黔北麻羊GPx3基因克隆、生物信息學(xué)分析及在不同性腺組織中的表達(dá)分析

付開斌，陳 祥*，周志楠，張 艷，惠茂茂，洪 磊

（1.貴州大學(xué)高原山地動(dòng)物遺傳育種與繁殖教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，貴州省動(dòng)物遺傳育種與繁殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，貴州貴陽(yáng) 550025；2.貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，貴州貴陽(yáng) 550025）

硒是動(dòng)物機(jī)體所必需的微量元素，可以整合到氨基酸序列中形成相應(yīng)的硒蛋白并發(fā)揮其生物學(xué)功能。谷胱甘肽過氧化物酶（Glutathione Peroxidase，GPx）家族是最早發(fā)現(xiàn)的硒蛋白，現(xiàn)已研究發(fā)現(xiàn)的GPx家族成員有8位。谷胱甘肽過氧化物酶3（Glutathione Peroxidase 3，）也被稱作血漿GPx，它是含硒谷胱甘肽過氧化物酶家族中具有前導(dǎo)序列、能分泌到細(xì)胞外間隙的糖基化蛋白。研究表明，適宜濃度的活性氧（Reactive Oxygen Species，ROS）是維持細(xì)胞正常生命活動(dòng)所必需的條件之一，ROS的過量則會(huì)造成生物膜的過氧化損傷、DNA鏈斷裂和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)破壞，引起細(xì)胞代謝途徑紊亂，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞壞死、凋亡；GPx3是主要的抗氧化酶之一，它可以利用過氧化氫、脂肪酸氫過氧化物等底物，以實(shí)現(xiàn)機(jī)體內(nèi)ROS的動(dòng)態(tài)平衡，其主要來源于腎臟，由近端腎小管上皮細(xì)胞和鮑曼囊壁層上皮細(xì)胞產(chǎn)生并釋放到血液中。同時(shí)，也表達(dá)于附睪并參與成熟精子免受活性氧損傷，催化降解精子在成熟過程中所接觸到的過氧化物。在雌性動(dòng)物生殖上，可以清除卵泡發(fā)育過程中產(chǎn)生的活性氧和母體胎盤硒轉(zhuǎn)移以及參與胎兒發(fā)育和生產(chǎn)。Xu等研究發(fā)現(xiàn)，在子宮內(nèi)膜重塑（去蘇醒）后的氧化應(yīng)激過程中，是一種必不可少的酶，可有效降低子宮內(nèi)膜中的HO含量來為著床做好準(zhǔn)備。還可以防止健康卵泡生長(zhǎng)過程中氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，其活性的降低會(huì)引起ROS代謝損傷，導(dǎo)致血小板高反應(yīng)性的發(fā)生和形成血栓的風(fēng)險(xiǎn)增加。綜上，的抗氧化功能不僅與機(jī)體的疾病健康有關(guān)，還影響著動(dòng)物的生殖調(diào)控。

