4種酰胺類合成大麻素的氣相色譜-質(zhì)譜檢驗(yàn)方法研究*

李 娜，王繼芬，張 瑛，胡 琨，李 鵬

（1.中國(guó)人民公安大學(xué) 偵查學(xué)院，北京 100038；2.德州市公安局 物證鑒定研究中心，山東 德州 253000；3.北京市公安局 司法鑒定中心，北京 100192）

新精神活性物質(zhì)（New psychoactive substances，NPS）又稱“第三代毒品”或者實(shí)驗(yàn)室毒品，是指沒(méi)有被國(guó)際公約所管制但對(duì)公眾健康造成危害的具有精神活性作用的物質(zhì)[1,2]。合成大麻素（Synthetic cannabinoids，SCs）是新精神活性物質(zhì)中種類最多，濫用最嚴(yán)重的一類[3,4]。合成大麻素是人工合成的內(nèi)源性大麻素CB1和CB2受體的激動(dòng)劑，它與大麻素受體結(jié)合，吸食后往往能產(chǎn)生類似于天然大麻甚至是更強(qiáng)烈的快感，也更易成癮[5,6]。而快速的技術(shù)創(chuàng)新，銷售方式的靈活性，外觀的迷惑性，使之易逃脫司法監(jiān)管，又因其價(jià)格低廉、隱蔽性強(qiáng)、不易檢測(cè)，逐步成為了傳統(tǒng)毒品的替代品，這導(dǎo)致合成大麻素在全球范圍內(nèi)迅速蔓延，危害日益嚴(yán)重。

合成大麻素自2008年首次在草藥混合物中被檢測(cè)到以來(lái)，世界各地陸續(xù)出現(xiàn)關(guān)于它的報(bào)道。目前，合成大麻素類名稱多樣，有K2、Genie（精靈）、Zohai（佐海）、迷幻鼠尾草、音樂(lè)小草、歡樂(lè)草等，其有效成分即為合成大麻素[7]。物質(zhì)結(jié)構(gòu)的多樣性給法醫(yī)和臨床毒理學(xué)家?guī)?lái)了持續(xù)的挑戰(zhàn)。對(duì)于合成大麻素的管制，各國(guó)采取的方式也不盡相同：日本、英國(guó)、美國(guó)等國(guó)家采用同系物法案[8]，之前我國(guó)采用的是逐一列舉法進(jìn)行管制[9]。但在2021年5月11日，國(guó)家禁毒辦召開(kāi)新聞會(huì)，公布將整類合成大麻素類物質(zhì)和氟胺酮等18種新精神活性物質(zhì)列為毒品進(jìn)行管制，于2021年7月1日施行。我國(guó)成為全球第一個(gè)對(duì)合成大麻素整類列管的國(guó)家。

酰胺類合成大麻素是指具有酰胺結(jié)構(gòu)的吲哚或吲唑類的合成大麻素。這類物質(zhì)通常結(jié)構(gòu)類似，通過(guò)改變或者修飾官能團(tuán)，可以得到大量性質(zhì)相近的物質(zhì)，使合成大麻素類毒品種類激增。近期5F-MDMBPICA等在世界范圍內(nèi)較為流行[10]，國(guó)內(nèi)查獲該類物質(zhì)的報(bào)道也屢見(jiàn)不鮮，及時(shí)準(zhǔn)確地對(duì)其進(jìn)行鑒定識(shí)別，具有必要性，能夠精準(zhǔn)打擊販毒者，拯救吸毒人員；在案件偵辦過(guò)程中，能為辦案部門提供偵查方向；在實(shí)驗(yàn)室階段，又能為類似的合成大麻素的檢驗(yàn)提供方法參考。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器和試劑

1300/ISQ LT型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（Thermo Fisher美國(guó)）；移液器（EppendorfAG美國(guó)）；高速冷凍離心機(jī)（Thermo Fisher美國(guó)）；高速振蕩機(jī)（上海愛(ài)朗儀器有限公司）。

甲醇、乙腈均為色譜純，德國(guó)Merk公司。

標(biāo)準(zhǔn)品5F-MDMB-PICA、MDMB-CHMINACA、5F-EMB-PICA和AMB-FUBINACA（法庭毒物分析公安部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供），具體信息見(jiàn)表1。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

單一標(biāo)準(zhǔn)溶液 準(zhǔn)確稱量4種合成大麻素的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)各10mg，分別置于10mL的容量瓶中，加入乙腈充分溶解并稀釋至刻度，配制成1mg·mL-1的單一標(biāo)準(zhǔn)溶液。

混合標(biāo)準(zhǔn)溶液 準(zhǔn)確移取4種合成大麻素的單一標(biāo)準(zhǔn)溶液各1mL，置于10mL的容量瓶中，加入乙腈充分溶解并稀釋至刻度，配制成0.1mg·mL-1的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.3 色譜質(zhì)譜條件

氣相（GC）條件 色譜柱TG-5MS毛細(xì)管柱（30m×0.25mm×0.25μm）；

程序升溫 起始溫度200℃，以20℃·min-1的速率升溫至280℃，保持16min；

載氣：高純He（純度＞99.999%），流速：1.0mL·min-1，進(jìn)樣口溫度：280℃；

進(jìn)樣方式：分流進(jìn)樣，分流比是20∶1；進(jìn)樣量為1μL；溶劑延遲3min。

質(zhì)譜（MS）條件 電離源：EI源；電離能：70eV；接口溫度：250℃；離子源溫度：230℃；掃描模式：scan；掃描范圍：35～500amu。

2 結(jié)果與討論

2.1 4種合成大麻素的檢測(cè)結(jié)果

使用該方法進(jìn)行分析，4種合成大麻素均可檢測(cè)到，并有較好的分離。標(biāo)準(zhǔn)溶液的總離子流圖、質(zhì)譜圖分別見(jiàn)圖1、2。由于合成大麻素類新精神活性物質(zhì)多為結(jié)構(gòu)修飾而來(lái)，一些物質(zhì)甚至互為同分異構(gòu)體，具有相同或相近的特征碎片離子。在分子量接近，特征碎片離子也十分相似的前提下，僅靠特征碎片定性較為困難，必須結(jié)合保留時(shí)間，綜合進(jìn)行分析。

