原發(fā)性高血壓老年患者血清富含半胱氨酸酸性分泌蛋白、DFR、半乳糖凝集素-3與頸動(dòng)脈粥樣硬化的相關(guān)性分析

李芳，郝杰，劉金明，杜珍，祖秀光

1. 河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院心內(nèi)三科，河北石家莊050000；2. 海軍軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院心血管外科，上海200433

原發(fā)性高血壓為常見的心血管疾病，在中老年人中多見。該病不僅是一個(gè)獨(dú)立疾病，而且是其他心腦血管疾病發(fā)生的高危因素[1]。在高血壓疾病的病理生理進(jìn)程中機(jī)體體循環(huán)動(dòng)脈處于高壓狀態(tài)，可引起頸動(dòng)脈粥樣硬化，繼而增大心腦血管事件風(fēng)險(xiǎn)[2]。因此，早期識(shí)別高血壓患者頸動(dòng)脈粥樣硬化，有利于提前制定預(yù)防措施，提前干預(yù)。富含半胱氨酸酸性分泌蛋白（cysteine rich acidic secretory protein，SPARC）是1 種由多種細(xì)胞分泌的鈣結(jié)合蛋白，與器官發(fā)育、細(xì)胞粘附、組織修復(fù)、慢性炎癥和血小板聚集等相關(guān)[3]。半乳糖凝集素-3（Galectin-3，Gal-3）是1 種多功能蛋白質(zhì)，參與細(xì)胞生長(zhǎng)、凋亡及炎癥損傷等[4]。血漿D-二聚體（D-dimer, D-D）和纖維蛋白原（fibrinogen,FIB）作為纖溶和凝血標(biāo)志物，與高血壓發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)[5]。D-二聚體與纖維蛋白原之比（ratio of Ddimer to fibrinogen，DFR）為臨床新型指標(biāo)之一，可反映纖溶/凝血平衡，該數(shù)值增高可提示平衡向纖溶偏移，血栓風(fēng)險(xiǎn)增高[6]。已有研究表明[7-9]，SPARC、DFR、Gal-3 與動(dòng)脈粥樣硬化關(guān)系密切，但與高血壓患者頸動(dòng)脈粥樣硬化關(guān)系鮮見報(bào)道。因此，本研究分析原發(fā)性高血壓患者血清中上述3 個(gè)指標(biāo)與頸動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系，以期為臨床診治提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2019年8月—2020年8月于河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院收治的原發(fā)性高血壓患者132 例設(shè)為觀察組，將同期健康體檢合格者90 例設(shè)為對(duì)照組。觀察組中男性78 例，女性54 例；年齡60～80 歲，平均年齡（70.5±4.2）歲；病程1～10年，平均病程（6.32±1.11）年；平均體質(zhì)量指數(shù)（22.41±2.70）kg/m2；吸煙52 例。對(duì)照組中男性55 例，女性35 例；年齡61～82 歲，平均年齡（71.1±4.1）歲；體質(zhì)量指數(shù)（22.27±2.62）kg/m2；吸煙37 例。2 組患者的體質(zhì)量指數(shù)、年齡及性別構(gòu)成比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（0.05）。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（批準(zhǔn)號(hào)為YGY20181109），參與研究者簽署知情同意書后實(shí)施。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合《中國(guó)高血壓防治指南2018年修訂版》中診斷標(biāo)準(zhǔn)[10]；（2）年齡≥60 歲；（3）病案信息完整；（4）病情可控制；（5）依從性好，可配合完成本次研究；（6）凡符合上述所有標(biāo)準(zhǔn)的病例方可納入本研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）繼發(fā)性高血壓；（2）知曉本研究，簽署知情同意書。合并嚴(yán)重的肝臟、心臟、腎臟等臟器疾病、精神疾病、免疫缺陷疾病、腫瘤性疾病或血液系統(tǒng)疾病。具有上述任意1 項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)的病例不納入本研究。

