人類免疫缺陷病毒感染者抗病毒治療期間病毒載量與免疫學指標的關(guān)系

范偉光，孟娟，蘇苗苗，王浩，石鵬輝，張珍

人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染與慢性T細胞活化、慢性抗原提呈和免疫細胞穩(wěn)態(tài)失調(diào)等多種機制引起的進行性CD4+T細胞丟失和免疫功能障礙有關(guān)，可導致獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS），它的疾病進展主要取決于對免疫系統(tǒng)的破壞程度和病毒數(shù)量[1]。HIV/AIDS在世界范圍內(nèi)的迅速傳播和擴散已成為嚴重的社會問題[2-3]。高效抗反轉(zhuǎn)錄病毒治療（highly active anti-retroviral therapy，HAART）的應用可以降低與HIV相關(guān)疾病的發(fā)生率和死亡率，是減少HIV傳播和治療AIDS的最有效方法[4]。2014 年替諾福韋（tenofovirdisoproxil，TDF）+拉米夫定（lamivudine，3TC）+依非韋倫（efavirenz，EFV）被推薦作為我國HIV/AIDS病人初始HAART 首選方案[5]。

HIV病毒載量（viral load，VL）檢測可直接客觀反映HIV/AIDS病人體內(nèi)HIV-RNA病毒復制情況，是公認監(jiān)測HIV/AIDS病人疾病進展和評價抗反轉(zhuǎn)錄病毒治療效果的指標[6]。本研究通過建立前瞻性研究隊列，探討HIV感染者抗病毒治療期間病毒載量與免疫學指標的關(guān)系，包括CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、免疫球蛋白G（immune globulin G，IgG）、免疫球蛋白M（immune globulin M，IgM）、免疫球蛋白A（immune globulin A，IgA）以提供更多的臨床證據(jù)，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料建立前瞻性研究隊列，選取2018年1月至2019年1月在保定市人民醫(yī)院治療的經(jīng)蛋白質(zhì)印跡法（Western blotting，WB）確認為HIV-1感染陽性并符合《艾滋病和艾滋病病毒感染診斷標準》[7]的感染者200例為研究對象。納入標準：（1）病人在此之前均未接受過任何HARRT藥物治療；（2）年齡超過18周歲；（3）治療符合臨床治療標準。排除標準：（1）其他病毒感染；（2）女性病人處于妊娠期或隨訪期間有受孕意愿；（3）其他自身免疫性疾病、腫瘤、藥物等造成干擾的病人。向所有研究對象說明研究的目的和性質(zhì)，病人及近親屬知情同意。本研究符合《世界醫(yī)學協(xié)會赫爾辛基宣言》相關(guān)要求。

1.2 方法

1.2.1 治療方案 所有病人均給予TDF（300毫克/次，每天1次）+3TC（300毫克/次，每天1次）+EFV（600毫克/次，每天1次），治療18個月。

1.2.2 VL水平檢測 分別采集病人用藥前及用藥后1、3、6、12和18月的外周血樣本，6 h內(nèi)分離血漿，以3 000 r/min離心10 min，?80℃保存。應用全自動病毒載量分析儀（COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan，美國）及配套試劑檢測HIV病毒載量。

1.2.3 免疫學指標檢測 檢測VL同時，用流式細胞計數(shù)儀（美國FACSCalibur）及配套試劑盒檢測T淋巴細胞亞群CD4+、CD8+。應用免疫比濁方法檢測免疫球蛋白IgG、IgM、IgA水平，試劑盒購于寧波瑞源生物科技有限公司。各測定指標的正常人參考范圍為：IgG 6.80～14.45 g/L，IgM 0.40～2.14 g/L；IgA 0.70～4.06 g/L。

1.3 觀察指標（1）病人一般資料；（2）治療前后不同時間VL水平比較；（3）治療前后不同時間免疫學指標比較；（4）VL水平與免疫學指標的相關(guān)性分析。

1.4 統(tǒng)計學方法使用SPSS24.0軟件分析處理數(shù)據(jù)，計量資料以±s描述，重復測量資料比較采用重復測量資料方差分析，兩兩樣本比較采用LSD-t檢驗，計數(shù)資料采用例（%）表示，數(shù)據(jù)比較采用χ2檢驗。VL水平與免疫學指標的相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)法。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料200例病人中男159例（79.50%），女41例（20.50%）；年齡（37.51±7.39）歲，年齡范圍為18～70歲，其中20～30歲階段病人最多，所占比例為40.50%（81/200）；病程（7.24±2.78）年，范圍為5～11年；感染途徑：同性傳播137例（68.50%）、異性傳播58例（29.00%）、其他 5例（2.50%）；漢族 198例（99.00%）、其他2例（1%）；婚姻狀況：已婚有配偶106例（53.00%）、未婚78例（39.00%）、離異或喪偶16例（8.00%）；文化程度：初中87例（43.50%）、高中或中專69例（34.50%）、大專及以上44例（22.00%）。

2.2 治療前后不同時間VL水平計量資料比較治療前VL水平為（4.89±1.63）log/mL，治療后1、3、6、12和18月的VL水平分別為（3.34±1.01）、（2.57±1.26）、（2.15±0.72）、（1.54±0.24）、（1.03±0.42）log/mL，與治療前比較，治療后VL水平隨著治療時間延長而下降，差異有統(tǒng)計學意義（F=61.17，P<0.05）。

2.3 治療前后不同時間免疫學指標計量資料比較與治療前比較，治療后CD4+及CD4+/CD8+隨時間延長而升高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），IgG、IgA隨時間延長而下降，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），CD8+及IgM治療前后不同時間比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表1。

