ASM在免疫調(diào)節(jié)及自身免疫性疾病中的研究進(jìn)展①

趙萌萌 田百玲 趙 珊 劉旭東（中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院，沈陽 110001）

鞘脂類化合物是主要的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)成分，作為細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)上的“組織者”，同時(shí)也調(diào)控著細(xì)胞與外界的信號(hào)傳導(dǎo)，與許多細(xì)胞功能息息相關(guān)。鞘脂類化合物相互代謝是在多種酶的參與調(diào)節(jié)下逐步進(jìn)行的。鞘脂類化合物的結(jié)構(gòu)復(fù)雜，種類繁多，目前已被確認(rèn)的有300余種。國際上尚無統(tǒng)一明確的分類，現(xiàn)多將其分為簡單鞘氨醇類、神經(jīng)酰胺類、鞘磷脂類、神經(jīng)苛醐旨類、鞘糖脂等。神經(jīng)酰胺是鞘脂類化合物的核心，通過重組給定的信號(hào)體，在細(xì)胞分化、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡、調(diào)節(jié)免疫及參與應(yīng)激反應(yīng)等方面發(fā)揮諸多功能［1］。酸性鞘磷脂酶（acid sphingomyelinase，ASM）作為神經(jīng)酰胺打撈途徑中最為重要的合成相關(guān)酶，通過水解鞘磷脂（sphingmyelin，SM）生成神經(jīng)酰胺，在免疫細(xì)胞調(diào)節(jié)、炎癥性疾病和腫瘤中的研究愈加受人矚目［2-4］。本文將對(duì)ASM/神經(jīng)酰胺通路在代謝途徑、免疫細(xì)胞調(diào)節(jié)和自身免疫性疾病等方面進(jìn)行綜述。

1 ASM/神經(jīng)酰胺代謝途徑

1.1神經(jīng)酰胺 神經(jīng)酰胺是鞘脂類化合物的核心代謝產(chǎn)物，與膽固醇和SM一起構(gòu)成真核細(xì)胞質(zhì)膜的“脂筏”，由神經(jīng)鞘氨醇長鏈堿基與脂肪?；鶄?cè)鏈共價(jià)結(jié)合形成［5］。其生成主要通過兩種途徑：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)生的從頭合成途徑和其他鞘脂類化合物轉(zhuǎn)化而來的打撈途徑。從頭途徑是絲氨酸和棕櫚酰基輔酶A在轉(zhuǎn)移酶作用下形成3-酮基雙氫鞘胺醇，通過還原酶轉(zhuǎn)變成雙氫鞘氨醇，再經(jīng)神經(jīng)酰胺合成酶（ceramide synthase，CerS）作用，生成雙氫神經(jīng)酰胺，最后通過脫氫酶的脫氫而轉(zhuǎn)變?yōu)樯窠?jīng)酰胺［6-8］。

打撈途徑主要由兩方面組成：直接水解途徑，SM在鞘磷脂酶（sphingomyelinase，SMase）的水解作用下，生成神經(jīng)酰胺，其中SMase主要包括ASM、中性鞘磷脂酶（neutral sphingomyelinase，NSM）和堿性鞘磷脂酶（alkaline sphingomyelinase）3種［9-10］；在酸性β葡糖苷酶1（acid β-glucosidase 1，GBA1）作用下，由葡糖神經(jīng)酰胺（glucosylceramide，GlcCer）形成［11］。

相反，神經(jīng)酰胺也可以作為底物生成其他鞘脂。如，在鞘磷脂合成酶（sphingomyelin synthase，SMS）作用下生成SM；在葡糖神經(jīng)酰胺合成酶（glucosyleceramide synthase，GCS）作用下生成GlcCer；在神經(jīng)酰胺酶（ceramidase，CDase）作用下生成鞘氨醇，并進(jìn)一步在鞘氨醇激酶（sphingosine kinase，SPHK）作用下，生成1-磷酸鞘氨醇（sphingosine 1-phosphate，S1P）；在神經(jīng)酰胺激酶（ceramide kinase，CERK）的作用下生成神經(jīng)酰胺-1-磷酸（ceramide-1-phosphate，C1P），發(fā)揮不同的生物作用［12-13］。

