裂殖壺藻對牦牛生長性能的影響及其機制

高 磊，洪 金，張麗萍，阿懷娜，劉晨曦，盧福山，常 蘭，張 壽

裂殖壺藻對牦牛生長性能的影響及其機制

高 磊，洪 金，張麗萍，阿懷娜，劉晨曦，盧福山，常 蘭，張 壽*

(青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院，西寧 810016)

為了研究裂殖壺藻飼喂對牦牛生長性能的影響，將24頭2～3歲健康雄性牦牛分為對照組和微藻組，每組12頭，對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，微藻組每天在基礎(chǔ)日糧加入200 g·頭-1的裂殖壺藻，進(jìn)行為期60 d的飼喂試驗。試驗期間記錄兩組牦牛日均采食量變化；測定兩組牦牛飼喂前后體重和體尺指標(biāo)變化；ELISA檢測血清生長激素（GH）、三碘甲狀腺原氨酸（T3）和甲狀腺素（T4）變化規(guī)律；飼喂結(jié)束后進(jìn)行屠宰，分離器官和組織計算屠宰率；同時熒光定量PCR（qPCR）和蛋白免疫印跡（WB）檢測試驗60 d后兩組牛體內(nèi)生長相關(guān)因子表達(dá)變化，探究裂殖壺藻飼喂影響牦牛生長性能的作用機制。結(jié)果表明，與對照組相比，裂殖壺藻飼喂后，牦牛體重、胸圍和屠宰率顯著增加（< 0.05），血清生長相關(guān)激素GH、T3和T4含量均顯著增加（< 0.01），生長相關(guān)基因（）和生長相關(guān)蛋白（AMPK1）表達(dá)顯著上調(diào)（< 0.01）。綜上所述，裂殖壺藻飼喂促進(jìn)牦牛生長激素水平升高，調(diào)控牦牛生長相關(guān)因子表達(dá)，從而加快其生長發(fā)育和生長性能提升，為牦牛繁育和飼料改良提供了一定的理論依據(jù)。

裂殖壺藻；牦牛；生長性能；生長激素；AMPKα1

牦牛（）作為世居青藏高原的土著動物，與當(dāng)?shù)亟?jīng)濟、文化和生態(tài)環(huán)境等息息相關(guān)[1]。牦牛肉具有極高的營養(yǎng)價值，富含蛋白質(zhì)、氨基酸及鈣、磷等微量元素，脂肪含量低，熱量高，對增強人體免疫力有顯著作用[2]。高原地區(qū)冬季漫長，牧草枯萎，會造成牦牛營養(yǎng)缺乏、免疫力低下甚至體況衰竭死亡，產(chǎn)生重大的經(jīng)濟損失[3]。牦牛生長和繁育性能較低[4]，嚴(yán)重制約著牦牛產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

裂殖壺藻（）是一種單細(xì)胞海洋真菌，具有體積小、種類多，繁殖速度快、光合效率高的特點，是生態(tài)系統(tǒng)的初級生產(chǎn)者[5]。裂殖壺藻中含有豐富的維生素（如生物素、葉酸、泛酸等）、氨基酸（含有賴氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、異亮氨酸、亮氨酸和纈氨酸6種必需氨基酸）、多糖、不飽和脂肪酸、核酸、礦物質(zhì)（如碘、鐵、鉀等）、色素（如類胡蘿卜素和葉綠素）等，被廣泛應(yīng)用于醫(yī)療保健、化妝品等行業(yè)[6]。反芻動物可以消化藻類生物的細(xì)胞壁，從而利用藻類的非蛋白氮，因此可將裂殖壺藻作為反芻動物的飼料添加劑[7]。研究表明，裂殖壺藻作為一種飼料添加劑，可以促進(jìn)家畜的生長與發(fā)育，提高家畜生長性能[8]。裂殖壺藻飼喂可以顯著提高生長羔羊的生產(chǎn)性能和脂肪酸含量[9]。日糧添加裂殖壺藻對雞的種蛋受精率、孵化率和健雛率都有明顯的促進(jìn)作用[10]。

