代謝組學(xué)技術(shù)在中藥復(fù)方配伍規(guī)律研究中的應(yīng)用

王 杰，隗鑫曈，陳 威，呂燕慧，魏艷平，祖先鵬*，張秀云*

·綜 述·

代謝組學(xué)技術(shù)在中藥復(fù)方配伍規(guī)律研究中的應(yīng)用

王 杰1，隗鑫曈1，陳 威2，呂燕慧1，魏艷平1，祖先鵬2*，張秀云1*

1.山東中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，山東 濟(jì)南 250355 2.海軍軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)院，上海 200433

藥物配伍是中醫(yī)遣方用藥的主要形式，中藥復(fù)方是藥物配伍的進(jìn)一步延伸，要科學(xué)闡明中藥復(fù)方療效、優(yōu)化復(fù)方配伍，單純針對(duì)中藥復(fù)方化學(xué)成分的研究不足以講清復(fù)方配伍規(guī)律及其基本藥效與作用機(jī)制。中藥復(fù)方作為一個(gè)整體，應(yīng)通過復(fù)方作用于機(jī)體和機(jī)體所處的整體反應(yīng)來判定其療效，進(jìn)而優(yōu)化復(fù)方配伍。代謝組學(xué)通過分析機(jī)體相關(guān)代謝簇和代謝網(wǎng)絡(luò)的時(shí)序變化，闡明藥味及復(fù)方的療效，進(jìn)而解析復(fù)方配伍規(guī)律。單味藥是配伍的基礎(chǔ)，藥對(duì)是配伍最基本的形式，方劑是復(fù)方臨床應(yīng)用的最主要形式。綜述了近年來代謝組學(xué)在“四氣五味”“七情合和”和“君臣佐使”配伍理論中的應(yīng)用研究，從性味、藥對(duì)、復(fù)方等不同層次對(duì)中藥復(fù)方配伍進(jìn)行系統(tǒng)性評(píng)價(jià)，分析中藥復(fù)方配伍規(guī)律，有助于指導(dǎo)中藥復(fù)方臨床用藥以及新復(fù)方的研制。

代謝組學(xué)；復(fù)方配伍；四氣五味；七情合和；君臣佐使

中藥擁有數(shù)千年的歷史傳承，對(duì)于各種復(fù)雜疾病的預(yù)防與治療具有自身獨(dú)特的優(yōu)勢。中藥復(fù)方在辨證立法的基礎(chǔ)上，按照“四氣五味”“七情合和”和“君臣佐使”等藥性及配伍理論構(gòu)建出復(fù)雜的“組方系統(tǒng)”，進(jìn)而發(fā)揮多組分、多靶點(diǎn)的治療作用，是對(duì)機(jī)體生化網(wǎng)絡(luò)的整體調(diào)控[1]。然而，由于中藥復(fù)方中活性成分繁雜、各成分間協(xié)同拮抗、中藥復(fù)方系統(tǒng)與病證機(jī)體之間“系統(tǒng)與系統(tǒng)”的相互作用等因素，使得復(fù)方效應(yīng)機(jī)制存在復(fù)雜的非線性特征，難以通過現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)的方法科學(xué)、客觀地詮釋復(fù)方配伍產(chǎn)生的整體療效和協(xié)同效應(yīng)[2]。這嚴(yán)重制約了中藥復(fù)方研究的深度和廣度，限制了中藥現(xiàn)代化的進(jìn)程及國際市場競爭力。