神經(jīng)酰胺不僅是重要的細(xì)胞膜組成物質(zhì)，它作為第二信使，通過調(diào)整細(xì)胞膜生物物理性質(zhì)、膜內(nèi)蛋白質(zhì)的功能及分布從而導(dǎo)致信號(hào)通路的激活過程，參與多種細(xì)胞生物學(xué)活動(dòng)和功能。生物學(xué)功能包括：①誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，神經(jīng)酰胺可通過激活caspases途徑誘導(dǎo)凋亡，并與線粒體膜通透性改變關(guān)系密切［14-15］；②神經(jīng)酰胺與應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)，可以參與皮膚、神經(jīng)系統(tǒng)、角膜及視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞的分化、增殖［16-17］；③神經(jīng)酰胺通過激活或抑制關(guān)鍵效應(yīng)分子，觸發(fā)多種腫瘤抑制和抗增殖的細(xì)胞程序，如凋亡、自噬、衰老和壞死。神經(jīng)酰胺具有強(qiáng)大的、多用途的抗腫瘤活性［18-19］；④神經(jīng)酰胺相關(guān)酶和下游代謝產(chǎn)物可以調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞功能和參與炎癥反應(yīng)等［3］。

1.2ASM人類ASM的編碼基因鞘磷脂酶磷酸二酯酶1（sphingomyelinase phosphodiesterase 1，SMPD1）長5～6 kb，定位于11p15.1～11p15.4號(hào)染色體，包含6個(gè)外顯子和5個(gè)內(nèi)含子［20］。ASM由3個(gè)主要結(jié)構(gòu)域組成：N端皂苷結(jié)構(gòu)域、富脯氨酸連接體結(jié)構(gòu)域和催化結(jié)構(gòu)域［21］。ASM基因編碼產(chǎn)生兩種不同轉(zhuǎn)運(yùn)途徑和分布的酶，即溶酶體型ASM（lysosomal sphingomyelinase，L-ASM）和分泌型ASM（secretory sphingomyelinase，S-ASM）。L-ASM分布于細(xì)胞內(nèi)溶酶體，而S-ASM分泌至胞外，存在于人體的血液及包括關(guān)節(jié)炎在內(nèi)的多種組織液中［22-23］。N-糖基化位點(diǎn)的突變影響L-ASM和S-ASM的催化活性和胞內(nèi)過程。L-ASM在轉(zhuǎn)運(yùn)到溶酶體酶途中，與細(xì)胞內(nèi)Zn2+離子相結(jié)合進(jìn)而活化；而S-ASM的激活則通過轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞膜上，與外源性Zn2+離子結(jié)合完成［24］。

ASM生物學(xué)活性約占SMase總活性的90%，在SM代謝中起著重要的作用，它將SM水解成神經(jīng)酰胺和磷酸膽堿，是神經(jīng)酰胺生成的重要途徑。而當(dāng)SMPD1基因突變引起ASM缺乏時(shí)，SM蓄積于神經(jīng)系統(tǒng)和實(shí)質(zhì)臟器，導(dǎo)致溶酶體蓄積病——尼曼匹克病的發(fā)生［25］。雖然ASM在pH=4.5～5.0時(shí)酶活性最佳，但在pH較高接近中性時(shí)可催化細(xì)胞膜上LDL-SM水解［9］。ASM可被多種外界刺激激活，包括細(xì)胞因子（如TNF家族、IL-1β）、死亡受體（如CD95、DR5）、多種細(xì)菌及病毒感染、化療藥物（如順鉑）、放射線和紫外線等［26-31］。受體信號(hào)誘導(dǎo)的ASM激活可以發(fā)生在受體信號(hào)體與溶酶體融合后的細(xì)胞內(nèi)如腫瘤壞死因子受體（tumor necrosis factor receptor，TNF-R），也可以發(fā)生在酶從溶酶體內(nèi)儲(chǔ)室轉(zhuǎn)移到質(zhì)膜的鞘外小葉后的細(xì)胞外（如CD95）［32］。而在激活A(yù)SM過程中，活性氧（reactive oxygen species，ROS）作為第二信使介導(dǎo)受上述刺激后的細(xì)胞反應(yīng)，是觸發(fā)ASM移位和活化的必需上游信號(hào)［33］。

