利用LC-M S 對(duì)保健酒中七種成分的定性分析研究

王佳雯，唐 雪，李雙成，張 強(qiáng)，鄧 駿，王燕軍，李冰川

（1.四川劍南春酒廠有限公司，四川 綿竹 618200；2.島津企業(yè)管理（中國）有限公司，四川 成都 610000；3.四川省公安廳，四川 成都 610000）

保健酒已有數(shù)千年的歷史，是中國醫(yī)藥科學(xué)的重要組成部分。中國的歷代醫(yī)藥著作中幾乎無一例外地有藥酒治疾健身的記載。今天隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，在中藥浸酒的傳統(tǒng)工藝的基礎(chǔ)上已發(fā)展到利用萃取、浸提和生物工程等現(xiàn)代化手段，提取中藥中的有效成分制成高含量的功能藥酒。當(dāng)人們的保健意識(shí)日趨增強(qiáng)，一些藥物成為食用保健品時(shí)，保健酒這一新名詞便開始出現(xiàn)。

海馬酒、健身酒和神酒主要使用的藥材有：人參、紅花、紅景天、枸杞、冬蟲夏草、刺五加、紅參、海馬、鹿茸等。為了確認(rèn)保健酒中是否有益于人體的功效成分存在，通過對(duì)中國藥典查找，了解到海馬酒、健身酒和神酒這3 種保健酒中可能含有紅景天苷、魯斯可皂苷元、人參皂苷Rb1、腺苷、紫丁香苷、羥基紅花黃色素和山奈素這7 種成分。通過運(yùn)用LCMS-8050 液相色譜質(zhì)譜儀對(duì)這7 種成分在這3種保健酒中是否存在進(jìn)行定性檢測(cè)。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑及儀器

酒樣：神酒、海馬酒、健身酒，市售。

試劑及耗材：紅景天苷標(biāo)準(zhǔn)品、魯斯可皂苷元標(biāo)準(zhǔn)品、人參皂苷Rb1 標(biāo)準(zhǔn)品、腺苷標(biāo)準(zhǔn)品、紫丁香苷標(biāo)準(zhǔn)品、羥基紅花黃色素標(biāo)準(zhǔn)品、山奈素標(biāo)準(zhǔn)品，甲醇，純水。

儀器設(shè)備：LCMS-8050，島津（上海）實(shí)驗(yàn)器材有限公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 樣品處理

以純水稀釋1000倍，濾膜過濾后，直接測(cè)定。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)品處理

在各市局長座談會(huì)上的講話要點(diǎn)（黃志平） ...................................................................................................11-9

以甲醇為溶劑，準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)品粉末，制成濃度為1 μg/L的溶液。

1.2.3 液相色譜分析條件

色譜柱：shim-pack GIST 50 mm×2.1 mm I.D.,2.0 μm P/N：227-30001-02，島津（上海）實(shí)驗(yàn)器材有限公司。

流動(dòng)相：A-水；B-甲醇；流速：0.4 mL/min；柱溫：40 ℃；進(jìn)樣量：5 μL。

洗脫方式：梯度洗脫，B 相初始濃度為10%。見文末表1。

表1 梯度時(shí)間程序

1.2.4 質(zhì)譜條件

離子源：ESI,正負(fù)模式同時(shí)測(cè)定；加熱氣流速：10.0 L/min；霧化氣流速：3.0 L/min；干燥氣流速：10.0 L/min；加熱模塊溫度：400 ℃；DL 溫度：250 ℃；接口溫度：300 ℃。

掃描模式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM），見文末表2。

表2 MRM參數(shù)

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)品與樣品MRM色譜圖

圖1 紅景天苷

圖2 魯斯可皂苷元

圖3 人參皂苷Rb1

圖4 腺苷

圖5 紫丁香苷

圖6 羥基紅花黃色素

如圖1—圖6 所示，通過檢測(cè)，紅景天苷、魯斯可皂苷元、人參皂苷Rb1、腺苷、紫丁香苷、羥基紅花黃色素和山奈素標(biāo)準(zhǔn)品響應(yīng)良好，無雜峰干擾，溶劑空白無干擾，可以進(jìn)行樣品檢測(cè)。

