測(cè)定血型的方法有幾種

張杰靈

眾所周知，營養(yǎng)物質(zhì)依靠血液的輸送，才能保證身體各組織器官的營養(yǎng)供給。血型是臨床上對(duì)于血液特性的表達(dá)方式之一，主要有A型、B型、AB型和O型。父母和孩子之間的血型有著必然的關(guān)聯(lián)，所以這些特性也在臨床上為鑒定親子關(guān)系和為患者提供合適的血液輸送治療手段提供了參考。

血液鑒定的基本原理和常用方法

隨著臨床醫(yī)學(xué)的發(fā)展，可快速獲得患者血液類型鑒定結(jié)果的臨床檢測(cè)方法有很多，醫(yī)生可以根據(jù)患者的實(shí)際需求和檢測(cè)的目的，科學(xué)合理地進(jìn)行選擇。其實(shí)，不同血型鑒定方法的原理具有相似性，就是利用抗原抗體之間的反應(yīng)來獲得鑒定結(jié)果，因?yàn)椴煌难蜁?huì)在紅細(xì)胞膜上呈現(xiàn)出不同的抗原性，會(huì)與相應(yīng)的抗原體產(chǎn)生肉眼可見的凝集反應(yīng)。最為簡單的血型測(cè)定方法就是取兩滴血，分別放置在載玻片上，然后再使用抗A血清和抗B血清滴在載玻片上進(jìn)行血液觀察，判斷血液是否出現(xiàn)了肉眼可見的凝集反應(yīng)，由此來獲得血液鑒定結(jié)果。

常見的血型鑒定方法

玻片法

準(zhǔn)確的血型鑒定是臨床上保證患者安全輸血的關(guān)鍵一步。在比較發(fā)達(dá)的地區(qū)，通常直接采用儀器法來獲得血型鑒定結(jié)果；但經(jīng)濟(jì)相對(duì)落后的地區(qū)，可能仍然采用最為傳統(tǒng)的手工玻片法來進(jìn)行逐一的血型鑒定。利用玻片法進(jìn)行血型鑒定，有兩種方式，即正定型和反定型。不論哪種類型，一般都需要用蠟筆在玻片上進(jìn)行畫線標(biāo)記，正定型的左端當(dāng)中會(huì)加入抗B標(biāo)準(zhǔn)血清，中間則加入抗A標(biāo)準(zhǔn)血清，最右端則會(huì)加入Rh血清；反定型的最左端加入A型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞，中間則加入B型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞，最右端則加入O型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞。被檢查的標(biāo)本也有添加區(qū)別，正定型當(dāng)中加入被檢紅細(xì)胞，反定型當(dāng)中加入被檢血清，用肉眼直接觀察玻片上的血液反應(yīng)狀況。如果血液出現(xiàn)了明顯的凝集現(xiàn)象，可以直接被肉眼觀察到。從臨床研究結(jié)果來看，玻片法會(huì)存在一定的錯(cuò)檢概率。

造成血型鑒定結(jié)果錯(cuò)誤的原因主要有以下幾類：首先，可能是沒有及時(shí)確認(rèn)標(biāo)本，沒有保證標(biāo)本的合格性。其次，所用的器材不夠潔凈，沒有做好明確的區(qū)域標(biāo)記、反應(yīng)試劑的添加量以及濃度控制；包括實(shí)驗(yàn)室的室內(nèi)反應(yīng)溫度和光線等，也都會(huì)對(duì)于血型鑒定結(jié)果造成影響。此外，還存在一定的個(gè)體性差異，如添加的試劑和被測(cè)物的方位不一致，也會(huì)造成比較嚴(yán)重的錯(cuò)判。為了提高玻片法血型鑒定的準(zhǔn)確率，目前已采取盡可能規(guī)范的模式，對(duì)實(shí)驗(yàn)室的判讀標(biāo)準(zhǔn)作出了統(tǒng)一規(guī)范。從方法對(duì)比來看，被規(guī)范的玻片法血型鑒定方法非常適用于經(jīng)濟(jì)落后的地區(qū)，整個(gè)方法操作簡便，既經(jīng)濟(jì)實(shí)惠又實(shí)用，還能降低人為的血型錯(cuò)判，為安全輸血提供保障。

