臺(tái)州獼猴桃潰瘍病防治藥劑篩選及應(yīng)用

江景勇，潘仙鵬，劉守平，何玲玲

（臺(tái)州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，浙江 臨海 317000）

獼猴桃細(xì)菌性潰瘍病是一種由丁香假單孢桿菌獼猴桃致病變種 [Pseudomonas syringaepv. actinidiae（PSA）]引起的毀滅性病害[1]。在新西蘭、意大利等世界獼猴桃主產(chǎn)區(qū)及我國的陜西、四川等主產(chǎn)區(qū)都有發(fā)生，并且都造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失[2]。近年來，臺(tái)州的獼猴桃尤其是紅陽獼猴桃的栽培面積快速擴(kuò)大，但潰瘍病的發(fā)生日趨嚴(yán)重，個(gè)別果園甚至毀園，這給臺(tái)州獼猴桃產(chǎn)業(yè)帶來了巨大威脅。在生產(chǎn)中由于防治獼猴桃潰瘍病的藥劑種類繁多，防治效果差異較大且不明確，加上防治方法缺乏科學(xué)依據(jù)，導(dǎo)致獼猴桃潰瘍病的防治效果不理想。雖然在獼猴桃潰瘍病病菌對(duì)不同殺菌劑敏感性測(cè)定及防治方面已有研究報(bào)道，但由于獼猴桃潰瘍病病菌的多樣性，致病力和基因型的差異性[3]以及各地區(qū)的氣候條件不盡相同等原因，藥劑的防治效果出現(xiàn)較大差異，相同成分的藥劑在不同地區(qū)可能表現(xiàn)出不同的抑菌力，例如：3%中生菌素可濕性粉劑在貴州和陜西[4-5]、20%葉枯唑可濕性粉劑在重慶和陜西[5-6]對(duì)獼猴桃潰瘍病病菌的抑菌性試驗(yàn)表現(xiàn)出了相反的結(jié)果。為此，筆者針對(duì)臺(tái)州地區(qū)的獼猴桃潰瘍病病菌和當(dāng)?shù)貧夂驐l件，采用室內(nèi)抑菌試驗(yàn)和田間藥效試驗(yàn)，開展了獼猴桃潰瘍病高效低毒防病藥劑的篩選，以期為臺(tái)州獼猴桃潰瘍病的科學(xué)防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試材料

1.1.1 供試菌株與獼猴桃品種 供試獼猴桃潰瘍病菌株為2018年自臺(tái)州紅陽獼猴桃潰瘍病發(fā)病園重病植株上分離的菌株，經(jīng)鑒定為獼猴桃潰瘍病病菌。供試獼猴桃品種為紅陽獼猴桃，選擇位于臺(tái)州市天臺(tái)縣的5 a齡果園中潰瘍病發(fā)病較嚴(yán)重的植株進(jìn)行田間藥效試驗(yàn)，獼猴桃的栽培株行距為2 m×3 m。

1.1.2 供試藥劑 通過產(chǎn)地調(diào)查與文獻(xiàn)查閱，綜合有關(guān)參考文獻(xiàn)后選擇32種藥劑（見表1）作為供試藥劑，其中有抗生素類殺菌劑6種、生物藥劑2種、無機(jī)殺菌劑4種、有機(jī)殺菌劑14種，植物源殺菌劑6種。

