美沙拉嗪結(jié)合錫類散灌腸治療潰瘍性結(jié)腸炎的效果及對患者免疫功能和細(xì)胞因子的影響

蔡 怡 賀明潔 羅培培

江蘇大學(xué)附屬武進(jìn)醫(yī)院消化內(nèi)科，江蘇常州 213000

潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）是一種由多種原因引起的結(jié)腸慢性復(fù)發(fā)性炎癥。近年來，UC 在中國的發(fā)病率顯著增加。大多數(shù)患者具有復(fù)發(fā)性的特點(diǎn)，輕度和長期緩解的UC 患者預(yù)后良好，但慢性或復(fù)發(fā)性患者預(yù)后較差，病程較長的患者癌變概率較高[1]。腸道菌群主要參與腸道內(nèi)物質(zhì)的分解代謝，以維持正常的生理功能，當(dāng)疾病發(fā)生時(shí)，腸道菌群的數(shù)量和類型會發(fā)生變化。腸道菌群失調(diào)是導(dǎo)致免疫反應(yīng)紊亂和細(xì)胞炎癥反應(yīng)的重要因素，而免疫反應(yīng)紊亂和細(xì)胞炎癥反應(yīng)是導(dǎo)致UC 的重要因素[2]。目前臨床上對UC 尚無有效的治療方法。中醫(yī)治療有其獨(dú)特的優(yōu)勢，中西醫(yī)結(jié)合治療UC 具有廣闊的發(fā)展前景[3]。美沙拉嗪當(dāng)前仍然是UC 的一線藥物，然而，研究發(fā)現(xiàn)，隨著使用時(shí)間的增加，其治療效果會下降，一些患者會出現(xiàn)明顯的胃腸道不適，嚴(yán)重甚至耐藥[4]。提高UC 患者的治療效果已成為一個(gè)非常重要的研究課題。錫類散是一種古方中成藥，國內(nèi)研究已將其應(yīng)用于UC 患者，療效顯著[5]。本研究選取在江蘇大學(xué)附屬武進(jìn)醫(yī)院診治的76 例UC 患者作為研究對象，主要探討美沙拉嗪結(jié)合錫類散灌腸對UC 的療效，并分析此治療方式對患者免疫功能和細(xì)胞因子的影響，旨在為臨床UC 的治療提供一定的參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1月至2021年1月在江蘇大學(xué)附屬武進(jìn)醫(yī)院診治的76 例UC 患者作為研究對象，按隨機(jī)數(shù)字表法將其分為對照組和研究組，每組各38 例。對照組中，男19 例，女19 例；年齡23～55 歲，平均（30.17±2.06）歲；病程1～5年，平均（3.03±1.06）年。觀察組中，男17 例，女21 例；年齡23～56 歲，平均（30.24±2.17）歲；病程1.5～6年，平均（3.02±1.17）年。兩組患者性別、年齡、病程等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)江蘇大學(xué)附屬武進(jìn)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核及同意，所有患者均知曉本研究情況并簽署知情同意書。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者均符合UC 診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；②所有患者的一般資料齊全；③主動配合研究者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病者；②感染性腹瀉者；③伴有其他器質(zhì)性腸病者；④凝血功能異常者；⑤妊娠和哺乳婦女；⑥有精神和認(rèn)知障礙患者。

1.2 方法

對照組患者給予美沙拉嗪（葵花藥業(yè)集團(tuán)佳木斯鹿靈制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H19980148，生產(chǎn)批號：20170326，規(guī)格：0.25 g）1 g 口服，3 次/d。

研究組患者在對照組的基礎(chǔ)上給予錫類散（江蘇信邦制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字Z32020770，生產(chǎn)批號：20170624，規(guī)格：1 g）1.0 g 加入0.9%生理鹽水100 ml混勻，保留灌腸，每晚臨睡前1 次，灌腸保留時(shí)間3～4 h，連用3 周，休息1 周。

兩組患者的療程均為8 周，治療期間禁止使用其他治療UC 的藥物。注意補(bǔ)充高熱量、高蛋白、易消化的食物，不吃冷、辣、刺激性食物，確保足夠的休息時(shí)間。