黔北麻羊是貴州省三大優(yōu)良地方山羊品種之一，具有適應(yīng)性強(qiáng)、產(chǎn)肉性能良好、肉鮮美可口、蛋白質(zhì)含量高等優(yōu)點(diǎn)，深受廣大消費(fèi)者的喜愛，具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和發(fā)展?jié)摿Γ敝沉κ冀K是制約黔北麻羊快速發(fā)展的重要因素之一。因此，本研究對(duì)黔北麻羊基因的CDS區(qū)進(jìn)行克隆和生物信息學(xué)分析，并探究GPx3在單、多羔黔北麻羊不同性腺組織中的表達(dá)差異，以期為提高黔北麻羊的繁殖性能提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料 本實(shí)驗(yàn)的黔北麻羊均來自貴州省習(xí)水縣，選取健康、成年且處于相同飼養(yǎng)環(huán)境下的產(chǎn)單、多羔的黔北麻羊各6只。按照貴州省地方標(biāo)準(zhǔn)《羊屠宰操作規(guī)程》（DB22/T 2740—2017）進(jìn)行屠宰，屠宰后立即采集黔北麻羊的下丘腦、垂體、子宮、輸卵管和卵巢5個(gè)組織，對(duì)組織樣進(jìn)行處理并標(biāo)記后放入液氮中冷凍保存，帶回實(shí)驗(yàn)室后，立即轉(zhuǎn)入-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及儀器 FirstStrand cDNA Synthesis、2×Taq MasterMix均購(gòu)自貴州艾瑞特生物有限公司；TRIzol RNA 提取試劑盒、膠回收試劑盒均購(gòu)自康為世紀(jì)生物科技有限公司；DNA Marker 2000、pMD-19T克隆載體均購(gòu)自大連寶生物工程有限公司；LB Broth培養(yǎng)基購(gòu)自上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司；PCR擴(kuò)增儀（C1000 Touch）、凝膠成像系統(tǒng)（Universal Hood II）及電泳儀（DYY-2C型）均購(gòu)自美國(guó)BIORAD公司；37℃恒溫?fù)u床、超微量紫外分光光度計(jì)（μL trospec 2100 pro）購(gòu)自安瑪西亞中國(guó)有限公司；實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀（CFX96 Real-Time System）購(gòu)自上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠。

1.3 引物的設(shè)計(jì)與合成 根據(jù)NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中提供的山羊基因（XM_005683183.3）的mRNA序列設(shè)計(jì)CDS區(qū)擴(kuò)增引物，使用Premier 5.0軟件設(shè)計(jì)熒光定量引物，以-actin作為qRT-PCR內(nèi)參基因。引物送至生工生物工程（上海）股份有限公司合成。引物序列信息詳見表1。

表1 引物信息

1.4 總RNA的提取及cDNA第一條鏈的合成 使用TRIzol法提取單、多羔黔北麻羊的下丘腦、垂體、子宮、輸卵管和卵巢組織的總RNA，使用超微量分光光度計(jì)測(cè)定RNA的濃度與純度值。RNA于-80℃冰箱保存。根據(jù)逆轉(zhuǎn)錄試劑盒說明書，對(duì)黔北麻羊組織樣品中的總RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。反應(yīng)體系為20 μL：RNA模板（ng/μL）9 μL、Oligo（dT）18 Primer 1 μL，RI 1 μL、RT 1 μL，dNTP Mix 2 μL，Buffer 4 μL，Nuclease-free Water 1 μL，Random 1 μL。反應(yīng)條件為42℃孵育60 min，70℃孵育5 min。結(jié)束后在超微量紫外分光光度計(jì)下進(jìn)行濃度和純度檢測(cè)。cDNA產(chǎn)物于-20℃冰箱保存。

1.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR及數(shù)據(jù)分析 以-actin為內(nèi)參基因，對(duì)所采集的單、多羔黔北麻羊的5種不同組織的基因mRNA進(jìn)行熒光定量PCR檢測(cè)。反應(yīng)體系為10 μL：2×UltraSYBR Mixture 5 μL，Primer Sense（10 pmol/μL）0.5 μL，Primer Anti-sense（10 pmol/μL）0.5 μL，cDNA（ng/μL）0.8 μL，ddHO 3.2 μL。反應(yīng)條件為：95℃ 2 min，95℃ 15 s，60.4℃ 30 s，72℃ 3 min，循 環(huán)40次后進(jìn)行溶解曲線分析，以每5 s上升0.5℃的速率從65℃上升到95℃，實(shí)驗(yàn)的每個(gè)樣品檢測(cè)做3個(gè)重復(fù)，取平均值。采用2法分析基因在單、多羔黔北麻羊5個(gè)不同性腺組織中的相對(duì)表達(dá)量，使用SPSS Statistics軟件對(duì)2相對(duì)定量法所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，分別以＜0.05和＜0.01為差異顯著和極顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.6 黔北麻羊基因CDS區(qū)的擴(kuò)增 以cDNA為模板，PCR擴(kuò)增黔北麻羊基因的CDS區(qū)。擴(kuò)增體系為20 μL：2× Es Taq MasterMix 10 μL，上下游引物各（10 pmol/μL）1 μL，ddHO 6 μL，cDNA（ng/μL）2 μL。反應(yīng)程序?yàn)椋?5℃預(yù)變性3 min；95℃變性30 s，53℃退火45 s，72℃延伸30 s，35個(gè)循環(huán)；72℃終延伸7 min，4℃保存。

