miR-543靶向HDAC3調(diào)控LPS誘導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞損傷

孫智娜 何秀琴 拉毛卓瑪

（青海紅十字醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科，西寧 810000）

支氣管哮喘是由多種炎癥細(xì)胞、細(xì)胞組分參與形成的氣道炎癥性疾病。支氣管上皮細(xì)胞作為重要的氣道結(jié)構(gòu)細(xì)胞，是維持呼吸道防御屏障的關(guān)鍵，當(dāng)吸入刺激性異物時(shí)，支氣管上皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)受損，其自然保護(hù)功能受到破壞，引起感染和氣道炎癥，參與哮喘的發(fā)生、發(fā)展［1］。因此，如何有效的減輕氣道上皮損傷對(duì)哮喘防治意義重大。miR-543是近年發(fā)現(xiàn)的人類疾病相關(guān)RNA，脊髓損傷大鼠模型中miR-543表達(dá)降低，過(guò)表達(dá)miR-543可降低脊髓損傷大鼠的炎癥反應(yīng)，抑制細(xì)胞凋亡［2］。過(guò)表達(dá)miR-543還可有效對(duì)抗IL-1β誘發(fā)的軟骨細(xì)胞損傷［3］。生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，組蛋白脫乙酰酶3（histone deacetylases 3，HDAC3）是miR-543的潛在靶點(diǎn)。既往研究顯示，HDAC3在缺血性腦損傷小鼠的小膠質(zhì)細(xì)胞中表達(dá)增加，抑制其表達(dá)可減輕缺血性腦損傷導(dǎo)致的炎癥反應(yīng)［4］。抑制HDAC3表達(dá)對(duì)糖尿病小鼠腦缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用［5］。然而，miR-543和HDAC3在支氣管哮喘疾病中對(duì)支氣管細(xì)胞損傷的研究較少。本研究以脂多糖（lipopolysaccha?ride，LPS）誘導(dǎo)人氣道上皮細(xì)胞BEAS-2B損傷，探討miR-543靶向HDAC3對(duì)BEAS-2B細(xì)胞凋亡、炎癥損傷的影響，以期為支氣管哮喘防治提供潛在靶點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1 材料人氣道上皮細(xì)胞株BEAS-2B購(gòu)于中國(guó)科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏中心；RPMI1640培養(yǎng)液、胎牛血清購(gòu)于美國(guó)Hyclone公司；LPS購(gòu)于美國(guó)Sigma公司；miR-543模擬物（miR-543 mimics）及其陰性對(duì)照（miR-NC）、HDAC3小干擾RNA（si-HDAC3）及其陰性對(duì)照（si-NC）、miR-543抑制物（anti-miR-543）及其陰性 對(duì) 照（anti-miR-NC）、HDAC3過(guò)表達(dá) 質(zhì)粒（pcDNA-HDAC3）、空載體質(zhì)粒（pcDNA）、PCR引物由上海生工公司提供；Hairpin-it TM miRNA qPCR試劑盒購(gòu)于上海吉瑪制藥技術(shù)有限公司；SYBR Green master mix購(gòu)于北京索萊寶生物技術(shù)公司；IL-6、IL-1β和TNF-α ELISA試劑盒、鼠源HDAC3抗體、兔源B細(xì)胞淋巴瘤2（B cell lymphoma 2，Bcl-2）抗體、兔源Bcl相關(guān)X蛋白（Bcl-2 associated X protein，Bax）抗體、兔源磷酸甘油醛脫氫酶（glyceraldehyde phos?phate dehydrogenase，GAPDH）抗體、山羊抗兔二抗、山羊抗鼠二抗購(gòu)于上海碧云天生物技術(shù)研究所。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)分組BEAS-2B細(xì)胞采用含10%胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基在37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。對(duì)照組（Con）：用完全培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞；LPS組：參照文獻(xiàn)［6］用LPS終濃度為50μg/ml的RPMI1640培養(yǎng)基處理BEAS-2B細(xì)胞8 h；LPS+miR-NC組、LPS+miR-543組、LPS+si-NC組、LPS+si-HDAC3組、LPS+miR-543+pcDNA組、LPS+miR-543+pcDNA-HDAC3組為利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將miR-NC、miR-543 mimics、si-NC、si-HDAC3、miR-543 mimics+pcDNA、miR-543 mimics+pcDNA-HDAC3分別轉(zhuǎn)染至BEAS-2B細(xì)胞，隨后用終濃度為50 μg/ml的RPMI1640培養(yǎng)基處理BEAS-2B細(xì)胞8 h。

