不同來源蜂花粉對皖西白鵝生長性能和胃組織結(jié)構(gòu)功能的影響

張鋒燕，任 曼*，余 琦，徐茂森，袁宇塵，趙春芳，江衛(wèi)軍，李升和*

（1.安徽科技學(xué)院動物科學(xué)學(xué)院，動物營養(yǎng)調(diào)控與健康安徽省重點實驗室，安徽鳳陽 233100；2.安徽展羽生態(tài)農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司，安徽六安 237100）

蜂花粉是蜜蜂從植物花蕊內(nèi)采集的花粉粒，并加入腺體分泌物混合而成的一種不規(guī)則扁圓形狀物。蜂花粉富含必需氨基酸、礦物質(zhì)、多糖和維生素等營養(yǎng)成分，具有促進動物生長發(fā)育和提高免疫力等多種生理功能。蜂花粉種類繁多，來源多樣，其功能也有一定差異。相關(guān)研究表明，蜂花粉可促進動物生長發(fā)育、降低炎癥因子含量、加強腸道免疫和改善腸道屏障功能等特點。廖呂燕等研究表明，添加不同劑量的油菜花粉超微粉可顯著提高肉雞體質(zhì)量，促進肉雞生長。李娟等研究表明，蕎麥蜂花粉多糖可以改善小鼠腸道隱窩結(jié)構(gòu)，加強腸道免疫，促進小鼠生長發(fā)育及免疫器官發(fā)育。位孟聰研究發(fā)現(xiàn)，板栗蜂花粉可以提高五龍鵝的繁殖性能，并且疾病少、抗病力強。

皖西白鵝是我國優(yōu)良的地方水禽，在國際市場上享有“世界珍禽”美譽。與傳統(tǒng)放牧相比，集約化飼養(yǎng)易導(dǎo)致各種疾病的發(fā)生和自身抵抗力下降。因此，開展提高皖西白鵝抗病抗逆性的研究具有重要意義。本試驗旨在研究油菜蜂花粉和茶花蜂花粉對皖西白鵝生長性能、肌胃和腺胃組織結(jié)構(gòu)及功能的作用，以期開發(fā)出相應(yīng)綠色飼料添加劑為規(guī)模化養(yǎng)鵝業(yè)的健康發(fā)展提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計與日糧 皖西白鵝購自六安市裕安區(qū)軍明皖西白鵝良種繁育基地。選用30 日齡健康的皖西白鵝150只，隨機分成3組，每組5個重復(fù)，每個重復(fù)10只鵝。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗組分別在基礎(chǔ)日糧中添加200 mg/kg茶花蜂花粉（葆春蜂王漿有限責任公司）、200 mg/kg油菜蜂花粉（上海冠生園蜂制品有限公司），試驗期為60 d。試驗日糧由玉米、豆粕、稻谷、麥麩、石粉、稻殼等組成。日糧營養(yǎng)成分參考“中國飼料成分與營養(yǎng)價值表2019”計算?；A(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)成分見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)成分（風干基礎(chǔ)）

1.2 飼養(yǎng)管理 試驗鵝采用地面平養(yǎng)，自由采食、飲水，嚴格按照養(yǎng)鵝場提供的免疫程序免疫。

1.3 樣品采集與指標測定

1.3.1 生長性能 試驗期間每天09:00以組內(nèi)的每個重復(fù)為單位記錄剩余料重，統(tǒng)計采食量。在試驗開始第30、60、90 天時每只試驗鵝空腹稱重并記錄。計算每只鵝的平均采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）、耗料增重比（F/G）。

1.3.2 肌胃、腺胃器官指數(shù) 分別在試驗開始第60、90天時各組中隨機選取5只鵝（每個重復(fù)1只）頸靜脈放血處死，屠宰放血后解剖分離肌胃（去角質(zhì)及內(nèi)容物）、腺胃分別稱重，并計算臟器指數(shù)。

1.3.3 肌胃、腺胃組織觀察 肌胃和腺胃稱重后剝開，用生理鹽水沖洗后取出一塊組織置于4%福爾馬林溶液中固定，石蠟包埋，連續(xù)切片，厚度為5 μm，蘇木精-伊紅（HE）染色，在全自動顯微鏡（BA600-4）下觀察其組織結(jié)構(gòu)。

1.3.4 腺胃胃蛋白酶活力測定 鵝屠宰后，取腺胃組織0.1 g，按1:9加勻漿介質(zhì)，組織勻漿（Schwing muhle Tissue Lyser2勻漿機）、2 500 r/min離心10 min，取上清液，用試劑盒（南京建成生物工程研究所）測定腺胃的胃蛋白酶活性。

