腸道微生物群落結(jié)構(gòu)對凡納濱對蝦生長的影響

李婷婷，夏楓峰，油九菊，張平平，張禎祺，張向東，宋懷穎，蔡惠文，施 慧

（1.浙江海洋大學(xué)國家海洋設(shè)施養(yǎng)殖工程技術(shù)研究中心，浙江舟山 316022；2.舟山市海洋與漁業(yè)局，浙江舟山 316000；3.浙江海洋大學(xué)海洋科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，浙江舟山 316022；4.浙江海洋大學(xué)海洋與漁業(yè)研究所，浙江省海洋水產(chǎn)研究所，浙江舟山 316021）

凡納濱對蝦Litopenaeus vannamei，又名南美白對蝦，因其具有餌料需求低、抗病性強、適應(yīng)性強、營養(yǎng)價值高、經(jīng)濟價值高等優(yōu)點，在水產(chǎn)品市場占有重要地位[1]。腸道是對蝦營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的重要器官，對蝦腸道微生物群落在宿主營養(yǎng)代謝、免疫防御和生長發(fā)育起著關(guān)鍵作用[2]。因此，凡納濱對蝦腸道微生物在對蝦生產(chǎn)和疾病預(yù)防等方面的研究越來越多。

GUO Haipeng,et al[3]發(fā)現(xiàn)對蝦腸道有益菌增加會促進對蝦生長。HOSSAIN,et al[4]發(fā)現(xiàn)健康和受感染的對蝦在腸道菌群組成和豐度存在顯著差異。FRANK,et al[5]認為腸道細菌的失衡可能引起腸炎。核心微生物是影響對蝦腸道微生物結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)鍵因素。XIONG Jinbo,et al[6]發(fā)現(xiàn)對蝦腸道有益核心微生物組是紅桿菌科和黃桿菌科。YAO Zhiyuan,et al[7]發(fā)現(xiàn)健康對蝦腸道核心微生物是紅桿菌科，患病對蝦腸道核心微生物是弧菌科。吳金鳳等[8]從對蝦腸道中選出61 種指示物種來區(qū)分對蝦的健康狀態(tài)。

目前在對蝦腸道微生物群落結(jié)構(gòu)與對蝦生長關(guān)系的研究中，大部分集中在對蝦健康與疾病方面，而有關(guān)對蝦產(chǎn)量和肌肉品質(zhì)方面的研究鮮有報道，且對蝦腸道微生物群落結(jié)構(gòu)中關(guān)鍵微生物的種類和功能尚待挖掘。高通量測序技術(shù)[9]能夠可靠、全面地反映微生物群落組成基本特征，因此本研究采用高通量測序技術(shù)，對對蝦腸道的微生物群落結(jié)構(gòu)進行分析，探討生態(tài)基[10]和凈水劑“格義凈”在調(diào)節(jié)對蝦養(yǎng)殖環(huán)境，優(yōu)化凡納濱對蝦腸道微生物群落結(jié)構(gòu)中的作用，分析凡納濱對蝦腸道微生物群落結(jié)構(gòu)對對蝦生長、肌肉品質(zhì)的具體影響，從而為提高凡納濱對蝦養(yǎng)殖產(chǎn)量和質(zhì)量提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 養(yǎng)殖管理與實驗設(shè)計

本研究在舟山市某水產(chǎn)養(yǎng)殖場開展，該養(yǎng)殖場單個實驗養(yǎng)殖塘面積9 m2，深度0.9 m，進水符合對蝦養(yǎng)殖技術(shù)規(guī)范水質(zhì)要求，且增氧設(shè)施及排水系統(tǒng)完備。實驗時間為2021 年8 月1 日—2021 年10 月30 日，養(yǎng)殖周期為90 d，分為3 個階段：0～30 d 為養(yǎng)殖前期、30～60 d 為養(yǎng)殖中期、60～90 d 為養(yǎng)殖后期。養(yǎng)殖水溫為25～31 ℃，鹽度為26～30，pH 為7.6～8.6，溶解氧為4.37～7.14 mg·L-1。蝦苗初始體長2.92±0.04 cm、初始體重0.23±0.004 g，養(yǎng)殖密度為667 尾·m-2。每天進行4 次餌料投喂（06:00、10:00、14:00、18:00）和1 次排換水（05:00），及時記錄飼料投喂量，并隨時觀察對蝦生長狀況。