代謝物變化作為機(jī)體終端信息表達(dá)的體現(xiàn)，中藥復(fù)方對(duì)“方證對(duì)應(yīng)”機(jī)體的療效必然涉及對(duì)紊亂失調(diào)代謝網(wǎng)絡(luò)的糾正和調(diào)節(jié)[3]。而代謝組學(xué)作為一門探究機(jī)體在生理或病理狀態(tài)下代謝產(chǎn)物及代謝軌跡時(shí)序性規(guī)律的技術(shù)，采用“自上而下”的策略，借助核磁共振技術(shù)（NMR）、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（LC-MS）、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）等現(xiàn)代分析技術(shù)，對(duì)體液、組織、細(xì)胞中相對(duì)分子質(zhì)量＜1000的內(nèi)源性小分子代謝物（脂質(zhì)、氨基酸、核糖酸等）進(jìn)行定性和定量分析，通過代謝組學(xué)數(shù)據(jù)庫（HMDB、KEGG、Metlin等）對(duì)相關(guān)代謝簇信息進(jìn)行整合，以監(jiān)測生命系統(tǒng)中代謝網(wǎng)絡(luò)的動(dòng)態(tài)變化，從機(jī)體代謝角度研究疾病或藥物干預(yù)導(dǎo)致的機(jī)體變化[4]。代謝組學(xué)是一種可用于發(fā)現(xiàn)疾病生物標(biāo)志物以及探索生命系統(tǒng)與藥物之間復(fù)雜效應(yīng)關(guān)系的有效工具。因此，其不僅能研究中藥復(fù)方藥效成分在體內(nèi)的變化，更重要的是探究復(fù)方干預(yù)下的作用靶點(diǎn)和代謝網(wǎng)絡(luò)調(diào)控機(jī)制，有助于揭示相應(yīng)藥物效應(yīng)機(jī)制，從“系統(tǒng)-系統(tǒng)”的層次揭示中藥復(fù)方的配伍規(guī)律和效應(yīng)機(jī)制[5]。在保障復(fù)方療效的基礎(chǔ)上，在單味藥、藥對(duì)、復(fù)方等不同層次上探索中藥復(fù)方配伍與相關(guān)靶點(diǎn)和效應(yīng)機(jī)制的量效關(guān)系，完成對(duì)中藥復(fù)方配伍的篩選和優(yōu)化[6]。代謝組學(xué)與中醫(yī)整體觀思想相吻合，適用于評(píng)價(jià)不同復(fù)方配伍對(duì)機(jī)體的生物學(xué)效應(yīng)，揭示其配伍規(guī)律。近年來，代謝組學(xué)也已被廣泛應(yīng)用于中醫(yī)藥的各個(gè)領(lǐng)域，包括疾病研究、藥物研發(fā)、藥物質(zhì)量控制、安全性評(píng)價(jià)等[7-9]。

復(fù)方配伍是根據(jù)不同疾病階段，不同證型，有選擇地將不同功效藥物兩兩或2種以上相結(jié)合。單味藥是配伍的基礎(chǔ)，藥對(duì)是配伍最基本的形式，方劑是復(fù)方臨床應(yīng)用的最主要形式，而代謝組學(xué)將機(jī)體內(nèi)的內(nèi)源性代謝物或生物標(biāo)志物群作為指標(biāo)，對(duì)比分析服用不同復(fù)方配伍方案下的相應(yīng)復(fù)方活性成分和機(jī)體內(nèi)源性代謝物的時(shí)效變化過程，進(jìn)而完成對(duì)中藥復(fù)方配伍方案的篩選，確定中藥復(fù)方的“量-時(shí)-效”關(guān)系，明晰復(fù)方配伍原則[10]（圖1）。本文主要對(duì)近年來代謝組學(xué)在中藥復(fù)方配伍規(guī)律“四氣五味”“七情合和”和“君臣佐使”中的應(yīng)用進(jìn)展進(jìn)行綜述。

