慢性蕁麻疹伴AD患兒脂氧素A4水平變化及臨床意義

金宛宛+喻蘇婷+周鵬飛+等

[摘要] 目的 探討兒童慢性蕁麻疹伴AD患兒血漿脂氧素A4水平，分析其與疾病嚴(yán)重程度的相關(guān)性。 方法 選取2012年6月～2014年6月我院收治慢性蕁麻疹患兒36例、AD患兒32例、慢性蕁麻疹伴AD患兒31例，正常對照患兒30例，采集患者外周靜脈血分離血漿，應(yīng)用ELISA法測定血漿脂氧素A4的含量，分析脂氧素A4與疾病嚴(yán)重程度SCORAD評分的相關(guān)性。 結(jié)果 AD組及慢性蕁麻疹伴AD組血漿脂氧素A4水平均低于正常對照組（P<0.05），血漿脂氧素A4水平與SCORAD評分呈負(fù)相關(guān)（r=-0.386，P<0.05）。慢性蕁麻疹組血漿脂氧素A4水平與正常對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。 結(jié)論 脂氧素A4水平的降低可能參與慢性蕁麻疹伴AD疾病發(fā)生。

[關(guān)鍵詞] 慢性蕁麻疹；AD；脂氧素；SCORAD

[中圖分類號] R758.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-9701（2015）23-0005-03

Change of lipoxin A4 level in patients with chronic urticaria associated with AD and its clinical significance

JIN Wanwan1 YU Suting1 ZHOU Pengfei1 LI Qiongying1 ZHAO Qifeng2 GAO Yu1

1.Department of Dermatology， Second Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University/Yuying Children's Hospital， Wenzhou 325000， China； 2.Department of Dermatology， Second Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University/Yuying Children's Hospital， Wenzhou 325000， China

[Abstract] Objective To investigate the plasma lipoxin A4 level in children with chronic urticaria associated with AD and analyze its correlation to the severity. Methods Thirty-six patients with chronic urticaria， 32 patients with AD， 31 patients with chronic urticaria associated with AD and 30 normal control patients who were treated in our hospital from June 2012 to June 2014 were selected. The patients' peripheral venous blood was collected for plasma separation. The ELISA method was used to measure the content of plasma lipoxin A4. The correlation between the plasma lipoxin A4 level and the SCORAD score indicating severity of disease was analyzed. Results The plasma lipoxin A4 level of both the AD group and the chronic urticaria associated with AD group were higher than the normal control group（P<0.05）， and the plasma lipoxin A4 level was in a negative correlation to the SCORAD score（r=-0.386， P<0.05）. The plasma lipoxin A4 level of chronic urticaria group was not significantly different from the normal control group（P>0.05）. Conclusion The reduction of plasma lipoxin A4 level may involve in the occurrence of chronic urticaria associated with AD.

[Key words] Chronic urticaria； AD； Lipoxin； SCORAD

慢性蕁麻疹和特應(yīng)性皮炎（atopic dermatitis，AD）是常見的慢性變態(tài)反應(yīng)性皮膚病，由各種炎癥介質(zhì)參與，其中白三烯在疾病發(fā)展過程中扮演著重要角色[1]。脂氧素A4（lipoxin A4）和白三烯C4都是花生四烯酸的代謝產(chǎn)物，脂氧素是拮抗白三烯的天然物質(zhì)，發(fā)揮廣泛的抗炎促消退作用，其代謝異常是多種炎癥相關(guān)疾病失控性發(fā)展的關(guān)鍵機(jī)制。本研究旨在測定慢性蕁麻疹及AD患兒血漿脂氧素A4水平，分析脂氧素A4 與疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2012年6月～2014年6月臨床確診為慢性蕁麻疹的36例患兒為慢性蕁麻疹組，在試驗(yàn)前24 h有蕁麻疹的癥狀和體征，男17例，女19例，平均年齡（5.8±1.9）歲，病程2～34個(gè)月。符合以下條件：①病程≥6周；②處于病情活動(dòng)期，風(fēng)團(tuán)每天發(fā)作或幾乎每天發(fā)作。根據(jù)診斷標(biāo)準(zhǔn)選擇臨床上確診為AD患兒32例為AD組，男17例，女15例，平均年齡（6.3±2.0）歲，15分≤SCORAD≤67分。另選擇慢性蕁麻疹伴AD患兒31例為慢性蕁麻疹伴AD組，蕁麻疹病程3～39個(gè)月，15分≤SCORAD≤62分。對照組為30例正常體檢兒童，平均年齡（6.9±2.1）歲。各組年齡及性別等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。排除標(biāo)準(zhǔn)：患有心臟病、嚴(yán)重肝腎功能不全、血液系統(tǒng)疾病、自身免疫性疾病、慢性感染、惡性腫瘤的患兒；2周內(nèi)服用過抗組胺藥、抗膽堿能藥、受體激動(dòng)劑、阿司匹林類藥及糖皮質(zhì)激素。在試驗(yàn)期間，家長/監(jiān)護(hù)人均簽署知情同意書。