實驗設(shè)計：本實驗共設(shè)1 個對照組和3 個實驗組，其中每個組設(shè)置2 個平行。對照組C 以傳統(tǒng)養(yǎng)殖方式進行管理：養(yǎng)殖前中期每隔5 d 投放3 mg·L-1EM 菌和微藻膏，養(yǎng)殖后期每隔3 d 投放3 mg·L-1EM 菌和微藻膏。實驗組B 相較于C 組減半投放EM 菌和微藻膏，同時在養(yǎng)殖池底部布設(shè)生態(tài)基。生態(tài)基通過系附墜石均勻得分布在池底，密度為0.18 m·2m-3。實驗組P 在養(yǎng)殖過程中投加凈水劑“格義凈”，即養(yǎng)殖前中期每隔5 d 投放0.2 mg·L-1格義凈（1.8 g），養(yǎng)殖后期每隔3 d 投放0.2 mg·L-1格義凈（1.8 g）。實驗組D 除了按照P 組的方法投放凈水劑外，同時在池底部布設(shè)生態(tài)基，密度為0.18 m·2m-3。

1.2 樣品采集與指標(biāo)測定

1.2.1 樣品采集

（1）對蝦采集：于養(yǎng)殖實驗開始和結(jié)束后，每組隨機撈取50 尾對蝦稱重。實驗結(jié)束后每組隨機撈取1 kg對蝦進行肌肉營養(yǎng)成分測定，最后各組撈出全部對蝦統(tǒng)計對蝦產(chǎn)量。

（2）微生物采集：養(yǎng)殖結(jié)束前5 d，每天每組隨機撈取20 尾對蝦，在無菌條件下取對蝦腸道及內(nèi)容物。每天從B 組養(yǎng)殖試驗池剪取生態(tài)基（0.004 5 m2），在無菌條件下震蕩富集微生物濾膜，微生物樣品均放-80 ℃冰箱冷凍保存，待進行16S rDNA 測序。

1.2.2 指標(biāo)測定

（1）對蝦生長指標(biāo)測定

根據(jù)實驗測得的各組對蝦的初始和末尾平均體質(zhì)量，計算對蝦增重率（weight gain rate,WGR），特定生長率（specific growth rate,SGR），餌料系數(shù)（feed conversion rate,FCR），存活率（survival rate,SR），并統(tǒng)計各組對蝦產(chǎn)量（yield,Y）。公式見（1）-（4）:

式中：W0為對蝦初均重，g；W1為對蝦末均重，g；t 為實驗天數(shù)，d；F 為飼料投喂總量，g；Wt0為對蝦初總重，g；Wt1為對蝦末總重，g；a 為對蝦初尾數(shù)，ind.；b 為對蝦末尾數(shù)，ind.。

（2）對蝦肌肉指標(biāo)測定

將各組對蝦甲殼剝離，肌肉搗碎、打漿混合，105 ℃烘干至恒重，采用《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)》[11]方法測定對蝦肌肉中一般營養(yǎng)成分（水分、粗灰分、粗蛋白、粗脂肪）、氨基酸組成、脂肪酸組成。

（3）高通量測序及序列分析

提取對蝦腸道和生態(tài)基微生物總DNA，以16S rDNA 基因V3+V4 區(qū)引物擴增DNA，采用Illumina MiSeq 測序平臺對擴增產(chǎn)物進行測序。用Vsearch 軟件[12]，按照97%相似度將有效序列進行OTU（operational taxonomic unit）聚類，分別從門（Phylum）、屬（Genus）分類水平上統(tǒng)計各樣本微生物群落組成及相對豐度。采用mothur 軟件，基于OTU 數(shù)目計算Chao1[13]、Shannon、Simpson[14]、Coverage[15]等多樣性指數(shù)，用R 軟件繪制稀釋曲線和PCA 圖。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析方法

通過SPSS 26.0 統(tǒng)計軟件對對蝦生長指標(biāo)、微生物組成相對豐度、Alpha 多樣性指數(shù)等數(shù)據(jù)進行單因素方差分析（One-Way ANOVA），試驗數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（mean±SD）表示。在滿足方差齊性的條件下對數(shù)據(jù)進行Turkey 多重比較，若不滿足方差齊性，則采用Dunnett-T3 檢驗法對數(shù)據(jù)進行多重差異性比較，P＜0.05 表示差異顯著。