圖1 代謝組學(xué)——現(xiàn)代生物技術(shù)與傳統(tǒng)中藥復(fù)方配伍理論連接的橋梁

1 在“四氣五味”理論中的應(yīng)用

“四氣五味”理論是中藥藥性理論的基礎(chǔ)，是中藥組方的重要依據(jù)[11]?！稖罕静荨分品街ㄖ性峒啊胺蛩幱泻疅釡貨鲋?，酸苦辛咸甘淡之味，各有所能，不可不通也”。但早期“四氣五味”理論的研究僅通過感官對(duì)中藥作用人體后的反應(yīng)對(duì)中藥療效進(jìn)行辨別，缺乏科學(xué)、客觀的詮釋。基于現(xiàn)有的技術(shù)已知每味中藥中含有幾十甚至上萬種化學(xué)成分，但仍無法代表其整體，而且中藥經(jīng)過不同炮制方法后其藥效成分也會(huì)隨之改變[12]，這也對(duì)科學(xué)解釋中藥的“四氣五味”理論提出了更嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。

寒與熱、溫與涼是兩兩相互對(duì)立的4種藥性，《素問·五常政大論》曾提出“治熱以寒，溫而行之；治寒以熱，涼而行之”的理論，運(yùn)用代謝組學(xué)通過表征證候及中藥作用后特異性生物標(biāo)志群的變化，對(duì)傳統(tǒng)“四氣五味”理論中“寒者熱之，熱者寒之”進(jìn)行詮釋。王東琴等[13]以發(fā)熱大鼠為對(duì)象，采用代謝組學(xué)技術(shù)研究狹葉柴胡的解熱作用機(jī)制，借助GC-MS技術(shù)研究發(fā)現(xiàn)大鼠血漿代謝物中與發(fā)熱相關(guān)的17個(gè)潛在生物標(biāo)記物，并發(fā)現(xiàn)不同劑量狹葉柴胡均能通過酶抑制作用、神經(jīng)遞質(zhì)等途徑發(fā)揮作用，深入闡釋了狹葉柴胡辛行苦泄，解表祛邪，微寒善于退熱的解熱機(jī)制。孟憲生等[14]運(yùn)用代謝組學(xué)技術(shù)研究熱性中藥川芎治療寒凝證的作用機(jī)制，應(yīng)用超高效液相色譜-電噴霧-飛行時(shí)間質(zhì)譜（UPLC-Q-TOF-MS）、Markerlynx軟件、主成分分析法等手段分析寒凝氣滯血瘀大鼠血漿代謝物，得到了二氫神經(jīng)鞘氨醇、油酰甘油磷酯酰膽堿等8種寒凝血瘀證潛在生物標(biāo)志物，根據(jù)差異代謝物證實(shí)川芎可能是通過影響磷脂酰膽堿代謝途徑，使血瘀癥狀減緩，在鞏固血瘀證病因病機(jī)認(rèn)識(shí)的同時(shí)，闡明熱性中藥川芎干預(yù)寒凝血瘀氣滯證的作用機(jī)制。代謝組學(xué)通過揭示中藥性味與相應(yīng)證候模型之間的作用，篩選出中藥調(diào)節(jié)的代謝通路和潛在生物標(biāo)記物，有利于正確指導(dǎo)中藥在臨床的運(yùn)用，探究性味合參中藥的氣味配合規(guī)律（表1～3）。同時(shí)，同一藥材也具有寒熱不同的藥性部位，當(dāng)其作用于不同證候模型時(shí)所引起的代謝網(wǎng)絡(luò)糾正也不盡相同。如郁金、姜黃均治療黃疸[15]，前者治療濕熱黃疸，而后者治療濕寒黃疸。前者引起甘氨酸、苯丙氨酸、甘油、半乳糖、甘露糖和油酸亞油酸含量顯著下降，而后者導(dǎo)致乙二酸、半乳糖、檸檬酸、蘋果酸和甘露糖含量顯著上升，苯丙氨酸、丙氨酸、蘇氨酸和脯氨酸含量顯著下降。吳宏偉[15]采用代謝組學(xué)的方法，比較了不同寒、熱模型（寒濕黃疸、濕熱黃疸）的差異代謝標(biāo)志物，確定了不同寒熱證候發(fā)病背后復(fù)雜的代謝紊亂機(jī)制，從單胺類神經(jīng)遞質(zhì)差異代謝物的角度，對(duì)姜黃、郁金寒熱藥性的異同進(jìn)行了一定的揭示。

