恩替卡韋分散片治療對(duì)高病毒載量慢性乙肝患者的T細(xì)胞亞群及血清脂聯(lián)素、IFN-γ、IL-2水平的影響

張金艷 馬洪德 楊汝磊

平頂山市第一人民醫(yī)院感染性疾病科 (河南 平頂山 467000)

慢性乙型肝炎作為一類常見肝臟病癥，全球范圍內(nèi)具有龐大感染人群，逾20億人，且近3.5億人為慢性乙型肝炎攜帶者，現(xiàn)已成為困擾全世界的社會(huì)公共衛(wèi)生難題[1]。而我國(guó)為慢性乙型肝炎高發(fā)地區(qū)，一般人群乙肝病毒(HBV)攜帶率達(dá)9.09%[2]。通常來(lái)說(shuō)，HBV并不直接對(duì)肝細(xì)胞造成損傷，往往是通過(guò)機(jī)體免疫應(yīng)答，尤其是T細(xì)胞免疫作用，致使機(jī)體肝細(xì)胞呈纖維化病理改變，由此，病情進(jìn)展至肝硬化、肝癌及相關(guān)合并癥，最終導(dǎo)致患者死亡。而高病毒載量慢性乙型肝炎患者病情更為危重，尤需采取特異性治療方案糾正機(jī)體紊亂免疫應(yīng)答。此前，由于以往疾病治療特異性藥物缺乏，多行護(hù)肝、營(yíng)養(yǎng)支持及減黃等對(duì)癥治療，療效一般。而隨著研究不斷深入，諸如拉米夫定、恩替卡韋等抗病毒藥物相繼上市，現(xiàn)在慢性乙型肝炎防控及治療領(lǐng)域逐步得到應(yīng)用[3]?；谖覈?guó)國(guó)情，抗病毒藥物應(yīng)用以恩替卡韋為臨床常見。而恩替卡韋對(duì)患者T淋巴亞群及相關(guān)亞型水平影響還有待進(jìn)一步研究證實(shí)。故本研究以此為著力點(diǎn)開展研究，作如下報(bào)道。

1 資料與方法

1.1 一般資料從本院于2018年6月至2020年6月收治慢性乙肝患者中篩選經(jīng)熒光定量PCR法測(cè)定HBV-DNA＞2×105IU/mL為高病毒載量86例進(jìn)行研究，各43例。其中，對(duì)照組：男24例、女19例；年齡28～62歲，平均年齡(44.16±6.23)歲；病程1～12年，平均病程(6.83±2.15)年。觀察組：男25例、女18例；年齡30～64歲，平均年齡(44.31±6.17)歲；病程2～11年，平均病程(6.76±2.09)年。以上兩組關(guān)于性別、年齡及病程等資料經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，具有可比性(P＞0.05)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：符合2019版《慢性乙型肝炎防治指南》[4]中診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)本院行乙肝兩對(duì)半等檢查確診；高病毒載量：HBV-DNA＞2×105IU/mL；非其他原因致使谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)持續(xù)異常(以正常值上限2倍及以上為參考但不局限)；年齡20～70歲；研究獲經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，并征得患者及家屬同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：伴有甲型、丙型等肝炎病毒重疊感染；諸如酒精性肝病、肝硬化等疾?。徊环螮TV等抗病毒藥物治療適應(yīng)證；妊娠期女性。

1.2 治療方法對(duì)照組患者接受對(duì)癥治療，諸如減黃、保肝及營(yíng)養(yǎng)支持等，具體藥物有甘草酸二銨注射液、天門冬氨酸鉀鎂、氨基酸及維生素C等。觀察組則在以上治療基礎(chǔ)上予以0.5mg恩替卡韋分散片(國(guó)藥準(zhǔn)字：H20100018，正大天晴藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司)于空腹下口服，每天均1次，兩組均持續(xù)治療6個(gè)月。

