兩種抑菌劑對(duì)楊樹爛皮病的抑制作用研究

紀(jì)純陽

(遼寧省楊樹研究所，遼寧 蓋州 115213)

遼寧是東北地區(qū)楊樹的主要產(chǎn)地，楊樹栽培廣泛，品種繁多。近年來因受氣候和立地條件等因素的影響，一些地區(qū)沒有做到合理栽樹、生態(tài)功能脆弱，導(dǎo)致楊樹病蟲害發(fā)生嚴(yán)重，給林業(yè)生產(chǎn)造成巨大損失，威脅著楊樹用材林和生態(tài)林的發(fā)展[1-2]。

楊樹爛皮病又稱腐爛病，通常分為干腐型和枝枯型。干腐型主要發(fā)生于主干、大枝和分杈處，發(fā)病初期病斑呈暗褐色、水漬狀，后期在病斑上長出許多針狀黑色小突起，即分生孢子器；枝枯型主要發(fā)生在苗木、幼樹及大樹的枝條，發(fā)病初期病斑呈暗灰色，后期散生許多黑色小點(diǎn)，分生孢子器[3-4]。病原有性階段為污黑腐皮殼(ValsasordidaNit.)，無性階段為金黃殼囊孢菌(Cytosporachrysosperma(Pers.) Fr.)[5]。爛皮病是楊樹重要的枝干病害之一[6]，如發(fā)生日灼、凍害、干旱等不利于楊樹生長環(huán)境條件，就會(huì)引起楊樹干部創(chuàng)傷、樹勢衰弱、爛皮病大面積發(fā)生，導(dǎo)致被害樹木樹勢衰弱，甚至枯死，嚴(yán)重時(shí)造成楊樹大片死亡[7-8]。

楊樹病蟲害常采用化學(xué)防治和生物防治的方法，選取廣譜抑菌劑百菌清和生物抑菌劑中生菌素兩種藥劑，通過室內(nèi)抑菌試驗(yàn)研究其對(duì)楊樹爛皮病病害病原菌抑制作用，為楊樹爛皮病病害防治提供一定的理論基礎(chǔ)。

1 試驗(yàn)材料

1.1 菌株

楊樹爛皮病病原菌：購自中國林業(yè)科學(xué)院林業(yè)菌種保存中心，編號(hào)為88513。

1.2 抑菌劑

有效成分3%中生菌素(江西正邦作物保護(hù)有限公司)，有效成分75%百菌清(利民化學(xué)有限責(zé)任公司)。

2 試驗(yàn)方法

2.1 馬鈴薯培養(yǎng)基制備

取新鮮去皮馬鈴薯200 g，切成小塊，加適量水放置于微波爐上加熱至沸騰，持續(xù)加熱25 min后用八層紗布過濾，棄濾渣，將濾液定容至1 L，加入20 g葡萄糖、20 g瓊脂，用玻璃棒攪拌至混勻溶解，均勻分裝于三角瓶中高壓滅菌備用[9-10]。

2.2 帶藥培養(yǎng)基制備PHam

稱取不同質(zhì)量的百菌清和中生菌素藥劑，加入無菌水充分溶解，再加入到滅菌冷卻至40 ℃左右的馬鈴薯培養(yǎng)基中，使藥劑在培養(yǎng)基里的終濃度依次是稀釋400、600、800、1000倍液，混合均勻后倒入無菌平皿里，待培養(yǎng)基冷卻后備用，以加等量無菌水的培養(yǎng)基作為對(duì)照，每組處理5次重復(fù)[11-13]。

2.3 接種

在無菌條件下用5 mm無菌打孔器在活化的楊樹爛皮病病原菌邊緣打孔，用無菌接種針挑取完整菌片，接種至帶藥培養(yǎng)基中， 置于25 ℃生物培養(yǎng)箱倒置培養(yǎng)，當(dāng)對(duì)照菌絲長滿整個(gè)培養(yǎng)基時(shí)終止生長[14-15]。

2.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用生長速率法測定菌絲生長抑制率，每隔12 h觀察菌絲的生長情況，并用十字交叉法測定菌絲生長直徑，取各處理測量的平均值[16-17]。按下邊公式計(jì)算菌絲生長抑制率,并用DPS18.10高級(jí)版LDS法進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，得出結(jié)論。