表1 代謝組學(xué)技術(shù)在中藥“四氣”理論研究中的應(yīng)用

表2 代謝組學(xué)技術(shù)在中藥“五味”理論研究中的應(yīng)用

表3 代謝組學(xué)技術(shù)在復(fù)方配伍“四氣五味”理論研究中的應(yīng)用

2 在“七情和合”理論中的應(yīng)用

不同功效中藥藥味經(jīng)過配伍形成治病診療的方劑，兩兩配伍的中藥藥對(duì)是中藥配伍的基本單元，而源自《神農(nóng)本草經(jīng)》的“七情合和”理論作為中藥配伍的綱領(lǐng)，指導(dǎo)著中藥臨床應(yīng)用，與病因?qū)W的“七情”截然不同，其是指單行、相須、相使、相畏、相殺、相惡、相反7種中藥相互配伍之后的不同作用效果，即對(duì)不同藥物配伍后增效減毒或減效增毒進(jìn)行詮釋[36]。藥對(duì)作為2味藥配伍的復(fù)方，與單味藥相比，其往往具有更多的活性成分。同時(shí)，部分成分還會(huì)發(fā)生拮抗、協(xié)同，或又拮抗又協(xié)同的相互作用，這就導(dǎo)致單純的單味藥有效成分的簡單加和，無法闡明一些中藥藥對(duì)的作用機(jī)制和配伍原則。而代謝組學(xué)將單味藥與藥對(duì)中的多種有效成分視為一個(gè)有機(jī)整體，通過對(duì)不同“方證對(duì)應(yīng)”機(jī)體代謝狀態(tài)的直觀繪制以及潛在標(biāo)記物的探索，提供了一種可視化的手段和相對(duì)定量的方法來評(píng)價(jià)中藥及藥對(duì)的療效，分析起主次作用的作用靶點(diǎn)和代謝途徑，研究藥對(duì)整體協(xié)同的治療作用，分析配伍規(guī)律，避免了單純研究化學(xué)成分的局限性。

2.1 單行

單行在《本草蒙筌》有云：“不與諸藥共劑而獨(dú)能攻補(bǔ)也”。即單味藥無需配伍對(duì)某些疾病也足以發(fā)揮療效，如人參補(bǔ)氣固血[37]、當(dāng)歸活血止痛[38]、黃芩善清肺火[16]。袁子文等[38]應(yīng)用代謝組學(xué)鑒定血瘀證大鼠血漿中的潛在生物標(biāo)記物，識(shí)別當(dāng)歸干預(yù)前后顯著調(diào)節(jié)的異常代謝物與紊亂代謝網(wǎng)絡(luò)，研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸通過干預(yù)血瘀證大鼠血漿中甘油磷脂代謝、花生四烯酸代謝等9條異常代謝途徑，發(fā)揮其活血化瘀之功效。研究從代謝物水平分析當(dāng)歸活血、補(bǔ)血的作用機(jī)制，為當(dāng)歸在血瘀證的臨床應(yīng)用提供了理論依據(jù)。

2.2 相須

相須是指2種功效相似的藥物合用相互增強(qiáng)藥效如當(dāng)歸-川芎[39]、麻黃-桂枝[40]。Li等[39]借助UPLC-Q-TOF-MS和模式識(shí)別技術(shù)，結(jié)合代謝組學(xué)的方法，構(gòu)建了當(dāng)歸-川芎及其單味藥對(duì)溶血性和再生障礙性貧血大鼠的代謝圖譜與代謝網(wǎng)絡(luò)。分析當(dāng)歸-川芎藥對(duì)配伍前后對(duì)再生障礙性貧血大鼠血漿和尿液的代謝影響，發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸、川芎、當(dāng)歸-川芎藥對(duì)均能通過回調(diào)差異代謝物，干預(yù)硫胺素代謝、鞘磷脂代謝等方式發(fā)揮其補(bǔ)血、活血、祛瘀的功效，揭示了當(dāng)歸、川芎和當(dāng)歸-川芎不同的造血功效和作用機(jī)制，深入闡明了當(dāng)歸-川芎協(xié)同互補(bǔ)的養(yǎng)血、活血作用，為全面了解血虛癥方劑的配伍規(guī)律提供了依據(jù)。