1.3 觀察指標(biāo)及評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1 臨床療效評價(jià) 參照《炎癥性腸病診斷與治療的共識意見（2018年·北京）》[7]對兩組患者的臨床療效進(jìn)行評價(jià)。顯效：癥狀消失，結(jié)腸鏡檢查結(jié)腸黏膜完全恢復(fù)正常；有效：癥狀明顯改善，結(jié)腸鏡檢查結(jié)腸黏膜輕度炎癥；無效：癥狀和結(jié)腸鏡檢查均無明顯改善?？傆行?（顯效+有效）例數(shù)/總例數(shù)×100%。

1.3.2 免疫指標(biāo) 采集所有患者清晨抗凝靜脈血5 ml，由檢驗(yàn)科使用CyFlow Cube6 流式細(xì)胞儀（廣州吉源生物科技有限公司）檢測患者的輔助性T 細(xì)胞（helper T cells，Th17）和調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞（regulatory T cell，Treg）、T 細(xì)胞亞群（CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）、自然殺傷細(xì)胞（natural killer cell，NK）水平，采用BS-220 全自動生化分析儀（南京貝登醫(yī)療股份有限公司）以免疫比濁法檢測免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）A、IgG、IgM 水平。試劑盒均購自上海瑞番生物科技有限公司，嚴(yán)格按試劑盒說明書操作。

1.3.3 細(xì)胞因子 取所有患者清晨空腹外周靜脈血5 ml，4℃，轉(zhuǎn)速為2000 r/min，離心半徑為10 cm，離心10 min，于-70℃保存待測。觀察比較兩組患者治療前后的血清白細(xì)胞介素（interleukin，IL）10、IL-18、IL-6、IL-4、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）的變化，通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）進(jìn)行檢測，試劑盒購于上海西唐生物科技有限公司，嚴(yán)格按試劑盒說明書操作。

1.3.4 不良反應(yīng) 觀察兩組患者治療期間的不良反應(yīng)（腹部不適、惡心、納差）發(fā)生情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 26.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn)，組內(nèi)比較采用配對樣本t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者臨床療效的比較

研究組患者的治療總有效率高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表1）。

表1 兩組患者臨床療效的比較[n（%）]

2.2 兩組患者治療前后Th17、Treg 表達(dá)水平的比較

兩組患者治療前的Th17、Treg 表達(dá)水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；兩組患者治療后的Th17表達(dá)水平低于治療前，Treg 表達(dá)水平高于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；研究組患者治療后的Th17表達(dá)水平低于對照組，Treg 表達(dá)水平高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表2）。

表2 兩組患者治療前后Th17、Treg 表達(dá)水平的比較（%，±s）

表2 兩組患者治療前后Th17、Treg 表達(dá)水平的比較（%，±s）

對照組（n=38）治療前治療后t 值P 值研究組（n=38）治療前治療后t 值P 值t 治療前組間比較值P 治療前組間比較值t 治療后組間比較值P 治療后組間比較值5.89±1.23 4.21±1.02 6.481＜0.001 5.88±1.21 3.16±1.03 10.552＜0.001 0.036 0.970 4.465＜0.001 5.39±1.02 7.51±1.62 6.827＜0.001 5.40±0.22 8.62±1.42 13.814＜0.001 0.059 0.950 3.176＜0.001組別 Th17 Treg

2.3 兩組患者治療前后T 細(xì)胞亞群及NK 水平的比較

兩組患者治療前的CD4+、CD4+/CD8+、NK 水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；兩組患者治療后的CD4+、CD4+/CD8+、NK 水平高于治療前，CD8+水平低于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；研究組患者治療后的CD4+、CD4+/CD8+、NK 水平高于對照組，CD8+水平低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表3）。