1.3 觀察指標(biāo)觀察兩組T細(xì)胞亞群、病毒載量指標(biāo)及Th1/Th2型與相關(guān)炎性因子水平。其中，(1)T細(xì)胞亞群水平：涵蓋成熟T淋巴細(xì)胞(CD3+)、輔助T淋巴細(xì)胞(CD4+)及毒性T淋巴細(xì)胞(CD8+)，檢測(cè)均運(yùn)用美國(guó)BD公司FACS Calibur型流式細(xì)胞儀；(2)病毒載量指標(biāo)水平：包括乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝e抗原(HBeAg)及乙肝病毒脫氧核苷酸(HBVDNA)，均采用熒光定量PCR法測(cè)??；(3)Th1/Th2型與相關(guān)炎性因子水平：囊括血清脂聯(lián)素(ADP)、干擾素-γ(IFN-γ)及白細(xì)胞介素(IL-2)，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)進(jìn)行測(cè)定。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 22.0軟件行處理分析，以(χ-±s)表示T細(xì)胞亞群、病毒載量指標(biāo)及Th1/Th2型與相關(guān)炎性因子水平，行t檢驗(yàn)，若P＜0.05，差異判定有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組T細(xì)胞亞群水平比較經(jīng)治療，兩組CD3+、CD4+水平均見提升，CD8+水平有一定下降，觀察組CD3+、CD4+水平較對(duì)照組更高，CD8+水平則更低(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組T細(xì)胞亞群水平比較(%)

2.2 兩組病毒載量指標(biāo)比較經(jīng)治療，兩組HBsAg、HBeAg及HBV-DNA載量水平均見相應(yīng)降低，觀察組低于對(duì)照組(P＜0.05)，見表2。

表2 兩組病毒載量指標(biāo)比較(±s)

表2 兩組病毒載量指標(biāo)比較(±s)

2.3 兩組Th1/Th2型與相關(guān)炎性因子水平比較經(jīng)治療，兩組ADP水平呈上升趨勢(shì)，IFN-γ及IL-2水平均呈下降趨勢(shì)，觀察組ADP水平高于對(duì)照組，F(xiàn)N-γ及IL-2水平均更低(P＜0.05)，見表3。

表3 兩組Th1/Th2型與相關(guān)炎性因子水平比較(±s)

表3 兩組Th1/Th2型與相關(guān)炎性因子水平比較(±s)

3 討論

慢性乙型肝炎是形成肝硬化的主要原因，發(fā)生率6%～20%。究其起病機(jī)制，現(xiàn)階段重要治療靶點(diǎn)為免疫應(yīng)答及炎性反應(yīng)調(diào)節(jié)，有利于延緩肝硬化進(jìn)程[5]。而發(fā)展至今，以恩替卡韋等抗病毒藥物治療手段已成為慢性乙型肝炎治療的關(guān)鍵。而據(jù)張小玉等[6]的研究指出，恩替卡韋治療慢性乙型肝炎有益于T淋巴細(xì)胞亞群改善，該藥物通過(guò)HBV多聚酶競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，HBV多聚酶啟動(dòng)抑制作用產(chǎn)生，由此mRNA及HBVDNA生成減少，從而達(dá)到HBV病毒復(fù)制進(jìn)程阻礙效果，有利于病毒清除。但恩替卡韋治療對(duì)于機(jī)體諸如T淋巴細(xì)胞亞群所發(fā)揮免疫功能的影響所涉研究較少。而在目前抗病毒治療的必然發(fā)展趨勢(shì)下，明確恩替卡韋藥物對(duì)患者機(jī)體免疫功能作用，可為抗病毒治療適應(yīng)癥拓寬提供可靠依據(jù)。