1.4 統(tǒng)計分析 數(shù)據(jù)采用IBM SPSS Statistic 23軟件進行統(tǒng)計分析，各數(shù)據(jù)之間的差異性采用單因子方差分析（One-Way ANOVA LSD）法進行多重比較分析，以<0.05作為差異顯著性判斷標準。所有數(shù)據(jù)均用平均值±標準差表示。

2 結(jié)果

2.1 不同來源蜂花粉對皖西白鵝生長性能的影響 如表2所示，試驗各組30、60、90日齡體重差異不顯著，油菜蜂花粉組、茶花蜂花粉組30～60、60～90、30～90日齡ADFI、ADG、F/G與對照組均無顯著差異。

表2 不同來源蜂花粉對皖西白鵝生長性能的影響

2.2 不同來源蜂花粉對皖西白鵝器官指數(shù)的影響 如表3所示，90日齡皖西白鵝的肌胃重量略高于60日齡，90日齡腺胃重量與60日齡差異不顯著。而90日齡的肌胃指數(shù)和腺胃指數(shù)低于60日齡。油菜蜂花粉組、茶花蜂花粉組皖西白鵝60、90日齡的肌胃重、腺胃重、肌胃指數(shù)和腺胃指數(shù)與對照組均無顯著差異。

表3 不同來源蜂花粉對皖西白鵝肌胃腺胃器官指數(shù)的影響

2.3 不同來源蜂花粉對皖西白鵝腺胃、肌胃組織結(jié)構(gòu)的影響 腺胃和肌胃的結(jié)構(gòu)可分為黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜4層。如圖1所示，與60日齡相比，90日齡腺胃的腺體數(shù)量多，排列緊湊，腺小管密集，深層黏膜肌厚。60日齡，對照組腺胃單管腺排列不整齊且較短，深層復(fù)管腺稀疏；茶花蜂花粉組淺層管狀腺排列整齊且較長，深層復(fù)管腺密集且數(shù)量多，深層黏膜肌比較厚，固有層管狀腺數(shù)量較多；油菜蜂花粉組腺胃單管腺排列不整齊，腺體大小不一；茶花蜂花粉組腺胃發(fā)育較好。90日齡，對照組腺胃的單管腺較短，腺體數(shù)量不多而且不緊湊；油菜蜂花粉組腺體數(shù)量多，排列緊湊，黏膜層和深層黏膜肌較厚，發(fā)育優(yōu)于對照組和茶花蜂花粉組。

圖1 不同來源蜂花粉對皖西白鵝腺胃組織結(jié)構(gòu)的影響（HE染色，×400）

肌胃黏膜層表面分布一層硬度較大的類角質(zhì)膜。如圖2所示，與60日齡相比，90日齡肌胃腺長且排列整齊，類角質(zhì)膜平整，說明肌胃結(jié)構(gòu)更趨于成熟。60日齡，對照組肌胃腺較短，油菜蜂花粉組黏膜層厚，肌層也較厚，肌胃腺長且排列整齊，并且上皮下陷形成漏斗狀的隱窩較深；茶花蜂花粉組肌胃腺數(shù)量多但較短，隱窩較淺但類角質(zhì)膜較厚。90日齡，油菜蜂花粉組、茶花蜂花粉組肌胃的黏膜上皮比對照組厚，肌胃腺排列整齊。60日齡時，茶花蜂花粉組的肌胃發(fā)育較好；90日齡時，油菜蜂花粉組肌胃發(fā)育優(yōu)于對照組、茶花蜂花粉組。

圖2 不同來源蜂花粉對皖西白鵝肌胃組織結(jié)構(gòu)的影響（HE染色，×400）

2.4 不同來源蜂花粉對皖西白鵝腺胃胃蛋白酶活力的影響 如圖3所示，90日齡皖西白鵝腺胃的胃蛋白酶活性高于60日齡（<0.01）。60日齡，油菜蜂花粉組、茶花蜂花粉組腺胃胃蛋白酶活力與對照組沒有顯著差異；90日齡，油菜蜂花粉組高于對照組和茶花蜂花粉組（<0.01），茶花蜂花粉組與對照組相比無顯著差異。