ASM被激活后，水解細(xì)胞膜上SM的磷酸二脂鍵，生成的神經(jīng)酰胺彼此相互作用，形成富含神經(jīng)酰胺的小膜域。這些小的結(jié)構(gòu)域在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起作用，并能進(jìn)一步融合到大的富含神經(jīng)酰胺的結(jié)構(gòu)域—信號(hào)平臺(tái)。直接水解途徑（ASM）被認(rèn)為是眾多神經(jīng)酰胺生成途徑中最為迅速和直接的。ASM的激活和隨后生成的神經(jīng)酰胺對(duì)細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)至關(guān)重要［34］。ASM/神經(jīng)酰胺通路的激活，導(dǎo)致了S1P生成的增加，促進(jìn)多種前炎癥細(xì)胞因子的生成［35］。通過ASM水解SM產(chǎn)生的神經(jīng)酰胺改變了生物膜的生理特性，富含神經(jīng)酰胺的信號(hào)平臺(tái)在各種刺激下重組受體和信號(hào)分子，在調(diào)節(jié)細(xì)胞分化、增殖、凋亡等廣泛的生物學(xué)行為方面發(fā)揮重要作用［36-37］。而ASM/神經(jīng)酰胺通路同樣參與免疫細(xì)胞在體內(nèi)的功能調(diào)節(jié)，進(jìn)而參與腫瘤、急慢性炎癥和自身免疫性疾病的發(fā)病和發(fā)展。

2 ASM/神經(jīng)酰胺對(duì)固有免疫細(xì)胞的調(diào)節(jié)

固有免疫系統(tǒng)又稱為天然免疫或非特異性免疫，會(huì)非特異地識(shí)別并作用于病原體，具有迅速的抗感染作用，在機(jī)體防御機(jī)制中具有重要作用。參與固有免疫系統(tǒng)的細(xì)胞包括：吞噬細(xì)胞（包括單核/巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞）、樹突狀細(xì)胞（dendritic cell，DC）、自然殺傷細(xì)胞（natural killer cells，NKs）和NK/T細(xì)胞、肥大細(xì)胞等。ASM/神經(jīng)酰胺通路可以調(diào)節(jié)固有免疫細(xì)胞功能，參與炎癥反應(yīng)。

2.1單核/巨噬細(xì)胞 外周血單核細(xì)胞和各組織中巨噬細(xì)胞作為重要的吞噬細(xì)胞，在固有免疫中發(fā)揮重要作用。病原體、某些細(xì)胞因子、脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）等與巨噬細(xì)胞表面的Toll樣受體（Toll-like receptors，TLR）等模式識(shí)別受體結(jié)合，啟動(dòng)相應(yīng)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，激活胞內(nèi)生化反應(yīng)，發(fā)揮增殖、趨化和吞噬功能。LPS在體內(nèi)和體外均可刺激巨噬細(xì)胞引起氧化應(yīng)激，進(jìn)而激活A(yù)SM產(chǎn)生神經(jīng)酰胺，誘導(dǎo)TLR4向胞膜脂質(zhì)筏的聚集，從而增加LPS的響應(yīng)性和細(xì)胞啟動(dòng)，促進(jìn)炎癥反應(yīng)［38］。除此以外，LPS和棕櫚酸（palmitic acid，PA）誘導(dǎo)的ASM活化，可致巨噬細(xì)胞分泌促炎因子IL-6增加［39］；而ASM抑制劑（NB06）則能下調(diào)巨噬細(xì)胞中促炎因子IL-1β、IL-6、IL-23A和趨化因子CCL4和CCL20的基因表達(dá)以及抑制NLRP3（NOD-like receptor family，pyrin domain-containing 3）炎癥小體的激活，從而發(fā)揮抗炎作用［40-41］。ASM/神經(jīng)酰胺信號(hào)通路通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路參與了氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞凋亡，誘發(fā)輕度的持續(xù)性炎癥，在動(dòng)脈硬化的進(jìn)展期發(fā)揮了重要作用［42-43］。

