實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)妊娠晚期孕婦B 族鏈球菌感染的臨床價(jià)值分析

馬倩

B 族鏈球菌是孕晚期孕婦生殖系統(tǒng)感染常見(jiàn)病原微生物類型,常規(guī)情況下此類微生物主要存在于人體下消化道及泌尿生殖系統(tǒng)內(nèi),感染發(fā)生率較低,但在妊娠期間受女性自身激素分泌水平影響時(shí),可在局部微生態(tài)環(huán)境變化后導(dǎo)致感染的發(fā)生。此類感染多發(fā)生于孕晚期階段,可導(dǎo)致早產(chǎn)、胎膜早破、宮內(nèi)感染等不良妊娠結(jié)局的發(fā)生,且可由垂直傳播導(dǎo)致新生兒感染性疾病的發(fā)生,威脅新生兒生命安全［1］?，F(xiàn)階段對(duì)孕晚期孕婦B 族鏈球菌感染的篩查主要采取微生物培養(yǎng)檢查方式,但此類檢驗(yàn)技術(shù)用時(shí)較長(zhǎng),且極易受檢驗(yàn)操作影響,導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果誤差,需在現(xiàn)有檢驗(yàn)技術(shù)基礎(chǔ)上合理選擇新型檢驗(yàn)技術(shù),提升臨床檢驗(yàn)效果［2,3］。因此,為分析實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)妊娠晚期孕婦B 族鏈球菌感染的臨床價(jià)值,特進(jìn)行本次研究,詳情報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019 年7 月～2021 年4 月本院3721例接受B 族鏈球菌感染檢測(cè)的孕晚期孕婦作為研究對(duì)象,年齡19～40 歲,平均年齡(29.54±3.95)歲；孕周34～39 周,平均孕周(36.54±1.71)周；其中初產(chǎn)婦2548例,經(jīng)產(chǎn)婦1173例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①單胎妊娠者；②經(jīng)明確研究細(xì)節(jié)后自愿加入研究者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①已明確不良妊娠類型者；②明確妊娠期并發(fā)癥者。

1.2 方法 經(jīng)采集孕婦陰道分泌物及直腸分泌物后均接受常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)檢驗(yàn)及實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)。

1.2.1 樣本采集 ①陰道分泌物：將無(wú)菌拭子置入陰道下段1/3 處,旋轉(zhuǎn)1 周后采集陰道分泌物,共采集兩份樣本,樣本采集后分別放置于不同無(wú)菌套管內(nèi)密封保存。②直腸分泌物：經(jīng)無(wú)菌拭子置入肛門括約肌上方2～3 cm 處,旋轉(zhuǎn)1 周后采集直腸分泌物,共采集2 份樣本,樣本采集后分別放置于不同無(wú)菌套管內(nèi)密封保存。

1.2.2 細(xì)菌培養(yǎng)檢測(cè) 取陰道分泌物、直腸分泌物樣本各1 份,接種于血瓊脂平皿后,在35℃、5%～10%二氧化碳(CO2)環(huán)境中培養(yǎng)24～48 h 后,選取含B 族鏈球菌菌落瓊脂行CAMP 試驗(yàn),后進(jìn)行微生物鑒定檢查。

1.2.3 實(shí)時(shí)熒光PCR 檢測(cè) 將無(wú)菌套管中陰道分泌物、直腸分泌物樣本進(jìn)行嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)室處理后,采集部分樣本放入PCR 管內(nèi),取PCR 擴(kuò)增試劑盒及全自動(dòng)生化分析儀器實(shí)施擴(kuò)增處理后檢驗(yàn)。

1.3 觀察指標(biāo) 對(duì)比細(xì)菌培養(yǎng)與實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果；對(duì)比不同年齡段(≤20 歲、21～30 歲、31～34 歲、≥35 歲)孕婦B 族鏈球菌陽(yáng)性檢出率；對(duì)比B 族鏈球菌陰性、陽(yáng)性孕婦妊娠結(jié)局(早產(chǎn)、胎膜早破、宮內(nèi)感染、胎兒窘迫及新生兒感染)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌培養(yǎng)與實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)結(jié)果對(duì)比實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)陰道分泌物、直腸分泌物陽(yáng)性檢出率分別為9.00%、9.16%,均高于細(xì)菌培養(yǎng)檢測(cè)的7.28%、7.77%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表1。

表1 細(xì)菌培養(yǎng)與實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)結(jié)果對(duì)比［n(%),n=3721］

2.2 不同年齡段孕婦B 族鏈球菌陽(yáng)性檢出率對(duì)比≤20 歲孕婦B 族鏈球菌陽(yáng)性檢出率為5.58%,21～30 歲孕婦B 族鏈球菌陽(yáng)性檢出率為7.19%,31～34 歲孕婦B 族鏈球菌陽(yáng)性檢出率為10.02%,≥35 歲孕婦B 族鏈球菌陽(yáng)性檢出率為12.16%；B 族鏈球菌感染發(fā)生率隨孕婦年齡增加上升,不同年齡段孕婦B 族鏈球菌陽(yáng)性檢出率對(duì)比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表2。