2.3 相使

相使是在治療目的相同的前提下，功效不同的2種藥物相互配伍，一味藥為主，另一味藥為輔，主輔結(jié)合以增主藥功效或降低不良反應(yīng)。如黃連-黃芩[41]、麻黃-石膏[42]。Li等[43]采用UPLC-Q-TOF-MS技術(shù)分析當(dāng)歸-紅藥對(duì)血虛證大鼠血漿和尿液中代謝物的調(diào)節(jié)作用，發(fā)現(xiàn)單味藥和藥對(duì)對(duì)血虛證大鼠花生四烯酸代謝途徑中的潛在生物標(biāo)志物有不同程度的干預(yù)作用，并且藥對(duì)組調(diào)節(jié)作用最強(qiáng)，從機(jī)體代謝變化的角度闡述當(dāng)歸、紅花、當(dāng)歸-紅花的補(bǔ)血作用及機(jī)制，通過代謝組學(xué)的方法進(jìn)一步闡釋了當(dāng)歸-紅花相使配伍的合理性。

2.4 相畏、相殺

相畏相殺，2味藥配伍，一味藥牽制另一味藥從而減毒或消除不良反應(yīng)。其中起制伏作用的藥味為相殺關(guān)系，受制藥味為相畏關(guān)系。如甘草-雷公藤[44]、附子-甘草[45]。Dong等[46]為研究川烏毒性誘導(dǎo)的生化表型擾動(dòng)和代謝網(wǎng)絡(luò)紊亂，采用UPLC-Q-TOF-MS技術(shù)進(jìn)行尿液代謝組學(xué)分析，鑒定出17個(gè)與川烏毒性相關(guān)的潛在生物標(biāo)志物，并評(píng)價(jià)甘草、白芍、干姜聯(lián)合用藥的解毒效果，發(fā)現(xiàn)干姜、白芍和甘草均能不同程度干預(yù)戊糖和葡萄糖醛酸的相互轉(zhuǎn)化以及丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代謝等代謝途徑，回調(diào)川烏毒性生物標(biāo)志物的水平。表明代謝組學(xué)對(duì)于評(píng)價(jià)中藥毒性和尋找解毒配伍具有重要意義。

2.5 相惡、相反

相惡，“相惡者，奪我之所能”，即配伍后藥味減效甚至失效。如黃芩惡生姜[47]，兩者配伍減弱黃芩的功效。相反，兩藥合用產(chǎn)生不良反應(yīng)，如甘遂-甘草[48]、昆布-甘草[49]。孫潤彬等[49]采用GC-MS方法對(duì)大鼠血清中內(nèi)源性代謝物分析發(fā)現(xiàn)昆布、甘草與昆布-甘草給藥均對(duì)代謝有明顯影響，且昆布-甘草與昆布對(duì)機(jī)體代謝影響相似，通過對(duì)腎臟病理組織切片發(fā)現(xiàn)聯(lián)合給藥較單味藥給藥造成更嚴(yán)重的腎臟組織病理異常。從代謝組學(xué)的角度科學(xué)地闡釋了“藻戟芫花俱戰(zhàn)草”的配伍禁忌[49]。代謝組學(xué)從體內(nèi)代謝物層次分析各藥對(duì)配伍前后機(jī)體內(nèi)代謝產(chǎn)物、代謝網(wǎng)絡(luò)的差異，揭示藥物七情配伍之間的功效特點(diǎn)，進(jìn)而客觀闡明“七情合和”理論，有利于解釋中藥藥對(duì)的干預(yù)機(jī)制（表4）。