1.7 黔北麻羊基因的T克隆 將經(jīng)凝膠電泳檢測(cè)的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物按膠回收試劑盒說明書進(jìn)行回收，使用超微量分光光度計(jì)對(duì)回收產(chǎn)物進(jìn)行濃度和純度檢測(cè)，并與pMD-19T載體進(jìn)行連接反應(yīng)（金屬浴16℃，12～16 h）。連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化至E.coli TOP10感受態(tài)細(xì)胞中。均勻涂布至LB固體培養(yǎng)基（含氨芐青霉素）上并于37℃恒溫箱培養(yǎng)12～16 h。挑取固體培養(yǎng)基上的白斑于含氨芐青霉素和LB液體培養(yǎng)液的10 mL離心管中進(jìn)行搖菌（37℃，200 r/min，12～16 h）。待菌液渾濁后即進(jìn)行菌液PCR，并用1%的瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測(cè)，篩選與目的片段一致的菌液送至北京擎科新業(yè)生物技術(shù)有限公司進(jìn)行測(cè)序。

1.8 黔北麻羊基因的生物信息學(xué)分析 將測(cè)序結(jié)果用DNAStar軟件與NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中山羊的CDS區(qū)序列進(jìn)行比對(duì)，在比對(duì)正確后利用MegAlign軟件對(duì)黔北麻羊GPx3的CDS區(qū)進(jìn)行同源性分析；分別使用在線網(wǎng)站ExPASy（https://web.expasy.org/protparam/）、ProtScal（https://web.expasy.org/protscale/）分析蛋白質(zhì)理化性質(zhì)和蛋白質(zhì)疏水性；分別使用SOPMA（http://npsapbil.ibcp.fr/cgi-bin/npsa_automat.pl?page=npsa_sopma.html）、SWISS-MODEL（https://swissmodel.expasy.org/interactive/EHVM5c/models/）預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)；利用PSORT II Preadict（https://psort.hgc.jp/form2.html）進(jìn)行亞細(xì)胞定位分析；使用SignalP 4.1 Sever（http://www.cbs.dtu.dk/services/SignalP-4.1）進(jìn)行氨基酸信號(hào)肽預(yù)測(cè)；MEGA 6.0和MegAlign軟件構(gòu)建不同物種中的系統(tǒng)進(jìn)化樹和同源性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1基因在單、多羔黔北麻羊不同性腺組織中的表達(dá)分析基因在單、多羔黔北麻羊的不同性腺組織中均有表達(dá)，結(jié)果如圖1所示。組內(nèi)分析可知基因在黔北麻羊單羔組5個(gè)不同組織中的表達(dá)趨勢(shì)由高到低依次為：卵巢＞下丘腦＞子宮＞輸卵管＞垂體；在多羔組中表達(dá)量由高到低依次為：卵巢＞垂體＞輸卵管＞子宮＞下丘腦。通過組間比較分析得出，黔北麻羊基因在多羔組中的卵巢、垂體、輸卵管和子宮的表達(dá)量極顯著高于單羔組，但在下丘腦中未達(dá)到差異顯著水平。

圖1 GPx3基因在黔北麻羊單、多羔不同性腺組織中的相對(duì)表達(dá)量

2.2 黔北麻羊基因的PCR擴(kuò)增 由圖2可知，基因熒光定量引物的擴(kuò)增條帶為262 bp（圖2A）；CDS區(qū)克隆引物擴(kuò)增條帶為681 bp（圖2B）。片段大小與預(yù)測(cè)結(jié)果一致，條帶清晰明亮、單一，無二聚體等非特異性片段擴(kuò)增，結(jié)果可用于下一步實(shí)驗(yàn)。

