；野鳶尾黃素；白射干素；芒果苷

射干為鳶尾科射干屬植物射干(L.) DC.的干燥根莖[1]。又名烏扇、野萱花、蝴蝶花等。主要分布于中國湖北、山東、江蘇及云南等省、自治區(qū)。其味苦、性寒、有小毒，歸肺、肝經，具有清熱解毒、祛痰利咽、散結消炎、消腫止痛等功效。臨床上主要用于治療扁桃腺炎、支氣管炎、肝脾腫大及腰痛等疾病?，F代藥理研究表明，射干具有抗炎、清除自由基、抗菌、抗病毒、抗腫瘤、雌激素樣作用以及抗血栓等作用[2]。射干所含化學成分類型較為豐富，主要為異黃酮、三萜、揮發(fā)油類型。然而，《中國藥典》2020年版僅對其中的次野鳶尾黃素進行含量限定，因此，同許多中藥材一樣，射干也存在著質控指標單一等問題。隨著對射干化學成分、藥理作用及臨床研究的逐步深入，其活性部位及有效成分的研究也逐漸受到關注。本文對射干化學成分、主要藥理活性進行系統(tǒng)性總結，并基于中藥質量標志物（quality marker，Q-Marker）的概念要求，對中藥射干的Q-Marker進行預測分析，為其質量控制研究及Q-Marker的選擇提供依據。

1 化學成分

射干中化學成分類型多，主要包括黃酮類、三萜類、甾體類、醌類、揮發(fā)油等成分，此外還包含有機酸以及微量元素等。其中異黃酮為主要活性成分。

1.1 黃酮類化合物

黃酮類物質是射干中的主要生物活性成分，并且與射干的藥理藥效密切相關，目前從射干中分離出來的黃酮類化合物有86種，主要有黃酮、異黃酮、黃酮醇等，這些化合物是從射干根莖中獲得，以親脂性苷元、親水性更強的糖苷或其多甲氧基化衍生物的形式存在。其中以異黃酮類化合物活性最強，其他還包括二氫黃酮以及雙苯吡酮等。黃酮類化合物名稱見表1，成分結構見圖1。

1.2 三萜類化合物

射干中三萜類成分含量相對較高。目前，已經從射干中分離鑒定出多種萜類化合物，其中從射干根莖中分離出12個虹膜型三萜[35-39]，分別為28-deacetylbelamcandal（87）、(6,10,11)-26- hydroxy-(13)-oxaspir-oirid-16-enal（88）、(6,10, 11,14,26)-26-hydroxy-15-methyli-dene-spiroird-16- enal（89）、iridobelamalA（90）、16--acetyl- isoiridogermanal（91）、isoiridogermanal（92）、anhydrobelachinal（93）、epianhy-drobelachina（94）、isoanhydrobelachinal（95）、iristectoreneB（96）、3--tetradecanoyl-16--acetylisoiridogermanal（97）、3--decanoyl-16--acetylisoiridogermanal（98）。有研究報道，從射干根的醋酸乙酯和乙醇提取物中發(fā)現了多個五環(huán)三萜類的化合物，如熊果酸（99）、樺木素（100）、樺木酸（101）、betulone （102）以及cycloartanol（103）[40]。最近，有研究者在射干的種子中發(fā)現了4種新型三萜類化合物belamchinanes A-D（104～107）[41]。其成分結構見圖2。

表1 射干中黃酮類化合物

續(xù)表1

1.3 醌類化合物

目前，從射干種子種發(fā)現了9種化合物[42-44]，分別為belamcandol A（108）、belamcandol B（109）、belamcandaquinone A（110）、belamcandaquinone B（111）、belamcandone A-D（112～115）以及ardisianone A（116）。其成分結構見圖3。

1.4 甾體類化合物

迄今，研究者們在射干中分離出5種甾醇類化合物[45]分別為豆甾醇（117）、β-谷甾醇（118）、β-胡蘿卜苷（119）、維他命苷（120）、豆固醇（121）。其成分結構見圖4。

