微生物檢驗(yàn)技術(shù)在慢性胃炎幽門螺桿菌臨床診斷中的價(jià)值研究

饒晶晶

湖北省荊門市中醫(yī)醫(yī)院(石化醫(yī)院)檢驗(yàn)科，湖北荊門 448000

慢性胃炎是臨床中最常見(jiàn)的一類胃病表現(xiàn)，發(fā)病率較高，臨床研究表明，慢性胃炎的發(fā)生，與患者幽門螺桿菌（Helicobacter pylori，Hp）感染、外部環(huán)境變化、膽汁反流、藥物刺激、口腔/咽部感染等因素密切相關(guān)，其中Hp 感染是引起慢性胃炎的最主要因素。在臨床中，針對(duì)慢性胃炎的治療，受到對(duì)Hp 感染認(rèn)知、判斷不足等因素的影響，無(wú)法及時(shí)完成對(duì)早期患者的確診，隨著病情的進(jìn)展，導(dǎo)致患者出現(xiàn)消化性潰瘍、胃神經(jīng)功能損傷等并發(fā)癥，并且影響患者的治療效果。微生物是一種無(wú)法通過(guò)肉眼觀察的體型微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的生物，必須通過(guò)實(shí)驗(yàn)室光學(xué)顯微鏡觀察。微生物主要包含原核微生物、真菌微生物以及無(wú)細(xì)胞生物三類，其中細(xì)菌是原核微生物的代表類型，真菌、藻類以及原蟲(chóng)是真菌微生物代表類型，病毒是無(wú)細(xì)胞生物的代表類型，微生物檢驗(yàn)技術(shù)即指通過(guò)光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡、組織培養(yǎng)、超速離心等方式，對(duì)微生物進(jìn)行檢驗(yàn)的技術(shù)。作為醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的一項(xiàng)重要組成部分，微生物檢驗(yàn)技術(shù)能夠幫助臨床對(duì)感染性疾病作出微生物學(xué)的診斷參考，并且經(jīng)過(guò)系統(tǒng)的檢驗(yàn)方案，對(duì)臨床標(biāo)本作出及時(shí)、準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷、抗菌藥物敏感性報(bào)告[1]。目前臨床已普遍認(rèn)為，通過(guò)微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)，能夠加強(qiáng)臨床醫(yī)師對(duì)臨床診治的把握。本研究就此展開(kāi)探討，以微生物檢驗(yàn)技術(shù)的臨床價(jià)值為重點(diǎn)，納入50 例慢性胃炎患者，分析該技術(shù)對(duì)臨床治療的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年1月至2021年1月荊門市中醫(yī)醫(yī)院收治的50 例慢性胃炎確診患者作為研究對(duì)象。50 例患者中，男23 例，女27 例；年齡23～66 歲，平均（40.12±5.01）歲；病程2～15年，平均（7.75±1.35）年。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者在入院時(shí)臨床病情癥狀符合慢性胃炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②患者在入院后均接受胃鏡檢查，發(fā)現(xiàn)其胃黏膜位置有充血、紅腫、糜爛等癥狀；③神經(jīng)以及語(yǔ)言功能正常；④認(rèn)同本次實(shí)驗(yàn)并簽署知情同意書(shū)，愿意配合醫(yī)護(hù)人員的治療及護(hù)理。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①處于妊娠期或哺乳期的婦女；②存在胃部及十二指腸病變患者，上消化道出血患者；③存在心臟等重要臟器的功能性障礙；④臨床資料缺失。

1.2 方法

患者入院后，首先對(duì)所有患者進(jìn)行胃鏡檢查，對(duì)患者的胃黏膜組織進(jìn)行取樣，送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行活檢標(biāo)本檢測(cè)，包括快速尿激酶實(shí)驗(yàn)以及組織病理學(xué)檢查，對(duì)患者是否存在Hp 感染進(jìn)行綜合判定。依次對(duì)取樣標(biāo)本進(jìn)行超速離心與分離培養(yǎng)。

分離培養(yǎng)方案：非選擇性培養(yǎng)基選擇綿羊血（5%濃度）+布氏瓊脂的心腦浸液，選擇性培養(yǎng)基選擇改良Skirrow 瓊脂，設(shè)定環(huán)境參數(shù)（O2：5%，CO2：10%，N2：85%），需氧環(huán)境，溫度室溫37℃，持續(xù)孵育3～5 d，待活檢標(biāo)本出現(xiàn)細(xì)小、灰白色、半透明、不溶血的菌落，即停止孵育，對(duì)其進(jìn)行觀察。

