中樞神經(jīng)特異蛋白檢測(cè)在小兒腦損傷臨床意義的研究

陳雪娟，李經(jīng)猷，郭悅?cè)A，勞志杰

江門市人民醫(yī)院兒科，廣東江門 529000

驚厥是兒科常見急癥之一，是由于腦大量神經(jīng)元一過性同步化放電致使所涉及的肌肉不受控的抽搐或肌張力改變，這種變化可以是部分身體（局灶性），也可以是全身性的（全面性）[1-2]。小兒熱性驚厥則是指一次發(fā)熱過程中出現(xiàn)的驚厥發(fā)展，大多與中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染或其他病因無關(guān)。熱性驚厥通常在3個(gè)月～5歲的兒童人群中較為高發(fā)，6歲以后便很少發(fā)生[3]。大部分患兒的預(yù)后較好，無需干涉，部分患兒仍會(huì)出現(xiàn)≥1次的復(fù)發(fā)情況[4]。驚厥本身就會(huì)對(duì)腦部造成不可逆的損傷，嚴(yán)重時(shí)甚至可引發(fā)缺血性的腦損害、腦水腫及腦疝等并發(fā)癥。研究顯示，熱性驚厥與癲癇存在一定的聯(lián)系，驚厥患兒約有2%～7%的概率轉(zhuǎn)變?yōu)榘d癇。因此，圍繞驚厥展開的相關(guān)研究中，神經(jīng)受損等預(yù)后相關(guān)的方面是研究的重點(diǎn)[5-6]。S100鈣結(jié)合蛋白B（S100 calciu binding peoteinB，S100B）是神經(jīng)組織蛋白中的一類，對(duì)于神經(jīng)損傷的存在及嚴(yán)重程度均有一定的反應(yīng)作用[7]?；诖?，方便選取2019年3月—2021年3月該院收治的117例驚厥患兒作為研究對(duì)象，就中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者血清神經(jīng)功能指標(biāo)S100B表達(dá)情況進(jìn)行分析，以期為疾病的有效診斷與治療提供參考依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取該院收治的117例驚厥患兒作為研究對(duì)象，根據(jù)患兒驚厥病因?qū)嵝泽@厥患兒納入熱性驚厥組（n=60）；病因?yàn)橹袠猩窠?jīng)系統(tǒng)感染者納入中樞神經(jīng)感染組（n=21）；出現(xiàn)癲癇癥狀的患兒納入癲癇組（n=36），統(tǒng)稱為觀察組；將同期疑似中樞神經(jīng)疾病但最終確診為健康兒童30名作為健康人群對(duì)照組。對(duì)照組，男20名，女10名；年齡3個(gè)月～4歲，平均（2.27±1.56）歲。觀察組，男63例，女54例；年齡4個(gè)月～5歲，平均（3.08±1.79）歲。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。該研究已獲得倫理委員會(huì)審批同意。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①入組患兒均為首次發(fā)病而且發(fā)病未超過24 h入院，年齡為6個(gè)月～6歲，驚厥形式主要表現(xiàn)符合以強(qiáng)直或陣攣等骨骼肌運(yùn)動(dòng)性發(fā)作，伴有意識(shí)障礙，患兒符合熱性驚厥、中樞神經(jīng)感染及癲癇診斷標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)臨床確診；②患兒及其家屬均充分知情同意，并自愿簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并先天性疾病、創(chuàng)傷、惡性腫瘤及自身免疫性疾病患兒；②患有嚴(yán)重肝腎功能不全和消化道疾病者。

診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]：排除中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染及引發(fā)驚厥的任何其他急性病后，未曾出現(xiàn)無熱驚厥史；具有神經(jīng)系統(tǒng)損傷的臨床表現(xiàn)，伴有全身感染癥狀，腦脊液檢查具有感染特點(diǎn)，腦電圖異常，頭顱CT或MRI顯示異常，即可診斷中樞神經(jīng)感染；癲癇為同一患者在無熱或其他誘因情況下長(zhǎng)期反復(fù)出現(xiàn)兩次或兩次以上的發(fā)作性腦功能異常。

1.2 方法

采集所有入組對(duì)象外周靜脈血1 mL，應(yīng)用免疫層析法測(cè)定血清中樞神經(jīng)特異蛋白（S100B），免疫層析試劑盒采購于武漢明德生物科技股份有限公司，實(shí)驗(yàn)所需儀器采購于武漢明德生物科技股份有限公司，實(shí)驗(yàn)操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行，統(tǒng)計(jì)4組受檢者血清S100B水平并比較差異。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以（±s）表示，采用t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組研究對(duì)象S100B濃度比較