1.2.2 RT-qPCR檢 測(cè)miR-543和HDAC3 mRNA表達(dá)利用TRIzol試劑從各組BEAS-2B細(xì)胞中分離得到總RNA。用DU650分光光度計(jì)測(cè)定分離RNA的純度和濃度。以U6為內(nèi)參，用Hairpin-it TM miRNA qPCR試劑盒檢測(cè)miR-543表達(dá)。以GAPDH為內(nèi)參，SYBR Green qPCR法檢測(cè)HDAC3 mRNA表達(dá)。2-ΔΔCt法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

1.2.3 ELISA試劑盒檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液上清中IL-6、IL-1β和TNF-α水平BEAS-2B細(xì)胞按照實(shí)驗(yàn)分組處理后，收集培養(yǎng)基上清，按照ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟測(cè)定IL-6、IL-1β和TNF-α濃度。酶標(biāo)儀檢測(cè)450 nm處的吸光度值。

1.2.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡收集各組BEAS-2B細(xì)胞，調(diào)整為1×106個(gè)/ml的細(xì)胞懸液。取100 μl細(xì)胞懸液，按照Annexin V-FITC/PI雙染法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)檢測(cè)BEAS-2B細(xì)胞凋亡率。

1.2.5 Western blot檢測(cè)HDAC3、Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)收集各組BEAS-2B細(xì)胞，細(xì)胞裂解液提取總蛋白。4℃、13 000 g離心20 min，BCA蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定上清中的蛋白濃度。取25μg蛋白樣品進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳，蛋白分離后將其轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜，5%脫脂牛奶室溫封閉膜1 h。加入一抗溶液4℃孵育過(guò)夜。用二抗溶液室溫孵育膜1 h。洗膜后，用Syngene軟件對(duì)印跡進(jìn)行分析。

1.2.6 雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)將含有miR-543結(jié)合位點(diǎn)的野生型（WT）或含有miR-543結(jié)合位點(diǎn)突變序列的突變型（MUT）的3'UTR-HDAC3分別插入pmirGLO熒光素酶報(bào)告載體，分別命名為WTHDAC3、MUT-HDAC3，該步驟由北京華大基因有限公司完成。利用Lipofectamine 2000試劑將WT/MUTHDAC3分 別 與miR-543 mimics或miR-NC轉(zhuǎn) 染 到BEAS-2B細(xì)胞，轉(zhuǎn)染48 h使用雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)BEAS-2B細(xì)胞熒光素酶活性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析每個(gè)實(shí)驗(yàn)組設(shè)置3個(gè)平行實(shí)驗(yàn)，重復(fù)3次。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s表示。采用SPSS20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，通過(guò)SNK-q法進(jìn)行兩兩比較。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 miR-543和HDAC3在LPS誘導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞損傷中的表達(dá)與Con組比較，LPS組BEAS-2B細(xì)胞中miR-543表達(dá)顯著降低，而HDAC3 mRNA和HDAC3蛋白表達(dá)顯著升高（P<0.05）。見(jiàn)圖1、表1。

表1 miR-543和HDAC3在LPS誘導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞損傷中的表達(dá)（±s，n=9）Tab.1 Expressions of miR-543 and HDAC3 in LPS-in?duced airway epithelial cell injury（±s，n=9）

表1 miR-543和HDAC3在LPS誘導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞損傷中的表達(dá)（±s，n=9）Tab.1 Expressions of miR-543 and HDAC3 in LPS-in?duced airway epithelial cell injury（±s，n=9）

Note：Compared with Con group，1）P<0.05.

Groups Con LPS t P miR-543 1.00±0.07 0.55±0.051）16.693<0.01 HDAC3 mRNA 1.00±0.06 2.85±0.271）20.066<0.01 HDAC3 protein 0.39±0.03 0.78±0.061）17.441<0.01

圖1 HDAC3蛋白表達(dá)Fig.1 HDAC3 protein expressions

2.2 miR-543過(guò)表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞炎癥因子表達(dá)的影響與Con組比較，LPS組BEAS-2B細(xì)胞中miR-543表達(dá)顯著降低，培養(yǎng)液上清中IL-6、IL-1β、TNF-α表達(dá)顯著升高，細(xì)胞凋亡率、Bax蛋白表達(dá)顯著升高，Bcl-2蛋白表達(dá)顯著降低；與LPS+miR-NC組 比 較，LPS+miR-543組BEAS-2B細(xì) 胞 中miR-543表達(dá)顯著升高，培養(yǎng)液上清中IL-6、IL-1β、TNF-α表達(dá)顯著降低，細(xì)胞凋亡率、Bax蛋白表達(dá)顯著降低，Bcl-2蛋白表達(dá)顯著升高（P<0.05）。見(jiàn)表2、圖2。