綜上所述，裂殖壺藻飼喂可以提高反芻動物和禽類的生長性能及抵抗力，但對牦牛的生長性能是否也有影響，卻鮮見報道。因此，為探明裂殖壺藻飼喂對牦牛生長性能的影響機制，本研究通過分析裂殖壺藻飼喂牦牛前后其體重、體尺指標(biāo)，血清GH、T3和T4水平，屠宰率和生長相關(guān)因子變化規(guī)律，以期尋找一種新的提升牦牛生長和繁育水平的有效途徑，為牦牛繁育和肉品質(zhì)改良提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

牦牛，24頭，2～3歲、雄性、健康、初始體重（200 kg左右）相近，由青海省海西州金穗牧業(yè)有限公司提供。

1.2 試驗材料和主要試劑

生長激素（GH）、三碘甲狀腺原氨酸（T3）和甲狀腺素（T4）試劑盒，均購自南京建辰生物工程研究所有限公司；蛋白裂解液購自碧云天公司；蛋白濃度檢測試劑盒購自凱基生物公司；兔抗腺苷磷酸激活蛋白激酶α1（AMPKα1，ab32047）抗體購自Abcam公司；鼠抗β-actin抗體購自三箭生物技術(shù)有限公司；驢抗兔IgG（H+L）二抗購自Thermo Fisher公司；TRIzol、反轉(zhuǎn)錄試劑盒和SYBR? Premix Ex Taq II均購自TaKaRa公司；裂殖壺藻（營養(yǎng)成分：水分2.3%，粗灰分2.8%，蛋白質(zhì)21%，脂質(zhì)41.2%，碳水化合物32.7%），購自西安小草植物科技有限責(zé)任公司；精料補充料，購自青海河湟青牧飼料科技開發(fā)有限公司。

1.3 方法

1.3.1 試驗設(shè)計及飼喂管理 將24頭年齡為2～3歲、初始體重為200 kg左右的雄性牦牛分為對照組和微藻組，每組12頭，每組分為4欄，每欄3頭。根據(jù)文獻(xiàn)報道[11]，對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，微藻組在基礎(chǔ)日糧中加入200 g·d-1·頭-1的裂殖壺藻，每天8:00和18:00飼喂2次，并記錄飼喂量，第2天飼喂前記錄剩余飼料量，計算日采食量，試驗期為60 d?；A(chǔ)日糧由粗飼料及精料補充料構(gòu)成，將裂殖壺藻混入精料補充料中，保證每天每頭牛能夠采食足夠的裂殖壺藻。根據(jù)農(nóng)業(yè)部肉牛飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（NY/T 815-2004）[12]進(jìn)行規(guī)范化消毒、防疫、驅(qū)蟲工作，自由采食和飲水。日糧組成及營養(yǎng)水平見表1所示。

1.3.2 日均采食量 試驗期間每天記錄飼喂前后飼料重量，計算每頭牦牛的采食量，然后計算兩組牛每天的日均采食量；飼喂試驗結(jié)束后，計算并對比對照組與微藻組牦牛的總?cè)站墒沉?，分析兩組牦牛日均采食量差異。

1.3.3 體重和體尺指標(biāo) 分別于試驗前（第0天）和試驗后（第61天），在牦牛處于放松的自然站立狀態(tài)下，用電子秤測定兩組牛體重，使用體尺儀和皮質(zhì)軟尺分別測定兩組牛體高、體長、胸圍和管圍等生長指標(biāo)，分析飼喂試驗前后兩組牦牛體重和體尺指標(biāo)的變化。

1.3.4 屠宰性能 飼喂試驗結(jié)束后（第61天），在定點屠宰場，按照牛屠宰操作規(guī)程（GB/T 19477-2018）[13]進(jìn)行屠宰；屠宰前稱宰前活重，每頭牦牛頸靜脈放血，去頭、蹄、尾和內(nèi)臟，保留雙腎以及周圍脂肪，剝皮劈半后稱胴體重，計算屠宰率[14]，公式如下：