表3 兩組患者治療前后T 細(xì)胞亞群及NK 水平的比較（±s）

表3 兩組患者治療前后T 細(xì)胞亞群及NK 水平的比較（±s）

對照組（n=38）治療前治療后t 值P 值研究組（n=38）治療前治療后t 值P 值t 治療前組間比較值P 治療前組間比較值t 治療后組間比較值P 治療后組間比較值32.12±3.22 38.86±2.17 10.700＜0.001 32.09±3.17 44.52±3.02 17.501＜0.001 0.041 0.970 9.382＜0.001 34.26±2.09 31.06±2.17 6.547＜0.001 34.17±2.06 26.23±3.01 13.419＜0.001 0.189 0.850 8.024＜0.001 1.06±0.32 1.42±0.22 5.715＜0.001 1.07±0.31 1.92±0.22 13.784＜0.001 0.138 0.890 9.907＜0.001 10.35±2.01 13.68±2.06 7.132＜0.001 10.34±2.11 17.28±2.31 13.674＜0.001 0.021 0.980 7.170＜0.001組別 CD4+（%） CD8+（%） CD4+/CD8+ NK（%）

2.4 兩組患者治療前后免疫球蛋白水平的比較

兩組患者治療前的IgA、IgG、IgM 水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；兩組患者治療后的IgA、IgG、IgM 水平低于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；研究組患者治療后的IgA、IgG、IgM 水平低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表4）。

表4 兩組患者治療前后免疫球蛋白水平的比較（g/L，±s）

表4 兩組患者治療前后免疫球蛋白水平的比較（g/L，±s）

對照組（n=38）治療前治療后t 值P 值研究組（n=38）治療前治療后t 值P 值t 治療前組間比較值P 治療前組間比較值t 治療后組間比較值P 治療后組間比較值1.97±0.22 1.72±0.32 3.969＜0.001 1.99±0.32 1.34±0.23 10.168＜0.001 0.317 0.350 5.944＜0.001 12.49±0.26 10.36±0.36 29.568＜0.001 12.51±0.26 8.53±0.28 64.209＜0.001 0.335 0.740 24.735＜0.001 1.37±0.22 1.24±0.39 2.202 0.030 1.38±0.21 1.10±0.01 8.210＜0.001 0.203 0.840 2.212 0.030組別 IgA IgG IgM

2.5 兩組患者治療前后細(xì)胞因子水平的比較

兩組患者治療前的IL-10、IL-4、IL-18、IL-6、TNF-α 水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；兩組患者治療后的IL-10、IL-4 水平均高于治療前，IL-18、IL-6、TNF-α 水平均低于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）； 研究組患者治療后的IL-10、IL-4 水平均高于對照組，IL-18、IL-6、TNF-α 水平均低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表5）。

表5 兩組患者治療前后細(xì)胞因子水平的比較（ng/ml，±s）

表5 兩組患者治療前后細(xì)胞因子水平的比較（ng/ml，±s）

對照組（n=38）治療前治療后t 值P 值研究組（n=38）治療前治療后t 值P 值t 治療前組間比較值P 治療前組間比較值t 治療后組間比較值P 治療后組間比較值10.85±2.17 15.22±3.06 7.181＜0.001 10.84±2.06 18.20±3.22 11.869＜0.001 0.021 0.980 4.135＜0.001 197.23±20.16 128.22±20.17 14.917＜0.001 198.16±20.22 88.26±10.16 29.938＜0.001 0.201 0.840 10.907＜0.001 275.23±30.13 176.25±20.17 16.828＜0.001 275.22±30.06 155.26±30.25 17.340＜0.001 0.001 1.000 3.559＜0.001 7.86±2.16 15.03±5.01 8.101＜0.001 7.87±2.09 20.22±5.13 13.743＜0.001＜0.001 1.000 4.462＜0.001 115.23±20.12 72.13±10.22 11.773＜0.001 114.17±20.06 56.27±10.26 15.841＜0.001 0.230 0.820 6.751＜0.001組別 IL-10 IL-18 IL-6 IL-4 TNF-α

2.6 兩組患者不良反應(yīng)總發(fā)生率的比較

兩組患者的不良反應(yīng)總發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（表6）。

表6 兩組患者不良反應(yīng)總發(fā)生率的比較[n（%）]