2 結(jié)果與討論

2.1 對蝦生長狀況

研究發(fā)現(xiàn)不同處理組凡納濱對蝦生長狀況具有差異（表1）。實驗組對蝦增重率和特定生長率均高于C組，B、D 組產(chǎn)量均高于C 組，餌料系數(shù)均低于C 組。其中，B 組的對蝦增重率、特定生長率以及總產(chǎn)量最高，分別比C 組提高11.22%、2.80%、2.45%，且B、D 組的餌料系數(shù)最低，較C 組降2.27%。

表1 不同處理組凡納濱對蝦生長狀況Tab.1 Growth status of L.vannamei in different treatment groups

2.2 對蝦肌肉營養(yǎng)組成

對蝦肌肉中的蛋白質(zhì)和脂肪含量是評價蝦類營養(yǎng)價值的重要指標(biāo)[16]。為了進一步評估不同處理組對蝦肌肉品質(zhì)和營養(yǎng)價值，分別對對蝦肌肉氨基酸和脂肪酸組成進行了詳細分析。

2.2.1 氨基酸組成

氨基酸是構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單位，氨基酸的種類和含量決定對蝦類肌肉營養(yǎng)價值和鮮味程度[17]。不同處理組對蝦肌肉中氨基酸組成相同，但含量不同（表2）。B 組對蝦肌肉中總氨基酸總量（ΣTAA）、必需氨基酸總量（ΣEAA）、非必需氨基酸總量（ΣNEAA）、鮮味氨基酸總量（ΣDAA）均高于其他組，具體表現(xiàn)在賴氨酸（6.44%）、苯丙氨酸（3.62%）、蘇氨酸（3.39%）、纈氨酸（3.24%）等必需氨基酸，以及谷氨酸（14.82%）、天門冬氨酸（9.10%）、甘氨酸（9.01%）、丙氨酸（5.35%）等鮮味氨基酸含量最高。本研究結(jié)果表明B 組對蝦肌肉中營養(yǎng)價值和鮮味最高。

表2 不同處理組凡納濱對蝦肌肉中的氨基酸含量（%）Tab.2 Amino acid content in L.vannamei muscle in different treatment groups（%）

2.2.2 脂肪酸組成

脂肪酸是細胞膜的主要組成部分，脂肪酸的種類和含量對對蝦肌肉營養(yǎng)價值和鮮味多汁性具有決定性意義。不同處理組對蝦肌肉中脂肪酸組成相同，但含量有差異（表3）。B 組對蝦肌肉中總n-3 多不飽和脂肪酸含量（25.21%）最高，具體包括EPA（12.67%）、EPA+DHA（24.27%）等含量高于其他組。P 組總n-6 多不飽和脂肪酸含量（24.83%）最高，具體包括亞油酸（22.33%）、花生三烯酸（1.69%）、花生四烯酸（2.51%）等含量高于其他組。本研究結(jié)果表明實驗組對蝦肌肉營養(yǎng)價值和鮮味多汁性高于C 組。

表3 不同處理組凡納濱對蝦肌肉中脂肪酸含量（%）Tab.3 Fatty acid content in L.vannamei muscle in different treatment groups（%）

2.3 微生物群落結(jié)構(gòu)特征

腸道微生物群落結(jié)構(gòu)與凡納濱對蝦生長密切相關(guān)[18]。本研究連續(xù)5 d 對對照組C、實驗組B、實驗組P對蝦腸道微生物和B 組養(yǎng)殖塘中掛設(shè)的生態(tài)基（S）附著微生物進行測序，分析其微生物群落結(jié)構(gòu)及多樣性特征，探討腸道微生物群落結(jié)構(gòu)對對蝦生長的影響。

2.3.1 微生物群落多樣性及穩(wěn)定性

應(yīng)用Illumina MiSeq 平臺對連續(xù)5 d 實驗獲取的各組對蝦腸道和生態(tài)基微生物樣品進行測序，并對獲得的原始序列進行質(zhì)控，共獲得1 494 508 條有效序列。根據(jù)測序結(jié)果對對蝦腸道微生物Alpha 多樣性指數(shù)Coverage、Chao1、Shannon、Simpson 進行計算。結(jié)果表明各處理組對蝦腸道Coverage 指數(shù)均接近于1.00（表4），說明各樣品測序覆蓋率高，測序數(shù)據(jù)量合理。各樣品的稀釋曲線均趨向飽和（圖1-a），進一步說明了數(shù)據(jù)的合理性。

