50%酰嘧磺隆水分散粒劑高效液相色譜分析方法研究

王詩雨，宋 朋，高勝健，張保建，趙廣義*

(1.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院，北京 100193；2.山東威瑞信試驗檢測有限公司，山東 濟(jì)南 250119)

1 前言

酰嘧磺隆英文名稱：Amidosulfuron，CAS號：120923-37-7，分子式：C9H15N5O7S2，化學(xué)名稱：3-(4,6-二甲氧基嘧啶-2-基)-1-(N-甲基-N-甲基磺酰氨基磺酰)-脲。酰嘧磺隆是一種選擇性內(nèi)吸除草劑，被葉面和根系吸收后傳導(dǎo)至植株全身，抑制植物生長，開始是頂向，然后是根向出現(xiàn)萎斑。主要用于用于冬小麥、硬質(zhì)小麥、大麥、黑麥、黑小麥、燕麥等作物苗后防除多種闊葉雜草尤其是豬殃殃。酰嘧磺隆在土壤中易被土壤微生物分解，不易在土壤中殘留積累，在推薦劑量下，對當(dāng)茬麥類作物和下茬作物安全。

目前國內(nèi)有關(guān)酰嘧磺隆水分散粒劑的分析方法未見公開報道。本文采用高效液相色譜法對50%酰嘧磺隆水分散粒劑進(jìn)行定量分析，該方法操作簡便快捷，分離效果好，精密度和準(zhǔn)確度均能達(dá)到定量分析的要求。

2 試驗部分

2.1 試劑和溶液 乙腈(色譜純)；超純水(電阻率18.2MΩ·cm，25℃)；磷酸(分析純)；磷酸溶液：ψ(磷酸:水)=1:1 000；酰嘧磺隆標(biāo)樣，已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.7%；50%酰嘧磺隆水分散粒劑。

2.2 儀器 高效液相色譜儀：日立Primaide，具有二極管陣列檢測器和自動進(jìn)樣器；日立色譜工作站；色譜柱：250mm×4.6mm(i.d.)不銹鋼柱，內(nèi)裝ZORBAX SB-C18、5μm填充物。

2.3 液相色譜操作條件 流動相：ψ(乙腈:磷酸溶液)=50+50(V/V)；流量：1.0mL/min；柱溫：30±2℃；檢測波長：254nm；進(jìn)樣體積：10μL；保留時間：酰嘧磺隆約5.7min。典型的酰嘧磺隆標(biāo)樣和50%酰嘧磺隆水分散粒劑的高效液相色譜圖(圖1、2)。

圖1 酰嘧磺隆標(biāo)樣高效液相色譜圖

圖2 50%酰嘧磺隆水分散粒劑高效液相色譜圖

2.4 測定步驟

2.4.1 標(biāo)樣溶液的配制 稱取0.05g酰嘧磺隆標(biāo)樣(精確至0.000 1g)，置于50mL容量瓶中，加入20mL乙腈，超聲波振蕩5min，冷卻至室溫，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。用移液管移取上述溶液5mL，置于50mL容量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。

2.4.2 試樣溶液的配制 稱取含酰嘧磺隆0.05g的試樣(精確至0.0001g)，置于50mL容量瓶中，加入20mL乙腈，超聲波振蕩5min，冷卻至室溫，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。用移液管移取上述溶液5mL，置于50mL容量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻，過濾。

2.4.3 測定 在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針標(biāo)樣溶液的響應(yīng)值相對變化<1.5%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測定。

2.4.4 計算 將測得的2試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中酰嘧磺隆峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中酰嘧磺隆的質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω(%)，按式(1)計算：

(1)

式中：

A1——標(biāo)樣溶液中酰嘧磺隆峰面積的平均值；

A2——試樣溶液中酰嘧磺隆峰面積的平均值；

m1——標(biāo)樣的質(zhì)量，g；

m2——試樣的質(zhì)量，g；

P——標(biāo)樣中酰嘧磺隆的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

3 結(jié)果與討論

3.1 色譜條件的選擇 通過日立Primaide高效液相色譜儀的光譜數(shù)據(jù)采集功能，獲得酰嘧磺隆的紫外波長掃描圖(圖3)。從圖中可以看到酰嘧磺隆最大吸收波長在235nm～260nm處，為了提高靈敏度，減少干擾，滿足分析的要求，故將檢測波長確定為254nm。

圖3 酰嘧磺隆的紫外光譜圖

色譜柱選擇250mm×4.6mm(i.d.)ZORBAX SB-C18、5um的不銹鋼柱。根據(jù)酰嘧磺隆物化性質(zhì)和溶劑的紫外吸收波長，選擇乙腈作為溶劑溶解樣品，并以乙腈和水作為流動相，為了得到更好的分離效果和峰形，在1 000mL水里加入1mL磷酸。將流動相按不同比例在色譜柱上進(jìn)行試驗，隨著乙腈比例的增加，保留時間減小，當(dāng)乙腈與0.1%磷酸水溶液比例達(dá)到55 : 45時，有雜質(zhì)峰干擾，峰純度達(dá)不到試驗要求，最終選擇Ψ(乙腈: 0.1%磷酸水溶液)=50: 50作為流動相，流速1.0mL/min。該條件下，酰嘧磺隆色譜峰峰形較好，與雜質(zhì)能完全分離，具有良好的精密度和準(zhǔn)確度，并且分析時間較短，提高了工作效率。

3.2 分析方法的特異性試驗 將2.4.1、2.4.2配制的酰嘧磺隆標(biāo)樣溶液和試樣溶液，在上述色譜操作條件下進(jìn)行全波段掃描、峰純度分析。結(jié)果表明標(biāo)樣溶液和試樣溶液中酰嘧磺隆峰純度均>990，有效成分出峰處無其他物質(zhì)干擾，符合定量分析要求。

3.3 分析方法的線性相關(guān)性試驗 稱取0.05g酰嘧磺隆標(biāo)樣(精確至0.000 1g)，置于50mL容量瓶中，加入20mL乙腈，超聲波振蕩5min，冷卻至室溫，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。用移液管移取3、4、5、6、7mL上述溶液，分別置于50mL容量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻，配置成5個不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。在上述色譜操作條件下進(jìn)行分析，以酰嘧磺隆質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(圖4)，得到酰嘧磺隆線性回歸方程為y=70 299x+25 791，線性相關(guān)系數(shù)為0.999 9。

圖4 酰嘧磺隆線性關(guān)系圖

3.4 分析方法的精密度試驗 從同一產(chǎn)品中準(zhǔn)確稱取5個試樣，在上述色譜操作條件下進(jìn)行分析，測得酰嘧磺隆的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.23，變異系數(shù)為0.47%(表1)。

表1 分析方法的精密度試驗結(jié)果

3.5 分析方法的準(zhǔn)確度試驗 從已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)(48.99%)的酰嘧磺隆水分散粒劑中稱取5個試樣，分別加入一定量的酰嘧磺隆標(biāo)樣(99.7%)，在上述色譜操作條件下進(jìn)行分析，測得酰嘧磺隆的平均回收率為99.90%(表2)。

表2 分析方法的準(zhǔn)確度試驗結(jié)果

4 結(jié)論

本文建立了酰嘧磺隆水分散粒劑有效成分含量測定的高效液相色譜分析方法，試驗結(jié)果表明，本方法分離效果好、線性關(guān)系良好，具有較高的精密度和準(zhǔn)確度，分析操作簡便快捷，是酰嘧磺隆水分散粒劑產(chǎn)品質(zhì)量控制較為理想的分析方法。