3 討論

UC 的發(fā)病機(jī)制尚不清楚。一些學(xué)者認(rèn)為炎癥細(xì)胞因子的失衡是UC 發(fā)病的關(guān)鍵。促炎因子水平的升高會損傷腸黏膜并引起疾病，炎癥反應(yīng)的程度與病情和預(yù)后有關(guān)。腸道免疫功能紊亂是UC 發(fā)生、發(fā)展的重要環(huán)節(jié)[8]。研究表明，腸黏膜受損后，其通透性增加，腸組織長期暴露于大量抗原，導(dǎo)致腸道免疫系統(tǒng)反應(yīng)和誤認(rèn)，激活巨噬和淋巴細(xì)胞，釋放細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)，并使全身和局部免疫系統(tǒng)紊亂，組織受損而引發(fā)UC[9]。因此，可以從細(xì)胞因子和免疫功能兩方面入手，找到科學(xué)有效的治療方法，對提高UC 的臨床療效具有十分重要的臨床意義。

5-氨基水楊酸（5-aminosalicylic acid，5-ASA）是治療UC 的首選藥物。5-ASA 可抑制腸黏膜中前列腺素的合成和炎癥介質(zhì)（如白三烯）的形成，具有抗炎作用，非常適合UC 患者。美沙拉嗪通過乙基纖維素包裹5-ASA，其pH 依賴性釋放微丸不易被胃酸分解，在胃內(nèi)失效，在腸道堿性環(huán)境下釋放5-ASA，發(fā)揮其功效。因?yàn)槠浒瑑蓚€(gè)5-ASA 分子，所以其比其他5-ASA 制劑具有顯著優(yōu)勢[10]。錫類散主要由象牙屑、青黛、人工牛黃、冰片、珍珠、人指甲、壁錢炭等組成，具有清熱解毒、活血止痛、收斂傷口、祛除腐肉的功效[11]。有研究證實(shí)，錫類散能消除腸黏膜充血水腫，促進(jìn)黏膜愈合[12]。

本研究結(jié)果顯示，研究組患者的治療總有效率高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），提示美沙拉嗪結(jié)合錫類散灌腸可提升UC 患者的臨床治療效果，分析原因：一方面，聯(lián)合用藥具有協(xié)同作用；另一方面，保留灌腸給藥藥效優(yōu)于傳統(tǒng)灌腸方法。在免疫功能方面，本研究結(jié)果顯示，研究組患者治療后的Th17表達(dá)水平低于對照組，Treg 表達(dá)水平高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；研究組患者治療后的CD4+、CD4+/CD8+、NK 水平高于對照組，CD8+水平低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；研究組患者治療后的IgA、IgG、IgM 水平低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），提示美沙拉嗪結(jié)合錫類散灌腸可改善UC 患者的免疫功能。細(xì)胞因子方面，本研究結(jié)果顯示，研究組患者治療后的IL-10、IL-4 水平均高于對照組，IL-18、IL-6、TNF-α 水平均低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），提示美沙拉嗪結(jié)合錫類散灌腸可減輕炎癥反應(yīng)，分析原因，改善腸道免疫功能和炎癥可能是美沙拉嗪結(jié)合錫類散灌腸的治療目標(biāo)。美沙拉嗪和錫類散的抗炎作用通過抑制炎癥細(xì)胞因子的釋放，改善腸道炎癥環(huán)境，調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞水平，糾正腸黏膜免疫功能紊亂[13]。美沙拉嗪可抑制UC 患者病原體繁殖，改善腸道炎癥，平衡腸道菌群，增強(qiáng)免疫力，顯著改善患者癥狀[14]。錫類散具有清熱解毒、去腐生肌的功效[3]。有研究認(rèn)為，錫類散有助于提高Toll樣受體4 的表達(dá)和核轉(zhuǎn)錄因子κB 的激活水平，減少炎性細(xì)胞因子的釋放，抑制炎癥和免疫反應(yīng)，修復(fù)黏膜和愈合潰瘍面[15]。另外，不良反應(yīng)方面，本研究結(jié)果顯示，兩組患者的不良反應(yīng)總發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），提示美沙拉嗪結(jié)合錫類散灌腸不會增加不良反應(yīng)發(fā)生，安全性較高。

綜上所述，美沙拉嗪結(jié)合錫類散灌腸可提升UC患者的臨床治療效果，改善UC 患者的免疫功能，減輕炎癥反應(yīng)，對免疫指標(biāo)和細(xì)胞因子均產(chǎn)生不同程度的影響，且安全性較高。