表2 miR-543過(guò)表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞損傷的影響（±s，n=9）Tab.2 Effect of miR-543 overexpression on LPS-induced airway epithelial cell damage（±s，n=9）

表2 miR-543過(guò)表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞損傷的影響（±s，n=9）Tab.2 Effect of miR-543 overexpression on LPS-induced airway epithelial cell damage（±s，n=9）

Note：Compared with Con group，1）P<0.05；compared with LPS+miR-NC group，2）P<0.05.

Groups Con LPS LPS+miR-NC LPS+miR-543 F P miR-543 1.00±0.05 0.53±0.051）0.51±0.04 0.86±0.072）185.843<0.01 IL-6/（ng·ml-1）56.32±5.88 136.25±11.251）139.58±10.52 69.33±6.252）221.135<0.01 IL-1β/（ng·ml-1）21.58±2.34 58.23±5.221）61.39±6.14 36.22±3.272）157.934<0.01 TNF-α/（ng·ml-1）95.36±9.28 183.62±13.471）188.25±14.62 125.32±10.272）126.265<0.01 Apoptosis rate/%6.32±0.63 27.14±2.771）29.82±2.84 11.36±1.172）275.604<0.01 Bcl-2 protein 0.69±0.06 0.27±0.031）0.25±0.03 0.58±0.052）223.101<0.01 Bax protein 0.32±0.03 0.76±0.071）0.78±0.08 0.40±0.042）149.130<0.01

圖2 miR-543過(guò)表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞凋亡的影響Fig.2 Effect of miR-543 overexpression on LPS-induced apoptosis of airway epithelial cells

2.3 miR-543靶向調(diào)控HDAC3的表達(dá)TargetScan在線分析顯示，miR-543與HDAC3的3'UTR之間存在互補(bǔ)結(jié)合位點(diǎn)，見(jiàn)圖3。miR-543 mimics與WTHDAC3共轉(zhuǎn)染組BEAS-2B細(xì)胞熒光素酶活性較miR-NC和WT-HDAC3共轉(zhuǎn)染組顯著降低（P<0.05）；而miR-543 mimics與WT-HDAC3共轉(zhuǎn)染組BEAS-2B細(xì)胞熒光素酶活性與miR-NC和WT-HDAC3共轉(zhuǎn)染組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表3。miR-543組BEAS-2B細(xì)胞HDAC3蛋白表達(dá)較miR-NC組顯著降低；anti-miR-543組BEAS-2B細(xì)胞HDAC3蛋白表達(dá)較miR-NC組顯著升高（P<0.05），見(jiàn)圖4、表4。

表4 miR-543調(diào)控HDAC3蛋白的表達(dá)（±s，n=9）Tab.4 miR-543 regulates expression of HDAC3 protein（±s，n=9）

表4 miR-543調(diào)控HDAC3蛋白的表達(dá)（±s，n=9）Tab.4 miR-543 regulates expression of HDAC3 protein（±s，n=9）

Note：Compared with miR-NC group，1）P<0.05；compared with antimiR-NC group，2）P<0.05.

Groups miR-NC miR-543 anti-miR-NC anti-miR-543 F P 0.43±0.04 0.21±0.021）0.40±0.03 0.86±0.072）347.846<0.01 HDAC3

圖4 HDAC3蛋白表達(dá)Fig.4 HDAC3 protein expression

表3 雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)（±s，n=9）Tab.3 Dual luciferase report experiment（±s，n=9）

表3 雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)（±s，n=9）Tab.3 Dual luciferase report experiment（±s，n=9）

Note：Compared with miR-NC group，1）P<0.05.