2.2NK細(xì)胞和NKT細(xì)胞NK細(xì)胞和NKT細(xì)胞均來源于淋巴細(xì)胞，NK細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞、病毒或細(xì)菌感染的等靶細(xì)胞具有直接殺傷作用，在固有免疫中發(fā)揮抗感染、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)作用。IL-2缺乏的NK/NKT細(xì)胞，可以通過磷脂酰肌醇-3激酶（phosphatidyl inositol-3 kinase，PI3K）通路激活A(yù)SM，減少神經(jīng)酰胺的生成，誘導(dǎo)了胞漿組織蛋白酶B（cathepsin B，CTSB）和caspase依賴的細(xì)胞凋亡，以及介導(dǎo)X-連鎖的凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor of apoptosis protein，XIAP）的降解，明確了NK/NKT細(xì)胞凋亡的新途徑［44］。ASM基因敲除小鼠會(huì)出現(xiàn)胸腺中主要組織相容性復(fù)合體（MHC）Ⅰ類糖蛋白CD1d限制性抗原呈遞和不變自然殺傷T細(xì)胞（inviarant natural killer T cells，iNKT）細(xì)胞選擇減少，導(dǎo)致iNKT細(xì)胞水平降低，并對(duì)iNKT細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥條件產(chǎn)生抵抗力［45］。

2.3DC DC作為重要的抗原提呈細(xì)胞，是適應(yīng)性免疫的主要啟動(dòng)者，在固有免疫和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)中均發(fā)揮重要作用。DC的凋亡伴隨著ASM激活而產(chǎn)生的神經(jīng)酰胺增多，未成熟DC較成熟DC具有更高水平的ASM，進(jìn)一步抑制ASM的激活和神經(jīng)酰胺的產(chǎn)生能夠使免疫調(diào)節(jié)信使NO保護(hù)未成熟DC免受大腸桿菌和LPS誘導(dǎo)的凋亡［46］。DC細(xì)胞表面受體DC-SIGN與HIV或麻疹病毒連結(jié)能快速激活A(yù)SM和NSM，隨后神經(jīng)酰胺在外膜小葉中聚集；SMase活化不僅在促進(jìn)DC-SIGN信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起重要作用，而且在增強(qiáng)DC對(duì)病原體的攝取方面也起著重要作用［47］。

2.4肥大細(xì)胞 肥大細(xì)胞來源于造血干細(xì)胞，分布皮膚、呼吸道、胃腸道黏膜下結(jié)締組織和血管壁周圍，在固有免疫中發(fā)揮較弱的吞噬作用、抗原提呈、趨化及致炎效應(yīng)，同時(shí)可參與Ⅰ型超敏反應(yīng)。SMase和神經(jīng)酰胺可以誘導(dǎo)重組白細(xì)胞介素-3（rIL-3）和/或重組干細(xì)胞因子支持的小鼠骨髓來源的肥大細(xì)胞的凋亡［48］。ASM在野生型小鼠肥大細(xì)胞收到抗原刺激后迅速被激活，并參與抗原誘導(dǎo)的Ca2+濃度升高、K+通道激活以及β己糖苷酶遷移和釋放，在肥大細(xì)胞介導(dǎo)的超敏反應(yīng)中發(fā)揮作用［49］。