2.1.2 神酒樣品MRM色譜圖（圖7—圖13）

圖7 紅景天苷

圖8 魯斯可皂苷元

圖9 人參皂苷Rb1

圖10 腺苷

圖11 紫丁香苷

圖12 羥基紅花黃色素

圖13 山奈素

從圖7—圖13 可以看出，紅景天苷、人參皂苷Rb1、腺苷、紫丁香苷和羥基紅花黃色素響應(yīng)良好；魯斯可皂苷元和山奈素在神酒樣品中無響應(yīng)。

2.1.3 健身酒樣品MRM色譜圖（圖14—圖20）

圖14 紅景天苷

圖15 魯斯可皂苷元

圖16 人參皂苷Rb1

圖17 腺苷

圖18 紫丁香苷

圖19 羥基紅花黃色素

圖20 山奈素

從圖14—圖20 可以看出，紅景天苷、人參皂苷Rb1、腺苷、紫丁香苷和羥基紅花黃色素響應(yīng)良好；魯斯可皂苷元和山奈素在健身酒樣品中無響應(yīng)。

2.1.4 海馬酒樣品MRM色譜圖（圖21—圖27）

圖21 紅景天苷

圖22 魯斯可皂苷元

圖23 人參皂苷Rb1

圖24 腺苷

圖25 紫丁香苷

圖26 羥基紅花黃色素

圖27 山奈素

從圖21—圖27 可以看出，紅景天苷、人參皂苷Rb1、腺苷和紫丁香苷響應(yīng)良好；魯斯可皂苷元、羥基紅花黃色素和山奈素在海馬酒樣品中無響應(yīng)。

2.2 樣品定性結(jié)果

由表3 可知，通過保留時(shí)間、信噪比和參比離子相對(duì)豐度進(jìn)行定性識(shí)別，神酒、海馬酒和健身酒中均檢測(cè)出含有紅景天苷。

表3 紅景天苷定性結(jié)果

由表4 可知，通過保留時(shí)間、信噪比和參比離子相對(duì)豐度進(jìn)行定性識(shí)別，神酒、海馬酒和健身酒中均未檢測(cè)出含有魯斯可皂苷元。

表4 魯斯可皂苷元定性結(jié)果

由表5 可知，通過保留時(shí)間、信噪比和參比離子相對(duì)豐度進(jìn)行定性識(shí)別，神酒、海馬酒和健身酒中均檢測(cè)出含有人參皂苷Rb1。

表5 人參皂苷Rb1定性結(jié)果

由表6 可知，通過保留時(shí)間、信噪比和參比離子相對(duì)豐度進(jìn)行定性識(shí)別，神酒、海馬酒和健身酒中均檢測(cè)出含有腺苷。

表6 腺苷定性結(jié)果

由表7 可知，通過保留時(shí)間、信噪比和參比離子相對(duì)豐度進(jìn)行定性識(shí)別，神酒、海馬酒和健身酒中均檢測(cè)出含有紫丁香苷。

表7 紫丁香苷定性結(jié)果

由表8 可知，通過保留時(shí)間、信噪比和參比離子相對(duì)豐度進(jìn)行定性識(shí)別，神酒、健身酒中均檢測(cè)出含有羥基紅花黃色素，而海馬酒中未檢測(cè)到羥基紅花黃色素。

表8 羥基紅花黃色素定性結(jié)果

由表9 可知，通過保留時(shí)間、信噪比和參比離子相對(duì)豐度進(jìn)行定性識(shí)別，神酒、海馬酒和健身酒中均未檢測(cè)出含有山奈素。

表9 山奈素定性結(jié)果

2.3 定性結(jié)果匯總

由表10 可知，神酒、健身酒和海馬酒中均檢測(cè)出含有紅景天苷；神酒、健身酒和海馬酒中均未檢測(cè)出含有魯斯可皂苷元；神酒、健身酒和海馬酒中均檢測(cè)出含有人參皂苷Rb1；神酒、健身酒和海馬酒中均檢測(cè)出含有腺苷；神酒、健身酒和海馬酒中均檢測(cè)出含有紫丁香苷；神酒和健身酒中均檢測(cè)出含有羥基紅花黃色素，而海馬酒中未檢測(cè)出含有羥基紅花黃色素；神酒、健身酒和海馬酒中均未檢測(cè)出含有山奈素。

表10 定性結(jié)果匯總

3 結(jié)論

建立了LCMS-8050 定性測(cè)定保健酒中7 種成分的分析方法，方法可在5 min 內(nèi)完成各化合物的分離和檢測(cè)。

樣品用純水稀釋1000 倍后進(jìn)行分析，通過對(duì)保留時(shí)間、信噪比和參比離子相對(duì)豐度比進(jìn)行定性識(shí)別，得出了如下結(jié)果：神酒中檢測(cè)出含有紅景天苷、人參皂苷Rb1、腺苷、紫丁香苷和羥基紅花黃色素；健身酒中檢測(cè)出含有紅景天苷、人參皂苷Rb1、腺苷、紫丁香苷和羥基紅花黃色素；海馬酒中檢測(cè)出含有紅景天苷、人參皂苷Rb1、腺苷和紫丁香苷。