圖1 不同處理組凡納濱對蝦腸道微生物多樣性分析（a.稀釋曲線；b.PCA 分析圖）Fig.1 Analysis of intestinal microbial diversity of L.vannamei in different treatment groups（a.rarefaction curve;b.PCA analysis）

Alpha 多樣性指數(shù)反映生物環(huán)境內(nèi)物種的豐富度、均勻度和多樣性，已有研究表明健康幼蝦多樣性指數(shù)顯著高于患病成蝦[19]。本研究中顯示各組對蝦腸道微生物Alpha 多樣性指數(shù)沒有顯著性差異（P＞0.05），可能是因為各組對蝦處于相同生長階段并且健康狀況相似。所有實驗組的Chao1、Shannon、Simpson 指數(shù)平均值均高于C 組，其中，P 組的Chao1 指數(shù)最高（1 559.30±53.26），而B 組的Shannon 指數(shù)（8.54±0.05）和Simpson 指數(shù)（0.995±0.000 2）都是最高的（表4），說明實驗組B 的微生物種類最豐富，且種類分布也最均勻。PCA 分析可以反映樣本差異性[20]。如圖1-b 所示，C1、C3、P1 樣本與其他樣本距離相對較遠，說明C、P 組樣本之間離散程度較大，而B 組樣本之間更加緊湊，說明B 組連續(xù)5 d 樣本的差異性及變化程度小于其他組，表明B 組對蝦腸道微生物群落結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性高于其他組。B 組對蝦增重率、特定生長率和產(chǎn)量均高于其他組（表1），說明腸道微生物多樣性和穩(wěn)定性有利于調(diào)節(jié)微生物群落動態(tài)平衡，提高對蝦的抗病能力，改善對蝦生長狀況。

表4 不同處理組凡納濱對蝦腸道微生物Alpha 多樣性指數(shù)統(tǒng)計（n=5）Tab.4 Alpha diversity index of L.vannamei intestinal microbials in different treatment groups（n=5）

2.3.2 微生物群落結(jié)構(gòu)

本研究分別從門和屬分類水平上統(tǒng)計對蝦腸道和生態(tài)基附著微生物群落結(jié)構(gòu)組成與相對豐度（圖2）。首先，在門水平上，對蝦腸道微生物與生態(tài)基附著微生物組成相似，依次為擬桿菌門Bacteroidota、變形菌門Proteobacteria、厚壁菌門Firmicutes 和放線菌門Actinobacteriota（圖2-a），說明對蝦存在固有腸道微生物群落結(jié)構(gòu)[21]，但是各組樣品優(yōu)勢菌相對豐度有差異，其中，生態(tài)基表面擬桿菌門（45.61%±3.35%）、變形菌門（45.7%±2.21%）最高，實驗組P 對蝦腸道厚壁菌門（25.7%±4.49%）、放線菌門（5.41%±2.36%）最高，這可能和養(yǎng)殖環(huán)境與宿主的差異性有關(guān)，該結(jié)果與XUE Ming,et al[22]報道的健康的對蝦腸道微生物群落結(jié)構(gòu)組成及特點相同。在屬水平上，對蝦腸道優(yōu)勢菌屬和生態(tài)基表面優(yōu)勢菌屬沒有重疊。對蝦腸道優(yōu)勢菌屬相對豐度從高到低依次為鼠桿狀菌屬Muribaculaceae、擬桿菌屬Bacteroidia、普雷沃式菌屬Prevotella 和埃希氏-志賀氏菌屬Escherichia-Shigella（圖2-c）。生態(tài)基上的優(yōu)勢菌屬相對豐度從高到低依次為棲河菌屬Fluviicola、交替單胞菌屬Alteromonas、弧菌屬Vibrio、海洋桿形菌屬Thalassotalea（圖2-d）。孫振麗等[23]發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖水環(huán)境與對蝦腸道微生物群落有顯著差異，本研究結(jié)果表明生長環(huán)境對微生物的定殖具有選擇性。