試管鑒定法

試管鑒定法是一種常見的血型鑒定方法，但是對(duì)于每日需要承接巨大檢測(cè)量的血型檢測(cè)機(jī)構(gòu)來說，需要考慮這種方法的缺點(diǎn)，即檢測(cè)操作過程煩瑣，不適合在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行大量血液標(biāo)本的檢測(cè)。試管鑒定法需要先準(zhǔn)備好三份20 ul的紅細(xì)胞懸液，然后每份加入不同的抗體血清，分別是抗A血清、抗D血清和抗B血清，之后將三個(gè)試管當(dāng)中的混合液混勻并離心，進(jìn)行顯微觀察。試管鑒定法是一種相當(dāng)經(jīng)典的血型鑒定手段，準(zhǔn)確率非常高，但由于檢測(cè)操作過程非常煩瑣，檢測(cè)結(jié)果會(huì)在一定程度上受人為因素的影響；且整個(gè)操作過程均由人工操作，所以可能對(duì)檢測(cè)人員造成危害，對(duì)環(huán)境也可能造成一定的污染。目前，臨床上經(jīng)常會(huì)將試管鑒定法與U型板法進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)試管鑒定法并不適用于每日大批量的血液標(biāo)本鑒定，而U型板法同樣具有很高的鑒定靈敏性和準(zhǔn)確性，已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于血站的大批量血型鑒定。將U型板法替代試管法進(jìn)行血型鑒定，能夠?qū)崿F(xiàn)樣本與試劑的合理分配，然后一次性快速震蕩，讓血清與血漿已經(jīng)形成的小血塊不會(huì)在震蕩過程中被輕易震散，從而根據(jù)U型板底部的血液凝集情況和凝集顆粒大小進(jìn)行血型判斷。

微柱凝膠法

微柱凝膠法的特點(diǎn)在于可以發(fā)展成為自動(dòng)化標(biāo)準(zhǔn)化的血型鑒定方法，且反應(yīng)結(jié)果相對(duì)來說可靠性較高，具有特異性強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)，目前已在許多的醫(yī)院和血站被廣泛使用。微柱凝膠法的基本原理是一些極其微小的凝膠顆粒構(gòu)成了濾網(wǎng)，然后在系統(tǒng)內(nèi)控制離心的條件下，將凝集的紅細(xì)胞和處于游離狀態(tài)的紅細(xì)胞分離開來，然后讀取它們分別形成的反應(yīng)圖譜，再通過系統(tǒng)的自動(dòng)化判讀裝置來判斷患者血型。簡單來說，微柱凝膠法借助的是分子篩的原理，凝膠卡當(dāng)中一般有正定型的抗血清，而反定型一般是需要自己加入反定型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞和受檢者血清或血漿的，然后利用分子篩的原理進(jìn)行篩選。如果抗原和抗體結(jié)合，就會(huì)凝聚在凝膠的表面，無法沉積；如果這兩者沒有發(fā)生結(jié)合反應(yīng)，那么紅細(xì)胞就會(huì)一路沉降到凝膠的底部，顯現(xiàn)為陰性。根據(jù)陰性或陽性的結(jié)果，就能判斷出患者的血型。微柱凝膠法全自動(dòng)血型建立系統(tǒng)具有以下特點(diǎn)：首先，能節(jié)約試劑的用量，準(zhǔn)確吸取標(biāo)本量，且血型鑒定結(jié)果的判讀易于標(biāo)準(zhǔn)化；具有較為穩(wěn)定的反應(yīng)結(jié)果圖譜，可以被合理地保存和拍照。通過微柱凝膠法進(jìn)行血型鑒定，只需要較少的標(biāo)本量，非常適合用于兒童血型的鑒定，且整個(gè)操作過程中，操作人員與血液直接接觸的概率大大降低，因此被感染上血源性疾病的概率也會(huì)大為下降，在一定程度上保障了實(shí)驗(yàn)人員的個(gè)人健康和安全。整個(gè)檢驗(yàn)過程中，可以用電腦來對(duì)于檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行管理，與其他的檢驗(yàn)設(shè)備進(jìn)行聯(lián)網(wǎng)操作，非常適用于現(xiàn)代化的管理設(shè)備，符合今后醫(yī)學(xué)發(fā)展的需求，大大節(jié)約了人力、物力和管理成本。

總而言之，隨著醫(yī)學(xué)水平的不斷發(fā)展，越來越多的先進(jìn)血型鑒定技術(shù)被投入使用。在臨床鑒定過程中，需要根據(jù)患者的實(shí)際情況，選擇合適的血型鑒定方法；同時(shí)需要逐步提高各種常用血型鑒定方法的檢測(cè)準(zhǔn)確度和穩(wěn)定性，力求通過快速的血型鑒定方法，保障患者的安全輸血，為后續(xù)疾病的治療提供幫助。