Groups miR-NC miR-543 t P WT-HDAC3 0.99±0.07 0.36±0.041）23.443<0.01 MUT-HDAC3 1.00±0.06 0.98±0.06 0.707 0.490

圖3 HDAC3的3'UTR中含有與miR-543互補(bǔ)的核苷酸序列Fig.3 3'UTR of HDAC3 contains a nucleotide sequence complementary to miR-543

2.4 干擾HDAC3表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞損傷的影響與Con組比較，LPS組BEAS-2B細(xì)胞HDAC3和Bax蛋白表達(dá)、凋亡率顯著升高，Bcl-2蛋白表達(dá)顯著降低，培養(yǎng)液上清中IL-6、IL-1β、TNF-α表達(dá)顯著升高；與LPS+si-NC組比較，LPS+si-HDAC3組BEAS-2B細(xì)胞HDAC3和Bax蛋白表達(dá)、凋亡率顯著降低，Bcl-2蛋白表達(dá)顯著升高，培養(yǎng)液上清中IL-6、IL-1β、TNF-α表達(dá)顯著降低（P<0.05）。見(jiàn)圖5、表5。

表5 干擾HDAC3表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞損傷的影響（±s，n=9）Tab.5 Effects of interfering with HDAC3 expression on LPS-induced airway epithelial cell damage（±s，n=9）

表5 干擾HDAC3表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞損傷的影響（±s，n=9）Tab.5 Effects of interfering with HDAC3 expression on LPS-induced airway epithelial cell damage（±s，n=9）

Note：Compared with Con group，1）P<0.05；compared with LPS+si-NC group，2）P<0.05.

Groups Con LPS LPS+si-NC LPS+si-HDAC3 F P HDAC3 protein 0.37±0.04 0.81±0.071）0.82±0.08 0.48±0.042）130.924<0.01 IL-6/（ng·ml-1）51.78±5.22 138.62±12.361）142.96±13.25 78.55±7.862）175.011<0.01 IL-1β/（ng·ml-1）22.65±2.27 63.59±6.281）64.87±6.33 40.57±4.852）135.931<0.01 TNF-α/（ng·ml-1）91.23±9.36 186.32±14.571）191.36±15.32 141.52±13.572）108.997<0.01 Apoptosis rate/%7.21±0.72 26.58±2.631）28.47±2.88 14.63±1.422）206.270<0.01 Bcl-2 protein 0.67±0.06 0.26±0.031）0.25±0.03 0.51±0.052）189.987<0.01 Bax protein 0.31±0.03 0.77±0.071）0.79±0.08 0.44±0.042）150.152<0.01

圖5 干擾HDAC3表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞凋亡的影響Fig.5 Effect of interfering with HDAC3 expression on LPS-induced apoptosis of airway epithelial cells

2.5 HDAC3過(guò)表達(dá)逆轉(zhuǎn)了miR-543過(guò)表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞損傷的作用與LPS+miR-NC組 比 較，LPS+miR-543組BEAS-2B細(xì) 胞HDAC3和Bax蛋白表達(dá)、凋亡率顯著降低，Bcl-2蛋白表達(dá)顯著升高，培養(yǎng)液上清中IL-6、IL-1β、TNF-α顯著降低；與LPS+miR-543+pcDNA組比較，LPS+miR-543+pcDNA-HDAC3組BEAS-2B細(xì)胞HDAC3和Bax蛋白表達(dá)、凋亡率顯著升高，Bcl-2蛋白表達(dá)顯著降低，培養(yǎng)液上清中IL-6、IL-1β、TNF-α顯著升高（P<0.05）。見(jiàn)表6、圖6。

表6 HDAC3過(guò)表達(dá)逆轉(zhuǎn)了miR-543過(guò)表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞損傷的作用（±s，n=9）Tab.6 HDAC3 overexpression reverses effect of miR-543 overexpression on LPS-induced airway epithelial cell damage（±s，n=9）

表6 HDAC3過(guò)表達(dá)逆轉(zhuǎn)了miR-543過(guò)表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞損傷的作用（±s，n=9）Tab.6 HDAC3 overexpression reverses effect of miR-543 overexpression on LPS-induced airway epithelial cell damage（±s，n=9）

Note：Compared with LPS+miR-NC group，1）P<0.05；compared with LPS+miR-543+pcDNA group，2）P<0.05.