1.5 有機酸類化合物

從射干根莖的醋酸乙酯提取物中發(fā)現多種有機酸類化合物，分別為[46-49]iriflophenone（122）、belalloside A（123）、belallo-side B（124）、白蘆藜醇（125）、belamphenone（126）、乙酰香草醛（127）、莽草酸（128）、沒食子酸（129）、阿魏酸（130）以及香草酸（131）。其成分結構見圖5。

1.6 其他類化合物

射干中除了上述常見的化合物之外還含有其他的一些化合物[50-52]，到目前為止，從射干中分離到4個酮類化合物，包括belamcandaphenol（132）、4-hydroxy-acetophenone（133）、sheganone（134）、apocynin（135）；秦民堅等[51]已從射干根莖中提取到多個揮發(fā)油，如桉葉醇（136）、十四酸（137）、5-庚基二氫呋喃酮（138）、5,8-diethyl-dodecame（139）、hexadecanoic acid（140）、橙花醇乙酸（141）。同時，段玉峰等[52]建立ICP發(fā)射光譜測定射干中的微量元素，從中發(fā)現鎂、鐵、釩、鉻、錳、鈷、鎳、銅、鋅、硼、錫、鉍、鉛等。

2 藥理作用

現代藥理研究表明，射干對治療支氣管炎、慢性支氣管哮喘、肺間質纖維化、呼吸窘迫綜合征和急性咽炎以及各種炎癥具有良好的臨床療效，并且含有的黃酮、三萜及其苷類、揮發(fā)油等活性成分起到抗炎鎮(zhèn)痛、清除自由基、抗菌、抗病毒等作用。

2.1 抗炎、鎮(zhèn)痛作用

鳶尾科射干中的主要成分及提取物具有明顯的抗炎及鎮(zhèn)痛的活性。李欣妍等[53]發(fā)現白射干素（70）是射干藥材抗炎止咳的藥效物質基礎成分，尤其對枸櫞酸引起的豚鼠咳嗽次數有顯著的抑制作用。趙金明等[54]的研究發(fā)現射干提取液中化合物鳶尾黃素（2）及鳶尾苷（1）可以抑制組織多肽抗原（tissue polypeptide antigen，TPA）或胡蘿卜素（thapsigargin）對環(huán)氧化酶-2的誘導作用有和抑制前列腺素E2的產生，并認為射干的抗炎機制可能與此關[55]。李國信等[56]通過實驗對射干提取物中鳶尾苷（1）和鳶尾黃素（2）在大鼠體內藥動學進行研究，發(fā)現ig給予相當于32倍臨床等效劑量即10.8 g/kg鳶尾黃素（2）比鳶尾苷（1）在體內的抗炎藥效發(fā)揮更持久。汪天青[57]對射干活性組分進行分子對接實驗，實驗過程中發(fā)現射干藥材主要是通過干預花生四烯酸環(huán)氧化酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）、細胞色素P450（cytochrome P450，CYP450）信號通路達到抗炎、止咳作用。卞婭等[58]在實驗中發(fā)現射干的根莖、葉片提取物的高、中、低濃度劑量（2.37、1.19、0.60 g/kg）組均對涂抹二甲苯（0.02 mL）小鼠耳腫脹有抑制作用，證明了其具有一定的抗炎作用。劉雨娟等[59]在研究射干對河西走廊地區(qū)沙塵所致大鼠慢性咽炎的保護作用時。通過實驗發(fā)現射干可通過腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor alpha，TNF-α）受體介導的信號轉導途徑、下調核轉錄因子-κ（nuclear transcription factor-κ，NF-κ）的表達水平，阻斷沙塵損傷咽部組織。