1.2 觀察指標(biāo)與方法

1.2.1 血清學(xué)指標(biāo)檢測(cè) 治療前采集觀察對(duì)象的外周靜脈血5 mL，3 000 r/min 離心10 min，取血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法[11]檢測(cè)血清SPARC 和Gal-3 水平。試劑由上海江萊生物科技有限公司和上海富雨生物科技有限公司提供，批號(hào)分別為 1534870226 和FY-04137H2。采用全自動(dòng)凝血分析儀（上海玉研科學(xué)儀器有限公司）測(cè)定D-D與FIB 水平，試劑由上海晶抗生物工程有限公司和上海江萊生物科技有限公司提供，批號(hào)分別為JK- (a) -E02586 和1533551594。計(jì)算D-D與FIB 之比，即DFR。所有操作均按儀器以及試劑說明書進(jìn)行。

1.2.2 高血壓分級(jí) 治療前進(jìn)行分級(jí)，1 級(jí)，舒張壓（diastolic pressure，DBP）在90～99 mmHg 和收縮壓（systolic pressure，SBP）在140～159 mmHg；2 級(jí)，DBP在100～109 mmHg 和/或SBP 在160～179 mmHg；3 級(jí)，DBP≥110 mmHg 和SBP≥180 mmHg[12]。

1.2.3 頸動(dòng)脈粥樣硬化分級(jí) 治療前頸動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度（Carotid intima-media thickness，IMT）≤1.2 mm為0 級(jí)；1.2 mm＜IMT＜2.0 mm，只有1 個(gè)斑塊為1 級(jí)；2.0 mm≤IMT≤4.0 mm，有≥1 個(gè)斑塊為2 級(jí)；多個(gè)斑塊且其中有1 個(gè)斑塊IMT＞4.0 mm 為3 級(jí)[13]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 24.0 統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)。以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示計(jì)量資料，2 組間比較采用 檢驗(yàn)，多組間比較使用AVONA 檢驗(yàn)（其中兩兩比較采用snk-檢驗(yàn)）；以例數(shù)和百分率表示計(jì)數(shù)資料，采用2檢驗(yàn)；相關(guān)性采用Spearman 相關(guān)分析。0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2 組患者的血清SPARC、Gal-3、D-D、FIB、DFR檢測(cè)值比較 觀察組患者的血清SPARC、Gal-3、DD、FIB、DFR 檢測(cè)值均顯著高于對(duì)照組（0.05）。見表1。

表1 2 組患者的血清SPARC、Gal-3、D-D、FIB、DFR 檢測(cè)值比較（±s）

表1 2 組患者的血清SPARC、Gal-3、D-D、FIB、DFR 檢測(cè)值比較（±s）

組別 SPARC( g/L) Gal-3(ng/L) D-D（mg/L） FIB（g/L） DFR對(duì)照組（ =90）觀察組（ =132）images/BZ_133_242_667_264_690.png3.28±0.37 4.56±0.84 15.446 0.001 32.11±5.28 41.17±9.86 8.857 0.001 0.33±0.15 1.30±0.32 30.286 0.001 2.59±0.52 3.61±0.87 10.911 0.001 0.18±0.04 0.38±0.09 22.481 0.001

2.2 高血壓分級(jí)不同的患者血清SPARC 水平、Gal-3水平和DFR 值比較 132 例原發(fā)性高血壓患者中，高血壓分級(jí)1 級(jí)34 例、2 級(jí)37 例和3 級(jí)61 例；比較高血壓分級(jí)不同的患者血清SPARC 水平、Gal-3 水平和DFR 值，發(fā)現(xiàn)血清SPARC 水平、Gal-3 水平和DFR值均隨著高血壓分級(jí)的增加而上升（0.05）。見表2。

表2 高血壓分級(jí)不同的患者血清SPARC 水平、Gal-3 水平和DFR 值比較（±s）

表2 高血壓分級(jí)不同的患者血清SPARC 水平、Gal-3 水平和DFR 值比較（±s）

注：與1 級(jí)比較，△.05；與2 級(jí)比較，▲0.05

高血壓分級(jí) 例數(shù) SPARC( g/L) Gal-3(ng/L) DFR 1 級(jí)2 級(jí)3 級(jí)34 37 61 3.99±0.52 4.60±0.86△5.23±1.12△▲36.48±7.00 41.23±9.70△45.29±11.01△▲0.33±0.07 0.38±0.09△0.44±0.11△▲