表2 不同年齡段孕婦B 族鏈球菌陽(yáng)性檢出率對(duì)比(%)

2.3 B 族鏈球菌陰性、陽(yáng)性孕婦妊娠結(jié)局對(duì)比 依據(jù)孕婦治療意愿予以B 族鏈球菌感染孕婦治療,B 族鏈球菌陽(yáng)性孕婦早產(chǎn)、胎膜早破、宮內(nèi)感染、胎兒窘迫及新生兒感染發(fā)生率均高于B 族鏈球菌陰性孕婦,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表3。

表3 B 族鏈球菌陰性、陽(yáng)性孕婦妊娠結(jié)局對(duì)比［n(%)］

3 討論

正常情況下女性生殖系統(tǒng)及直腸環(huán)境內(nèi)微生態(tài)系統(tǒng)及環(huán)境均處于平衡狀態(tài),單一菌種感染性疾病發(fā)生率較低,但在妊娠期間受女性自身雌激素及孕激素分泌水平變化影響,陰道內(nèi)微生態(tài)環(huán)境可在局部免疫功能下降后出現(xiàn)失衡情況,從而誘發(fā)感染性疾病。B 族鏈球菌作為生殖系統(tǒng)內(nèi)常見(jiàn)微生物類型,是妊娠晚期生殖系統(tǒng)感染主要病原微生物類型,且可在生殖系統(tǒng)感染進(jìn)展后發(fā)生直腸內(nèi)感染,臨床發(fā)病率受孕婦年齡影響［4］。

流行病學(xué)研究［5,6］指出,相較非孕期患者,妊娠期孕婦B 族鏈球菌發(fā)病后所致臨床風(fēng)險(xiǎn)性更為明顯,發(fā)病期間或可由B 族鏈球菌感染上行導(dǎo)致子宮、胎膜感染的發(fā)生,增加妊娠晚期流產(chǎn)、胎膜早破、早產(chǎn)等不良妊娠結(jié)局的發(fā)生,且在分娩期間或可由垂直感染導(dǎo)致新生兒感染的發(fā)生,誘發(fā)臨床感染性疾病,威脅新生兒健康安全。故在孕期檢查中針對(duì)孕晚期孕婦積極開(kāi)展B 族鏈球菌感染檢測(cè)對(duì)控制B 族鏈球菌感染所致不良妊娠結(jié)局風(fēng)險(xiǎn)具有積極意義。

本次研究結(jié)果顯示,實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)陰道分泌物、直腸分泌物陽(yáng)性檢出率均高于細(xì)菌培養(yǎng)檢測(cè),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)B 族鏈球菌感染發(fā)生率隨孕婦年齡增加上升。B 族鏈球菌陽(yáng)性孕婦早產(chǎn)、胎膜早破、宮內(nèi)感染、胎兒窘迫及新生兒感染發(fā)生率均高于B 族鏈球菌陰性孕婦,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)?，F(xiàn)階段,孕期檢驗(yàn)中對(duì)于B 族鏈球菌感染的檢測(cè)主要采取細(xì)菌培養(yǎng)方式實(shí)施檢驗(yàn),即在采集受檢孕婦陰道分泌物及直腸分泌物樣本,經(jīng)特定環(huán)境條件內(nèi)血瓊脂培養(yǎng)后對(duì)所得菌群進(jìn)行針對(duì)性研究,分析受檢者B 族鏈球菌感染情況,但在此類檢驗(yàn)實(shí)施中樣本采集、培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn)室操作的開(kāi)展均存在質(zhì)量影響因素,導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果發(fā)生誤差,影響實(shí)際檢驗(yàn)效果,應(yīng)用局限性明顯［7-9］。在實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)中,受檢驗(yàn)技術(shù)特性影響,整體檢驗(yàn)操作可在4 h 內(nèi)完成,快速完成檢驗(yàn),且對(duì)于已死亡B 族鏈球菌同樣具有顯著檢驗(yàn)效果,且檢驗(yàn)操作自動(dòng)化程度高,使得人工檢驗(yàn)操作所致檢驗(yàn)結(jié)果差異性風(fēng)險(xiǎn)明顯下降,檢驗(yàn)結(jié)果真實(shí)性確切。且在本次研究中發(fā)現(xiàn),部分B 族鏈球菌感染孕婦或僅存在陰道分泌物或直腸分泌物單一檢驗(yàn)結(jié)果陽(yáng)性情況,故對(duì)兩類樣本進(jìn)行同時(shí)檢驗(yàn)或可積極發(fā)揮妊娠晚期B 族鏈球菌感染篩查效果［10-13］。

綜上所述,實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)妊娠晚期孕婦B 族鏈球菌感染具有顯著應(yīng)用價(jià)值,需在年齡較大孕婦中加強(qiáng)檢測(cè)力度,且需在確認(rèn)檢驗(yàn)結(jié)果后及時(shí)予以干預(yù),降低不良妊娠結(jié)局風(fēng)險(xiǎn),保障母嬰安全。