圖2 萜類成分的結構

Fig.2 Structure skeleton of terpenoids

圖3 醌類成分的結構

圖4 甾體類成分的結構

圖5 有機酸類成分的結構

除了典型的異黃酮類成分外，射干屬植物中的一些其他成分同樣具有抗炎活性。張玉奎等[60]在射干葉中發(fā)現新成分芒果苷（82），可抑制肥大細胞介導的炎癥反應，同時減輕由花生四烯酸和佛波醇肉豆蔻酸乙酸酯（phorbol diester phorbol myristis acetate，PMA）引起的小鼠耳浮腫。異丹葉大黃素、白藜蘆醇（125）和茶葉花寧對5-脂氧合酶（5-lipoxygenase，5-LO）和環(huán)氧化酶（cyclooxygenase，COX）有較強的抑制作用。綜上分析，射干中主要脂溶性成分[61]，如鳶尾黃素（2）、鳶尾苷（1）、芒果苷（82）、白藜蘆醇（125）和茶葉花寧、異丹葉大黃素等均具有抗炎活性。

2.2 抗病毒作用

射干作為我國傳統(tǒng)清熱解毒類中藥，現代藥理研究表明其具有抗病毒的藥理作用。目前有研究發(fā)現[62-63]，射干有效成分鳶尾苷（1）、鳶尾黃素（2）、野鳶尾苷（6）、野鳶尾黃素（7）、德鳶尾苷（68）、次野鳶尾黃素（69）在組織細胞培養(yǎng)方法下對皰疹I、呼吸道合胞病毒、柯薩奇16、腺病毒3型、皰疹II及腺病毒7型等病毒具有抑制作用。向談婷等[64]采用實時定量PCR對禽傳染性支氣管炎病毒N基因（infectious bronchitis virus-N，IBV-N）和干擾素-β（interferon-β，IFN-β）mRNA的表達量進行檢測，以及采用Western blotting法對IBV-N蛋白的表達量進行檢測，證明了射干乙醇提取物對禽傳染性支氣管炎病毒（infectious bronchitis virus，IBV）的體外抑制作用。射干中的野尾鳶尾黃素（7）在培養(yǎng)組織中可抗流感病毒[65]，延遲柯薩奇病毒與埃可病毒引起的細胞病變，具有抗肺炎球菌活性。其對毛細血管通透性增高，有抑制作用，肉芽組織增生有治療作用。

2.3 抗菌作用

張宏等[66]采用體外及體內抑菌法，對射干提取物進行了抑菌實驗研究。體外實驗結果表明射干提取物對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、停乳鏈球菌、肺炎鏈球菌有抑制作用。體內實驗結果表明，射干提取物可明顯降低金黃色葡萄球菌感染小鼠死亡率的作用（＜0.05）。秦文艷等[67]進行了射干提取物體內體外抑菌作用的研究，采用2倍稀釋法檢測射干提取物的最小抑菌濃度（minimum inhibitory concentration，MIC），發(fā)現射干提取物對金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌等體內體外所有菌株均有抑制作用。在體外抗耐多藥結核菌試驗中[68]發(fā)現射干有較好的抑制耐多藥菌生長的作用，并且可在1∶4稀釋濃度的培養(yǎng)基中無細菌生長，研究者猜測抗菌效果可能和鳶尾苷（1）有關。

2.4 抗氧化作用

眾多研究表明，黃酮類化合物具有抗自由基的作用[69-71]，而射干較其它一些含有黃酮類化合物的中藥，其整體清除自由基能力更強。射干根莖中分離得到的異黃酮成分鳶尾苷（1）、鳶尾黃素（2）、野鳶尾黃素（7）、5,6,7,3′-四羥基-8-甲氧基異黃酮（37）均具有清除自由基的作用，其中鳶尾黃素（2）清除H2O2氧自由基的能力和活性都最強[72]。