2.3 頸動(dòng)脈粥樣硬化分級(jí)不同的患者血清 SPARC 水平、Gal-3 水平和DFR 值比較132 例原發(fā)性高血壓患者中，頸動(dòng)脈粥樣硬化分級(jí)0～1 級(jí)93 例、2～3 級(jí)39例；比較頸動(dòng)脈粥樣硬化分級(jí)不同的患者血清SPARC水平、Gal-3 水平和DFR 值，發(fā)現(xiàn)頸動(dòng)脈粥樣硬化分級(jí)2～3 級(jí)患者血清SPARC 水平、Gal-3 水平和DFR 值均顯著高于0～1 級(jí)患者（0.05）。見表3。

表3 頸動(dòng)脈粥樣硬化分級(jí)不同的患者血清SPARC 水平、Gal-3 水平DFR 值比較

2.4 高血壓分級(jí)與IMT 和斑塊面積的關(guān)系 IMT 和斑塊面積檢測(cè)值均隨著高血壓分級(jí)的增加而上升（.05）。見表4。

表4 高血壓分級(jí)不同的患者IMT 和斑塊面積檢測(cè)值比較（±s）

表4 高血壓分級(jí)不同的患者IMT 和斑塊面積檢測(cè)值比較（±s）

注：與1 級(jí)比較，△＜0.05；與2 級(jí)比較，▲＜0.05

高血壓分級(jí) 例數(shù) IMT(mm) 斑塊面積(mm2)1 級(jí)2 級(jí)3 級(jí)34 37 61 1.88±0.45 3.56±0.75△5.76±1.25△▲15.33±3.75 19.00±4.60△23.12±5.11△▲

2.5 各指標(biāo)與高血壓分級(jí)及頸動(dòng)脈粥樣硬化分級(jí)的相關(guān)性分析 血清SPARC 水平、Gal-3 水平、DFR 值與高血壓分級(jí)及頸動(dòng)脈粥樣硬化分級(jí)均呈正相關(guān)（0.05）。見表5。

表5 相關(guān)性分析

3 討論

SPARC 是1 種在機(jī)體內(nèi)分布廣泛的小分子酸性糖蛋白，具有促進(jìn)細(xì)胞骨架重排、調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、抑制內(nèi)皮細(xì)胞增殖、促進(jìn)血小板聚集、抑制血管生成和抗細(xì)胞粘附等生物學(xué)作用。以往廣大學(xué)者對(duì)SPARC分子的研究報(bào)道多集中在腫瘤方面，近年來對(duì)其研究的重心逐漸轉(zhuǎn)移至心腦血管領(lǐng)域。本研究顯示，SPARC在原發(fā)性高血壓老年患者血清中呈高表達(dá)水平，提示SPARC 可能參與了原發(fā)性高血壓的發(fā)病，其機(jī)制可能與動(dòng)脈粥樣硬化、血脂異常和炎癥反應(yīng)等過程有關(guān)。此外，不同高血壓分級(jí)及頸動(dòng)脈粥樣硬化分級(jí)老年高血壓患者血清SPARC 水平總體對(duì)比得出的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且隨著分級(jí)增加，血清SPARC 水平逐漸升高，Spearman 相關(guān)分析顯示二者具有相關(guān)性。進(jìn)一步分析，SPARC 可能增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞通透性，并破壞屏障作用，增強(qiáng)血管平滑肌細(xì)胞遷移能力，使平滑肌細(xì)胞在血管內(nèi)膜沉積，高水平SPARC 可阻止血管內(nèi)膜增生，加速血管內(nèi)膜粥樣硬化形成。