表1 人類免疫缺陷病毒感染者200例治療前后免疫學指標水平/±s

表1 人類免疫缺陷病毒感染者200例治療前后免疫學指標水平/±s

注：①與治療前比較，P<0.05。②與治療后1個月比較，P<0.05。③與治療后3個月比較，P<0.05。④與治療后6個月比較，P<0.05。⑤與治療后12個月比較，P<0.05。

IgA/（g/L）4.34±0.78 4.08±0.85①3.61±0.87①②3.32±0.56①②③2.97±0.45①②③④2.87±0.34①②③④⑤125.37<0.05治療時間0 1個月3個月6個月12個月18個月F值P值例數(shù)200 200 200 200 200 200 CD4+/（個/微升）376.23±102.34 395.91±104.92①421.39±116.91①②479.37±113.21①②③520.84±147.39①②③④587.43±134.57①②③④⑤57.76<0.05 CD8+/（個/微升）1 364.87±269.32 1 196.24±229.18 1 257.27±231.48 1 289.38±283.38 1 428.34±212.39 1 490.59±232.08 29.25>0.05 CD4+/CD8+0.28±0.03 0.33±0.04①0.35±0.05①②0.43±0.06①②③0.54±0.06①②③④0.65±0.07①②③④⑤43.34<0.05 IgG/（g/L）21.94±5.49 19.95±4.19①16.91±4.28①②15.76±3.75①②③14.71±4.21①②③④12.33±2.45①②③④⑤97.68<0.05 IgM/（g/L）1.48±0.27 1.43±0.29 1.42±0.14 1.38±0.15 1.35±0.25 1.44±0.21 16.58>0.05

2.4 VL水平與免疫學指標的相關(guān)性分析分析經(jīng)Pearson相關(guān)性分析，VL與CD4+、CD4+/CD8+呈負相關(guān)（r=?0.869，P<0.001；r=?0.794，P<0.001），VL載量與免疫學指標CD8+無明顯相關(guān)性（r=0.010，P>0.05）。VL與IgG、IgA水平均呈正相關(guān)（r=0.892，P<0.001；r=0.901，P<0.001）。VL與IgM水平無明顯相關(guān)性（r=0.03，P>0.05）。

3 討論

HIV感染機體后快速復制并攻擊機體的免疫系統(tǒng)，可能會導致機會感染或腫瘤等最終導致病人死亡[8]。AIDS目前還無法治愈，HAART是目前國際上主要的控制HIV的療法。HAART能較好地控制HIV在人體內(nèi)的復制，降低HIV/AIDS病人體內(nèi)VL并維持在較低的水平，提高艾滋病病人的免疫功能[9]。這一治療方式能夠有效減少單一用藥產(chǎn)生的抗藥性，抑制病毒的復制，對被破壞的機體免疫功能具有恢復的作用，能夠有效延緩病人的病程，改善預后，延長病人生命[10]。

本研究的200例HIV感染者治療后，VL水平隨著治療時間延長而下降，說明抗病毒治療效果明顯。茅乃玲等[11]發(fā)現(xiàn)，通過有效的抗病毒治療以后，隨著治療時間的延長，VL顯著下降。有研究發(fā)現(xiàn)[12]，TDF+3TC+EFV作為成人初始HAART方案能在短期內(nèi)明顯降低病人HIV的VL并升高CD4+。同樣有研究證明[13]，免費抗病毒治療的5年累積生存率為95.8%。以上結(jié)果提示，有效抗病毒治療效果顯著。

AIDS病人是由于HIV病毒感染后浸入人體免疫系統(tǒng)，而作為細胞免疫的主要因素T淋巴細胞成為主要被攻擊對象[14]。T淋巴細胞是人體免疫系統(tǒng)中最重要的一組淋巴細胞群，主要有CD4+和CD8+[15]。本研究結(jié)果提示在抗病毒治療過程中，病人經(jīng)過HAART后，CD4+及CD4+/CD8+比值隨時間延長而升高，提示抗病毒治療對免疫功能的改善起到了積極作用。與陳昭云等[16]的研究結(jié)果一致。本研究結(jié)果中，病人IgG、IgA水平在治療前均高于正常范圍，說明在AIDS病人中存在著體液免疫增強反應，故導致血漿中免疫球蛋白含量增高。本研究中，HIV感染者治療前后血清IgM水平變化不明顯，可能因為IgM為機體體液第一次發(fā)生免疫應答后早期生成的免疫球蛋白，半衰期較短，并且存在的時間比較短而不容易被檢測到所致[17]。與陳燕萍等[18]研究結(jié)果一致。

本研究中Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，VL與免疫學指標 CD4+、CD4+/CD8+呈負相關(guān)，與 IgG、IgA水平呈正相關(guān)。有研究表明[19]，基線CD4值與VL抑制有著密切的關(guān)聯(lián)。鄧林等[20]發(fā)現(xiàn)，CD4+淋巴細胞數(shù)及CD4+/CD8+比值與VL結(jié)果呈負相關(guān)。黃慧謙等[21]發(fā)現(xiàn)，AIDS病人抗病毒治療期間，IgG、IgA水平與VL正相關(guān)，與本研究結(jié)果一致。以上研究說明AIDS病人的VL水平與免疫學指標CD4+、CD4+/CD8+、IgG、IgA水平密切相關(guān)。

綜上所述，TDF+3TC+EFV能在短期內(nèi)明顯降低HIV感染者的VL，改善免疫指標，且VL載量與免疫學指標CD4+、CD4+/CD8+呈負相關(guān)，與IgG、IgA水平呈正相關(guān)。今后在HIV感染者抗病毒治療過程中，可通過檢測VL或免疫指標的綜合研判，對抗毒度治療效果及機體免疫功能做出評價，以指導臨床治療。