屠宰率=屠宰后胴體重/宰前活體重×100%

1.3.5 血清生長相關(guān)激素 分別于試驗前（第0天）和試驗后（第61天）對每頭牦牛進(jìn)行頸靜脈采血，室溫環(huán)境析出血清，2 000 r·min-1離心30 min，分離得到上清，-20℃保存?zhèn)溆?。ELISA檢測生長相關(guān)激素GH、T3和T4含量變化，ELISA檢測步驟詳見試劑盒說明書。

1.3.6 生長相關(guān)基因表達(dá)檢測 飼喂試驗結(jié)束后（第61天），在定點屠宰場屠宰，采集每頭牦牛肝臟組織，標(biāo)記后液氮保存。TRIzol法提取總RNA，生物分光光度計測值并計算總RNA濃度，取RNA樣品各1 μg，進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄合成cDNA。根據(jù)NCBI公布的基因序列設(shè)計合適的qPCR引物（表2），按照qPCR SYBR green MIX試劑操作說明進(jìn)行反應(yīng)。根據(jù)樣本的Ct值，采用2-ΔΔCT相對定量法進(jìn)行結(jié)果分析，為內(nèi)參基因。qPCR檢測兩組牦牛肝臟中生長相關(guān)基因（）表達(dá)量差異。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平

注：預(yù)混料為每kg日糧提供維生素A 4 000 IU，維生素D 300 IU，維生素E 50 IU，鐵48 mg，銅 8 mg，錳 20 mg，鋅 20 mg，硒 0.1 mg。

表2 qPCR引物序列

1.3.7 生長相關(guān)蛋白表達(dá)檢測 飼喂試驗結(jié)束后（第61天），在定點屠宰場屠宰，采集每頭牦牛肝臟組織，標(biāo)記后液氮保存。采用組織勻漿器研磨肝臟組織提取蛋白，BCA法測定蛋白濃度，取20 μg蛋白樣品進(jìn)行SDS-PAGE電泳，電泳結(jié)束后將蛋白轉(zhuǎn)印至PVDF膜上；5 %脫脂奶粉室溫封閉PVDF膜2 h；將PVDF膜分別置于一抗工作液中，在搖床上4 ℃搖晃過夜，PBST洗膜4次，每次5 min；將PVDF膜置于辣根過氧化物酶HRP標(biāo)記的二抗IgG工作液中，搖床上室溫孵育1.5 h；PBST洗膜4次，每次5 min。洗滌結(jié)束后，用PBS漂洗PVDF膜一次，稍微晾干，將膜置于塑料自封袋內(nèi)，在暗室中將ECL發(fā)光液滴加至PVDF膜上，作用1 min；然后用圖像分析系統(tǒng)測定各帶吸光值作定量分析。WB檢測兩組牦牛肝臟中生長相關(guān)蛋白（AMPKα1）表達(dá)量差異。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

利用Sigma plot v14.0軟件對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行計算和處理，并進(jìn)行單因素方差分析（檢驗）和雙因素方差分析（Two way ANOVA），數(shù)據(jù)采用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”形式表示，以＜0.05作為差異顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧中添加裂殖壺藻對牦牛日均采食量影響

測定試驗過程兩組牦牛每天采食量，計算試驗60 d兩組牦牛日均采食量。與對照組相比，微藻組日均采食量并沒有顯著的增加（＞ 0.05）（表3），說明采食量不會對后續(xù)試驗結(jié)果造成干擾。

2.2 日糧中添加裂殖壺藻對牦牛體重及體尺指標(biāo)的影響

分別測定試驗前后兩組牦牛體重和體尺指標(biāo)（體長、體高、胸圍和管圍）的變化，測定結(jié)果見表4。

由表4可知，與試驗前（第0天）相比，飼喂60 d后（第61天），兩組牦牛體重、胸圍和管圍均極顯著增加（< 0.001）；對照組牦牛體長極顯著增加（< 0.01），微藻組牦牛體長顯著增加（< 0.05）；兩組牦牛體高均極顯著增加（< 0.01）。

與對照組相比，微藻組在飼喂60 d后體重和胸圍均極顯著增加（< 0.01），其余指標(biāo)變化不明顯（0.05），表明裂殖壺藻飼喂對牦牛體重和體尺指標(biāo)增加有促進(jìn)作用。