表4 代謝組學(xué)技術(shù)在“七情合和”理論研究中的應(yīng)用

3 在“君臣佐使”理論中的應(yīng)用

方劑配伍是按照“君臣佐使”的主次原則，將功效不同的群藥整合成一個(gè)嚴(yán)密有效的有機(jī)整體，從而提高藥物療效，減輕不良反應(yīng)?！熬甲羰埂崩碚撆c“七情合和”理論有著緊密的聯(lián)系，是七情配伍的延伸與拓展[54]。目前，對(duì)中藥復(fù)方配伍規(guī)律的揭示多采用復(fù)方拆方的方法，將復(fù)方拆去一味或幾味中藥以觀察藥效變化[55]。該方法雖然一定程度上闡明了配伍的合理性，但因?yàn)榉絼┏煞謴?fù)雜且具有時(shí)效性，以及機(jī)體與藥物的相互作用，使得傳統(tǒng)的復(fù)方拆方方法破壞原方劑配伍產(chǎn)生的整體性[56]。而代謝組學(xué)通過跟蹤和揭示中藥復(fù)方配伍過程中機(jī)體相關(guān)代謝標(biāo)志物的組成變化，研究機(jī)體失調(diào)代謝網(wǎng)絡(luò)的糾正和調(diào)節(jié)過程，借助代謝組學(xué)的方法將不同配伍復(fù)方的作用靶點(diǎn)、途徑、調(diào)控網(wǎng)絡(luò)等生物學(xué)信息相整合，從宏觀整體參數(shù)和微觀特異性參數(shù)相結(jié)合角度入手，比較復(fù)方中各功能組分（君、臣、佐、使）與復(fù)方協(xié)同作用的差異，揭示不同功能組分配伍前后的相關(guān)靶點(diǎn)與作用途徑，探究其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，明確中藥復(fù)方配伍產(chǎn)生的不同藥效作用和代謝網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)，尋找最佳中藥復(fù)方配伍方案，盡可能挖掘復(fù)方配伍中“藥味-量-時(shí)-效”規(guī)律[57]（表5）。

續(xù)表5

表5 代謝組學(xué)技術(shù)在“君臣佐使”理論研究中的應(yīng)用

君藥可理解為是單行的延展應(yīng)用，即主病之謂君。如獨(dú)參湯補(bǔ)氣固脫[37]。戴偉東等[58]基于超快速液相色譜-離子阱-飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜（UFLC-IT-TOF-MS）的代謝組學(xué)方法對(duì)過度疲勞模型大鼠血漿進(jìn)行分析，評(píng)價(jià)了通心絡(luò)和人參對(duì)過度疲勞的干預(yù)作用，通過對(duì)與過度疲勞相關(guān)的生物標(biāo)記物進(jìn)行綜合分析，從代謝網(wǎng)絡(luò)中發(fā)現(xiàn)人參與通心絡(luò)對(duì)大部分差異代謝物均具有顯著干預(yù)作用，但對(duì)溶血磷脂酰膽堿的調(diào)節(jié)作用相反，通心絡(luò)調(diào)節(jié)更加全面，闡明了君藥、復(fù)方對(duì)過度疲勞大鼠的不同干預(yù)作用，發(fā)現(xiàn)君藥人參性能強(qiáng)、藥力大的特點(diǎn)，但仍弱于組方的療效，進(jìn)一步證實(shí)組方配伍的合理性。