段麗紅等[73]選擇氧自由基清除、羥基自由基清除、二苯代苦味肼基自由基清除、烷基自由基清除和抗油脂氧化作用等實驗體系進行抗氧化活性的試驗，證明了純化得到的鳶尾苷（1）有較顯著的抗氧化作用。張業(yè)等[74]研究證明射干種子的80%乙醇提取液對2,2-二苯基-1-苦肼基自由基（2,2-diphenyl- 1-picrylhydrazyl，DPPH）的清除率最高。可能是因為在強極性溶劑中更容易發(fā)生氫鍵效應，導致自由基清除劑的活性降低。同時，秦民堅等[75]在通過生物化學發(fā)光法對射干的甲醇提取物和天然產物單體清除自由基的能力進行研究時發(fā)現，檢測射干類中藥甲醇提取物及單體化合物清除O、OH+、H2O2的作用，認為抗自由基的作用可能是射干類藥物防治疾病的機制之一。射干中異丹葉大黃素的化學結構與白藜蘆醇（125）相似，能顯著抑制各種氧化應激促進肝粒體、腦線粒體和突觸體內二醛形成，以及阻止還原型谷胱甘肽水平下降和脂質過氧化反應，增強脂質過氧化作用中過度微弱的化學發(fā)光，減少DNA氧化損害。

2.5 雌性激素樣作用

現代藥理關于射干對于雌性激素樣作用的研究較少。馮漢林等[76]建立卵巢切除致大鼠骨質疏松癥模型，測定大鼠的骨礦密度（bone mineral density，BMD），骨礦含量（bone mineral content，BMC），血清鈣、磷的水平和堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，AKP）活性，發(fā)現射干總黃酮提取物和射干乙醇提取物能明顯改善大鼠因雌激素缺乏引起的骨礦丟失，提高BMD、BMC，改善骨骼力學性能。靜脈注射射干提取物能抑制被切除卵巢小鼠的促性腺激素的釋放促黃體生成激素（luteinizing hormone，LH）的分泌，證明了射干具有雌性激素樣作用。

2.6 抗腫瘤作用

射干屬中的鳶尾苷（1）可通過調節(jié)腫瘤細胞的生物學特性從而發(fā)揮抗腫瘤的作用。研究者[77]在探討射干苷對卵巢癌SK-OV-3細胞的影響及其作用機制時，發(fā)現鳶尾苷（1）發(fā)揮治療卵巢癌的作用機制可能是通過影響磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白質絲氨酸蘇氨酸激酶信號通路蛋白的活性，從而阻礙細胞的增殖、侵襲和遷移抑制。在體外培養(yǎng)的人肺癌H460細胞下，采用軟瓊脂集落形成法檢測錨定非依賴性生長能力，發(fā)現在顯微鏡下克隆數減少，Matrigel穿膜法檢測細胞侵襲能力檢測出藥物組能穿透人工基底膜的細胞數明顯減少，懸浮成球法檢測腫瘤干細胞自我更新能力顯示細胞球數目減少，高濃度下無細胞數形成，實時熒光定量PCR法檢測細胞中微小RNA-21的表達水平?？偨Y出了射干乙醇提取物可以有力抑制肺癌細胞的錨定非依賴性生長能力和侵襲能力，顯著下調了肺癌細胞中微小RNA-21的表達水平[78-79]。熊玲凡[80]研究鳶尾苷（1）對結腸癌SW480細胞的毒性作用以及其增殖、侵襲能力的影響。實驗數據顯示，給藥48 h后，射干苷可以抑制SW280細胞的生長，遷移以及克隆增長。Western blotting實驗顯示，鳶尾苷（1）可以通過上調SW480細胞凋亡相關蛋白Bax（Bcl2-Associated X的蛋白質，Bcl2-Associated X）的表達水平，下調SW480細胞增殖相關蛋白clycin D1、c-myc的表達水平起到抗腫瘤的作用。