表3 兩組牦牛日均采食量對比結(jié)果

表4 牦牛體重和體尺指標(biāo)的測定結(jié)果

注：同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)大寫字母不同表示差異極顯著（< 0.01），大寫字母相同、小寫字母不同表示差異顯著（<0.05），大小寫字母均相同表示差異不顯著（＞0.05）；相同指標(biāo)內(nèi)，與試驗前對比，數(shù)據(jù)肩標(biāo)*表示差異顯著（< 0.05），**表示差異極顯著（< 0.01），***表示差異極顯著（< 0.001），未標(biāo)*表示差異不顯著（＞0.05）。下同。

表5 裂殖壺藻飼喂對牦牛屠宰性能的影響

2.3 日糧中添加裂殖壺藻對牦牛屠宰率的影響

飼喂試驗結(jié)束后在定點屠宰場進(jìn)行屠宰，測定兩組牦牛屠宰率。由表5可知，微藻組屠宰率極顯著高于對照組（< 0.01），說明裂殖壺藻飼喂可以提高牦牛的屠宰性能。

2.4 日糧中添加裂殖壺藻對牦牛血清生長相關(guān)激素的影響

分別在試驗前（第0天）和試驗后（第61天）頸靜脈采血，測定兩組牦牛血清生長相關(guān)激素水平，測定結(jié)果見圖1。由結(jié)果可知，微藻組（feed）牦牛第61天血清中GH、T3和T4含量均極顯著高于飼喂前（< 0.001）；與對照組（unfed）相比，微藻組（feed）牦牛第61天血清中GH和T4含量也均極顯著升高（< 0.001），表明裂殖壺藻飼喂對牦牛血清生長相關(guān)激素的分泌有促進(jìn)作用。

數(shù)據(jù)肩標(biāo)*表示差異顯著（P < 0.05），**表示差異極顯著（P < 0.01），***表示差異極顯著（P < 0.001），未標(biāo)*表示差異不顯著（P ＞0.05）。unfed表示對照組，feed表示微藻組。下同。

Figure 1 Effect offeeding on changes of serum growth related hormones in yak

圖2 裂殖壺藻飼喂對牦牛肝臟生長相關(guān)基因表達(dá)的影響

Figure 2 Effect offeeding on expression of growth related genes in yak liver

(a) 蛋白免疫印跡結(jié)果；(b) 灰度分析。

Figure 3 Effect offeeding on expression of growth related protein in yak liver

2.5 日糧中添加裂殖壺藻對牦牛生長相關(guān)基因表達(dá)的影響

為了探究裂殖壺藻飼喂對牦牛生長性能影響的機制，飼喂試驗結(jié)束后在定點屠宰場進(jìn)行屠宰，取兩組牦牛肝臟組織，檢測兩組牦牛第61天肝臟中生長相關(guān)基因表達(dá)差異（圖2）。由結(jié)果可知，與對照組（unfed）相比，微藻組（feed）牦牛第61天肝臟中生長相關(guān)基因（）表達(dá)量均極顯著升高（< 0.001），表明裂殖壺藻飼喂對牦牛生長相關(guān)基因的表達(dá)有促進(jìn)作用。

2.6 日糧中添加裂殖壺藻對牦牛生長相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

為了探究裂殖壺藻飼喂對牦牛生長性能影響的機制，飼喂試驗結(jié)束后在定點屠宰場進(jìn)行屠宰，取兩組牦牛肝臟組織，檢測兩組牦牛第61天肝臟中生長相關(guān)蛋白表達(dá)差異（圖3）。由結(jié)果可知，與對照組（unfed）相比，微藻組（feed）牦牛第61天肝臟中生長相關(guān)蛋白（AMPKα1）表達(dá)極顯著升高（< 0.001），表明裂殖壺藻飼喂對牦牛生長相關(guān)蛋白的表達(dá)有促進(jìn)作用。

