高效液相色譜-柱后衍生法測(cè)定蔬菜中克百威農(nóng)藥殘留量的不確定度評(píng)定

高強(qiáng)　孫榕　高升成　楊治彪　羅慧

摘要 ? ?通過高效液相色譜—柱后衍生法測(cè)定蔬菜中克百威殘留量，對(duì)測(cè)定過程中可能引入的不確定度進(jìn)行了分析和評(píng)定，建立了不確定度評(píng)定的數(shù)學(xué)模型，從影響不確定度的標(biāo)準(zhǔn)溶液、樣品前處理、儀器測(cè)量、數(shù)字修約等4個(gè)方面因素對(duì)不確定度分量進(jìn)行合成計(jì)算。結(jié)果表明，該方法在本實(shí)驗(yàn)室的合成擴(kuò)展不確定度UX=0.005 3 mg/kg，k=2。

關(guān)鍵詞 ? ?高效液相色譜—柱后衍生法;克百威;蔬菜;農(nóng)藥殘留;不確定度

中圖分類號(hào) ? ?TS207.5+3 ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 ? ?A

文章編號(hào) ? 1007-5739（2019）19-0101-02 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）

Evaluation ?of ?Uncertainty ?in ?Determination ?of ?Carbofuran ?Pesticide ?Residues ?in ?Vegetables ?by ?High ?Performance ?Liquid ?Chromatography-Post-Column ?Derivatization

GAO Qiang ? ?SUN Rong ? ?GAO Sheng-cheng ? ?YANG Zhi-biao ? ?LUO Hui

（Yulin Agricultural Products Testing Center of Shaanxi Province，Yulin Shaanxi 719000）

Abstract ? ?The determination of carbofuran residue in vegetables by high performance liquid chromatography-post-column derivatization method was carried out to analyze and evaluate the uncertainty introduced during the determination.The mathematical model of uncertainty evaluation was established.The uncertainty components were synthesized and calculated from four factors：standard solution，sample pretreatment，instrument measurement and digital repair.The results showed that the uncertainty of the synthetic extension of this method in our laboratory was UX=0.005 3 mg/kg，k=2.

Key words ? ?high performance liquid chromatography-post-column derivatization;carbofuran;vegetable;pesticide residue;uncertainty

1 ? ?材料與方法

1.1 ? ?儀器與試劑

Waters e2695高效液相色譜儀配FLR檢測(cè)器;柱后衍生裝置（美國(guó)Waters公司生產(chǎn)）;分析天平（美國(guó)Sartorius公司生產(chǎn)）;勻漿機(jī)（德國(guó)IKA公司生產(chǎn)）;氨基甲酸酯類農(nóng)藥克百威標(biāo)準(zhǔn)溶液，由農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所生產(chǎn)，濃度為100 μg/mL;乙腈、甲醇、二氯甲烷，均為色譜純;0.5 mol/L NaOH溶液、OPA稀釋液、鄰苯二甲醛、巰基乙醇，均為Pic-kering生產(chǎn);其他試劑均為分析純。

1.2 ? ?樣品前處理過程

1.2.1 ? ?提取。稱量25.00 g（m）樣品于150 mL燒杯中，加入50.0 mL乙腈（V1），勻漿后過濾到裝有5～7 g氯化鈉的100 mL具塞量筒，收集濾液40～50 mL，蓋上塞子，劇烈振蕩1 min，室溫靜置30 min，使乙腈和水相分層;移取10.0 mL乙腈相（V2）于50 mL燒杯中，80 ℃水浴蒸發(fā)近干，加入2 mL甲醇+二氯甲烷（1+99）溶解殘?jiān)黐1-2]。

1.2.2 ? ?凈化。氨基柱用4 mL甲醇+二氯甲烷（1+99）預(yù)洗平衡，加入上述凈化液，收集于25 mL燒杯中，用2 mL甲醇+二氯甲烷（1+99）洗燒杯過柱，并重復(fù)1次;將25 mL燒杯中凈化液50 ℃水浴氮吹近干，用甲醇準(zhǔn)確定容至2.50 mL（V3），過0.22 μm濾膜，待測(cè)[3-4]。

1.3 ? ?測(cè)定結(jié)果計(jì)算

用單點(diǎn)外標(biāo)法定量，試樣中被測(cè)農(nóng)藥殘留量按以下公式計(jì)算[5-6]：

式中：X為試樣中被測(cè)農(nóng)藥殘留量，單位為mg/kg，計(jì)算結(jié)果保留2位有效數(shù)字;Cs為標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，單位為mg/L;As為標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積;Ai為樣品被測(cè)農(nóng)藥的峰面積;V1、V2、V3、m在上文已注明。