2.7 其他作用

射干植物具有廣泛的藥理活性，除以上藥理作用外，還具有抗糖尿病，降血糖作用[81]，抗艾滋病病毒（human immunodeficiency virus，HIV），抗血栓，抗過敏等藥理作用。Jung等[82]發(fā)現射干中的異黃酮成分如鳶尾黃素（2）、野鳶尾黃素（7）及其糖苷顯示出強烈的醛糖還原酶抑制作用，以-甘油醛為底物，將化合物作用于鏈脲佐菌素誘導的糖尿病大鼠，能夠顯著抑制山梨糖在晶狀體、坐骨神經和紅細胞中的積蓄，并且野鳶尾黃素（7）的抑制活性更強，鳶尾黃素（2）能夠預防和治療糖尿病綜合征。王小利等[83]研究射干提取物在HIV潛伏再激活治療中的應用，通過中藥植物粉碎，用乙醇或乙醚水混合物提取，滲漉，濃縮，發(fā)現其具有在制備抗HIV潛伏治療藥物上的應用的用途。有報道稱[84]，由于鳶尾黃素（2）可抑制花生四烯酸或膠原引起血小板聚集，因而其可能是射干抗血栓的有效成分之一；研究者發(fā)現卵清蛋白誘導的大鼠在鳶尾黃素（2）的干預下皮膚過敏的抑制率為40%。

3 質量標志物的預測分析

射干所含化合物種類多樣，分布廣泛，但目前《中國藥典》2020年版僅對其中的野鳶尾黃素進行含量限定，同許多中藥材一樣，射干也存在著質控指標單一等問題。因此，需要更能體現其專屬性和整體價值的質量評價方法。中藥質量標志物是劉昌孝院士[85]提出的新概念，是指存在于中藥材和中藥產品（中藥飲片、中藥煎劑、中藥提取物等）中固有或加工制備過程中形成的，與中藥的功能屬性密切相關的化學物質，作為反映中藥安全性和有效性的標示性物質。通過文獻分析，基于中藥質量標志物的核心概念，對射干質量標志物進行預測，有利于建立中藥射干的質量控制辦法。

3.1 基于植物親緣學及化學成分可測性的Q-Marker預測分析

中藥的有效成分多為其次生代謝產物，不同植物具有不同遺傳物質基礎和生物合成途徑，因而可生成特異的次生代謝產物[86]。近年研究表明，植物次生代謝物質不僅具有廣泛的生物活性，而且它們在植物進化中起到不可或缺的作用，具有廣泛的生態(tài)學意義。射干來源于百合目鳶尾科射干屬，分布于全世界的熱帶、亞熱帶及溫帶地區(qū)。射干屬分為2個組，我國僅有1種，其廣布于全中國，主要生于林緣或山坡草地，大部分生于海拔較低的地方，在西南山區(qū)，海拔2000～2200 m處也可生長。

化學成分的可測性是中藥Q-Marker的基本條件之一。射干含有多種化學成分，包括黃酮類、三萜類、揮發(fā)油等，其中異黃酮類成分在射干中的量較大，為其主要藥效成分?！吨袊幍洹?020年版規(guī)定了射干中野鳶尾黃素的測定方法和限度要求。姜鴻等[87]采用UPLC法對藥材射干中10個成分鳶尾苷（1）、鳶尾黃素（2）、鳶尾甲苷A、鳶尾甲苷B、野鳶尾苷（6）、野鳶尾黃素（7）、鳶尾甲黃素A（8）、鳶尾甲黃素B（9）、次野鳶尾黃素（69）、白射干素（70）進行含量測定。該10個有效成分主要覆蓋了射干主要成分異黃酮類。王曉月等[88]采用HPLC-VWD法測定復方黃芩射干湯中4個異黃酮成分鳶尾苷（1）、野鳶尾苷（6）、鳶尾黃素（2）、次野鳶尾黃素（69）的含量。尤獻民等[89]建立RP-HPLC法同時測定射干藥材中鳶尾苷（1）、鳶尾黃素（2）、野鳶尾苷（6）、野鳶尾黃素（7）、鳶尾甲黃素A（8）、鳶尾甲黃素B（9）、次野鳶尾黃素（69）、白射干素（70）、及芒果苷（82）9種成分的含量。孫朝榮等[90]利用反相高效液相色譜法測定射干合劑中次野鳶尾黃素（69）含量。馮傳衛(wèi)等[91]利用紫外分光光度法對射干中的總異黃酮的含量進行測定。綜上所述，射干中黃酮類成分與其有效性密切相關，且能采用高效液相色譜法進行定量分析，可作為是其可能的主要藥效物質基礎，可作為其Q-Marker。宜根據不同化學成分的差異，建立專屬性測定方法，為質量評價標準的建立提供科學依據。

