牛水皰性口炎的診斷與防控

陳立剛

（本溪滿族自治縣農(nóng)業(yè)綜合發(fā)展服務(wù)中心高官動(dòng)監(jiān)所 遼寧本溪 117100）

水皰性口炎是由水皰性口炎病毒引起的一種多種哺乳動(dòng)物感染的高度接觸性人畜共患病，牛感染后臨床特征性的癥狀為口部、乳頭和蹄部發(fā)生水皰[1]。水皰性口炎最早于1821 年發(fā)現(xiàn)于馬和騾，常見于牛、豬、馬。

1 發(fā)病原因

牛水皰性口炎的病原為水皰性口炎病毒，該病毒屬于彈狀病毒科水皰病毒屬，病毒基因組為RNA，病毒粒子呈子彈狀或圓柱狀，有囊膜，囊膜上有纖突。水皰性口炎病毒的基因組編碼5 種蛋白，分別為糖蛋白（G）、基質(zhì)蛋白（M）、核蛋白（N）、磷酸蛋白（NS）和RNA 聚合酶大蛋白（L）[2]。通過補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)和中和試驗(yàn)將水皰性口炎病毒分為印第安納株和新澤西株兩種血清型，兩種血清型無交叉反應(yīng)。水皰性口炎病毒可經(jīng)雞胚接種，接種后的雞胚絨毛尿囊膜有痘斑狀病變，感染的雞胚在1～2d 內(nèi)死亡。水皰性口炎病毒還可用雞胚成纖維細(xì)胞、Vero 進(jìn)而BHK-21 細(xì)胞進(jìn)行體外增殖。此外，水皰性口炎病毒可在埃及伊蚊、白紋伊蚊、果蠅的體內(nèi)或體外細(xì)胞系中增殖。水皰性口炎病毒對(duì)光、高溫、常見消毒劑都較為敏感。水皰性口炎病毒在土壤中可存活數(shù)天，在含有50%的甘油緩沖液中4～6℃可存活4～6 個(gè)月，凍干的病毒在4～6℃可存活5 個(gè)月。0.05%結(jié)晶紫、0.1%陽(yáng)離子表面活性劑、1%甲醛、0.5%乙醇-碘復(fù)合物、0.5%氯芐烷胺、0.1%次氯酸鈣、0.1%鄰苯基苯酚復(fù)合物均可在15min 內(nèi)殺死水皰性口炎病毒，1%升汞、3%甲酚皂、1%石炭酸需6h 以上才能殺滅水皰性口炎病毒。

2 流行病學(xué)

患病牛或隱性帶毒牛是水皰性口炎病毒的主要傳染源，其他帶病毒的動(dòng)物如患病的馬、豬，甚至患病的人都可向牛群中傳播水皰性口炎病毒。蚊、白蛉、螨蟲、蚋、庫(kù)蠓、虻、果蠅、蟬等昆蟲在自然狀態(tài)或試驗(yàn)條件下均可感染水皰性口炎病毒，其中部分吸血節(jié)肢動(dòng)物可通過叮咬動(dòng)物使其患病?；疾?dòng)物的鳥、糞便和乳汁中均為病毒，但病畜的水皰液和唾液中可存在大量的病毒，并在水皰形成前96h 即可通過唾液排出水皰性口炎病毒。除蚊蟲叮咬外，牛個(gè)體間的水平傳播途徑包括通過受損傷皮膚或黏膜感染，被病毒污染的飼料和飲水被易感牛攝入后病毒可通過消化道感染牛。牛水皰性口炎病毒具有一定的季節(jié)性，多發(fā)于蚊蟲活動(dòng)頻繁的夏季和秋季兩季。我國(guó)的水皰性口炎呈散發(fā)和地方性流行，僅有少數(shù)?；疾?，傳染性不強(qiáng)，發(fā)病率一般為1.7%～7.6%，并常以良性經(jīng)過，極少引起病牛死亡。