表1 供試藥劑的含量及劑型、類型及其生產(chǎn)廠家

1.1.3 培養(yǎng)基 選用NA培養(yǎng)基，其配方為牛肉膏3.0 g、蛋白胨10.0 g、NaCl 5.0 g、瓊脂15.0 g，加蒸餾水定容至1 000 mL，pH值7.0～7.2，121℃濕熱滅菌20 min。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 室內(nèi)抑菌試驗(yàn) 采用平板紙藥碟測(cè)定法[7]，先將供試菌株在NA平板培養(yǎng)基上活化24 h，再接種于NA斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)72 h，然后在試管中加入10 mL無菌水，用無菌接種環(huán)刮下菌苔制成菌懸液備用。在直徑為9 cm的培養(yǎng)皿中倒入10 mL融化的固體NA培養(yǎng)基，搖勻后制成平板，再取100 μL菌懸液均勻涂布在冷卻的NA平板上。將各供試藥劑按用藥指導(dǎo)說明推薦最大濃度用無菌水配制成藥液（表2），分別將直徑為6 mm的滅菌濾紙片置于各藥液中浸泡30 s后取出，50℃恒溫干燥后將干燥紙片轉(zhuǎn)移到含菌平板上，每個(gè)培養(yǎng)皿對(duì)角排放4片吸附同一藥液的紙碟，以無菌水浸泡的濾紙片為對(duì)照（CK），在25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h后觀察濾紙片周圍的抑菌現(xiàn)象，采用十字交叉法測(cè)量抑菌圈直徑，減去濾紙片直徑后算出每個(gè)培養(yǎng)皿4個(gè)抑菌圈的平均直徑凈增值。

1.2.2 田間藥效試驗(yàn) （1）涂抹防治試驗(yàn)。根據(jù)室內(nèi)抑菌試驗(yàn)的篩選結(jié)果，選用27.12%堿式硫酸銅懸浮劑（銅高尚）、0.3%四霉素水劑、20%溴硝醇可濕性粉劑、3 000億CFU/g熒光假單胞桿菌粉劑和噻霉酮5種藥劑進(jìn)行田間藥效試驗(yàn)（表3）。噻霉酮選用1.6%噻霉酮膏劑，其他4種藥劑稀釋成20倍液，直接涂抹獼猴桃枝干病斑或在病斑處用刀縱刻1～3條刻痕（深至韌皮部）后再涂抹藥劑，涂藥后再涂一層黃油防止雨水沖刷，以涂抹清水為對(duì)照（CK），共6個(gè)處理，每個(gè)處理8株。于2019年2月上旬開始涂藥。2個(gè)月后觀察記錄病斑的愈合率并計(jì)算防效。（2）噴霧防治試驗(yàn)。2019年2月、2020年3月，進(jìn)行噴霧防治潰瘍病試驗(yàn)。選用27.12%堿式硫酸銅懸浮劑（銅高尚）、0.3%四霉素水劑、20%溴硝醇可濕性粉劑、3 000億CFU/g熒光假單胞桿菌粉劑和3%噻霉酮水分散粒劑按表4稀釋倍數(shù)進(jìn)行試驗(yàn)，以噴施清水為對(duì)照（CK）。分別從2019年2月中下旬和2020年3月上旬開始噴施藥液，每隔7 d噴藥1次，連續(xù)噴2次，每株噴藥量0.3 kg，每處理10株，末次噴藥后15 d調(diào)查防治效果。

1.3 病害調(diào)查方法

獼猴桃潰瘍病分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)參考張鋒等[8]的方法，0級(jí)，無病；1級(jí)，0～5%以下枝條、葉片發(fā)病，主干未見病斑；2級(jí)，5%～20%枝條發(fā)病或萎蔫死亡，主干有少量病斑；3級(jí)，20%～50%枝條發(fā)病或萎蔫死亡，主干病斑繞莖1/4～1/2；4級(jí)，50%～80%枝條發(fā)病或萎蔫死亡，主干病斑繞莖1/2～3/4；5級(jí)，80%以上枝條發(fā)病或萎蔫死亡，主干病斑繞莖大于3/4或者全株死亡。根據(jù)獼猴桃潰瘍病的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，按照試驗(yàn)方法分別統(tǒng)計(jì)施藥前后潰瘍病的各級(jí)發(fā)病數(shù)，再分別按公式（1）、（2）和（3）計(jì)算病情指數(shù)、防治效果和病斑愈合率。

式中，CK0為藥前對(duì)照區(qū)病情指數(shù)，CK1為藥后對(duì)照區(qū)病情指數(shù)，pt0為藥前處理區(qū)病情指數(shù)，pt1為藥后處理區(qū)病情指數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用DPS 2000軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同殺菌劑對(duì)獼猴桃潰瘍病菌的抑菌效果