超速離心方案：采用實(shí)驗(yàn)室himac CP70NE 型號(hào)超速離心機(jī)儀器（日本Koki Holding Co.Ltd.），對(duì)活檢標(biāo)本，應(yīng)用密度梯度離心法完成離心操作，選用蔗糖為介質(zhì)，按照試驗(yàn)要求設(shè)定好離心速度與時(shí)間，使其沉降，將樣品中的粒子逐漸分離，并于其對(duì)應(yīng)密度梯度層中分布，通過(guò)虹吸法，對(duì)密度梯度中的溶液進(jìn)行分段收集，后進(jìn)行檢驗(yàn)。

1.3 觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

①計(jì)算不同微生物檢驗(yàn)技術(shù)（分離培養(yǎng)方案、超速離心方案）的準(zhǔn)確度、敏感度與特異性。②檢測(cè)判定標(biāo)準(zhǔn)：參考快速尿激酶實(shí)驗(yàn)以及組織病理學(xué)檢查結(jié)果（“金標(biāo)準(zhǔn)”），將超聲離心方案、分離培養(yǎng)方案中最終測(cè)定結(jié)果作為統(tǒng)一檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，如檢測(cè)結(jié)果提示為陽(yáng)性，則判定Hp 感染為陽(yáng)性，如檢測(cè)結(jié)果提示為陰性，則判定Hp 感染為陰性[2]。敏感度=真陽(yáng)性/（真陽(yáng)性+假陰性）×100%；特異度=真陰性/（假陽(yáng)性+真陰性）×100%；準(zhǔn)確度=（真陽(yáng)性+真陰性）/總例數(shù)×100%。③檢驗(yàn)滿意度評(píng)分：主要包括患者對(duì)醫(yī)護(hù)人員的工作態(tài)度、技術(shù)水平、管理水平以及檢驗(yàn)及時(shí)性四個(gè)方面，評(píng)分均采用Likert 5 級(jí)評(píng)分量表[3]，設(shè)定滿意、較滿意、較不滿意、不滿意以及很不滿意5項(xiàng)指標(biāo)，分別設(shè)定其分值為5、4、3、2 分及1分，統(tǒng)計(jì)其總滿意度得分。該量表信度系數(shù)為0.8134。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，兩組間比較采用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 超速離心培養(yǎng)與分離培養(yǎng)的診斷價(jià)值

金標(biāo)準(zhǔn)的Hp 陽(yáng)性患者為27 例、Hp 陰性患者為23 例。超速離心培養(yǎng)中，Hp 陽(yáng)性患者27 例，Hp 陰性患者22 例，超速離心培養(yǎng)準(zhǔn)確度為98.00%（49/50），敏感度為100.00%（27/27），特異性為95.65%（22/23）。分離培養(yǎng)中，Hp 陽(yáng)性患者28 例，Hp 陰性患者22 例，分離培養(yǎng)準(zhǔn)確度為94.00%（47/50），敏感度為96.29%（26/27），特異性為91.30%（21/23）（表1）。

表1 超速離心培養(yǎng)與分離培養(yǎng)的診斷價(jià)值

2.2 超速離心培養(yǎng)與分離培養(yǎng)準(zhǔn)確率、敏感度、特異性的比較

超速離心培養(yǎng)與分離培養(yǎng)的準(zhǔn)確度、敏感度、特異性比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；超速離心培養(yǎng)與分離培養(yǎng)的檢驗(yàn)滿意度評(píng)分比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（表2）。

表2 超速離心培養(yǎng)與分離培養(yǎng)準(zhǔn)確率、敏感度、特異性的比較[%（n/N）]

2.3 超速離心培養(yǎng)與分離培養(yǎng)檢驗(yàn)滿意度的比較

超速離心培養(yǎng)滿意度為（4.14±0.82）分，分離培養(yǎng)滿意度為（4.07±0.55）分，二者比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.215，P=0.830）。