3.2 基于傳統(tǒng)功效的Q-Marker預測分析

傳統(tǒng)功效（功能主治）是對中藥有效性的概括，也是臨床用藥的依據[92]。射干始載于《神農本草經》，現收載于《中國藥典》2020年版中，具有祛痰利咽、消癖散結、清熱解毒、消腫止痛的功效，臨床常用于治療感受風熱或痰熱壅盛引起的咽喉腫痛、痰涎壅盛等癥，是中醫(yī)治療喉痹咽痛之要藥。異黃酮類化合物是射干的主要有效成分類型。異黃酮類化合物屬于植物雌激素類化合物，在治療雌激素依賴性疾病、腫瘤、心血管疾病及神經退行性疾病等方面具有良好的效果，并具有抗過敏、抗炎、抗糖尿病及肝保護等[93]作用。射干中的鳶尾苷（1）、鳶尾黃素（2）、染料木素（49）、白射干素（70）這幾類與射干的傳統(tǒng)功效相似[58]，是射干傳統(tǒng)功效的主要藥效物質基礎，同時也是射干Q-Marker篩選的主要途徑和重要依據。

3.3 基于傳統(tǒng)藥性的Q-Marker預測分析

藥的性味歸經是中藥的基本屬性，也是臨癥治法、遣藥組方的重要依據，因此，也應作為Q-Marker確定的依據之一。《中國藥典》2020年版中記載，射干味苦、辛，性寒，微毒，歸肺、肝經?？辔端幍幕瘜W成分多以黃酮類、醌類、苷類、生物堿為物質基礎，且三萜類化合物多味苦[94]；含有揮發(fā)油，各種苷類、生物堿等物質的藥物則呈現為辛味。通過以上分析，射干中的三萜類、黃酮類和揮發(fā)油成分應作為其Q-Marker選擇的重要參考依據。

3.4 基于不同配伍中表達組分的Q-Marker預測

臨床用藥一般以復方多見，根據不同的病癥，配伍不同方劑藥物以達到驅除疾病的目的。射干具有止咳化痰的功效，是中醫(yī)治療喉痹咽痛之要藥。射干-麻黃來自《金匱要略》中的射干麻黃湯，射干-麻黃藥對是寒溫配伍的經典藥對，在臨床上廣泛應用于支氣管哮喘的治療。射干中的野鳶尾黃素（7）具有改善氣道炎癥作用；麻黃具有宣肺平喘、發(fā)汗解表以及消腫利水的功效，麻黃總生物堿為麻黃的主要有效成分[95]，具有擴張支氣管作用，其中麻黃堿含量最高。射干黃芩湯現臨床用于治療咳嗽，其作用機制推測為是通過干預花生四烯酸炎癥通路中COX-2發(fā)揮抗氣道炎癥作用[96]，射干止咳的主要藥效物質基礎為白射干素（70），而黃芩抗炎主要藥效物質基礎[97]為黃芩苷和黃芩素。2味中藥配伍的其一目的就是增效[98]，發(fā)揮藥效作用起著一定的促進意義?，F代臨床應用射干配伍治療哮喘疾病時，應將其改善支氣管成分作為方劑配伍Q-Marker的選擇參考；在止咳鎮(zhèn)痛時，應將止咳抗炎成分作為方劑配伍Q-Marker的選擇參考。中藥多以配伍形式應用于臨床[99]，針對不同病癥所選用不同的方劑配伍治療，故選擇不同的Q-Marker作為中藥方劑配伍質控指標更具有現實意義。