綜上所述，ASM/神經(jīng)酰胺通路對(duì)于固有免疫細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用主要是參與調(diào)節(jié)固有免疫細(xì)胞凋亡以及調(diào)控信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，從而在固有免疫細(xì)胞吞噬、趨化、抗原提呈及促炎效應(yīng)等多方面發(fā)揮重要作用。

3 ASM/神經(jīng)酰胺對(duì)獲得性免疫細(xì)胞的調(diào)節(jié)

適應(yīng)性免疫系統(tǒng)又稱獲得性免疫或特異性免疫，分為細(xì)胞免疫（T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)）和體液免疫（B淋巴細(xì)胞介導(dǎo)）?？乖碳な且饳C(jī)體產(chǎn)生適應(yīng)性免疫應(yīng)答的先決條件，而免疫細(xì)胞則是完成應(yīng)答的物質(zhì)基礎(chǔ)。在某些情況下，適應(yīng)性免疫應(yīng)答可能對(duì)機(jī)體產(chǎn)生損害，引起超敏反應(yīng)或自身免疫性疾病。ASM/神經(jīng)酰胺通路參與B細(xì)胞和T細(xì)胞的細(xì)胞分化和功能調(diào)節(jié)等生理和病理過程。

3.1T細(xì)胞T細(xì)胞作為適應(yīng)性免疫中細(xì)胞免疫的效應(yīng)細(xì)胞，根據(jù)其分子生物學(xué)特征分別不同的T細(xì)胞亞型，發(fā)揮不同的免疫功能。大致分為：CD4+效應(yīng)性T細(xì)胞（也稱輔助性T細(xì)胞，helper T cell，包括Th1、Th2、Th17等）、CD4+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（regulaotory T cell，Treg）、CD8+T細(xì)胞（主要為細(xì)胞毒性T細(xì)胞，cytotoxic T lymphocyte，CTL）和記憶性T細(xì)胞（memory T cell）。ASM/神經(jīng)酰胺對(duì)不同亞型的T細(xì)胞發(fā)揮不盡相同的作用。

既往研究普遍認(rèn)為ASM通過水解SM和產(chǎn)生神經(jīng)酰胺，在人CD4+T細(xì)胞中充當(dāng)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)的調(diào)節(jié)因子［9］。ASM在抗CD3/CD28抗體刺激T細(xì)胞后被激活，促進(jìn)神經(jīng)酰胺生成，分別通過CD3-ZAP70-PLC-γ1-MAPK/JNK CD28-PI3K-Akt-mTOR通路介導(dǎo)CD4+T細(xì) 胞 活 化 和 增 殖、并 向Th1細(xì) 胞 分 化［50］。ASM還 參 與Th17細(xì) 胞 的 分 化，即 抗CD39或/和CD161可以激活A(yù)SM，誘導(dǎo)神經(jīng)酰胺產(chǎn)生，介導(dǎo)包括信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子3（signal transducer and activator of transcription 3，STAT3）和哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）在內(nèi)的下游信號(hào)持續(xù)活化，從而誘導(dǎo)Th17細(xì)胞的分化，參與炎癥性疾病發(fā)生［51］。

而ASM調(diào)節(jié)Treg細(xì)胞的作用與效應(yīng)性T細(xì)胞恰恰相反。ASM缺陷小鼠較野生型小鼠體內(nèi)的Treg細(xì)胞數(shù)量更多，同時(shí)ASM缺乏的CD4+T細(xì)胞中PI3K-Akt信號(hào)通路激活受損，從而導(dǎo)致FoxP3表達(dá)增強(qiáng)和Treg分化［52］。另一項(xiàng)研究提示，TGF-β和IL-2體外刺激ASM缺陷的T細(xì)胞可以誘導(dǎo)更多的Treg細(xì)胞。應(yīng)用ASM抑制劑處理的小鼠及人T細(xì)胞，也可以誘導(dǎo)CD4+T細(xì)胞中Treg細(xì)胞的比例升高［53］。以上研究證實(shí)了ASM/神經(jīng)酰胺對(duì)于Treg細(xì)胞的負(fù)向調(diào)節(jié)作用。