1.4 ? ?測(cè)量不確定度分量來源及數(shù)學(xué)模型的建立

農(nóng)藥殘留檢測(cè)的不確定度分量來源包括以下7個(gè)方面：①重復(fù)測(cè)量引入的不確定度分量，用A類方法評(píng)定;②檢測(cè)設(shè)備引入的不確定度分量，用B類方法評(píng)定;③標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)引入的不確定度分量，包含有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和上機(jī)工作液配制;④環(huán)境條件引入的不確定度分量，當(dāng)檢測(cè)在標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的環(huán)境條件下進(jìn)行時(shí)，環(huán)境引入的不確定度可忽略不計(jì);⑤抽樣引入的不確定度分量，來樣檢測(cè)不考慮此分量;⑥數(shù)字修約引入的不確定度分量;⑦檢測(cè)人員操作引入的不確定度分量，受其熟練程度及工作經(jīng)驗(yàn)影響[7-8]。測(cè)量不確定度分量來源因果圖見圖1。

2 ? ?結(jié)果與分析

2.1 ? ?標(biāo)準(zhǔn)溶液引入的不確定度

2.1.1 ? ?標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。克百威標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度為100 μg/mL，擴(kuò)展不確定度為0.09 μg/mL，其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

2.6 ? ?合成相對(duì)擴(kuò)展不確定度

在95%置信概率水平下，取K=2，則：

UX95%=K×uX=2×5.3%=10.6%

2.7 ? ?合成擴(kuò)展不確定度

UX=0.050×10.6%=0.005 3（mg/kg）

3 ? ?結(jié)論與討論

通過分析高效液相色譜—柱后衍生法測(cè)定蔬菜中克百威殘留量各個(gè)步驟的不確定度發(fā)現(xiàn)，影響不確定度的因素主要為樣品前處理引入的不確定度，其次是儀器檢測(cè)引入的不確定度。因此，在檢測(cè)工作中應(yīng)抓住影響方法不確定度的主要因素，檢測(cè)人員要提高對(duì)前處理操作規(guī)范性的控制，設(shè)備管理員要做好儀器設(shè)備的檢定及期間核查工作，為進(jìn)一步提高檢測(cè)數(shù)據(jù)質(zhì)量提供參考。

4 ? ?參考文獻(xiàn)

[1] 祁光增，史海軍，侍金敏，等.高效液相色譜-柱后衍生法測(cè)定苦杏仁中黃曲霉毒素B1和B2的不確定度分析[J].農(nóng)業(yè)科技與信息，2019（3）：55-57.

[2] 李慧敏.常用玻璃量器容量測(cè)量結(jié)果的不確定度評(píng)定[J].中國(guó)計(jì)量，2019（1）：104-107.

[3] 蘇美玲，劉海旭，丁勇寶，等.氣相色譜法測(cè)定糧食中4種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的不確定度評(píng)定[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)，2018，9（21）：5618-5622.

[4] 方向斌，趙清華，包鳳琳，等.原子吸收法測(cè)定牛乳中鈣含量的不確定度[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)，2018，9（23）：6278-6282.

[5] 肖聰偉.超高效液相色譜質(zhì)譜法測(cè)定水產(chǎn)品中孔雀石綠和結(jié)晶紫殘留量的測(cè)量不確定度評(píng)定[J].現(xiàn)代食品，2018（22）：108-115.

[6] 王英，許利琴，嚴(yán)敏鳴，等.高效液相色譜法測(cè)定雞蛋中氟苯尼考?xì)埩袅康牟淮_定度研究[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊，2018（6）：28-29

[7] 吳云普，彭少娜，潘錦秀，等.氣相色譜法測(cè)定蔬菜中聯(lián)苯菊酯殘留量的不確定度[J].農(nóng)產(chǎn)品加工，2018（22）：46-48.

[8] 林景星，林勤，池輝.測(cè)量不確定度評(píng)定中幾個(gè)問題的探討[J].中國(guó)計(jì)量，2018（11）：81-85.

[9] 中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局，中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì).實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測(cè)：GB/T 27404-2008[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2008.

[10] 中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局，中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì).測(cè)量不確定度評(píng)定和表示：GB/T 27418-2017[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2017.

[11] 中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部.蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測(cè)定：NY/T 761-2008[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2008.

[12] 中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.常用玻璃量器：JJG 196-2006[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2006.