3 討論

3.1 裂殖壺藻飼喂促進(jìn)牦牛生長發(fā)育和屠宰率的提高

研究表明，各類微藻中的蛋白質(zhì)含量豐富，反芻動物依靠獨特的瘤胃微生物系統(tǒng)，對微藻具有更強的消化能力[15]。因此，在畜牧養(yǎng)殖中，微藻常作為飼料添加劑促進(jìn)家畜的生長發(fā)育[16]。鈍項螺旋藻和小球藻飼喂均能顯著提高斷奶犢牛的平均日增重和微生物蛋白產(chǎn)量[17]。微藻飼喂能顯著提高羔羊的生長性能和飼料轉(zhuǎn)化率[18]，裂殖壺藻飼喂羔羊的平均日增重顯著提高[9]。添加藍(lán)藻和螺旋藻飼喂豬的平均日增重可以提高9.26%[19]，螺旋藻飼喂對斷奶仔豬生長指標(biāo)和平均日增重有顯著促進(jìn)作用[20]。螺旋藻飼喂肉仔雞體增重和料重比顯著提高[21]，螺旋藻飼喂能顯著提高肉雞的平均活體重和試驗結(jié)束時活體重、飼料轉(zhuǎn)化率[22]，飼糧中添加螺旋藻的蛋雞產(chǎn)蛋率、蛋重和飼料轉(zhuǎn)化率顯著提升[23]。裂壺藻粉可以提高星斑川鰈幼魚的生長性能和營養(yǎng)價值[24]。通過測定家畜體重和體尺指標(biāo)計算其不同生長時期的生長曲線并進(jìn)行預(yù)測，可以確定適宜的屠宰年齡，控制家畜的生長發(fā)育，同時進(jìn)行體重、體尺間的相關(guān)性分析，以掌握生長發(fā)育的規(guī)律[25]。本研究結(jié)果與上述研究結(jié)果一致，飼喂試驗后，兩組牦牛體重和體尺指標(biāo)均有顯著增加，這與牛隨著日齡的增加，采食和生長有關(guān)；飼喂60 d后，與對照組相比，微藻組牦牛體重和胸圍均顯著增加，說明裂殖壺藻飼喂可以增加牦牛生長相關(guān)指標(biāo)，對其生長發(fā)育有明顯的促進(jìn)作用。

屠宰性能是動物經(jīng)濟價值的直觀表現(xiàn)，是衡量動物產(chǎn)肉性能和生長性能的重要指標(biāo)[26]，也是判斷動物生長發(fā)育的主要依據(jù)[27]。作為微藻的一種，裂殖壺藻含有豐富的蛋白質(zhì)和不飽和脂肪酸，具有改善畜禽產(chǎn)品品質(zhì)的作用[11]。研究表明，日糧蛋白水平的提升，可使肉驢背膘厚度增高和脂肪沉積增 加[28]，高精料日糧飼喂可提高肉驢凈肉率、肉骨比、屠宰率和脂肪沉積[29]，混合日糧飼喂的絨山羊胴體重和屠宰率顯著高于對照組[30]。其他研究證明，微藻營養(yǎng)豐富，蛋白質(zhì)、脂質(zhì)含量較高，飼喂后動物肌肉生長和脂肪的沉積加快[31]，說明添加營養(yǎng)物質(zhì)豐富的微藻飼喂，通過加快動物肌肉生長和脂肪的沉積，提高屠宰率。本研究結(jié)果與上述研究發(fā)現(xiàn)一致，微藻組牦牛屠宰率增加，產(chǎn)肉性能提高。