Groups LPS+miR-NC LPS+miR-543 LPS+miR-543+pcDNA LPS+miR-543+pcDNA-HDAC3 F P HDAC3 protein 0.83±0.07 0.42±0.041）0.40±0.03 0.72±0.072）136.073<0.01 IL-6/（ng·ml-1）141.36±13.25 68.23±6.821）66.98±6.63 120.54±12.012）123.726<0.01 IL-1β/（ng·ml-1）62.58±6.28 38.22±3.811）35.49±3.55 50.43±5.012）60.704<0.01 TNF-α/（ng·ml-1）189.25±13.54 117.36±11.471）115.93±12.53 168.37±13.422）75.158<0.01 Apoptosis rate/%27.22±2.73 12.24±1.251）11.73±1.18 21.58±2.162）135.471<0.01 Bcl-2 protein 0.24±0.03 0.57±0.051）0.59±0.06 0.36±0.032）130.329<0.01 Bax protein 0.76±0.07 0.39±0.041）0.37±0.03 0.65±0.062）122.045<0.01

3 討論

微小RNA（microRNAs，miRNA）是由18~25個(gè)核苷酸組成的單鏈非編碼RNA，其通過(guò)在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因表達(dá)在包括哮喘在內(nèi)的多種肺部疾病中發(fā)揮作用［6］。研究顯示，哮喘患者中miR-192-5p表達(dá)下調(diào)，上調(diào)miR-192-5p可抑制Ⅰ型膠原蛋白沉積，減輕哮喘患者的氣道重塑和氣道平滑肌細(xì)胞自噬［7］。miR-20b可能通過(guò)調(diào)控血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）表達(dá)對(duì)哮喘小鼠氣道炎癥產(chǎn)生抑制作用［8］。上調(diào)miR-20a-5p通過(guò)調(diào)控信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活子3（signal transducer and activator of transcription 3，STAT3）表達(dá)可降低細(xì)胞的生存能力，促進(jìn)TGF-β1引發(fā)的細(xì)胞凋亡，是哮喘治療的潛在靶點(diǎn)［9］。LPS是一種內(nèi)毒素，可誘導(dǎo)免疫細(xì)胞、非免疫細(xì)胞的炎癥反應(yīng)，誘導(dǎo)氣道上皮細(xì)胞損傷［10-12］。本研究發(fā)現(xiàn)，LPS誘導(dǎo)后BEAS-2B細(xì)胞凋亡率、凋亡促進(jìn)蛋白Bax表達(dá)、炎癥因子IL-6、IL-1β和TNF-α分泌顯著升高，miR-543表達(dá)降低，提示miR-543可能參與氣道上皮細(xì)胞損傷。進(jìn)一步功能獲得實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miR-543功能發(fā)現(xiàn)，恢復(fù)miR-543表達(dá)可降低LPS誘導(dǎo)下炎癥因子IL-6、IL-1β和TNF-α分泌水平，降低Bax蛋白表達(dá)，升高Bcl-2蛋白，抑制LPS誘導(dǎo)的BEAS-2B細(xì)胞凋亡。提示過(guò)表達(dá)miR-543可減輕LPS誘導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞凋亡和炎癥損傷。

HDAC3是HDAC家族成員之一，研究顯示HDAC可能通過(guò)影響絲裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase，MAPK）、核因子κB（nuclear factor κB，NF-κB）通路，控制炎癥細(xì)胞因子水平，最終引起哮喘小鼠氣道炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，增加氣道炎癥反應(yīng)，使用HDAC抑制劑可緩解哮喘小鼠氣道炎癥、氣道重塑和氣道高反應(yīng)［13-14］。然而，有研究指出，哮喘患者、香煙煙霧刺激的致敏大鼠氣道HDAC2活性降低，與疾病的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)［15-16］。本研究發(fā)現(xiàn)LPS誘導(dǎo)后BEAS-2B細(xì)胞中HDAC3表達(dá)顯著升高，進(jìn)一步功能缺失實(shí)驗(yàn)探索HDAC3功能作用發(fā)現(xiàn)，干擾HDAC3表達(dá)可降低LPS誘導(dǎo)下炎癥因子IL-6、IL-1β和TNF-α分泌水平，降低Bax蛋白表達(dá)，升高Bcl-2蛋白，抑制LPS誘導(dǎo)的BEAS-2B細(xì)胞凋亡，與過(guò)表達(dá)miR-543作用相一致。同時(shí)，本研究發(fā)現(xiàn)HDAC3是miR-543的 下 游 靶 基 因，且miR-543對(duì)HDAC3具有負(fù)調(diào)控作用。過(guò)表達(dá)HDAC3能夠逆轉(zhuǎn)miR-543過(guò)表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞凋亡和炎癥損傷的影響。提示miR-543對(duì)LPS誘導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用與調(diào)控HDAC3表達(dá)有關(guān)。

綜上所述，miR-543通過(guò)靶向下調(diào)HDAC3可抑制LPS誘導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞的凋亡和炎癥損傷。因此，miR-543有望成為支氣管哮喘防治的有效靶點(diǎn)。