3 討論

慢性胃炎在臨床中，具有如下表現(xiàn)，反酸、上腹隱痛、食欲減退、腹瀉以及嘔吐等[4]，在臨床中慢性胃炎的治療上，常見(jiàn)的有對(duì)癥治療與藥物干預(yù)治療，但無(wú)論是哪種治療方案，都需要建立在慢性胃炎確診的基礎(chǔ)上，而臨床在慢性胃炎的診斷中，有胃液分析、血清學(xué)檢測(cè)、胃腸X 線鋇餐檢測(cè)、胃鏡、活體組織檢查等方式[5]。但是慢性胃炎存在一定的特殊性，即其臨床癥狀特異性較弱，因此，通過(guò)上述檢查無(wú)法精確、高效地完成診斷，例如，在X 線檢查中，僅僅能夠?qū)ζ渌覆考膊∵M(jìn)行排除，從而確診，因此，胃鏡、胃黏膜活體組織檢查是一般情況下臨床優(yōu)先選用的方法[6]?，F(xiàn)代病理學(xué)結(jié)果證實(shí)，Hp 感染與慢性胃炎的發(fā)生密切相關(guān)，然而Hp 感染其臨床傳播途徑較廣，隱匿性較強(qiáng)，此外，臨床中在對(duì)胃鏡檢查人群進(jìn)行操作的過(guò)程中，也可能存在Hp 感染風(fēng)險(xiǎn)，一方面增加了Hp 感染的高危性，另一方面也對(duì)患者的機(jī)體健康形成了一定程度的損傷[7-8]。

微生物具有體型微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的特點(diǎn)，無(wú)法通過(guò)肉眼進(jìn)行觀察，在臨床中必須借助光學(xué)/電子顯微鏡輔助觀察，微生物檢驗(yàn)結(jié)束是指利用超速離心、光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡、組織培養(yǎng)等輔助方式，對(duì)微生物的存在情況進(jìn)行評(píng)估的技術(shù)[9]。在臨床檢驗(yàn)技術(shù)中，微生物檢驗(yàn)技術(shù)具有經(jīng)濟(jì)適用、操作簡(jiǎn)單、無(wú)需侵入的優(yōu)勢(shì)，患者對(duì)該技術(shù)的耐受度較強(qiáng)[10]。而微生物檢驗(yàn)技術(shù)也憑借其及時(shí)、準(zhǔn)確的檢驗(yàn)優(yōu)勢(shì)，為臨床提供了高質(zhì)量的病原學(xué)診斷依據(jù)[11-12]。

本研究結(jié)果顯示，金標(biāo)準(zhǔn)的Hp 陽(yáng)性患者為27 例、Hp 陰性患者為23 例。超速離心培養(yǎng)中，Hp 陽(yáng)性患者27 例，Hp 陰性患者22 例，超速離心培養(yǎng)準(zhǔn)確度為98.00%（49/50），敏感度為100.00%（27/27），特異性為95.65%（22/23）。分離培養(yǎng)中，Hp 陽(yáng)性患者28 例，Hp陰性患者22 例，分離培養(yǎng)準(zhǔn)確度為94.00%（47/50），敏感度為96.29%（26/27），特異性為91.30%（21/23）。超速離心培養(yǎng)與分離培養(yǎng)的準(zhǔn)確度、敏感度、特異性比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；超速離心培養(yǎng)與分離培養(yǎng)的檢驗(yàn)滿意度評(píng)分比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。超速離心培養(yǎng)滿意度為（4.14±0.82）分，分離培養(yǎng)滿意度為（4.07±0.55）分，二者比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

其中，超速離心技術(shù)，能夠配合超速離心機(jī)，完成分離、制備、物質(zhì)分析等操作，將標(biāo)本的活性物質(zhì)通過(guò)離心后，根據(jù)其密度、比重形成的密度梯度帶[13]，完成對(duì)活檢標(biāo)本中的物質(zhì)分析；分離培養(yǎng)則是從自然物中混雜的微生物群落里，獲取純種微生物的檢驗(yàn)技術(shù)。在慢性胃炎患者的診斷中，微生物檢驗(yàn)技術(shù)具有較高的準(zhǔn)確度、靈敏度與特異性，能夠?qū)z驗(yàn)活標(biāo)本中的Hp 感染情況進(jìn)行分析，具有較高的適用性[14-16]。

綜上所述，在慢性胃炎患者的Hp 診斷中，借助超速離心培養(yǎng)與分離培養(yǎng)完成輔助診斷，能夠有效評(píng)估臨床對(duì)患者Hp 感染情況，反饋患者的病原菌情況。