而由賈繼東等[7]的研究通過(guò)2019版《慢性乙型肝炎防治指南》亮點(diǎn)發(fā)掘，相比于2015版，2019年慢性乙型肝炎抗病毒治療方案已適有一定程度拓寬，指南指出HBV-DNA呈陽(yáng)性，ALT除其他原因外持續(xù)異常便可開展抗病毒治療，已不再局限于HBV-DNA升高、ALT呈最高限2倍及以上指征。對(duì)此，本文圍繞這一主題納入高病毒載量慢性乙型肝炎患者進(jìn)行臨床隨機(jī)對(duì)照研究，旨在探討恩替卡韋對(duì)患者T淋巴亞群及相關(guān)亞型水平影響。而陳竹等[8]的研究指出，高病毒載量人群T淋巴亞群失衡更為顯著，由此機(jī)體免疫功能減退更為嚴(yán)重。由此，利用恩替卡韋是否可糾正患者細(xì)胞免疫功能需進(jìn)一步研究。而本研究結(jié)果顯示，經(jīng)治療，兩組CD3+、CD4+水平均呈上升，CD8+則顯下降，觀察組變化幅度較對(duì)照組更高。而機(jī)體遭受HBV感染后，可驟然降低機(jī)體CD3+、CD4+及CD8+水平，經(jīng)采取不同治療策略后，兩組CD3+、CD4+及CD8+水平上升，可見對(duì)癥治療及抗病毒治療均可改善T淋巴亞群指標(biāo)水平，而與對(duì)癥治療比較，應(yīng)用恩替卡韋治療患者指標(biāo)呈正向變化明顯，提示恩替卡韋對(duì)患者T淋巴亞群改善效果更好。而本文對(duì)諸多HBsAg、HBeAg及HBV-DNA等載量指標(biāo)亦進(jìn)行了監(jiān)測(cè)，通過(guò)比對(duì)治療后陰轉(zhuǎn)結(jié)果，HBsAg陰轉(zhuǎn)臨界值2.8ng/mL，HBeAg為250S/CO，HBV-DNA為500IU/mL，可見于治療6個(gè)月后部分患者已好轉(zhuǎn)，不過(guò)根據(jù)抗病毒治療原則，還需持續(xù)觀察，并進(jìn)行3年鞏固治療，并隔半年按時(shí)前來(lái)醫(yī)院復(fù)診。這與洪俐[9]的研究存在較大相關(guān)性。此外，本研究還指出，病情嚴(yán)重患者HBV-DNA變化并不顯著，需結(jié)合諸如ALT、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)等血清指標(biāo)進(jìn)行綜合判定療效。對(duì)此，考慮到本文收治的高病毒載量慢性乙型肝炎患者普遍病情嚴(yán)重，除對(duì)血清指標(biāo)檢測(cè)外，還對(duì)HBsAg、HBeAg水平進(jìn)行量化分析，可使研究結(jié)論更為可靠。此外，據(jù)劉欣等[10]的觀點(diǎn)，CD4+中Th1、Th2兩個(gè)亞型可介導(dǎo)體液免疫，因細(xì)胞因子水平改變，可使機(jī)體免疫損傷增加，從而加劇CD4+T淋巴細(xì)胞異常，進(jìn)而使肝臟上皮細(xì)胞或肝小葉組織出現(xiàn)代償性增生，若Th1、Th2兩個(gè)亞型出現(xiàn)異常，可使HBV感染呈慢性化。另由邵錦歡等[11]的觀點(diǎn)，以三聚體、六聚體等形式存在的ADP可與相應(yīng)受體結(jié)合發(fā)揮胰島素抵抗、免疫調(diào)節(jié)功能，故與乙肝纖維化、肝硬化關(guān)系密切相關(guān)，提示上述指標(biāo)亦可一定程度反映機(jī)體免疫功能。故本研究亦對(duì)上述指標(biāo)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，結(jié)果顯示，觀察組經(jīng)治療ADP有所上升，Th1、Th2亞型中IFN-γ及IL-2呈下降表現(xiàn)。這亦側(cè)面證實(shí)了應(yīng)用恩替卡韋可提升高病毒載量慢性乙肝患者免疫功能。這與沈軼驪等[12]的研究呈一定相關(guān)性。

綜上所述，高病毒載量慢性乙肝患者應(yīng)用恩替卡韋分散片治療，有助于T細(xì)胞亞群改善，且較大程度降低了病毒載量水平，并增強(qiáng)了機(jī)體免疫功能，具有較高應(yīng)用價(jià)值。