ASM可以通過調(diào)節(jié)細(xì)胞毒顆粒和細(xì)胞毒效應(yīng)分子的分泌調(diào)節(jié)CD8+T細(xì)胞的細(xì)胞毒活性［54］。ASM參與了保護(hù)記憶T細(xì)胞對(duì)抗糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡（glucocorticoid-induced cell death，GICD）［55］。綜上所述，ASM/神經(jīng)酰胺通路在不同的亞型T細(xì)胞生物學(xué)進(jìn)程和細(xì)胞免疫相關(guān)信號(hào)均發(fā)揮重要作用。

3.2B細(xì)胞B細(xì)胞被認(rèn)為是體內(nèi)唯一能產(chǎn)生抗體（免疫球蛋白）的細(xì)胞，B細(xì)胞抗原受體（B-cell receptor，BCR）通過識(shí)別不同抗原表位激活B細(xì)胞，繼而分化為漿細(xì)胞，產(chǎn)生特異性抗體，發(fā)揮體液免疫功能。前B細(xì)胞表面抗原CD20單克隆抗體利妥昔單抗作用于B淋巴瘤細(xì)胞后激活BCR，脂筏微區(qū)的ASM活性和神經(jīng)酰胺的生成迅速而短暫地增加，并與CD20受體共定位，此外，還與鞘磷脂磷酸二酯酶3b（SMPDL-3b）蛋白結(jié)合，調(diào)節(jié)ASM活性，在B淋巴瘤和局灶節(jié)段性腎小球硬化發(fā)揮治療作用［56-57］。創(chuàng)傷造成B細(xì)胞質(zhì)膜的損傷，在質(zhì)膜修復(fù)的過程中將破壞ASM/神經(jīng)酰胺所在的脂筏與BCR的共聚體，進(jìn)而抑制BCR信號(hào)傳導(dǎo)［58］。

ASM/神經(jīng)酰胺通路可以參與激活固有免疫、協(xié)助抗原提呈，調(diào)節(jié)固有免疫細(xì)胞和適應(yīng)性免疫細(xì)胞功能，在適應(yīng)性免疫應(yīng)答過程中發(fā)揮重要作用，參與全身炎癥反應(yīng)，從而參與到急慢性炎癥性疾病和自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展進(jìn)程。

4 ASM/神經(jīng)酰胺對(duì)自身免疫性疾病和炎癥疾病影響

ASM/神經(jīng)酰胺通路廣泛參與腫瘤、細(xì)菌/病毒感染性疾病、急性呼吸窘迫綜合征、囊泡性纖維癥、動(dòng)脈硬化等疾病的發(fā)病［59-64］。在ASM水平的變化可以調(diào)節(jié)腫瘤部位免疫細(xì)胞的表達(dá)從而重塑腫瘤免疫微環(huán)境［65］。除此以外，基于對(duì)固有免疫和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的重要作用，ASM/神經(jīng)酰胺通路參與器官特異性和全身性自身炎癥性疾病和自身免疫性疾病的發(fā)病進(jìn)程。

4.1多發(fā)性硬化 多發(fā)性硬化表現(xiàn)為中樞神經(jīng)系統(tǒng)腦白質(zhì)炎癥脫髓鞘病變的自身免疫性疾病。在膠質(zhì)細(xì)胞的研究中發(fā)現(xiàn)，激活A(yù)SM是神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞形成微粒脫落并釋放IL-1β的至關(guān)重要的因素［66］。在中毒性脫髓鞘模型的研究中，與野生型小鼠相比，ASM基因敲除小鼠在2周后髓磷脂恢復(fù)增加，少突膠質(zhì)細(xì)胞計(jì)數(shù)升高，有害星形膠質(zhì)分布也明顯減少，應(yīng)用ASM抑制劑也獲得了類似的結(jié)果，表明ASM在髓鞘修復(fù)中起到重要作用，也為MS提供了新的治療方法［67-68］。

