咽拭子培養(yǎng)聯(lián)合降鈣素原、C反應(yīng)蛋白及肺炎支原體檢測在兒童肺炎診斷中的應(yīng)用

趙賀紅，曹麗敏，董鳳芝

（1.河南省開封市人民醫(yī)院 檢驗科，河南 開封 475000；2.天津醫(yī)科大學中新生態(tài)城醫(yī)院，天津 300467）

肺炎作為兒童最常見及最重要的呼吸系統(tǒng)疾病之一，主要以過敏性變態(tài)反應(yīng)或吸入羊水、油類及病原體感染等引起肺部相應(yīng)性局部炎癥為特征，具有較高的病死率，其特點包括咳嗽、發(fā)熱、呼吸不暢、食欲下降、腹瀉、嘔吐等癥狀為主要表現(xiàn)，好發(fā)于我國北方地區(qū)冬春季節(jié)［1］。兒童一旦罹患肺炎性相關(guān)疾病，應(yīng)及時進行治療，按照誘因的不同可將其分為細菌性肺炎、病毒性肺炎、真菌性肺炎、支原體肺炎及衣原體肺炎等若干類型。細菌性肺炎的患兒降鈣素原（PCT）及C 反應(yīng)蛋白（CRP）明顯升高［2-3］，肺炎支原體肺炎患兒支原體培養(yǎng)及肺炎支原體（MP）檢測陽性率升高明顯［4］。兒童肺炎發(fā)病較急，因此早期有效識別各型肺炎，及早進行對照診治顯得尤為重要。故本研究選取開封市人民醫(yī)院收治的各型兒童肺炎病例339 例，通過對其進行咽拭子培養(yǎng)及全血PCT、CRP 和MP 檢測分析探討其在各型肺炎的臨床鑒別應(yīng)用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究采用回顧性分析開封市人民醫(yī)院兒科病區(qū)2018 年10 月至2020 年11 月339 例收治入院的肺炎患兒，其中男167 例，女172 例；年齡2～10 歲，平均（4.3±0.6）歲；分為細菌性肺炎組115 例、病毒性肺炎組113 例、肺炎支原體肺炎組111 例。另外選取健康兒童105 例作為對照組，男58 例，女47 例；年齡2～11 歲，平均（4.7±0.8）歲。排除標準：原發(fā)性肝、腎、心、肺功能異常，其它感染性疾病以及血液病史。所選健康兒童性別、年齡與實驗對象構(gòu)成比差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究征得經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準并告知患者家屬知情同意。

1.2 方法

各研究對象均于晨起采集靜脈血2 mL 于EDTAK2 真空紫色抗凝管，并使用無菌咽拭子采集鼻咽部分泌物于無菌管。對抗凝管血液標本進行盡快檢測，所有實驗項目均在1 h 內(nèi)完成相關(guān)檢測及接種培養(yǎng)。

PCT 檢測采用熒光免疫層析法，儀器為上海奧普生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)便攜式熒光免疫分析儀（型號：Maya-500，注冊證編號：滬械注準20192220131），試劑批號為機器配套的檢測試劑盒，參考值為0.0～0.5 ng/mL，在此區(qū)間為正常（或認為是陰性），超過0.5 ng/mL 視為陽性（或認為有感染可能）。CRP 采用乳膠增強免疫散射比濁法進行測定，儀器為BC-5180 全自動血液細胞分析儀（深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司），試劑為機器配套的檢測試劑盒，參考值為0.0～10.0 mg/L。MP 采用膠體金免疫層析技術(shù)進行檢測，試劑盒由珠海麗珠試劑股份有限公司提供，結(jié)果判讀為陰性、陽性和保留三種。MP 培養(yǎng)采用安圖生物支原體培養(yǎng)鑒定計數(shù)藥敏試劑盒（鄭州安圖生物工程股份有限公司），培養(yǎng)48 h 判讀，其培養(yǎng)液顏色由桔紅色轉(zhuǎn)變成黃色表明有MP 生長，結(jié)果判讀為陽性，培養(yǎng)液如無顏色改變?yōu)闊oMP 生長，結(jié)果判讀為陰性。所有檢測試劑批號均在有效期內(nèi)使用。

1.3 統(tǒng)計學方法

本研究所有數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS 20.0 軟件進行統(tǒng)計學處理。計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，多組間比較用單因素方差分析，兩兩比較用t檢驗；計數(shù)資料以百分率（%）表示，用χ2檢驗。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 血清PCT 和CRP 檢測結(jié)果分析

血清PCT 和CRP 在細菌性肺炎組中均顯著上升，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；且PCT+CRP聯(lián)合檢測針對細菌性肺炎的診斷與鑒別明顯優(yōu)于單獨檢測，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1、表2。

表1 各組血清PCT、CRP 水平比較（±s）

表1 各組血清PCT、CRP 水平比較（±s）

注：?與對照組比較，P＜0.05。

表2 各組血清PCT、CRP 及聯(lián)合檢測陽性例數(shù)比較（例）

2.2 MP 和咽拭子檢測結(jié)果分析

肺炎支原體肺炎組MP 檢測陽性率、咽拭子培養(yǎng)陽性率顯著高于其他幾組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；且MP+咽拭子培養(yǎng)聯(lián)合檢測針對肺炎支原體肺炎的診斷與鑒別明顯優(yōu)于單獨檢測，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 各組MP、咽拭子及聯(lián)合培養(yǎng)陽性率比較 ［n（%）］