圖2-a 顯示，B 組對蝦腸道擬桿菌門相對豐度（36.53%±1.25%）高于其他組，同時生態(tài)基表面擬桿菌門（45.61%±3.35%）顯著高于對蝦腸道（P＜0.05）（圖2-a）。圖2-c 顯示，各組對蝦腸道優(yōu)勢菌屬沒有顯著性差異，可能是因為對蝦生長階段和健康狀況相似。B 組對蝦腸道前3 位的優(yōu)勢菌屬均隸屬于擬桿菌門，相對豐度均高于其他組（P＞0.05）（圖2-c），同時生態(tài)基表面隸屬于擬桿菌門的棲河菌屬相對豐度（26.05%±4.79%）顯著高于其他菌屬（P＜0.05）（圖2-d）。上述結(jié)果說明B 組在相對于C 組減半投放EM 菌和微藻膏的情況下，受生態(tài)基擬桿菌相對豐度的較高影響，B 組對蝦腸道擬桿菌相對豐度提高。生態(tài)基上附著的大量微生物形成了對蝦的天然餌料，其表面附著的微生物結(jié)構(gòu)能夠直接影響對蝦腸道的微生物群落結(jié)構(gòu)，與裴鵬兵等[24]發(fā)現(xiàn)生態(tài)基能提高對蝦腸道微生物群落結(jié)構(gòu)豐富度和復(fù)雜性的結(jié)果相一致。

圖2 凡納濱對蝦腸道和生態(tài)基附著微生物門（a,b）、屬（c,d）水平群落結(jié)構(gòu)組成（n=5）Fig.2 Composition of microbial community in L.vannamei intestine and ecobase at the levels of phylum（a,b）,genus（c,d）（n=5）

腸道微生物與對蝦消化吸收、營養(yǎng)代謝、免疫防御等生理活動密切相關(guān)，核心微生物是影響對蝦腸道微生物群落結(jié)構(gòu)和功能的主導(dǎo)者[25]。有報道稱，擬桿菌是與機體營養(yǎng)代謝相關(guān)的重要菌群[26]，其中鼠桿狀菌屬[27]、擬桿菌屬[28]、普雷沃式菌屬[29]有助于宿主分解含氮物質(zhì)，調(diào)節(jié)血糖血脂，維持腸道穩(wěn)態(tài)。同時，擬桿菌可以通過直接合成氨基酸，分泌消化酶等方式促進對蝦氨基酸的合成，提高對蝦肌肉中氨基酸的含量。本研究結(jié)果顯示實驗組B 中的擬桿菌門屬的相對豐度高于其他組，說明B 組對蝦代謝能力和腸道內(nèi)穩(wěn)態(tài)優(yōu)于其他組。實驗組B 的對蝦增重率、特定生長率、產(chǎn)量和肌肉中氨基酸品質(zhì)高于其他組（表1、2），也印證了擬桿菌在對蝦生長中的作用。實驗組B 中，對蝦腸道微生物的多樣性、均勻度和穩(wěn)定性也是最優(yōu)的（表4，圖1），說明擬桿菌能夠調(diào)節(jié)腸道內(nèi)環(huán)境平衡，提高對蝦腸道結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性，維持對蝦正常的生命活動，促進對蝦優(yōu)良生長。

圖2-a 顯示，各實驗組對蝦腸道內(nèi)厚壁菌門、放線菌門相對豐度均高于生態(tài)基上的該兩類細菌，尤其是P 組，顯著高于生態(tài)基上附著菌群的豐度（P＜0.05），表明厚壁菌門、放線菌門在對蝦腸道中具有更強的定殖能力，這與腸道中具有更豐富的營養(yǎng)物質(zhì)有關(guān)。實驗組對蝦腸道厚壁菌門、放線菌門相對豐度均高于C組，其中P 組最高，分別占細菌總數(shù)的25.7%±4.49%和5.41%±2.36%（圖2-a）。GUO Haipeng,et al[3]發(fā)現(xiàn)飼料中C/N 比的增加與厚壁菌門、放線菌門的富集呈正相關(guān)，本研究也表明“格義凈”為對蝦提供碳源從而促進對蝦腸道中厚壁菌門、放線菌門的定殖。已有研究發(fā)現(xiàn)，厚壁菌門在宿主生長過程中參與蛋白質(zhì)、脂肪等復(fù)雜大分子有機物質(zhì)的轉(zhuǎn)化，為有機體提供營養(yǎng)和能量[30]。放線菌門可以降解淀粉和蛋白質(zhì)等化合物，產(chǎn)生多種抗生素、維生素酶，并抑制致病菌的活性[31]。本研究中所有實驗組的對蝦增重率及產(chǎn)量均高于C組，且餌料系數(shù)均低于C 組（表1），說明定殖在對蝦腸道的厚壁菌門和放線菌門有助于提高機體代謝潛力，促進對蝦飼料的消化與利用，降低餌料系數(shù)并提高對蝦產(chǎn)量[32]。