4.2脂肪性肝炎（steatohepatitis，SH）SH分為酒精性和非酒精性，是最常見可進(jìn)展為肝硬化和肝癌的慢性肝病之一。而ASM/神經(jīng)酰胺通路參與激活調(diào)節(jié)脂肪變性、纖維化和脂肪毒性等關(guān)鍵途徑，包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、自噬和溶酶體膜滲透等，在SH過程中，ASM作為關(guān)鍵作用酶通過TNF、ROS及氧化應(yīng)激激活，從而介導(dǎo)應(yīng)激反應(yīng)和細(xì)胞凋亡［69］。同時(shí)參與SH中調(diào)節(jié)甲基化反應(yīng)、抗氧化防御和膜完整性的兩個(gè)關(guān)鍵事件即調(diào)節(jié)蛋氨酸循環(huán)和磷脂酰膽堿穩(wěn)態(tài)［70］。綜上，靶向抑制ASM激活可以通過多種途徑在SH中發(fā)揮治療作用。

4.3炎癥性腸?。╥nflammatory bowel disease，IBD）IBD主要包括克羅恩?。╟rohn disease，CD）和潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC），是由于胃腸道黏膜免疫系統(tǒng)失調(diào)引起慢性、反復(fù)性炎癥性疾病。LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞與結(jié)腸細(xì)胞共培育時(shí)，結(jié)腸細(xì)胞的活性明顯下降，應(yīng)用ASM抑制劑進(jìn)行處理后，結(jié)腸細(xì)胞的存活率沒有下降；在同一篇文獻(xiàn)中，ASM抑制劑可以顯著降低葡聚糖硫酸鈉（dextran sulphate sodium，DSS）誘導(dǎo)的結(jié)腸炎小鼠結(jié)腸細(xì)胞因子水平和結(jié)腸損傷的嚴(yán)重程度［71］。而在病原體鼠檸檬酸桿菌誘導(dǎo)的結(jié)腸炎小鼠模型中抑制ASM的小鼠對(duì)感染有很強(qiáng)的敏感性，ASM-/-小鼠較野生型小鼠表現(xiàn)出更為顯著的Th1和Th17炎癥反應(yīng)，同時(shí)伴有更為嚴(yán)重的結(jié)腸病理表現(xiàn)［72］。ASM可以通過調(diào)節(jié)多種免疫細(xì)胞功能參與不同病因誘導(dǎo)的IBD病理過程。

4.4類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid ahritis，RA）RA是一種以慢性破壞性關(guān)節(jié)病變?yōu)樘卣鞯娜硇匝仔宰陨砻庖卟。?3］。具有RA高危因素和遺傳易感性的人群，在無關(guān)節(jié)癥狀前已經(jīng)出現(xiàn)自身免疫激活（瓜氨酸化和新的表位形成），而在滑膜局部，成纖維樣滑膜細(xì)胞（fibroblast-like synoviocytes，F(xiàn)LS）、抗原提呈細(xì)胞（antigen-presenting cells，APCs）和巨噬細(xì)胞等被激活產(chǎn)生一系列炎癥因子，引發(fā)滑膜炎癥。RA患者T細(xì)胞中長鏈非編碼RNA（lncRNAs）LOC100506036的表達(dá)增加，siRNA抑制其表達(dá)后SMPD1表達(dá)降低［74］。在抗原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎（antigeninduced arthritis，AIA）的過程中，ASM基因敲除小鼠較對(duì)照組，關(guān)節(jié)炎程度更輕；且應(yīng)用ASM抑制劑組的AIA小鼠可以改善關(guān)節(jié)炎的嚴(yán)重程度［75］。另一項(xiàng)關(guān)于RA的研究，發(fā)現(xiàn)RA患者較健康對(duì)照組外周血清中S-ASM的活性增強(qiáng)［76］。因此，ASM可以作為RA中的早期炎癥標(biāo)志物參與炎癥反應(yīng)，但ASM參與RA的疾病發(fā)展的具體機(jī)制還需進(jìn)一步研究。

