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    猴頭菇超微粉酸奶的研制及營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定

    2022-02-22 06:49:02龐澤翀黃君紅
    中國(guó)乳業(yè) 2022年1期
    關(guān)鍵詞:超微粉原味猴頭菇

    龐澤翀,黃君紅

    嶺南師范學(xué)院食品科學(xué)與工程學(xué)院,廣東湛江 524048

    0 引言

    猴頭菇是珍貴的食藥兩用真菌,不但味道鮮美,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富,富含氨基酸、維生素與無(wú)機(jī)鹽等,且含有多種生物活性物質(zhì),如低聚糖、多糖與甾醇類等,具有較好保健與藥用價(jià)值[1,2]?,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明,猴頭菇提取物能有效修復(fù)胃黏膜損傷、預(yù)防與治療慢性萎縮性胃炎[3,4]。此外,猴頭菇的獨(dú)特風(fēng)味,還能作為天然調(diào)味粉進(jìn)行食品深加工[5,6]。超微粉碎技術(shù)作為較為先進(jìn)的食品加工技術(shù)之一,能最大限度地保持加工產(chǎn)品的色澤、營(yíng)養(yǎng)及生物活性成分[6,7]。而且,超微粉具有很多優(yōu)良特性,如溶解性、分散性與化學(xué)活性等,有利于人體對(duì)食品營(yíng)養(yǎng)的吸收[8]。酸奶是公認(rèn)的具有獨(dú)特風(fēng)味和保健功能的乳制品[9,10],而當(dāng)前市面上的非原味酸奶制品多以凝固型與攪拌型添加輔料混合發(fā)酵而成[11,12]。為開(kāi)發(fā)兼具營(yíng)養(yǎng)與保健功能的新型酸奶,本研究將超微粉碎后的猴頭菇粉添加于牛乳中,利用保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌進(jìn)行混合發(fā)酵,通過(guò)正交試驗(yàn)篩選最佳生產(chǎn)配方,檢測(cè)其乳酸菌活菌數(shù)及pH值,并測(cè)定有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分(蛋白質(zhì)、總氨基酸、維生素C)及礦物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)(鈣、磷、鉀)的含量,為超微粉碎技術(shù)應(yīng)用于猴頭菇的深加工和食用菌酸奶工藝優(yōu)化提供科學(xué)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    1.1.1 原料

    猴頭菇:市售干品,選用拳頭大,子實(shí)體圓厚和生長(zhǎng)著如發(fā)肉刺的猴頭菇。奶粉:雀巢全脂奶粉。蔗糖:市售優(yōu)質(zhì)白砂糖。

    1.1.2 菌種

    保加利亞乳桿菌(Lactobacillus Bulgaricus)和嗜熱鏈球菌(Streptococcus Thermophilus),均由嶺南師范學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室提供。

    1.1.3 培養(yǎng)基

    LAB半固體培養(yǎng)基:牛肉膏10.0 g、酵母膏10.0 g、吐溫80 1.0mL、乳糖20.0 g、CaCO410.0 g、KH2PO42.0g、瓊脂3.0 g、蒸餾水1000 mL,pH值6.6。

    1.1.4 主要設(shè)備

    WZJ6 型振動(dòng)式超微粉碎機(jī)(濟(jì)南倍力粉技術(shù)工程有限公司);85-2控溫磁力攪拌器(余姚市第二熱工儀表廠);YXQ.SG41.280電熱手提壓力蒸汽消毒器(上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠);SPX-250B-Z型生化培養(yǎng)箱(上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠);SW-CL.D潔凈工作臺(tái)(上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠);DZKW-C型儀表恒溫不銹鋼水浴鍋(上海樹(shù)立儀器儀表有限公司);FC104電子天平(上海精科天平儀器廠);80-2電動(dòng)離心機(jī)(金壇富華儀器有限公司);UV-2600型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(尤尼柯儀器有限公司);電冰箱(廣東科龍電器股份有限公司);DZB-712便攜式多參數(shù)分析儀(上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司)。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 工藝流程