1.2 方法

血漿中脂氧素A4濃度的檢測：采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測血漿中脂氧素A4水平，ELISA試劑盒為美國R&D公司進(jìn)口分裝。采集慢性蕁麻疹患兒、AD患兒、慢性蕁麻疹伴AD患兒及正常對照組患兒靜脈血2 mL，加入肝素抗凝管內(nèi)，4℃離心5 min，取上清-80℃冰箱保存待測，操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。應(yīng)用ELISA軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算其濃度。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察各組入選對象血漿脂氧素A4指標(biāo)水平，分析脂氧素A4水平與疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，多組間計(jì)量資料比較采用單因素方差分析，相關(guān)性分析采用Pearson分析，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 四組患者血漿脂氧素A4水平比較

正常對照組血漿脂氧素A4為（65.9±20.0）pg/mL，AD組為（49.4±15.6）pg/mL，慢性蕁麻疹伴AD組為（46.7±13.9）pg/mL，慢性蕁麻疹組為（72.9±16.5）pg/mL。AD組低于正常對照組（P<0.05），慢性蕁麻疹伴AD組低于正常對照組（P<0.05）；AD組低于慢性蕁麻疹組（P<0.05），慢性蕁麻疹伴AD組低于慢性蕁麻疹組（P<0.05），慢性蕁麻疹組與正常對照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。四組血漿脂氧素A4水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=19.23，P<0.05）。

表1 不同組別血漿中脂氧素A4比較（x±s，pg/mL）

注：與正常對照組比較，*P<0.05，與慢性蕁麻疹組比較，#P<0.05

2.2 血漿脂氧素A4水平與SCORAD評分相關(guān)性分析

血漿脂氧素A4水平與疾病嚴(yán)重程度SCORAD評分的相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血漿脂氧素A4水平與疾病嚴(yán)重程度SCORAD評分呈負(fù)相關(guān)（r=-0.386，P<0.05）。

3 討論

機(jī)體內(nèi)炎癥不僅由一系列促炎介質(zhì)推動(dòng)，還存在一整套炎癥自限機(jī)制精密調(diào)節(jié)炎癥的發(fā)生和消退。促炎介質(zhì)的表達(dá)、炎癥反應(yīng)的強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間受到脂氧素等炎癥檢查點(diǎn)的嚴(yán)密監(jiān)控。由于自限機(jī)制的存在，炎癥在發(fā)展到合適的階段，致炎源被控制后，炎癥細(xì)胞和促炎介質(zhì)被迅速消除，炎癥得以及時(shí)終止。因而，炎癥現(xiàn)在被認(rèn)為是一個(gè)從啟動(dòng)到消退的程序化過程，炎癥自限機(jī)制被打破，炎癥免疫反應(yīng)不能及時(shí)消退才是炎癥失控和持續(xù)進(jìn)展的根本原因。

脂氧素（lipoxins，LXs）是由Serhan等在人類白細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的一種花生四烯酸的代謝產(chǎn)物，通過細(xì)胞表面的多種膜受體在炎癥及免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。因?yàn)榫哂袕?qiáng)大的抗炎作用，被稱為炎癥反應(yīng)的“停止信號”和“剎車信號”，是炎癥消退過程中最重要的內(nèi)源性抗炎促炎消退因子，在炎癥反應(yīng)中發(fā)揮廣泛的抗炎促消退作用[2]。脂氧素通過抑制中性粒細(xì)胞在炎癥部位的募集，調(diào)節(jié)促炎/抗炎因子的平衡、限制炎癥損傷、調(diào)節(jié)組織修復(fù)，促進(jìn)單核巨噬細(xì)胞對凋亡中性粒細(xì)胞吞噬等促進(jìn)炎癥及時(shí)消退[3]。因此，脂氧素促進(jìn)炎癥及時(shí)消退是防止疾病走向慢性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，成為近年來慢性疾病炎癥反應(yīng)研究的新熱點(diǎn)。