3 臨床癥狀

水皰性口炎病毒最開始從患病牛損傷的口鼻黏膜、乳頭或蹄部感染，并在皮膚表層進(jìn)行復(fù)制，經(jīng)2～3d 患病部位開始出現(xiàn)水皰，若繼發(fā)感染常波及皮下組織，若無繼發(fā)感染可在患病后的14d內(nèi)痊愈[3]。牛水皰性口炎的潛伏為3～7d，病牛在患病初期體溫升高至40～41℃，精神沉郁，食欲減退，反芻減少，飲欲增加，鼻鏡干燥，耳根發(fā)熱，在舌面、唇部出現(xiàn)米粒大的水皰，多個(gè)水皰融合成更大的水皰，內(nèi)含大量黃色水皰液[4]。經(jīng)1～2d 后水皰破裂，形成潰瘍，后患病部位出現(xiàn)痂皮，脫落后留下鮮紅色的瘢痕?；疾∨４罅苛飨?，唾液黏稠，采食困難。水皰還可出現(xiàn)于乳頭和蹄部，與口唇部病變過程基本一致。牛水皰性口炎病程通常為1～2 周，多數(shù)病例可在數(shù)天內(nèi)康復(fù)，痊愈后病牛狀態(tài)良好，病死率極低。

4 診斷方法

首先，應(yīng)根據(jù)當(dāng)?shù)嘏Ｋ捫钥谘椎牧餍星闆r、牛群內(nèi)是否存在患病牛、患病牛是否接觸過其他病牛等流行病學(xué)信息，結(jié)合患病牛的臨床癥狀進(jìn)行臨床診斷，應(yīng)注意與口蹄疫、牛病毒性腹瀉、牛傳染性鼻氣管炎等同樣可導(dǎo)致病牛出現(xiàn)口部或蹄部水皰潰瘍糜爛等癥狀的疾病進(jìn)行區(qū)分。由于牛水皰性口炎患病癥狀較輕且臨床上通常以良性經(jīng)過為結(jié)局，因此較為容易與其他疾病進(jìn)行區(qū)分。進(jìn)一步確診可采集樣品送至獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行水皰性口炎病毒檢測(cè)?？刹杉疾∨２∽儾课坏酿杵?、水皰皮、水皰液等樣品，放入50%甘油鹽水中保存，也可采集水皰拭子、口鼻拭子、咽喉洗液等，上述樣品均用于水皰性口炎病毒的病原檢測(cè)[5]。也可采集患病牛的血液或血清進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)。病毒學(xué)檢測(cè)水皰性口炎病毒的方法有病毒的分離鑒定、電鏡檢測(cè)和動(dòng)物接種試驗(yàn)等?？蓪⑺捚せ蝠杵さ冗M(jìn)行研磨，加入生理鹽水制成10%的懸液后過濾除菌，也可用水皰液稀釋后過濾除菌，之后將上述樣品液體接種至7～13 日齡的雞胚尿囊膜或尿囊腔，水皰性口炎病毒可導(dǎo)致雞胚在接種后1～2d 內(nèi)死亡。并且胚體有明顯的充血或出血病變。之后收集病死雞胚的尿囊液，也可再次接種雞胚進(jìn)行傳染，后通過分子生物或免疫學(xué)檢測(cè)方法檢測(cè)水皰性口炎病毒。分子生物學(xué)檢測(cè)水皰性口炎病毒的方法有RT-PCR、熒光定量RT-PCR、基因芯片技術(shù)等，其中RT-PCR是實(shí)驗(yàn)室較為常用的檢測(cè)方法，可通過擴(kuò)增水皰性口炎病毒保守性基因序列鑒定該病毒，也可通過不同血清型的特異性基因序列區(qū)分水皰性口炎新澤西株和印第安納株。血清學(xué)檢測(cè)水皰性口炎病毒又分為抗原檢測(cè)和抗體檢測(cè)，抗原檢測(cè)有補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、熒光抗體染色試驗(yàn)、間接夾心ELISA 試驗(yàn)等，抗體檢測(cè)方法有補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、中和試驗(yàn)、液相阻斷ELISA 等。其中間接ELISA 是診斷水皰性口炎的常用方法，可用于水皰性口炎病毒的血清型鑒定，也可與其他水皰性疾病進(jìn)行區(qū)分。

5 防治措施

牛水皰性口炎一般均可自愈，因此可不做任何處理。但為了促進(jìn)病牛康復(fù)，防止病牛繼發(fā)感染其他疾病，可根據(jù)患病牛的臨床癥狀進(jìn)行治療。臨床上可使用清水、食醋、0.1%高錳酸鉀清洗病?？谇换疾〔课?，糜爛面可涂抹1%明礬、碘甘油或冰硼散進(jìn)行治療。蹄部可使用高錳酸鉀或甲酚皂溶液進(jìn)行清洗后涂抹松餾油或魚石脂軟膏。乳房可使用2%硼酸溶液進(jìn)行清洗后涂抹紅霉素或青霉素軟膏。目前，無針對(duì)水皰性口炎病毒的特效治療藥物。由于患病?？诓砍霈F(xiàn)病變后采食困難，應(yīng)喂食質(zhì)地較軟的飼料或牧草，做好護(hù)理工作，待其癥狀緩解后再逐步更換為正常的飼料。