3.5 基于不同產地和采收時期的Q-Marker預測分析

中藥的產地、采收期是中藥質量控制的源頭環(huán)節(jié)，與藥物有效成分含量密切相關。同一藥材因受到不同產地生態(tài)環(huán)境和采收時期的影響，其有效成分的差異性也很大。張倩玉[100]選擇了河南、河北、湖北、湖南、安徽、貴州、四川7個省，對不同產地射干的活性成分進行對比研究，通過對射干苷等10個抗炎止咳活性成分單體進行測定的含量測定方法，發(fā)現湖南射干中抗炎止咳活性成分的總含量遠遠高于其他產地射干。湖南、湖北射干抗炎有效成分鳶尾黃素（1）、鳶尾甲黃素A（8）、鳶尾甲黃素B（9）、野鳶尾黃素（7）含量顯著大于其他產地；止咳有效成分野鳶尾黃素（7）、白射干素（70）含量，安徽射干與湖北射干最高，湖南射干最低。普冰清等[101]建立了HPLC法測定二年生和三年生栽培射干春、秋季不同采收時間中12種黃酮類成分含量的動態(tài)變化，研究發(fā)現春季采收期二年生和三年生射干以5月上旬和中旬含量最高。秋季采收期，二年生射干中黃酮苷含量于9月末達到最高，黃酮苷元含量于10月初達到最高；三年生射干中黃酮苷和苷元含量均于11月初達到最高。綜上所述，不同的采收期和產地對射干黃酮類成分的含量有顯著影響，故為更好評價不同采收期和產地射干的質量，可將黃酮類成分作為其Q-Marker的重要來源。

3.6 基于藥動學的Q-Marker預測分析

射干具有治療流感及上呼吸道感染作用，主要效應成分為射干異黃酮類化合物。楊萬軍等[102]研究麻黃與射干配伍對大鼠體內射干異黃酮類成分藥動學的影響，建立了UHPLC-MS/MS方法測定血漿中射干異黃酮類成分鳶尾黃素（2）、野鳶尾黃素（7）及次野鳶尾黃素（69）的量，發(fā)現鳶尾黃素（2）和次野鳶尾黃素（69）在大鼠體內含量較高。有研究表明，在濁點萃取最優(yōu)條件為Triton X-114濃度5%，加入0.3 mol/L鹽酸50 μL調至酸性、平衡溫度50 ℃，平衡時間20 min的基礎上，發(fā)現給予射干提取物次野鳶尾黃素（69）后使氣道炎癥豚鼠血漿中升高的LTB4濃度得到顯著回調[103]。還有實驗通過對ig鳶尾苷（1）和鳶尾黃素（2）研究其在大鼠體內的藥動學。結果表明，鳶尾苷（1）及鳶尾黃素（2）的吸收較快以及達峰時間相同，但鳶尾黃素（2）的消除半衰期比鳶尾苷消除半衰期長，說明它在體內的藥效有可能發(fā)揮得更持久[104]。趙金明等[105]在探討射干提取物發(fā)揮止咳作用的藥效動力學過程中，證實了含有鳶尾苷（1）、鳶尾黃素（2）、次野鳶尾黃素（69）的射干提取混合物在小鼠體內均呈一室模型特征，均具有明顯的止咳效果，抑制咳嗽次數的作用強度及延長咳嗽潛伏期的作用強度隨著劑量的增大而增強。依照分析可知，除了藥典已列出的次野鳶尾黃素（69）外，鳶尾黃素（2）和野鳶尾黃素（7）可作為射干藥材Q-Marker的主要選擇。