3.2 裂殖壺藻飼喂調(diào)控牦牛生長相關(guān)因子表達(dá)，提高其生長性能

研究表明，腺苷磷酸激活蛋白激酶α1（AMPKα1）是一種在真核細(xì)胞生物中廣泛存在的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶。作為細(xì)胞內(nèi)最重要的能量感受器，AMPKα1在細(xì)胞生長、繁殖、維持機體能量平衡以及細(xì)胞代謝過程中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用[32]。AMPKα1的活性主要受到細(xì)胞內(nèi)磷酸腺苷/三磷酸腺苷（AMP/ATP）水平、肝激酶和鈣調(diào)素依賴蛋白激酶等因素的影響[33]。黑皮質(zhì)激素受體4（MC4R）作為蛋白耦聯(lián)受體成員之一，在動物的采食、能量代謝和體重調(diào)節(jié)方面發(fā)揮關(guān)鍵作用[34]。MC4R作為能量平衡的調(diào)控信號分子，可以顯著增加陸川豬的背膘厚度[35]。同時，MC4R對哺乳動物采食量的調(diào)控也有著至關(guān)重要的作用[36]。肝X受體（LXRα）主要在哺乳動物肝臟組織中廣泛表達(dá)，是一種氧化固醇激活核受體，參與機體多種生理活動的調(diào)節(jié)，包括膽固醇的代謝和轉(zhuǎn)運，脂肪的形成[37]。肝激酶（LKB1）是一類多糖裂解酶，參與細(xì)胞能量調(diào)節(jié)、細(xì)胞極性調(diào)節(jié)和細(xì)胞凋亡等多種生理學(xué)過程。LKB1依賴于AMPKα1在維持動物機體細(xì)胞能量平衡中發(fā)揮作用[38]。LKB1是AMPKα1的上游激酶，可以磷酸化AMPKα1間接參與調(diào)控細(xì)胞能量水平和代謝狀態(tài)，調(diào)控細(xì)胞的生長，進(jìn)而影響機體的生長發(fā)育[39]。LKB1的高表達(dá)能促進(jìn)骨骼發(fā)育，進(jìn)而促進(jìn)牦牛的產(chǎn)肉性能[40]。本研究結(jié)果與上述研究發(fā)現(xiàn)一致，飼喂添加裂殖壺藻的飼料后，微藻組牦牛生長性能、體內(nèi)AMPKα1蛋白和生長相關(guān)基因（）表達(dá)量均顯著升高，表明裂殖壺藻飼喂的牦牛通過調(diào)控體內(nèi)生長相關(guān)因子的表達(dá)，促進(jìn)能量代謝，加速牦牛生長發(fā)育水平，從而影響其生長性能。

3.3 裂殖壺藻飼喂增加牦牛生長激素含量，從而調(diào)控生長相關(guān)因子表達(dá)，提高其生長性能

生長激素（GH）是由動物腦垂體前葉分泌的一種具有特異性的單鏈蛋白質(zhì)類激素，能促進(jìn)骨、軟骨、肌肉以及其他組織細(xì)胞分裂增殖，蛋白質(zhì)合成增加；對糖、脂肪和蛋白質(zhì)代謝都具有促進(jìn)作用[41]。GH可以促進(jìn)牛的生長發(fā)育[42]。作為合成GH非常重要的前體物質(zhì)，三碘甲狀腺原氨酸（T3）和甲狀腺素（T4）的含量和比例直接決定機體生成GH的多少[43]。研究表明，T4通常被認(rèn)為是一種促激素，需要轉(zhuǎn)化為T3來發(fā)揮生物活性[42]。T3可以調(diào)節(jié)細(xì)胞生長分化，調(diào)節(jié)軟骨和軟骨細(xì)胞的發(fā)育和增殖[45]。T3可以促進(jìn)黑骨雞生長和肌肉蛋白質(zhì)積累[46]。同時，T3和T4還具有促進(jìn)糖脂氧化分解，促進(jìn)生長發(fā)育，提高中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮性的作用[47]。本研究結(jié)果與上述研究發(fā)現(xiàn)一致，飼喂添加裂殖壺藻的飼料后，微藻組牦牛體內(nèi)的GH、T3和T4含量均顯著高于飼喂前；飼喂60 d后，微藻組牦牛GH和T4含量也明顯高于對照組，說明裂殖壺藻飼喂的牦牛通過提升生長相關(guān)激素水平，影響其生長性能。