牛水皰性口炎的防控方面，應(yīng)以生物安全管理為主。在生物安全防控方面，應(yīng)采取綜合性的牛群管理措施。首先，應(yīng)降低牛接觸水皰性口炎病毒的概率。對(duì)于規(guī)模較大的牛場(chǎng)或有一定養(yǎng)殖基礎(chǔ)的牛場(chǎng)可采取自繁自養(yǎng)和全進(jìn)全出的養(yǎng)殖模式，防止引入病牛從而導(dǎo)致牛水皰性口炎病毒在牛群中擴(kuò)散。對(duì)于需要引進(jìn)新牛的牛場(chǎng)尤其肉牛場(chǎng)應(yīng)做好引入牛牛場(chǎng)的資格審查、疫病檢疫工作，在新牛引進(jìn)后采取隔離飼養(yǎng)的方式，隔離期為30d 左右，期間觀察引進(jìn)牛的狀態(tài)，有條件的養(yǎng)殖場(chǎng)也可再次進(jìn)行疫病檢測(cè)。牛場(chǎng)工作人員也可能成為傳染源將水皰性口炎病毒帶入牛場(chǎng)，因此應(yīng)做好人員入場(chǎng)前和入舍前的更衣、沐浴消毒工作，并且在牛場(chǎng)內(nèi)劃定污染區(qū)、潔凈區(qū)和過渡區(qū)，從污染區(qū)進(jìn)入潔凈區(qū)應(yīng)先進(jìn)入過渡區(qū)消毒。車輛進(jìn)入牛場(chǎng)前也應(yīng)對(duì)車的輪胎、車身等進(jìn)行消毒。螨蟲、蚊、蠅等動(dòng)物也可通過叮咬牛傳播水皰性口炎病毒，因此在夏秋兩季蚊蟲活動(dòng)的時(shí)期定期進(jìn)行牛場(chǎng)內(nèi)的驅(qū)蟲工作，可采用物理滅蚊燈、使用殺蟲藥殺蟲等，減少牛舍內(nèi)蚊蟲數(shù)量。其次，還要做好牛群內(nèi)的水皰性口炎病毒的監(jiān)測(cè)工作和病牛的處理工作。在夏秋兩季要注意牛群內(nèi)的牛是否出現(xiàn)口部、蹄部和乳房水皰，發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)該癥狀的病牛應(yīng)及時(shí)隔離，進(jìn)行發(fā)病原因的診斷，尤其是與口蹄疫進(jìn)行區(qū)分。當(dāng)確診為水皰性口炎病毒引起牛水皰性口炎后進(jìn)行對(duì)癥治療，可能接觸病牛的其他牛也應(yīng)隔離飼喂，以防水皰性口炎病毒在牛群內(nèi)傳播。對(duì)于患病牛使用的圈舍、養(yǎng)殖器具等進(jìn)行消毒，尤其是可能被病牛舔舐或唾液污染的物品更應(yīng)進(jìn)行全面的消毒。若病牛繼發(fā)感染其他疾病導(dǎo)致臨床癥狀惡化，應(yīng)及時(shí)淘汰病牛并采取深埋、焚燒或化學(xué)銷毀等無害化處理方式處理病牛。

6 結(jié)語(yǔ)

牛水皰性口炎是一種接觸性的人畜共患病，雖然對(duì)牛的影響相對(duì)較小，并且病?？勺孕锌祻?fù)，但仍需要牛場(chǎng)工作人員引起注意，一方面防止該病在牛群內(nèi)大規(guī)模擴(kuò)散，以免免疫力低下的牛出現(xiàn)更為嚴(yán)重的癥狀，另一方面也防止牛場(chǎng)工作人員感染該病毒發(fā)病。對(duì)于水皰性口炎病毒仍存在較多的知識(shí)缺口，如病毒的傳播機(jī)制和致病機(jī)制，以及目前仍無特效的抗水皰性口炎病毒的藥物，因此獸醫(yī)科研工作者應(yīng)繼續(xù)開展有關(guān)水皰性口炎病毒的基礎(chǔ)研究以及疫苗、藥物和診斷方法的應(yīng)用研究，從而為牛水皰性口炎的防控工作奠定基礎(chǔ)。