圖1 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的總離子流（TIC）色譜圖（0.1mg·mL-1）Fig.1 TIC chromatogram of mixed standard solution

圖2 4種常見(jiàn)合成大麻素在全掃描模式下的質(zhì)譜圖Fig.2 Mass spectyums of 4 synthetic cannabinoids in full scan mode

2.2 色譜條件的選擇

色譜柱 本實(shí)驗(yàn)采用TG-5MS弱極性色譜柱。在多數(shù)毒品和理化實(shí)驗(yàn)室，氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀均采用TG-5MS或其等效柱，如島津DB-5MS，適用于大多數(shù)毒品樣品的檢測(cè)，故本實(shí)驗(yàn)采用TG-5MS毛細(xì)管柱。

色譜初始溫度、升溫速率 考察初始溫度100、150和200℃，升溫速率5、10和20℃·min-1，在盡可能分離目標(biāo)物和縮短檢測(cè)時(shí)間的綜合考量下，以200℃為初始溫度，20℃·min-1升溫至280℃，保持16min，分析總時(shí)長(zhǎng)為20min，此區(qū)間各目標(biāo)物分離良好，4種合成大麻素的保留時(shí)間和特征離子碎片見(jiàn)表2。

表2 4種合成大麻素的保留時(shí)間和特征離子碎片Tab.2 Retention time and characteristic ion fragments of 4 synthetic cannabinoids

2.3 線性范圍

檢出限（LOD）分別配制濃度為1、2、5、8、10、15、20、25μg·mL-1的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，以信噪比（S/N≥3）為檢出限，進(jìn)行GC-MS分析，記錄各目標(biāo)物峰面積。

線性回歸方程 將4種合成大麻素的單一標(biāo)準(zhǔn)溶液分別稀釋為10、20、30、50、100、200、500μg·mL-1，每個(gè)濃度點(diǎn)進(jìn)樣3次，取面積的平均值y對(duì)質(zhì)量濃度c（μg·mL-1）進(jìn)行線性回歸，得到4種目標(biāo)物的回歸方程：y=ax+b，在20～500μg·mL-1范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r2在0.991～0.997之間，線性關(guān)系良好。4種合成大麻素的線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)和檢出限見(jiàn)表3。

表3 線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)和檢出限Tab.3 Linear regression equation,correlation coefficient and detection limit

2.4 精密度測(cè)定

配制含有4種合成大麻素的標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度覆蓋低、中、高3個(gè)區(qū)間，用所建立的方法進(jìn)行精密度分析。1天內(nèi)早、中、晚各分析1次，共計(jì)3次，測(cè)定日內(nèi)精密度；連續(xù)分析5d，測(cè)定4種目標(biāo)物的日間精密度。

表4 日內(nèi)和日間精密度Tab.4 Intra-day precision and daytime precision

3 案例應(yīng)用

2021年6月15日，某縣公安局接到舉報(bào)稱，某男子在其轄區(qū)內(nèi)兜售電子煙油，有人吸食后出現(xiàn)頭暈、惡心、迷糊，甚至有幻覺(jué)出現(xiàn)的癥狀，疑似含有毒品成分。民警將其送往該市公安局物證鑒定研究中心對(duì)其成分進(jìn)行檢驗(yàn)。鑒定人員利用該方法對(duì)其進(jìn)行檢驗(yàn)，檢材取20μL，用甲醇稀釋100倍，供GCMS分析，和標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行對(duì)照，保留時(shí)間和特征離子碎片一致，確定該電子煙油中含有MDMB-4en-PINACA和5F-MDMB-PICA兩種合成大麻素成分，結(jié)果見(jiàn)圖3。

圖3 檢材總離子流（TIC）色譜圖Fig.3 TIC chromatogram of a sample solution

由圖3可知，這和近期全球范圍內(nèi)較為流行的合成大麻素種類相吻合，證實(shí)了方法的可靠性。此方法用于實(shí)際辦案當(dāng)中，簡(jiǎn)便、快捷，既可為偵查人員提供偵查方向，也可為案件訴訟提供法庭證據(jù)，并為毒品實(shí)驗(yàn)室的合成大麻素類的檢驗(yàn)工作提供了方法參考。

4 結(jié)論

針對(duì)4種酰胺類合成大麻素，建立了GC-MS定性定量檢驗(yàn)方法，考察了其色譜條件，并進(jìn)行了方法學(xué)驗(yàn)證。將建立氣相色譜質(zhì)譜的方法應(yīng)用于實(shí)際案例當(dāng)中，能夠檢測(cè)出繳獲樣品中摻有的合成大麻素成分。該方法前處理簡(jiǎn)單，分析時(shí)間較短，能夠滿足基層的日常辦案需要。在合成大麻素等新精神活性物質(zhì)泛濫愈演愈烈，隱約有取代傳統(tǒng)毒品的趨勢(shì)下，及時(shí)準(zhǔn)確地識(shí)別和檢測(cè)，為打擊毒品犯罪提供了極大地便利，是禁毒工作必不可少的環(huán)節(jié)。