3 討論

兒童免疫力相對較低，肺炎的發(fā)病率在兒童群體中居高不下，且具有相對較高的病死率。兒童是一個特殊的群體，因其語言表達能力差，所以兒科臨床醫(yī)生如何能夠快速準確鑒別各型肺炎，并給予及時正確的治療顯得尤為重要。

PCT 是一種含有116 個氨基酸，生理情況下主要由甲狀腺C 細胞合成分泌［5-6］的蛋白質(zhì)，當機體受到細菌攻擊感染時，上皮細胞合成表達PCT 濃度則引起上調(diào)。PCT 在細菌攻擊所引起的周身性炎癥早期反應(yīng)中（2～3 h）即可顯著升高，炎癥反應(yīng)12～24 h 即可達到峰值，患者受感染的程度比例與PCT 測定的數(shù)值呈正相關(guān)性，當機體所受感染因素消除后PCT 濃度即可恢復正常水準［7］；而當患者機體受到病毒性感染時，PCT 表達正常，這一數(shù)據(jù)變化可以用于初步協(xié)助評價患兒受到細菌性感染的危險程度［8］。本研究通過PCT 濃度的升高來區(qū)分兒童細菌性肺炎，指導臨床準確快速用藥，盡早減輕患兒痛苦。

超敏CRP 作為可以與肺炎鏈球菌的C 多糖體反應(yīng)的一種急性時相反應(yīng)蛋白，其通常主要由肝細胞分泌合成。在組織發(fā)生損傷6～8 h 就開始升高，峰值高度可以達到正常參考范圍的20～500 倍，而當機體所受致病因素解除后CRP 則能夠迅速降到正常范圍［9］。CRP 在血液中的半衰期短暫（＜1 d），現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于臨床，在觀察抗生素治療療效時具有一定的參考價值。有研究指出CRP 對兒童肺炎早期檢測特異度低，單獨檢測CRP 對鑒別各型肺炎意義不大［10］，因此本研究將實驗對象進行PCT 與CRP 聯(lián)合檢測，且實驗結(jié)果顯示CRP 和PCT 聯(lián)合檢測能提高兒童細菌性肺炎的檢出率。

從人類體內(nèi)可以分離得到的支原體種類具有12 種，但能夠?qū)θ梭w致病并可以引人類肺部炎癥的僅有MP 這一種。支原體所引起的肺炎以患者多為兒童和青少年，長期頑固性咳嗽，頭孢類及青霉素類常用藥物對其治療無效為特點。機體感染后MP 最早能在血清中檢測到其抗體，對于MP 所引發(fā)的肺部炎癥早期的診斷、早期的治療具有很大意義。MP 作為主要的人類原發(fā)性非典型性肺炎病原體之一，其可從人體的上呼吸道以及口腔處分離采集。MP 通常經(jīng)飛沫進行傳播，主要易感人群為青少年及兒童。通過染色直接鏡檢病人的分泌物標本診斷MP 意義欠佳，是由于其沒有固定的形態(tài)特點，導致染出的結(jié)果與樣本中的組織碎片等雜物不能夠進行區(qū)分，實驗室通常主要通過微生物分離培養(yǎng)檢驗及依靠血液學免疫球蛋白M（IgM）抗體檢查法。臨床上通常采集胸水、痰、鼻咽部位及支氣管部的分泌物等，由于兒童采集鼻咽部分泌物比較方便，通過咽拭子細菌培養(yǎng)出致病菌的方式可對兒童細菌性肺炎的診斷和治療提供很大幫助；咽拭子MP 培養(yǎng)聯(lián)合MP 檢測可對兒童肺炎支原體肺炎的診斷和治療提供幫助［11-12］。MP 陽性則表明該兒童現(xiàn)在感染或者近期曾經(jīng)感染肺炎支原體肺炎，具有一定的假陽性與假陰性率；咽拭子MP 培養(yǎng)陽性表明兒童現(xiàn)在感染MP，但陽性率較低。血MP 檢測聯(lián)合咽拭子MP 培養(yǎng)結(jié)果可對該兒童是否為現(xiàn)在感染做出精準判斷，并提高其檢出率［13］。

本研究表明血清PCT、CRP 和MP 檢測方便，快速；咽拭子培養(yǎng)耗時雖長，但是作為肺炎支原體肺炎來鑒別意義重大。咽拭子培養(yǎng)聯(lián)合血清PCT、CRP 和MP 檢測對兒童肺炎的分型很有幫助，并能夠精準指導臨床用藥。

綜上所述，我國各個地區(qū)醫(yī)療資源配置不同，兒童感染肺炎就醫(yī)后如何能快速準確的鑒別和診治顯得尤為重要。咽拭子培養(yǎng)聯(lián)合PCT、CRP 及MP 檢測能夠在兒童肺炎診斷的早期進行指導。臨床醫(yī)生可根據(jù)檢測結(jié)果針對性采取預(yù)防與治療的措施，對延緩和阻止肺炎的發(fā)生與發(fā)展具有積極的臨床意義。