厚壁菌門和擬桿菌門在營養(yǎng)物質(zhì)代謝與吸收方面存在著相互促進的共生關(guān)系。BROWN,et al[30]發(fā)現(xiàn)患有肥胖小鼠腸道厚壁菌門與擬桿菌門比值（F:B）更高。圖2-b 顯示，各組對蝦的比值顯著高于S（P＜0.05），其中P 組（0.81±0.21）最高，同時P 組對蝦肌肉中n-6PUFA（24.83%）高于其他組（P＞0.05）（表3）。謝夢琪等[33]發(fā)現(xiàn)成蝦比值（0.55）高于幼蝦比值（0.47），顯示出成蝦更強的分解食物和吸收能量的能力，本研究結(jié)果也表明高F:B 會加強宿主腸道脂肪代謝和能量吸收，提高對蝦肌肉脂肪酸含量。

變形菌門是海水養(yǎng)殖環(huán)境和對蝦腸道中的細菌群體之一，包含大腸桿菌、沙門氏菌、弧菌和幽門螺桿菌等許多致病菌，是腸道微生物群落失調(diào)的標(biāo)志性菌群。楊坤杰等[34]發(fā)現(xiàn)變形菌門比例越高，對蝦生長面臨的疾病風(fēng)險越高。本實驗的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)（圖2-a），實驗組對蝦腸道變形菌門平均豐度均低于C 組（P＞0.05），說明致病菌對實驗組對蝦生長的危害相較對照組低。實驗組對蝦增重率以及特定生長率等均優(yōu)于C組（表4），說明實驗組對蝦生長狀況優(yōu)于對照組，表明降低變形菌門相對豐度有助于降低對蝦患病風(fēng)險，改善對蝦生長狀況。

對蝦腸道微生物結(jié)構(gòu)組成及穩(wěn)定性是影響宿主代謝能力和健康水平的重要因素。本研究表明優(yōu)化凡納濱對蝦腸道微生物結(jié)構(gòu)組成和穩(wěn)定性，提高擬桿菌門、厚壁菌門、放線菌門的相對豐度和厚壁菌門/擬桿菌門比值，不僅能夠促進宿主對氨基酸、脂肪酸等營養(yǎng)物質(zhì)的消化與吸收，還能夠抑制變形菌門等致病菌的繁殖，保護機體免受病原菌感染，促進對蝦生長和提高肌肉品質(zhì)。

3 結(jié)論

本研究采用Illumina 高通量測序技術(shù)，比較不同處理系統(tǒng)下凡納濱對蝦腸道微生物群落結(jié)構(gòu)對對蝦生長、肌肉品質(zhì)的具體影響，結(jié)論如下：

（1）實驗組對蝦增重率和特定生長率均高于C 組，B 組的對蝦增重率、特定生長率以及總產(chǎn)量最高，分別比C 組提高11.22%、2.8%和2.45%。實驗組對蝦肌肉品質(zhì)均高于C 組，其中，B 組的對蝦肌肉氨基酸含量最高，P 組脂肪酸含量高于其他組。

（2）對蝦腸道具有固定的微生物群落結(jié)構(gòu)，主要優(yōu)勢菌群包括擬桿菌門、變形菌門、厚壁菌門、放線菌門。腸道微生物的定殖易受環(huán)境影響，生態(tài)基的微孔結(jié)構(gòu)有助于促進擬桿菌門、厚壁菌門等有益菌的繁殖，從而影響到凡納濱對蝦腸道微生物結(jié)構(gòu)，以及厚壁菌門與擬桿菌門的比值（F:B）。

（3）改善凡納濱對蝦腸道微生物結(jié)構(gòu)組成和穩(wěn)定性，提高擬桿菌門、厚壁菌門等有益菌相對豐度和F:B 值，降低變形菌門相對豐度對促進對蝦消化吸收和營養(yǎng)代謝，降低對蝦患病風(fēng)險，促進對蝦生長和提高肌肉品質(zhì)有重要意義。