    全脂奶粉、蔗糖、蒸餾水→預(yù)熱(40.0 ℃)→均質(zhì)→猴頭菇超微粉→均質(zhì)→過(guò)濾→滅菌(90.0 ℃10 min)→冷卻(40.0 ℃)→接種→攪拌均勻→灌裝→發(fā)酵培養(yǎng)(41.5℃ 4 h)→后熟(4.0℃ 12 h)→成品。

    1.2.2 操作要點(diǎn)

    (1)猴頭菇超微粉的制備

    選擇無(wú)腐爛、無(wú)病蟲(chóng)害的干品猴頭菇,用清水沖洗干凈,用沸水直接浸泡2 h后,擠干水,重復(fù)浸泡3 次,以去掉猴頭菇的苦味。其后將泡發(fā)好后的猴頭菇撕成小塊,置于恒溫干燥箱60.0 ℃烘干至恒重。經(jīng)干燥后用萬(wàn)能粉碎機(jī)進(jìn)行粗粉碎,而后經(jīng)超微粉碎機(jī)粉碎10 min,過(guò)200 目篩備用。

    (2)還原奶的制備

    將雀巢全脂奶粉和白砂糖加水在40.0 ℃溫度下溶解均質(zhì)。

    (3)混合乳調(diào)配

    適量猴頭菇超微粉加入到還原奶中混合均質(zhì),然后經(jīng)4 層150 目滅菌紗布過(guò)濾。

    (4)接種

    將滅菌后的混合乳自然冷卻到40.0 ℃左右,在無(wú)菌操作條件下,將發(fā)酵菌種(保加利亞乳桿菌發(fā)酵劑和嗜熱鏈球菌發(fā)酵劑以1∶1比例混合)按比例接種,混勻。

    (5)發(fā)酵

    將上述接種后的原料分裝入經(jīng)預(yù)先清洗滅菌的奶瓶中,密封后置于41.5 ℃的恒溫培養(yǎng)箱下發(fā)酵至凝固。

    (6)冷藏后熟

    將剛凝固的酸奶從培養(yǎng)箱中取出,置4.0 ℃冰箱中冷藏后熟12 h。

    1.2.3 酸奶配方篩選

    為調(diào)配出較好口感酸奶,猴頭菇粉、接種量與蔗糖等的添加比例十分重要。本試驗(yàn)根據(jù)以前的研究[10],添加9.00%的奶粉量所制成的酸奶口感及營(yíng)養(yǎng)最好,本試驗(yàn)選取猴頭菇汁量、接種量與蔗糖量為主要試驗(yàn)參數(shù)按照L9(33)正交試驗(yàn)進(jìn)行試驗(yàn),其因素水平見(jiàn)表1。

    表1 猴頭菇酸奶配方正交試驗(yàn)因子水平(%)

    1.2.4 感官評(píng)分

    感官評(píng)分以酸奶的色澤、氣味、組織狀態(tài)、風(fēng)味與口感等標(biāo)準(zhǔn)對(duì)試驗(yàn)產(chǎn)品進(jìn)行評(píng)定,權(quán)重分分別為10 分、25 分、30 分、35 分,滿分為100分,具體評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)如表2。

    表2 猴頭菇酸奶的感官評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)表

    1.2.5 乳酸菌活菌數(shù)與pH值的測(cè)定

    (1)乳酸菌活菌數(shù)

    測(cè)定方法參考馬向前與周德慶[13]的報(bào)道,將正交試驗(yàn)篩選得出評(píng)分較好的酸奶分別接入在LAB培養(yǎng)基,并對(duì)乳酸菌活菌數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)。具體做法參考龐澤翀與梁燕清[14]的報(bào)道。

    (2)pH值

    使用DZB-712便攜式多參數(shù)分析儀進(jìn)行測(cè)定,分別檢測(cè)正交試驗(yàn)篩選得出評(píng)分較好的酸奶在貯藏過(guò)程中pH值的變化,每天1 次,連續(xù)8 天。

    1.2.6 營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定方法

    總蛋白質(zhì)測(cè)定:考馬斯亮藍(lán)蛋白測(cè)定試劑盒(貨號(hào):A045-2-1);總氨基酸測(cè)定:總氨基酸測(cè)定試劑盒(貨號(hào):A026-1-1);維生素C測(cè)定:維生素C測(cè)定試劑盒(貨號(hào):A009-1-1);鈣離子的測(cè)定:鈣試劑盒(貨號(hào):C004-1-1);磷離子的測(cè)定:無(wú)機(jī)磷測(cè)定試劑盒(貨號(hào):C006-1-1);鉀離子的測(cè)定:鉀測(cè)定試劑盒(貨號(hào):C001-1-1)。以上試劑盒均生產(chǎn)于南京建成生物工程研究所。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 猴頭菇酸奶配方的正交試驗(yàn)與感官評(píng)分