圖2 GPx3瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)結(jié)果

2.3 黔北麻羊基因的T克隆載體測(cè)序鑒定 黔北麻羊基因克隆結(jié)果使用1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，結(jié)果顯示，目的條帶清晰明亮，與目的片段大小一致（圖3）。菌液測(cè)序驗(yàn)證結(jié)果與NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中山羊CDS區(qū)序列比對(duì)吻合度為99.85%（圖4）。第611位 的堿基由A突變?yōu)門，屬于同義突變，所編碼的氨基酸不變，皆為甘氨酸。菌液PCR瓊脂糖凝膠電泳及測(cè)序結(jié)果皆顯示基因CDS區(qū)序列已成功克隆至pMD-19T載體中，表明pMD-19T-GPx3克隆載體構(gòu)建成功。

圖3 GPx3基因菌液PCR檢測(cè)結(jié)果

圖4 黔北麻羊GPx3基因部分克隆序列與NCBI上傳序列比對(duì)結(jié)果

2.4 黔北麻羊基因生物信息學(xué)分析

2.4.1 黔北麻羊GPx3蛋白質(zhì)理化性質(zhì)分析 黔北麻羊基因編碼區(qū)大小為681 bp，共編碼225個(gè)氨基酸，其編碼的蛋白質(zhì)分子式為CHNOS，原子總數(shù)3 573，相對(duì)分子質(zhì)量25 392.24，理論等電點(diǎn)7.63，在哺乳動(dòng)物機(jī)體內(nèi)的估計(jì)半衰期為30 h。該蛋白質(zhì)的不穩(wěn)定指數(shù)為50.47，屬于不穩(wěn)定蛋白，由20種氨基酸構(gòu)成，其中亮氨酸含量最高，占總氨基酸數(shù)的11.1%，色氨酸和組氨酸含量最低，占氨基酸總數(shù)的1.3%。帶負(fù)電荷的殘基總數(shù)（Asp+Glu）為25，正電荷殘基總數(shù)（Arg+Lys）為26，提示黔北麻羊GPx3蛋白的氨基酸序列帶正電。由ProtScale分析可知，橫坐標(biāo)代表GPx3蛋白質(zhì)的氨基酸位置，縱坐標(biāo)代表GPx3蛋白質(zhì)的疏水分值，得分低于0為親水性蛋白質(zhì)，得分高于0是疏水性蛋白質(zhì)。GPx3蛋白親水性最強(qiáng)的是第109位上的谷氨酸（-2.689），疏水性最強(qiáng)的是第15位上的絲氨酸（2.567），肽鏈上的疏水性氨基酸少于親水性氨基酸，提示整條肽鏈表現(xiàn)為親水性（圖5）。

圖5 GPx3蛋白疏水性圖譜

2.4.2 黔北麻羊GPx3蛋白質(zhì)高級(jí)結(jié)構(gòu)分析與預(yù)測(cè) 由SOMPA在線軟件結(jié)果顯示，黔北麻羊GPx3蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)由-螺旋（29.78%）、-轉(zhuǎn)角（8%）、延伸鏈（17.33%）以及無規(guī)則卷曲（44.89%）構(gòu)成，可見GPx3蛋白質(zhì)主要由無規(guī)則卷曲和-螺旋構(gòu)成（圖6）。GPx3蛋白三級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)結(jié)果與二級(jí)結(jié)構(gòu)分析結(jié)果一致（圖7）。

圖6 黔北麻羊GPx3蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)分析

圖7 GPx3蛋白三級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)