根據(jù)各種殺菌劑對(duì)潰瘍病病菌的抑菌圈直徑凈增值大小結(jié)果（見表2），32種殺菌劑對(duì)獼猴桃潰瘍病病菌的抑菌力有顯著性差異。各殺菌劑中對(duì)潰瘍病病菌的抑菌圈直徑凈增值大小平均在25 mm以上的有溴硝醇、四霉素和氯溴異氰尿酸3種，其中四霉素和氯溴異氰尿酸的抑菌圈凈增值都在40 mm以上，表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑菌力和擴(kuò)散能力；抑菌圈凈增值為15～25 mm的殺菌劑有熒光假單胞桿菌和蠟質(zhì)芽孢桿菌2個(gè)生物藥劑；抑菌圈凈增值為9～15 mm的殺菌劑有噻霉酮、辛菌胺醋酸鹽、琥膠肥酸銅、氧化亞銅、堿式硫酸銅、腐皮康和腐必清7種；其他20種殺菌劑的抑菌力較低，抑菌圈凈增值平均在9 mm以下。

表2 各種殺菌劑的使用濃度及其抑菌圈直徑凈增值

2.2 田間藥效試驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 不同殺菌劑涂抹的田間防治效果 5種殺菌劑的田間藥效試驗(yàn)結(jié)果（表3）表明：以0.3%四霉素水劑的防治效果最好，平均防效為70.3%，其次是1.6%噻霉酮膏劑、27.12%堿式硫酸銅懸浮劑和3 000億CFU/g熒光假單胞桿菌粉劑，其平均防效分別為59.4%、67.9%和60.1%，但這4種殺菌劑的防效沒有顯著性差異，而20%溴硝醇可濕性粉劑的防效僅為43.8%，顯著低于上述4種殺菌劑。

表3 5種殺菌劑涂抹對(duì)獼猴桃枝條潰瘍病的田間防治效果（%）

2.2.2 不同殺菌劑噴霧的田間防治效果 由表4可知，2019年的防治效果較差，5種殺菌劑的防效均在50%以下，但0.3%四霉素水劑和3%噻霉酮水分散粒劑的防效顯著高于其他3種種殺菌；2020年的防治效果較好，只有3 000億CFU/g熒光假單胞桿菌粉劑的防效低于50%，為36.8%，顯著低于其他殺菌劑，0.3%四霉素水劑、3%噻霉酮水分散粒劑和27.12%堿式硫酸銅懸浮劑的防效都達(dá)到65%以上，分別為71.3%、66.2%和65.1%，顯著高于其他殺菌劑，但這3種殺菌劑之間沒有顯著性差異。2019年的防治效果較差可能與當(dāng)年的發(fā)病程度和氣候條件有關(guān)，試驗(yàn)時(shí)臺(tái)州地區(qū)多雨，且正值獼猴桃潰瘍病集中發(fā)病期，過多的雨水和較低的溫度可能影響了藥劑的防治效果。

表4 5種殺菌劑噴霧對(duì)獼猴桃潰瘍病的田間防治效果

3 討 論

由于各地的地理環(huán)境和氣候條件不同，相同藥劑的防治效果可能存在差異，有研究表明，硫酸鏈霉素[8-10]和乙蒜素[11]對(duì)獼猴桃潰瘍病的防治效果較好，而筆者的試驗(yàn)結(jié)果與焦紅紅[12]的研究結(jié)果均表明硫酸鏈霉素和乙蒜素沒有明顯的抑菌效果。筆者的試驗(yàn)結(jié)果表明，用0.3%四霉素水劑涂干和噴霧對(duì)獼猴桃潰瘍病的防治效果都較好，這與胡榮平等[11]和陽廷密等[13]的研究結(jié)果一致。

根據(jù)該試驗(yàn)結(jié)果結(jié)合生產(chǎn)實(shí)踐，建議防治獼猴桃潰瘍病時(shí)先使用石硫合劑冬季清園并進(jìn)行涂白，2月中下旬開始噴施四霉素、堿式硫酸銅或噻霉酮等殺菌劑進(jìn)行防治，也可選擇溴硝醇、熒光假單胞桿菌、琥膠肥酸銅等殺菌劑交替使用，間隔10 d噴1次，連噴2～3次；結(jié)合噴霧防治在1月下旬到2月上旬可用20倍四霉素或噻霉酮、堿式硫酸銅等藥劑涂抹枝干病斑。