4.5系統(tǒng)性硬化（systemic sclerosis，SSc）SSc也稱硬皮病，是一種自身免疫性結(jié)締組織病，在疾病中晚期表現(xiàn)為皮膚和臟器的廣泛纖維化。而發(fā)生纖維化的主要原因在于正常的內(nèi)皮細(xì)胞（endothelial cells，ECs）異常凋亡、循環(huán)中血管生成細(xì)胞（circulating angiogenic cells，CACs）數(shù)量下降以及成纖維細(xì)胞細(xì)胞凋亡的減少。關(guān)于SSc的研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)皮細(xì)胞來源富含花生四烯酸的微粒，被CACs吞噬可以激活A(yù)SM，生成神經(jīng)酰胺，啟動(dòng)細(xì)胞凋亡機(jī)制［77］。另一項(xiàng)研究則探討了成纖維細(xì)胞對(duì)Fas介導(dǎo)的凋亡抗性增強(qiáng)，在SSc的成纖維細(xì)胞中ASM表達(dá)下降，而當(dāng)ASM表達(dá)上調(diào)時(shí)，細(xì)胞恢復(fù)對(duì)Fas介導(dǎo)凋亡的敏感性［78］。因此ASM在SSc的纖維化進(jìn)程中發(fā)揮重要作用。

4.6系統(tǒng)性血管炎 系統(tǒng)性血管炎以累及血管的非感染性炎癥和壞死為基本病理表現(xiàn)的結(jié)締組織病，依據(jù)受累血管分為：以大動(dòng)脈炎（takayasu arteritis，TA）為代表的大血管炎、以結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎（polyarteritis nodosa，PAN）和川崎?。╧awasaki disease，KD）為代表的中等血管炎和以ANCA相關(guān)性血管炎（antineutrophil cytoplasmic antibody-associated vasculitis，AAV）為代表的小血管炎。在初治AAV患者的外周血中S-ASM的活性較對(duì)照組升高，通過激素和免疫抑制劑治療后，到14周時(shí)，S-ASM的活性較前下降，在研究中推測(cè)由于AAV中內(nèi)皮細(xì)胞功能異常導(dǎo)致分泌S-ASM升高［79］。另一項(xiàng)關(guān)于KD的研究也提示相似的結(jié)果，患者治療前血清ASM活性明顯升高，且ASM活性與C反應(yīng)蛋白水平顯著相關(guān)［80］。綜上，ASM通過內(nèi)皮功能異常參與系統(tǒng)性血管炎的炎癥反應(yīng)。

5 總結(jié)

ASM/神經(jīng)酰胺通路不僅參與調(diào)節(jié)機(jī)體免疫細(xì)胞，還在多種免疫相關(guān)疾病和炎癥性疾病的進(jìn)程中發(fā)揮重要作用。一方面，激活A(yù)SM通過水解途徑產(chǎn)生神經(jīng)酰胺，富含神經(jīng)酰胺的信號(hào)平臺(tái)重組信號(hào)通路，調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞分化、增殖、凋亡等細(xì)胞代謝過程；另一方面，ASM可以參與調(diào)節(jié)炎癥信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，促進(jìn)炎癥細(xì)胞因子的釋放和炎癥反應(yīng)。近年來對(duì)于ASM與免疫細(xì)胞的研究主要集中在于T細(xì)胞分化和調(diào)節(jié)Th17/Treg平衡等方面。雖然ASM/神經(jīng)酰胺通路參與自身免疫性疾病和自身炎癥疾病的具體機(jī)制還有待進(jìn)一步研究和論證，但以地昔帕明、阿米替林等在內(nèi)的多種三環(huán)類抗抑郁藥為代表的ASM功能性抑制劑已經(jīng)作為多發(fā)性硬化、炎癥性腸病、脂肪型肝炎的治療新策略［69，81］。因此ASM在風(fēng)濕免疫病以及系統(tǒng)性自身免疫病中的臨床應(yīng)用仍具有巨大前景。