圖3 不同來源蜂花粉對皖西白鵝腺胃胃蛋白酶活力的影響

3 討 論

皖西白鵝屬于中型肉絨兼用品種，是同類型中早期生長最快的地方鵝品種之一。從4周齡開始其生長加速，至第5周時體重生長強度達到高峰，之后生長強度降低，至第7周齡趨于穩(wěn)定。8周齡后主要是骨骼和羽毛生長，尤其毛囊快速發(fā)育和羽毛的生長，飼料轉(zhuǎn)化效率顯著降低。有研究發(fā)現(xiàn)，添加0.5%、1.0%、1.5%油菜蜂花粉對產(chǎn)蛋高峰期和產(chǎn)蛋后期蘆花雞的ADFI、料蛋比、平均蛋重無顯著影響，但添加1.0%油菜蜂花粉可以顯著提高產(chǎn)蛋后期產(chǎn)蛋率。肉雞中添加2%蜂花粉多糖4周齡體重和F/G與對照組差異不顯著，但8周齡時體重和F/G與對照組差異顯著。本研究中，添加蜂花粉對皖西白鵝生長性能有一定提高，但影響不顯著，可能與添加劑量和鵝的周齡有關(guān)。劉曉紅等研究表明，與對照組相比，50 mg/kg茶花粉水提物組大鼠體重無顯著差異；意大利蜜蜂補飼茶花粉和油菜花粉可促進工蜂幼蟲生長并可顯著提高工蜂的壽命。不同品種和產(chǎn)地蜂花粉的礦物元素和蛋白質(zhì)等營養(yǎng)含量的差異非常大。不同品種蜂花粉的總黃酮含量和自由基清除能力差異也較大。油菜蜂花粉的總黃酮含量較高，具有較強的自由基清除活性和抗氧化潛力。本研究中，添加相同劑量的油菜蜂花粉和茶花蜂花粉對動物生長性能的影響均不顯著，但油菜蜂花粉總體效果較好，這可能與油菜花粉中多不飽和脂肪酸（Polyunsaturated Fatty Acid，PUFA）含量豐富有關(guān)。油菜蜂花粉中-亞麻酸（α-Linolenic Acid，ALA）的含量占總脂肪酸含量的48.51%，飽和脂肪酸與PUFA比例合理，維生素E含量豐富，PUFA的平衡可以減少一些疾病的發(fā)生，對機體正常生長和內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定有重要作用。

腺胃和肌胃對皖西白鵝營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收、機體免疫和生長發(fā)育等具有至關(guān)重要的影響。鵝肌胃極其發(fā)達，崩解壓力遠遠大于雞和鴨，能把植物細胞壁壓裂，利于吸收細胞內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)。肌胃黏膜是由上皮和固有層構(gòu)成，沒有黏膜肌層，在黏膜表面覆蓋有一層厚而且粗糙的類角質(zhì)膜，俗稱肫皮，中藥稱“雞內(nèi)金”，它具有保護黏膜的作用，并可抵抗蛋白酶、稀酸和弱酸的作用，對吞入食物起機械性磨碎作用，消化能力強。本試驗通過組織結(jié)構(gòu)觀察發(fā)現(xiàn)，蜂花粉可顯著改善肌胃的組織結(jié)構(gòu)，促進肌胃腺發(fā)育，類角質(zhì)膜更加平整，黏膜下層發(fā)育較厚。腺胃亦稱前胃，紡錘型，黏膜表面有許多圓形乳頭，乳頭體積較小，但是數(shù)量較多。腺胃具有分泌黏液、酸及酶的功能，對飼料的磨碎起到了潤滑和柔化的作用，有助于粗飼料的進一步粉碎和消化，而酸所帶來的pH降低也有助于纖維素分解菌的生長。家禽的腺胃較小，其內(nèi)腔比食管內(nèi)腔略大，但由于腺胃黏膜固有層內(nèi)存在大量深層復(fù)管腺，所以比食管壁厚很多，腺體腺細胞具有家畜胃底腺中壁細胞和主細胞的特征，這表明該細胞既能分泌鹽酸又能分泌胃蛋白酶。蜂花粉中具有抗氧化、抗腫瘤、抗菌、提高免疫力、清除自由基等功效，對沙門氏菌、大腸桿菌具有良好的殺滅作用，能夠促進胃液分泌和改善腸道功能。研究表明，日糧中添加蜂花粉能夠改善蛋雞消化道的組織結(jié)構(gòu)并增強機體的消化吸收功能。本試驗研究顯示，添加油菜蜂花粉腺胃的深層復(fù)管腺數(shù)量多且密集，黏膜層變厚，而深層復(fù)管腺可以分泌鹽酸和胃蛋白酶。本研究中，90日齡時油菜蜂花粉組胃蛋白酶活力極顯著高于對照組和茶花蜂花粉組，這可能與油菜蜂花粉中的黃酮類物質(zhì)比其他類花粉要高，而黃酮類化合物具有很好的保健和促消化作用。

4 結(jié) 論

本研究結(jié)果表明，在基礎(chǔ)日糧中添加200 mg/kg的油菜蜂花粉和200 mg/kg茶花蜂花粉對皖西白鵝生長性能沒有顯著影響，但可以改善皖西白鵝肌胃和腺胃組織結(jié)構(gòu)，提高腺胃胃蛋白酶活力，增強機體消化吸收功能，其中200 mg/kg油菜蜂花粉對皖西白鵝應(yīng)用效果較好。