用TOSOH HLC-723 G8型糖化血紅蛋白儀檢測糖化血紅蛋白的精密度及正確度

郭勝利，郭麗麗，李守霞

(1. 邯鄲邯鋼醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 邯鄲 056001 ；2. 邯鄲市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 邯鄲 056001)

近年來，糖化血紅蛋白檢測在診治糖尿病中得到了廣泛的應(yīng)用。準(zhǔn)確地檢測糖化血紅蛋白對(duì)檢測儀器分析性能的要求較高。在本研究中，筆者參照美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)制定的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)、WS/T 492-2016、WS/T 420-2013、WS/T 402-2012、YY/T 1246-2014 等中國行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中的相關(guān)方法對(duì)用TOSOH HLC-723 G8 型糖化血紅蛋白儀（采用高效液相色譜法）檢測糖化血紅蛋白的精密度及正確度進(jìn)行了評(píng)價(jià)。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源

在我院就診糖尿病患者的乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA）抗凝全血；衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心提供的具有互換性的有證參考物質(zhì)。

1.2 儀器和試劑

TOSOH HLC-723 G8 型糖化血紅蛋白儀及其原裝配套試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品。

1.3 驗(yàn)證方案

1.3.1 精密度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn) 選擇兩個(gè)糖化血紅蛋白濃度水平（5.0%、9.9%）的EDTA 抗凝全血，進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控，每天每個(gè)濃度檢測1 個(gè)批次，每批次重復(fù)測定3 次，連續(xù)測定5 d，每個(gè)濃度水平累計(jì)檢測15 個(gè)結(jié)果，統(tǒng)計(jì)計(jì)算得出批內(nèi)不精密度和總不精密度。糖化血紅蛋白的允許總誤差（allowable total error，TEa）為8.0%，實(shí)驗(yàn)室允許批內(nèi)不精密度≤2.0%（1/4 TEa），實(shí)驗(yàn)室允許總不精密度≤2.67%（1/3 TEa）。

1.3.2 正確度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn) 選擇衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心提供的具有互換性的有證參考物質(zhì)，包括低〔（5.02±0.15）%〕、 中〔（6.86±0.15）%〕、 高〔（9.34±0.21）%〕三個(gè)糖化血紅蛋白濃度水平的EDTA 抗凝全血各100 μL。按糖化血紅蛋白檢測標(biāo)準(zhǔn)中的相關(guān)操作規(guī)程進(jìn)行檢測樣本的前處理及測定，進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控，每天每個(gè)濃度檢測1 個(gè)批次，每批次重復(fù)測定2 次，連續(xù)測定5 d，每個(gè)濃度水平累計(jì)檢測10 個(gè)結(jié)果，計(jì)算驗(yàn)證區(qū)間（VI），參考物質(zhì)的賦值在VI 范圍內(nèi)，表示正確度驗(yàn)證通過。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0 軟件對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)量資料用均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用百分比（%）表示，采用χ2 檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 糖化血紅蛋白檢測精密度驗(yàn)證結(jié)果

在TOSOH HLC-723 G8 型糖化血紅蛋白儀上檢測糖化血紅蛋白的結(jié)果顯示，低（5.0%）、高（9.947%）兩個(gè)糖化血紅蛋白濃度水平血樣的實(shí)測批內(nèi)不精密度分別為0.73%、0.519%，總不精密度分別為0.76%、0.779%，均在實(shí)驗(yàn)室允許范圍（批內(nèi)不精密度＜ 2.0%，總不精密度＜2.667%）內(nèi)，檢測精密度驗(yàn)證通過。詳見表1。

2.2 用參考物質(zhì)進(jìn)行糖化血紅蛋白檢測正確度驗(yàn)證的結(jié)果

低〔（5.02±0.15）%〕、中〔（6.86±0.15）%〕、高〔（9.34±0.21）%〕 三 個(gè) 糖 化 血 紅 蛋白濃度水平參考物質(zhì)的賦值分別落在VI 4.8 8 5% ～ 5.1 2 9%、6.7 2 8% ～ 7.1 9 4%、9.266% ～9.622% 范圍內(nèi)，檢測正確度驗(yàn)證通過。詳見表2。

表2 用參考物質(zhì)進(jìn)行糖化血紅蛋白檢測正確度驗(yàn)證的結(jié)果（%）

3 討論

1968 年，Ranbar 等[1-2]在糖尿病患者體內(nèi)的紅細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了異常血紅蛋白。此后，臨床上開始逐步了解了血紅蛋白與糖尿病的關(guān)系。現(xiàn)如今，糖化血紅蛋白已成為臨床上診斷、治療、監(jiān)測糖尿病的重要指標(biāo)。糖化血紅蛋白的穩(wěn)定性較強(qiáng)，不會(huì)受到一過性血糖升高/ 降低的影響[3-4]。美國臨床化學(xué)協(xié)會(huì)糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)和國際臨床化學(xué)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)聯(lián)合會(huì)糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)化工作組均建議將高效液相色譜法作為檢測糖化血紅蛋白的金標(biāo)準(zhǔn)[5]。有研究指出，離子交換高效液相色譜法具有高效、高靈敏度、高準(zhǔn)確度、操作簡便快捷等優(yōu)點(diǎn)。精密度和正確度是檢測系統(tǒng)重要的性能指標(biāo)。據(jù)統(tǒng)計(jì)，2000 ～2010年，臨床上檢測4% ～6% 濃度水平糖化血紅蛋白血樣的變異系數(shù)由7.0% 降至4.0%，檢測6% ～10% 濃度水平糖化血紅蛋白血樣的變異系數(shù)由5.0% ～5.5% 降至4.0%[6]。美國病理學(xué)家協(xié)會(huì)建議所有糖化血紅蛋白檢測方法的目標(biāo)變異系數(shù)均應(yīng)≤3.5%。其中，多數(shù)方法的目標(biāo)變異系數(shù)應(yīng)≤3.0%，少數(shù)方法的目標(biāo)變異系數(shù)應(yīng)≤2.0%。本研究的結(jié)果顯示，低（5.0%）、高（9.947%）兩個(gè)糖化血紅蛋白濃度水平血樣的實(shí)測批內(nèi)不精密度分別為0.73%、0.519%，總不精密度分別為0.76%、0.779%，均在實(shí)驗(yàn)室允許范圍（批內(nèi)不精密度＜ 2.0%，總不精密度＜ 2.667%）內(nèi)，檢測精密度驗(yàn)證通過。通過檢測具互換性有證參考物質(zhì)進(jìn)行檢測正確度驗(yàn)證的結(jié)果顯示，低〔（5.02±0.15）%〕、 中〔（6.86±0.15）%〕、 高〔（9.34±0.21）%〕三個(gè)糖化血紅蛋白濃度水平參考物質(zhì)的賦值分別落在VI 4.885% ～5.129%、6.728% ～7.194%、9.266% ～9.622% 范圍內(nèi)，檢測正確度驗(yàn)證通過。

綜上所述，用TOSOH HLC-723 G8 型糖化血紅蛋白儀檢測糖化血紅蛋白的精密度及正確度均符合相關(guān)要求。