臣藥更側(cè)重于相須相使的配伍運(yùn)用，即輔君藥，兼治病。如麻黃湯中，麻黃-桂枝的君臣相須[71]；黃連解毒湯中，黃連-黃芩的君臣相使[72]；四逆湯中附子回陽救逆，干姜溫中散寒，二者君臣配伍，奠定方之基石。Zhou等[59]采用代謝組學(xué)結(jié)合計(jì)算機(jī)系統(tǒng)分析和RNA反轉(zhuǎn)錄-cDNA聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增結(jié)合技術(shù)（RT-PCR），定量評(píng)估不同配伍四逆湯對(duì)心力衰竭大鼠的作用功效并闡明其作用機(jī)制，研究發(fā)現(xiàn)君藥能顯著逆轉(zhuǎn)紊亂的6條代謝通路，臣藥能顯著逆轉(zhuǎn)紊亂的5條代謝通路，其中亞油酸代謝、鞘脂代謝和花生四烯酸代謝為共同調(diào)節(jié)的通路，附子-干姜配伍后能顯著逆轉(zhuǎn)苯丙氨酸代謝、色氨酸代謝、三羧酸循環(huán)等10條紊亂的代謝通路，配伍后代謝調(diào)節(jié)更為廣泛，通過構(gòu)建復(fù)方-藥味-代謝途徑的代謝網(wǎng)絡(luò)，對(duì)“附子無干姜不熱”的君臣協(xié)同增效配伍理論進(jìn)行了一定的科學(xué)詮釋，進(jìn)一步為臨床上四逆湯的遣方用藥提供了理論依據(jù)。

佐藥乃是相須、相使、相畏、相殺的靈活運(yùn)用，即佐助藥，助長君臣藥味的治療作用。如腎氣丸中配伍桂附增強(qiáng)熟地功效[73]，佐制藥，牽制君臣藥味不良反應(yīng)，如麻黃湯、麻桂畏炙甘草[71]。使藥是單行的特殊應(yīng)用，即用以調(diào)和藥味，引導(dǎo)諸藥，如補(bǔ)中益氣湯中的升麻、柴胡引導(dǎo)諸藥[60]。Wu等[61]以血清代謝譜的整體擾動(dòng)為指標(biāo)，采用UPLC-Q-TOF-MS血清代謝組學(xué)的方法，評(píng)價(jià)血瘀證模型大鼠血清代謝物異常變化以及當(dāng)歸四逆湯和各組分活血化瘀的配伍效果，發(fā)現(xiàn)去除佐使藥后無法調(diào)節(jié)甘油磷脂代謝途徑，通過去除功能組分以保持部分協(xié)同作用的方法，揭示當(dāng)歸四逆湯的整體干預(yù)作用以及各組分對(duì)活血化瘀功效的貢獻(xiàn)。

4 結(jié)語與展望

方劑的組成是根據(jù)機(jī)體的病證、病機(jī)、病因等因素，選取不同性味的中藥，綜合運(yùn)用七情合和的配伍關(guān)系，對(duì)不同藥味進(jìn)行協(xié)同或拮抗調(diào)節(jié)，以實(shí)現(xiàn)調(diào)偏制毒、增效減毒的功效[71-74]。同時(shí)，按照君臣佐使的主次原則，將群藥融合成一個(gè)協(xié)調(diào)有序的有機(jī)整體。因此，復(fù)方具有2個(gè)典型特點(diǎn)：一是方中各藥味可能針對(duì)患者的不同環(huán)節(jié)發(fā)揮作用；二是方中各藥味地位不同，即君臣佐使之分。只有明晰各藥味對(duì)整個(gè)復(fù)方的貢獻(xiàn)，才能更好地闡明傳統(tǒng)方劑治療疾病的優(yōu)勢，也有利于治療各種復(fù)雜疾病[75]。而代謝組學(xué)研究中藥復(fù)方配伍特點(diǎn)擁有以下優(yōu)勢：（1）代謝組學(xué)檢測的物質(zhì)種類比其他組學(xué)所測種類少，無需建立全基因測序的龐大數(shù)據(jù)庫；（2）代謝物在不同的生物樣本中種類基本一致，其研究技術(shù)相對(duì)更通用，檢測結(jié)果更簡潔明了；（3）代謝組學(xué)整體、無創(chuàng)、動(dòng)態(tài)的特點(diǎn)能夠更好的反應(yīng)不同中藥配伍時(shí)對(duì)“方證對(duì)應(yīng)”機(jī)體的修復(fù)和調(diào)節(jié)作用；（4）代謝物能有效地反映出中藥干預(yù)下基因和蛋白表達(dá)的微小變化，易于檢測。中醫(yī)治病的基本原則在于“證千變，藥亦千變”，而代謝組學(xué)通過檢測代謝網(wǎng)絡(luò)擾動(dòng)情況，定量評(píng)估不同配伍方案對(duì)發(fā)揮藥效的特定機(jī)體內(nèi)環(huán)境的影響，既能揭示“證”的實(shí)質(zhì)，又有助于揭示各藥物配伍前后的作用機(jī)制。