2.4.3 黔北麻羊GPx3蛋白質(zhì)亞細(xì)胞定位分析與信號(hào)肽預(yù)測(cè) 運(yùn)用PSORT II Preadict對(duì)黔北麻羊GPx3蛋白質(zhì)亞細(xì)胞定位分析發(fā)現(xiàn)，GPx3蛋白質(zhì)主要定位在細(xì)胞外（66.7%），包括細(xì)胞壁；其次為空泡（22.2%）；最低是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（11.1%）。使用SignalP 4.1預(yù)測(cè)氨基酸序列中的信號(hào)肽及其剪切位點(diǎn)，結(jié)果由圖8所示，黔北麻羊基因編碼的氨基酸序列中具有信號(hào)肽，信號(hào)肽平均值大于0.5，表明GPx3蛋白屬于分泌蛋白；GPx3蛋白可能的剪切位點(diǎn)位于第24位和第25位氨基酸之間，表明成熟肽始于第24位氨基酸。

圖8 黔北麻羊GPx3基因編碼氨基酸信號(hào)肽分析

2.4.4 GPx3氨基酸同源性分析及系統(tǒng)進(jìn)化樹的構(gòu)建MegAlign進(jìn)行氨基酸同源性分析，結(jié)果顯示所克隆的黔北麻羊基因CDS區(qū)序列與綿羊、牛、豬、馬、犬、小鼠、人、兔、雞的同源性分別為99.6%、98.2%、88.4%、90.7%、92.0%、86.2%、86.7%、88.4%、68.8%（圖9）。MEGA 6.0構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹，結(jié)果表明黔北麻羊基因編碼的氨基酸序列與綿羊的遺傳距離最近，其次是牛，遺傳距離最遠(yuǎn)的是雞，符合物種進(jìn)化的規(guī)律（圖10）。

圖9 黔北麻羊GPx3基因編碼區(qū)同源性分析

圖10 黔北麻羊GPx3基因編碼區(qū)遺傳進(jìn)化樹

3 討 論

是動(dòng)物機(jī)體重要的抗氧化物質(zhì)，不僅在維持機(jī)體內(nèi)ROS的動(dòng)態(tài)平衡具有顯著的作用，且在動(dòng)物生殖調(diào)控方面也具有重要意義。有大量研究表明，基因與人類的正常妊娠和分娩以及母嬰硒轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制有關(guān)，且它可以影響子癇前期和妊娠高血壓綜合征的發(fā)生。熊賢榮等研究顯示在牦牛卵母細(xì)胞體外成熟過程中，硒可顯著提高卵母細(xì)胞谷胱甘肽過氧化物酶的活性及其家族基因的表達(dá)，進(jìn)而提高卵丘細(xì)胞DNA完整性以及卵母細(xì)胞減數(shù)分裂和發(fā)育能力。同時(shí)，姚曉蕾等也報(bào)道了硒對(duì)母畜相關(guān)生殖激素的合成具有積極作用。故本實(shí)驗(yàn)以黔北麻羊?yàn)檠芯繉?duì)象，運(yùn)用qRT-PCR方法，對(duì)產(chǎn)單、多羔黔北麻羊的5個(gè)不同性腺組織基因的表達(dá)水平進(jìn)行了檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)基因在產(chǎn)單、多羔黔北麻羊的下丘腦、垂體、子宮、輸卵管以及卵巢均有表達(dá)，與基因在日本沼蝦各組織均有表達(dá)的結(jié)果一致。Tao等研究發(fā)現(xiàn)，在刀額新對(duì)蝦的卵巢快速發(fā)育時(shí)期GPx的表達(dá)量呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。本研究結(jié)果顯示在黔北麻羊多羔組中基因在卵巢的表達(dá)量極顯著高于所有組織，單羔組卵巢的表達(dá)量也極顯著高于垂體和輸卵管，顯著高于子宮。這提示基因的表達(dá)對(duì)卵巢的發(fā)育具有重要作用，推測(cè)可能是在卵巢發(fā)育時(shí)會(huì)產(chǎn)生大量ROS，因此表達(dá)量上升以保護(hù)卵巢免受氧化傷害，但具體原因及作用機(jī)理有待進(jìn)一步研究。此外，基因在產(chǎn)單、多羔黔北麻羊的子宮中均有表達(dá)，這與許袖以小鼠為研究對(duì)象的研究結(jié)果相反，即在小鼠的子宮內(nèi)膜中，mRNA在妊娠期的前4天沒有表達(dá)，第5天才出現(xiàn)特異性表達(dá)，且在假孕和延遲著床的子宮中沒有表達(dá)，推測(cè)這可能是不同物種之間存在差異的結(jié)果?；蛟诋a(chǎn)多羔黔北麻羊的垂體、子宮、輸卵管和卵巢的表達(dá)量極顯著高于產(chǎn)單羔的黔北麻羊，下丘腦未達(dá)到顯著水平，提示基因可能參與黔北麻羊產(chǎn)羔性狀的調(diào)控，其具體作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