GH為一種重要的代謝調(diào)節(jié)激素，可以調(diào)節(jié)機體能量代謝[48]。研究表明，GH能夠作用于犢牛肝臟、肌肉等細(xì)胞，促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成代謝和脂肪的分解，將養(yǎng)分分配于各組織間吸收利用，促進(jìn)機體組織和骨骼的生長[42]。在細(xì)胞水平，GH通過結(jié)合并激活生長激素受體（GHR）及其下游信號通路，誘導(dǎo)對生長和代謝的多種效應(yīng)[49]。AMPK作為線粒體能量代謝信號通路分子，受線粒體內(nèi)AMP/ATP比例影響，調(diào)節(jié)細(xì)胞能量代謝[50]。研究表明，生長激素受體基因GHR敲除鼠體內(nèi)生長發(fā)育受阻，壽命縮短，并且肝臟組織中代謝相關(guān)基因AMPKα1表達(dá)量顯著下調(diào)[51]。IGF1作為一種GHR激活因子，可以激活肝實質(zhì)細(xì)胞GHR的表達(dá)，從而激活A(yù)MPKα1的表達(dá)[52]。GH基因過表達(dá)顯著提高了鮭魚骨骼肌細(xì)胞AMPKα1的表達(dá)[53]。以上證據(jù)充分說明，GH可以調(diào)節(jié)動物體內(nèi)代謝相關(guān)的AMPK信號通路表達(dá)。本研究結(jié)果與上述研究發(fā)現(xiàn)一致，微藻組牦牛生長性能提高，血清GH含量升高，同時肝臟AMPKα1表達(dá)量顯著上調(diào)，說明裂殖壺藻飼喂提高牦牛生長激素水平，通過調(diào)控GHR-AMPK信號通路，增加生長相關(guān)因子的表達(dá)，促進(jìn)能量代謝，從而影響其生長性能。

綜上所述，裂殖壺藻飼喂提高牦牛生長相關(guān)激素含量，調(diào)控其體內(nèi)生長相關(guān)因子的表達(dá)，加快牦牛的生長發(fā)育，促進(jìn)生長指標(biāo)和屠宰率等生長性能的提升。

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Effect ofaffecting the growth performance and its mechanism in yaks

GAO Lei, HONG Jin, ZHANG Liping, A Huaina, LIU Chenxi, LU Fushan, CHANG Lan, ZHANG Shou

(College of Agriculture and Animal Husbandry, Qinghai University, Xining 810016)

In order to study the effect offeeding on the growth performance in yaks, 24 healthy male yaks aged 2-3 years were divided into control group and microalgae group, with 12 in each group. The control group was fed with basic diet, and the microalgae group added 200 g·head-1to the basic diet every day for 60 days. During the experiment, the changes of daily average feed intake of yaks in two groups were recorded; The changes of body weight and body size were measured before and after feeding; Changes of serum Growth hormone (GH), Triiodothyronine (T3) and Thyroxine (T4) were detected and analyzed by ELISA. After feeding, the carcass percentage was calculated by separating organs and tissues; Fluorescence quantitative PCR (qPCR) and Western blotting (WB) were used to detect the expression changes of growth related factors in the two groups after 60 days, so as to explore the mechanism offeeding on the growth performance in yaks. The results showed that, compared with control group, the body weight, chest circumference and slaughter rate were significantly increased (< 0.05), the expression levels of serum growth related hormones GH, T3 and T4 were significantly increased (< 0.01), and the growth related genes (,,,) and growth related protein (AMPKα1) were significantly up-regulated (< 0.01) afterfeeding in yaks. In conclusion,feeding increase the growth hormone levels, via regulates the expression of growth related factors and promotes their growth and development performance in yak, which provides a certain theoretical basis for yak breeding and feed improvement.

; Yak; growth performance; growth hormone; AMPKα1

S823.85；S818.9

A

1672-352X (2022)06-0927-08

10.13610/j.cnki.1672-352x.20230106.006

2023-01-06 17:27:43

[URL] https://kns.cnki.net/kcms/detail//34.1162.S.20230106.1200.008.html

2021-12-26

青海省科技廳自然科學(xué)基金青年項目（2022-ZJ-934Q），青海大學(xué)青年科研基金（2021-QNY-8），青海省科技廳科技成果轉(zhuǎn)化專項（2018-NK-107）和青海省科技廳科技援青合作專項（2020-QY-217）共同資助。

高 磊，博士，講師。E-mail：2019990029@qhu.edu.cn

張 壽，教授。E-mail：895169158@qq.com