目前已發(fā)現(xiàn)參與介導(dǎo)脂氧素生物學(xué)效應(yīng)的受體包括脂氧素A4受體（ALX）、半胱氨酸白三烯受體（CysLT1）及AhR三種受體，而脂氧素受體目前研究最多，其抗炎及免疫調(diào)節(jié)作用通過多種受體介導(dǎo)。研究表明，LXA4在除白細(xì)胞外的多種細(xì)胞和細(xì)胞中作為部分激動(dòng)劑通過影響白三烯受體介導(dǎo)其他生物學(xué)功能[4]。極少量的LXA4就可在系膜細(xì)胞及人靜脈內(nèi)皮細(xì)胞表面競爭性結(jié)合LTD4[5]脂氧素相關(guān)受體下游信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制可通過CysLT1的拮抗劑阻斷白三烯而發(fā)揮炎癥調(diào)節(jié)效應(yīng)。中性粒細(xì)胞的積累和炎癥介質(zhì)如白三烯是炎癥性疾病的經(jīng)典標(biāo)志[2]。促炎和消炎介質(zhì)之間的失衡會(huì)導(dǎo)致慢性炎癥性疾病的發(fā)生[6]。

慢性蕁麻疹和特應(yīng)性皮炎（AD）是常見的慢性變態(tài)反應(yīng)性皮膚病，目前其防治策略是從源頭上控制組胺的釋放，拮抗組胺的生理作用。誠然，該策略能一定程度上減輕水腫、紅斑等臨床癥狀，但不能徹底阻止臨床癥狀反復(fù)出現(xiàn)。因此，尋找新的安全有效的防治策略迫在眉急。慢性蕁麻疹和特應(yīng)性皮炎的發(fā)病中多種炎癥介質(zhì)參與，其中白三烯在疾病發(fā)展過程中扮演著重要角色。脂氧素A4和白三烯C4是花生四烯酸的代謝產(chǎn)物，其產(chǎn)生依賴于5-脂氧合酶的激活[6]。脂氧素是拮抗白三烯的天然物質(zhì)，發(fā)揮廣泛的抗炎促消退作用。脂氧素的活化可抑制白三烯介導(dǎo)的PSDP轉(zhuǎn)化為前角鯊烯單磷酸，進(jìn)而抑制磷酸酶D及超氧負(fù)離子自由基合成的PMNs胞內(nèi)信號途徑[7]。由于磷酸酶D及超氧負(fù)離子自由基對組織損傷，因此脂氧素介導(dǎo)的PIPP途徑可阻止炎癥性損傷，促進(jìn)炎性損傷組織的修復(fù)[8]。

我們原認(rèn)為可能是脂氧素水平降低或功能異常參與慢性蕁麻疹患者體內(nèi)炎癥消退障礙，造成疾病走向慢性過程，使疾病反復(fù)發(fā)作，遷延不愈。但是，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)慢性蕁麻疹組血漿中脂氧素A4與正常對照組比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而AD組及慢性蕁麻疹伴AD組血漿中脂氧素A4水平均低于正常對照組，可能與脂氧素并非直接參與慢性蕁麻疹炎性介質(zhì)消退作用有關(guān)。

脂氧素在多種疾病中發(fā)揮廣泛的抗炎促炎消退作用，先兆子癇老鼠中脂氧素可降低白介素6、腫瘤壞死因子α和IFN-γ的水平，使IL-10水平增加[9]。脂氧素可激活P38/MAPK信號突進(jìn)，導(dǎo)致小鼠IL-10在單核細(xì)胞中的表達(dá)上調(diào)[10，11]。此外，脂氧素A4治療子宮內(nèi)膜異位癥的小鼠模型，可減少子宮內(nèi)膜異位病變的大小和下調(diào)促炎性因子白介素1和白介素6的水平[12]。白三烯等刺激物誘導(dǎo)的皮膚炎癥反應(yīng)及偏苯三酸酐誘導(dǎo)的遲發(fā)型超敏反應(yīng)，脂氧素可劑量依賴性地減輕皮膚組織水腫、炎癥性細(xì)胞浸潤和表皮增值[13]。有研究表明，阿司匹林誘生的脂氧素可有效抑制白三烯受體介導(dǎo)的小鼠皮膚血管滲漏，也可抑制中性粒細(xì)胞的募集，抑制LTD4誘導(dǎo)的人系膜細(xì)胞增殖[14]。臨床觀察實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，含有脂氧素成分藥物局部治療嬰兒皮炎濕疹可使臨床癥狀得到改善[15]。我們發(fā)現(xiàn)AD患者的血漿脂氧素A4水平均低于正常對照組，其水平與疾病嚴(yán)重程度SCORAD評分呈負(fù)相關(guān)性。由此可見，AD患者體內(nèi)血漿脂氧素水平降低，其分泌水平與疾病的嚴(yán)重程度密切相關(guān)。