本研究以黔北麻羊的卵巢、輸卵管和下丘腦組織cDNA為模板，成功克隆了基因的CDS區(qū)，與NCBI上傳數(shù)據(jù)庫(kù)中山羊的編碼區(qū)序列進(jìn)行對(duì)比，同源性達(dá)99.85%，堿基由A突變?yōu)門，屬于同義突變，所編碼的氨基酸不變，表明黔北麻羊基因所編碼蛋白質(zhì)的功能不發(fā)生改變?；蚬簿幋a225個(gè)氨基酸，理論等電點(diǎn)（7.63）與李蒙等在三疣梭子蟹（7.98）的研究結(jié)果差距較小，推測(cè)可能是不同物種之間存在差異。GPx3蛋白是疏水性蛋白質(zhì)，且該蛋白的不穩(wěn)定指數(shù)為50.47，屬于不穩(wěn)定蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)對(duì)其發(fā)揮生物學(xué)功能起著決定性作用。本研究發(fā)現(xiàn)黔北麻羊GPx3蛋白三級(jí)結(jié)構(gòu)的預(yù)測(cè)結(jié)果與二級(jí)結(jié)構(gòu)分析一致，均主要是由無規(guī)則卷曲和-螺旋構(gòu)成，這與郭笑對(duì)人體GPx3蛋白質(zhì)的預(yù)測(cè)結(jié)果相符。對(duì)GPx3蛋白進(jìn)行亞細(xì)胞定位和信號(hào)肽分析，程雪艷等研究發(fā)現(xiàn)GPx3蛋白主要定位于細(xì)胞外，屬于分泌蛋白，與本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果一致；SignalP4.1預(yù)測(cè)結(jié)果顯示GPx3蛋白具有信號(hào)肽，與前人的研究結(jié)果相同，說明GPx3蛋白在跨膜蛋白運(yùn)輸中起著信號(hào)識(shí)別的作用。GPx3蛋白的剪切位點(diǎn)位于第24位和第25位氨基酸之間，提示其成熟肽始于第24位氨基酸。經(jīng)同源性分析發(fā)現(xiàn)，黔北麻羊基因編碼區(qū)的序列與綿羊同源性最高（99.6%），其次是牛（98.2%），最低的是雞（68.8%），表明基因的CDS區(qū)序列在哺乳動(dòng)物中具有較高的保守性和種屬特異性，這符合物種進(jìn)化的規(guī)律，結(jié)果與唐蕾等的研究結(jié)果相同。

4 結(jié) 論

本研究成功克隆了黔北麻羊基因的CDS區(qū)序列，分析發(fā)現(xiàn)GPx3蛋白是一種具有信號(hào)肽的不穩(wěn)定的親水性分泌蛋白質(zhì)，二級(jí)結(jié)構(gòu)主要由無規(guī)則卷曲和-螺旋構(gòu)成。qRT-PCR顯示基因在產(chǎn)單、多羔黔北麻羊的5個(gè)不同性腺組織中均有表達(dá)，且存在組織表達(dá)特異性；在多羔組中的表達(dá)量皆高于單羔組，提示基因可能對(duì)黔北麻羊的產(chǎn)羔性狀具有正向調(diào)控作用。