    正交試驗(yàn)各因素水平具體如表3。由表3可知,猴頭菇酸奶各配方的正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)、結(jié)果及極差分析。各因素對(duì)猴頭菇酸奶口感的影響為A>B>C,其中最優(yōu)組合配方為A2B2C2,即1.00%猴頭菇超微粉,6.00%接種量,7.00%蔗糖。但該組合在正交試驗(yàn)中并未出現(xiàn),因此,追加1 次試驗(yàn),并將該試驗(yàn)的結(jié)果與正交試驗(yàn)中結(jié)果最好的5號(hào)試驗(yàn)樣品(配方為1.00%猴頭菇超微粉,6.00%接種量,8.00%蔗糖)進(jìn)行對(duì)比。兩者在色澤、氣味與組織狀態(tài)均沒(méi)有明顯差別,但由于猴頭菇本身具有苦味且含糖較少,故而追加試驗(yàn)在風(fēng)味與口感偏酸,其評(píng)分為94分,略低于5號(hào)試驗(yàn)。因此,選擇加糖量較多的5號(hào)試驗(yàn)組合為最佳結(jié)果。由表4的方差分析可知,猴頭菇超微粉、接種量與蔗糖3 種原料的添加量中猴頭菇超微粉添加量對(duì)酸奶的品質(zhì)影響最大。

    表3 正交試驗(yàn)與感官評(píng)分

    表4 正交試驗(yàn)結(jié)果方差分析

    2.2 猴頭菇酸奶儲(chǔ)藏過(guò)程中乳酸菌數(shù)及pH值的變化

    篩選出配方評(píng)分較高的2、4、5、6號(hào)猴頭菇酸奶與原味酸奶分別接入LAB半固體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)48 h后檢測(cè)其乳酸菌活菌數(shù),結(jié)果見(jiàn)表5。

    從表5可以看出,猴頭菇酸奶的乳酸菌含量,隨儲(chǔ)藏時(shí)間的延長(zhǎng),乳酸菌活菌數(shù)發(fā)生變化,各種配比中總趨勢(shì)是先升高后降低。在猴頭菇酸奶發(fā)酵后儲(chǔ)存的前5 天,乳酸菌迅速生長(zhǎng)、繁殖,第5天,乳酸菌數(shù)達(dá)高峰,其中6號(hào)猴頭菇酸奶乳酸菌含菌量較其他幾種高,達(dá)1.45×109~2.18×109CFU/mL。第6天后乳酸菌活菌數(shù)開(kāi)始減少。5號(hào)猴頭菇酸奶次之,原味酸奶最少,但各配方猴頭菇酸奶的含菌量仍比原味酸奶高。

    表5 不同時(shí)期猴頭菇酸奶乳酸菌含量變化單位:109 CFU/mL

    用便攜式多參數(shù)分析儀測(cè)定猴頭菇酸奶儲(chǔ)藏過(guò)程中pH值的變化(圖1)。由圖1可見(jiàn),隨著培養(yǎng)天數(shù)的增加,乳酸菌生長(zhǎng)繁殖,乳酸量不斷增多,酸奶的pH值不斷下降。前5天pH值逐漸下降,第6天、第7天pH值趨于平穩(wěn)。猴頭菇酸奶pH值的變化范圍大于原味酸奶的,其中6號(hào)配比的pH值最低,最低值達(dá)4.08。比較猴頭菇添加量可知,猴頭菇添加量越大,含菌量越高,產(chǎn)酸能力越強(qiáng),pH值越小。