盡管代謝組學(xué)在中藥復(fù)方配伍研究中有較大的優(yōu)勢，但仍面臨著許多挑戰(zhàn)。首先，不同造模方式會(huì)引起不同代謝物變化。其次，同種藥材的不同藥用部位，不同配伍比例，不同炮制方法等也會(huì)引起不同的代謝物調(diào)節(jié)。最后，代謝組學(xué)研究篩選得到的代謝物和代謝通路數(shù)量較少，影響檢測結(jié)果因素較多，易出現(xiàn)假陽性、假陰性等情況。但代謝組學(xué)能與多學(xué)科（中藥藥理學(xué)-網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)-腸道菌群等）相結(jié)合，從多角度（方-證-效）、多層次（性味-七情和合-君臣佐使），建立中藥復(fù)方配伍的研究方法，在保證中藥復(fù)方整體療效的基礎(chǔ)上，解析各組分對(duì)全方的貢獻(xiàn)，挖掘中藥復(fù)方配伍規(guī)律內(nèi)涵，為優(yōu)化復(fù)方的臨床應(yīng)用提供了參考，也為今后創(chuàng)造新的中藥復(fù)方提供了思路。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Application on metabolomics techniques in compatibility law of traditional Chinese medicine formulae

WANG Jie1, WEI Xin-tong1, CHEN Wei2, LYU Yan-hui1, WEI Yan-ping1, ZU Xian-peng2, ZHANG Xiu-yun1

1.School of Pharmacy, Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250355, China 2.School of Pharmacy, Naval Medical University, Shanghai 200433, China

Drug compatibility is the main form of dispatching prescription in traditional Chinese medicine (TCM), and TCM formula is the further extension of drug compatibility.In order to scientifically clarify the efficacy and optimize the drug compatibility, investigations on chemical components of TCM formula alone are not enough to explain the compatibility law, efficacy and mechanism of action of TCM formula.As a whole, TCM formula should be used to determine the synergistic effects by acting on the body and the body’s overall response, so as to optimize the compatibility of TCM formula.Metabolomics could clarify the drug flavors, activities and compatibility laws of TCM formula by analyzing the time-series changes of related metabolic clusters and network of the body.Single TCM is the basis of compatibility, and drug pair is the most basic form of compatibility, and prescription is the most important form of clinical application.Application of metabolomics in the compatibility theories of “four natures and five flavors”, “seven ways of compatibility” and “king, minister, assistant and guide” were reviewed in this paper, and compatibility of TCM formula was systematically evaluated from different levels, such as drug flavors, drug pairs and TCM formula, and compatibility law of TCM formulae was analyzed, in order to guide the clinical application of TCM formulae and development of new TCM formulae.

metabolomics; formula compatibility; four natures and five flavors; seven ways of compatibility; king, minister, assistant and guide

R283.21

A

0253 - 2670(2022)05 - 1528 - 12

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.05.029

2021-08-24

國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目（2019YFC1711000）；國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（82004215）；上海市衛(wèi)生健康委員會(huì)衛(wèi)生行業(yè)臨床研究專項(xiàng)（20204Y0326）

王 杰（1996—），男，碩士研究生。E-mail: cyan0880@163.com

通信作者：祖先鵬，男，講師。E-mail: zuxianpeng@163.com

張秀云，女，副教授。E-mail: zhangxiuyunsh@163.com

[責(zé)任編輯 崔艷麗]