3 結(jié)果與分析

3.1 百菌清對(duì)楊樹爛皮病病原菌菌絲生長的影響

楊樹爛皮病病原菌在對(duì)照培養(yǎng)基上生長較快，而在含百菌清藥劑各培養(yǎng)基上生長緩慢。當(dāng)培養(yǎng)8 d時(shí)，對(duì)照菌絲已生長至平皿邊緣，各處理菌絲生長抑制率見表1，相應(yīng)菌絲生長情況見圖1。當(dāng)百菌清稀釋1000倍液時(shí)，抑制率為78.81%，當(dāng)稀釋600倍液時(shí)，抑制率達(dá)到85.04%，且各處理菌絲生長直徑在P<0.05水平上存在顯著性差異。從圖1可以看出，對(duì)照菌絲生長至8 d時(shí)，菌絲已延伸至平皿的邊緣部位，且菌絲為白色，中間略帶少量黃色，說明產(chǎn)生少量孢子；而各處理菌絲向外延伸很小，且菌絲均為白色，未產(chǎn)生孢子。隨著百菌清藥劑稀釋倍數(shù)的減小(藥劑濃度增大)，抑制率逐漸增大。

表1 百菌清對(duì)對(duì)楊樹爛皮病菌菌絲生長的抑制作用

圖1 百菌清對(duì)楊樹爛皮病的抑菌效果

3.2 中生菌素對(duì)楊樹爛皮病病原菌菌絲生長的影響

楊樹爛皮病病原菌在對(duì)照培養(yǎng)基上生長較快，而在含中生菌素藥劑各培養(yǎng)基上生長緩慢。當(dāng)培養(yǎng)8 d時(shí)，對(duì)照菌絲已生長至平皿邊緣，各處理菌絲生長抑制率見表2，相應(yīng)菌絲生長情況見圖2。當(dāng)中生菌素稀釋1000倍液時(shí)，抑制率為79.77%，當(dāng)稀釋800倍液時(shí)，抑制率達(dá)到85.12%。且各處理菌絲生長直徑在P<0.05水平上存在顯著性差異。從圖2可以看出，對(duì)照菌絲培養(yǎng)至8 d時(shí)菌絲生長到平皿邊緣，且白色菌絲中間略帶少量黃色菌絲，產(chǎn)生少量孢子；而各處理菌絲向外延伸更小，且菌絲均為白色，未產(chǎn)生孢子。隨著中生菌素藥劑稀釋倍數(shù)的減小(藥劑濃度增大)，抑制率逐漸增大。

表2 中生菌素對(duì)楊樹爛皮病菌菌絲生長的抑制作用

圖2 中生菌素對(duì)楊樹爛皮病的抑菌效果

3.3 兩種藥劑對(duì)楊樹爛皮病抑菌作用比較

以上兩組抑菌試驗(yàn)中，相同稀釋倍數(shù)的兩種抑菌劑對(duì)楊樹爛皮病的抑菌效果百菌清低于中生菌素，其中百菌清600倍稀釋液對(duì)楊樹爛皮病的抑制率為85.04%，而中生菌素800倍稀釋液對(duì)楊樹爛皮病的抑制率為85.12%。所以證實(shí)百菌清和中生菌素對(duì)楊樹爛皮病都有較好抑菌作用，但中生菌素的抑菌效果要高于百菌清。

4 結(jié)論與討論

研究選取百菌清和中生菌素兩種化學(xué)藥劑，研究它們對(duì)楊樹爛皮病病原菌的抑制作用。通過室內(nèi)抑菌試驗(yàn)證實(shí)兩種藥劑對(duì)楊樹爛皮病有較好的抑菌效果，并且抑制作用隨著稀釋倍數(shù)的減小(藥劑濃度增大)，抑制效果明顯增加。從藥劑的使用量和防治效果綜合考慮，百菌清對(duì)楊樹爛皮病的最適抑制稀釋倍數(shù)為600倍液，中生菌素對(duì)楊樹爛皮病的最適抑制稀釋倍數(shù)為800倍液。

試驗(yàn)中選用的百菌清為廣譜抑菌劑，主要是破壞真菌的新陳代謝，防治真菌侵染蔓延，具有粘著在植物表面、不易被雨水沖刷、藥效期長等特點(diǎn)。使用時(shí)要按照規(guī)定的劑量使用，濃度偏高會(huì)發(fā)生藥害。中生菌素是一種新型生物發(fā)酵抑菌劑，能抑制菌體蛋白質(zhì)的合成，阻止孢子萌發(fā)，破壞病菌繁殖機(jī)能，導(dǎo)致菌體死亡。將兩種藥劑對(duì)楊樹爛皮病的抑菌作用進(jìn)行比較證實(shí)了中生菌素的抑菌效果要高于百菌清，為楊樹爛皮病的生物防治提供一定的理論基礎(chǔ)，為中生菌素在林業(yè)病蟲害防治中的應(yīng)用提供理論支持。