    圖1 各配比猴頭菇酸奶在貯藏過(guò)程的pH值變化

    2.3 猴頭菇酸奶營(yíng)養(yǎng)成分含量測(cè)定

    2.3.1 猴頭菇酸奶有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分含量測(cè)定

    從表6可知,4 種猴頭菇酸奶的總氨基酸、蛋白質(zhì)和維生素C的含量均高于原味酸奶,并隨著猴頭菇超微粉添加量的增加而提高。與原味酸奶相比,5號(hào)猴頭菇酸奶的蛋白質(zhì)與總氨基酸含量顯著提高,增幅分別達(dá)到32.89%與80.87%。而6號(hào)維生素C含量最高(13.42μg/mL),與原味酸奶相比,增幅達(dá)到125.89%。此外,在猴頭菇超微粉相同的不同配方(即4、5與6號(hào)試驗(yàn)樣品)中,猴頭菇酸奶中的有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分含量無(wú)顯著差異。

    表6 猴頭菇酸奶中有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分的含量

    2.3.2 猴頭菇酸奶礦物質(zhì)含量測(cè)定

    由圖2可知,與原味酸奶相比,隨著猴頭菇超微粉的增加,猴頭菇超微粉酸奶的鉀與磷含量也顯著提高,而鈣含量則無(wú)所顯著差異。與原味酸奶相比,6號(hào)猴頭菇酸奶的鉀含量顯著提高,增幅分別達(dá)到35.25%。而5號(hào)磷含量最高,與原味酸奶相比,增幅達(dá)到372.36%。此外,在猴頭菇超微粉相同的不同配方(即4、5與6號(hào)試驗(yàn)樣品)中,猴頭菇酸奶中的鈣、鉀與磷的含量無(wú)顯著差異。

    圖2 各配方猴頭菇酸奶中鈣、鉀、磷成分含量

    3 討論

    猴頭菇超微粉是成品質(zhì)量的主要影響因素,配比為1.00%猴頭菇超微粉、6.00%接種量、8.00%蔗糖與9.00%奶粉研制的酸奶呈淡黃色,組織狀態(tài)細(xì)致光滑,無(wú)乳清析出,酸甜適中,帶有猴頭菇的獨(dú)特風(fēng)味,符合人群口味要求。

    本研究結(jié)果表明,酸奶發(fā)酵過(guò)程中乳酸菌含量的變化趨勢(shì)均是先升高后降低。該結(jié)果與黃君紅等[15]的研究一致,即發(fā)酵前期,乳酸菌利用酸奶中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖并產(chǎn)生乳酸,隨著乳酸菌的數(shù)量增加,可利用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)減少,且積累的乳酸使pH值下降,不利于乳酸菌生長(zhǎng),乳酸菌的數(shù)目呈遞減趨勢(shì)。這也符合本研究結(jié)果中,酸奶pH值隨儲(chǔ)藏時(shí)間的延長(zhǎng)而不斷下降。重要的是,與原味酸奶相比,猴頭菇酸奶活菌數(shù)均高于原味酸奶,這是由于猴頭菇中富含的多糖、維生素與蛋白質(zhì)等物質(zhì)可以促進(jìn)菌體的生長(zhǎng),降低發(fā)酵過(guò)程中菌體的死亡率,有利于乳酸菌的快速生長(zhǎng)繁殖[16,17]。此外,由于猴頭菇酸奶中乳酸菌含量較多,產(chǎn)酸能力較強(qiáng),使得猴頭菇酸奶的pH值均比原味酸奶的低[18]。另外,總氨基酸含量比原味酸奶高,一方面是猴頭菇本身含豐富氨基酸[19],另一方面是在發(fā)酵過(guò)程中,部分蛋白質(zhì)被乳酸菌的蛋白酶分解成多肽和蛋白質(zhì)在酸性條件下發(fā)生水解,前者進(jìn)一步被肽酶分解成氨基酸所致[20]。猴頭菇中含有豐富的鉀與磷等多種礦物元素[21,22],使得猴頭菇超微酸奶鉀、磷的含量能顯著提高。

    總而言之,1.00%猴頭菇超微粉、6.00%接種量、8.00%蔗糖與9.00%奶粉研制的猴頭菇超微粉酸奶,其總氨基酸、總蛋白質(zhì)、維生素C以及礦物元素鉀與磷等營(yíng)養(yǎng)成分均較原味酸奶中的高,是一種風(fēng)味獨(dú)特且集保健和營(yíng)養(yǎng)功能的新型發(fā)酵乳制品。

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