FIB 是血液內(nèi)常見凝血因子，與免疫和炎癥有著密不可分的關(guān)系，并與動(dòng)脈粥樣硬化關(guān)系密切。D-D可反映機(jī)體高凝狀態(tài)和機(jī)體的繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)，其在臨床的應(yīng)用不僅局限于排除靜脈血栓栓塞，還在心腦血管疾病發(fā)生、發(fā)展以及不良事件預(yù)測(cè)中有重要應(yīng)用價(jià)值。以往研究顯示[14]，原發(fā)性高血壓患者血漿中FIB 可促進(jìn)頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成，D-D 與頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成也有相關(guān)性，F(xiàn)IB 和D-D 檢測(cè)值能夠反映高血壓患者動(dòng)脈粥樣硬化程度。動(dòng)脈粥樣硬化為高血壓患者發(fā)生心血管事件的基本病理環(huán)節(jié)，而頸動(dòng)脈為反映全身動(dòng)脈粥樣硬化的窗口，因此早期評(píng)估頸動(dòng)脈粥樣硬化狀況和程度對(duì)心腦血管事件的預(yù)測(cè)有重要的意義[15]。本項(xiàng)研究結(jié)果表明，外周血DFR 與高血壓分級(jí)及頸動(dòng)脈粥樣硬化分級(jí)均呈正相關(guān)關(guān)系，提示DFR 可能與高血壓患者頸動(dòng)脈粥樣硬化有關(guān)，這可為臨床提供簡(jiǎn)單且易獲取的評(píng)估高血壓患者頸動(dòng)脈粥樣硬化情況的血清學(xué)標(biāo)志物。

Gal-3 為1 種分子量為31 kD 的-半乳糖苷結(jié)合凝集蛋白，由巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞及中性粒細(xì)胞等炎性細(xì)胞合成并分泌，該蛋白能夠介導(dǎo)細(xì)胞粘附，參與機(jī)體整體或局部炎癥反應(yīng)，參與心肌纖維化。有研究顯示[16]，Gal-3 血清水平變化與心室重構(gòu)關(guān)系密切，而心室重構(gòu)為高血壓預(yù)后不良的重要影響因素之一。研究認(rèn)為[17]，2 型糖尿病患者Gal-3 與雙側(cè)頸動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度（carotid intima-media thickness，cIMT）具有正相關(guān)關(guān)系，在校正有關(guān)影響因素后發(fā)現(xiàn)Gal-3仍是2 型糖尿病病人左側(cè)cIMT 異常的危險(xiǎn)因素。本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組Gal-3 均顯著高于對(duì)照組，這與既往研究結(jié)果相符[18]。同時(shí)本研究發(fā)現(xiàn)，隨著高血壓分級(jí)及頸動(dòng)脈粥樣硬化分級(jí)增高，血清SPARC 水平逐漸升高。此前已有臨床研究顯示[19]血清Gal-3 表達(dá)水平與動(dòng)脈粥樣硬化密切相關(guān)，Gal-3 在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)沉積并隨斑塊范圍增大及炎癥程度增加而上調(diào)，Gal-3 可能是管理動(dòng)脈粥樣硬化疾病的分子靶點(diǎn)之一。Gal-3 可能通過介導(dǎo)巨噬細(xì)胞分化、大量泡沫細(xì)胞形成、機(jī)體血管內(nèi)皮功能異常和血管平滑肌增殖而促使動(dòng)脈粥樣硬化形成[20]。此外，分析高血壓分級(jí)與IMT、斑塊面積的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)CIMT 和斑塊面積均隨著高血壓分級(jí)的增加而上升，提示高血壓分級(jí)和頸動(dòng)脈粥樣硬化分級(jí)之間的關(guān)系密切，這與既往報(bào)道相符[21]。

綜上所述，富含半胱氨酸酸性分泌蛋白、DFR 和半乳糖凝集素-3 在原發(fā)性高血壓老年患者血清中呈高表達(dá)水平，并與頸動(dòng)脈粥樣硬化關(guān)系密切。但本研究的例數(shù)相對(duì)較少，結(jié)果可靠性可能相對(duì)較弱，此外不能忽視種族差異以及各因子聯(lián)合預(yù)測(cè)作用，因而后期仍需更大規(guī)模隨訪研究，以進(jìn)一步探索3 個(gè)分子指標(biāo)與高血壓患者頸動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系及機(jī)制。