綜上所述，慢性蕁麻疹及AD發(fā)病機(jī)制涉及到多種細(xì)胞因子和其他細(xì)胞的參與，脂氧素及相關(guān)其他因子疾病發(fā)生發(fā)展中的作用有待更進(jìn)一步研究和探討。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 金宛宛，胡波瑛，馬新華，等. 特應(yīng)性皮炎患兒血清和 CD4+ CD25+ T細(xì)胞分泌 IL-10 水平的檢測[J]. 中華皮膚科雜志，2013，46（1）：13.

[2] Jin W，Jia Y，Huang L，et al. Lipoxin A4 methyl ester ameliorates cognitive deficits induced by chronic cerebral hypoperfusion through activating ERK/Nrf2 signaling pathway in rats[J]. Pharmacology Biochemistry and Behavior，2014，124（6）：145-152.

[3] Hao H，Xu F，Hao J，et al. Lipoxin A4 suppresses lipopolysaccharide-induced Hela cell proliferation and migration via NF-κB pathway[J]. Inflammation，2015，38（1）：400-408.

[4] B？覿ck M，Powell WS，Dahlén S E，et al. Update on leukotriene， lipoxin and oxoeicosanoid receptors：IUPHAR review[J].British Journal of Pharmacology，2014，171（15）：3551-3574.

[5] Romano M. Lipoxin and aspirin-triggered lipoxins[J]. The Scientific World Journal，2010，10（2）：1048-1064.

[6] Fredman G，Ozcan L，Spolitu S，et al. Resolvin D1 limits 5-lipoxygenase nuclear localization and leukotriene B4 synthesis by inhibiting a calcium-activated kinase pathway[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences，2014，111（40）：14530-14535.

[7] Yang J，Eiserich J P，Cross C E，et al. Metabolomic profiling of regulatory lipid mediators in sputum from adult cystic fibrosis patients[J]. Free Radical Biology and Medicine， 2012，53（1）：160-171.

[8] Uddin M，Levy BD. Resolvins：Natural agonists for resolution of pulmonary inflammation[J]. Progress in Lipid Research，2011，50（1）：75-88.

[9] Xu Z，Zhao F，Lin F，et al. Preeclampsia is associated with a deficiency of lipoxin A4， an endogenous anti-inflammatory mediator[J]. Fertility and Sterility，2014，102（1）：282-290.

[10] Cooray S N，Gobbetti T，Montero-Melendez T，et al. Ligand-specific conformational change of the G-protein-coupled receptor ALX/FPR2 determines proresolving functional responses[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences，2013，110（45）：18232-18237.

[11] He HQ，Troksa EL，Caltabiano G，et al. Structural determinants for the interaction of formyl peptide receptor 2 with peptide ligands[J]. Journal of Biological Chemistry， 2014，289（4）：2295-2306.

[12] Kumar R，Clerc A C，Gori I，et al. Lipoxin A4 prevents the progression of De Novo and established endometriosis in a mouse model by attenuating prostaglandin E2 production and estrogen signaling[J]. Plo S One，2014，9（2）： 89742e.

[13] R？觟se L，Schneider C，Stock C，et al. Extended DNFB-induced contact hypersensitivity models display characteristics of chronic inflammatory dermatoses[J]. Experimental Dermatology，2012，21（1）：25-31.

[14] B？觟rgeson E，McGillicuddy F C，Harford K A，et al. Lipoxin A4 attenuates adipose inflammation[J]. The FASEB Journal，2012，26（10）：4287-4294.

[15] SH Wu，XQ Chen，B Liu，et al. Efficacy and safety of 15（R/S）-methyl-lipoxin A4 in topical treatment of infantile eczema[J]. British Journal of Dermatology，2013，168（1）：172-178.

（收稿日期：2015-01-13）