4 結語

射干為我國傳統(tǒng)中藥，應用歷史悠久，具有多方面的藥理活性，療效確切，還有新的藥理作用，如抗?jié)?、射干與麻黃聯(lián)用的射干麻黃湯在治療咳嗽有良好的應用前景等。現行對射干的標準僅是藥材中的異黃酮成分次野鳶尾黃素含量作為藥材是否合格的指標，射干作為清熱藥發(fā)揮其功效與所含化學成分密不可分，其中的黃酮類成分次野鳶尾黃素為其抗炎、抗病毒療效的主要物質基礎。除以上射干還具有毒魚活性的鳶尾醛型三萜類化合物等。中藥中所含成分多種多樣，單一指標成分難以表征中藥復雜體系質量屬性的完整性，僅以次野鳶尾黃素來作為射干質控指標與藥效的關聯(lián)性不夠。

本文在系統(tǒng)綜述射干化學成分和現代藥理作用研究現狀的基礎上，以中藥質量標志物新概念的理論為指導，根據射干的化學成分和藥理作用、傳統(tǒng)功效、性味、成分可測性、入血化學成分及配伍變化，對射干的中藥質量標志物的預測和篩選進行了初步分析，其中以鳶尾苷（1）、鳶尾黃素（2）、野鳶尾黃素（7）、白射干素（70）、芒果苷（82）表現最為顯著，可將這些化合物作為射干藥材的潛在中藥Q-Marker，再進一步深入的考察探究。因此，為了更好地開發(fā)利用射干資源，有必要繼續(xù)對其化學成分、藥理作用、作用機制進行深入研究，并結合疾病發(fā)生的特點，多層次、多方位、多靶點深入探討其作用機制和功效，注重將其化學成分研究和藥理活性研究相結合，以闡明藥效物質基礎，為射干深入開發(fā)應用提供依據。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Research grogress ofand predictive analysis of its quality markers

LING Yue1, CHEN Jin-peng2, 3, 4, YE Qing1, LIU Yi-miao1, XU Xu2, 3, 4, TIAN Cheng-wang2, 3, 4

1.Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 300193, China 2.Tianjin Institute of Pharmaceutical Research, Tianjin 300301, China 3.Tianjin Key Laboratory of Quality Marker of Traditional Medicine, Tianjin 300301, China 4.State Key Laboratory of Drug Delivery and Pharmacokinetics, Tianjin Institute of Pharmaceutical Research, Tianjin 300301, China

is a commonly used Chinese medicinal material in China, which has abundant resources, wide distribution and broad prospects for development and utilization.The chemical compositions are rich in, including flavonoids, triterpenes, volatile oils, steroids.etc.Traditionally, isoflavones are considered to be the main medicinal ingredients.Based on the summarization of its chemical components and pharmacological effects, the Q-Markers ofare predicted from the aspects of chemical components, traditional properties, detectable components, different producing areas, collecting periods, components entering blood and different compatibility environments.It was found that iris, iris flavin, wild kite flavin, eucalyptin and mangiferin were the most significant, which can provide basis for clarifying the Q-Markers and establishing scientific quality standardsof.

(L.) DC.; isoflavone; quality marker;iris; iris flavin; wild kite flavin; eucalyptin; mangiferin

R28

A

0253 - 2670(2022)05 - 1595 - 14

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.05.035

2021-10-08

國家重大新藥創(chuàng)制專項（2019ZX09201005）；國家自然科學基金青年科學基金項目（82003936）；中醫(yī)藥國際合作專項（基地類項目）（0610-2140NF020630）

凌 悅，碩士研究生，藥物分析與質量標志物研究。E-mail: 18361140199@163.com

通信作者：田成旺，研究員。E-mail: tiancw@tjipr.com

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