觀察組患兒S100B濃度（0.173±0.055）ng/mL顯著高于對(duì)照組（0.116±0.021）ng/mL，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組研究對(duì)象S100B濃度比較[(±s),ng/mL]

表1 兩組研究對(duì)象S100B濃度比較[(±s),ng/mL]

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2.2 3組患兒S100B濃度比較

熱性驚厥組S100B濃度（0.154±0.078）ng/mL明顯低于中樞神經(jīng)感染組患兒（0.196±0.043）ng/mL和癲癇組患兒（0.190±0.047）ng/mL，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；中樞神經(jīng)感染組與癲癇組對(duì)比，兩組患兒S100B濃度數(shù)據(jù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表2。

表2 3組患兒S100B濃度比較[(±s),ng/mL]

表2 3組患兒S100B濃度比較[(±s),ng/mL]

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3 討論

因小兒的神經(jīng)元功能不完善，中樞神經(jīng)系統(tǒng)未成熟，當(dāng)神經(jīng)元遇到刺激時(shí)，容易興奮，從而讓大腦神經(jīng)元區(qū)域性的同步放電產(chǎn)生驚厥。臨床上有數(shù)據(jù)顯示，驚厥的發(fā)生率與年齡相關(guān)，患兒年齡越小，病情就越嚴(yán)重，發(fā)作次數(shù)更頻繁，嚴(yán)重者會(huì)出現(xiàn)驚厥持續(xù)狀態(tài)，對(duì)小兒的大腦發(fā)育造成了極為不利的影響[9-11]。根據(jù)患兒發(fā)生驚厥的病因可分為熱性驚厥、中樞神經(jīng)感染及癲癇。熱性驚厥屬于臨床高發(fā)的驚厥性疾病，可發(fā)生于3個(gè)月～5歲，多數(shù)發(fā)生在6個(gè)月～3歲，高峰期為18個(gè)月。當(dāng)病原體進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)，發(fā)生顱內(nèi)感染，會(huì)對(duì)腦部造成實(shí)質(zhì)性損害，而癲癇則是小兒非感染性驚厥的最常見病因[12]。

S100鈣結(jié)合蛋白最早由MOOre等在牛的腦組織中首次發(fā)現(xiàn)，因其能在飽和硫酸鈉銨溶液中100%溶解，由此命名為S100[13]。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)的S100蛋白家族成員由20多個(gè)具有氨基酸序列和結(jié)構(gòu)上高度保守的鈣結(jié)合蛋白構(gòu)成，它們?cè)诙鄠€(gè)組織結(jié)構(gòu)當(dāng)中扮演鈣激活開關(guān)的角色，可調(diào)控相應(yīng)靶點(diǎn)的活性[14]。S100B蛋白是S100蛋白成員中首個(gè)被發(fā)現(xiàn)的蛋白，其在顱內(nèi)的活性也最高，是一種EF-手型的酸性同源（2個(gè)β兩個(gè)亞基）或（α、β兩個(gè)亞基組成）二聚體。 S100B蛋白主要分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞，周圍神經(jīng)系統(tǒng)的雪旺細(xì)胞、黑色素細(xì)胞、軟骨細(xì)胞和脂肪細(xì)胞中，其中96%分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)，因此，輕微的周圍組織損傷通常不會(huì)導(dǎo)致S100B水平的明顯升高[15]。S100B蛋白作為一種鈣敏感細(xì)胞分布于細(xì)胞內(nèi)，在多種生命活動(dòng)中均高度參與，從第二信使傳遞信號(hào)，同時(shí)與不同細(xì)胞類型互相作用，對(duì)細(xì)胞的增殖、存活、分化及細(xì)胞內(nèi)鈣的穩(wěn)態(tài)和酶的活性均有著一定的調(diào)節(jié)作用。隨著對(duì)S100B蛋白的細(xì)胞外研究逐漸深入，20世紀(jì)70年代后期，在細(xì)胞外首次發(fā)現(xiàn)，最初在多發(fā)性硬化癥（multiple sclerosis，MS）急性期時(shí)檢測(cè)到S100B在腦脊液中的水平明顯升高，但在疾病穩(wěn)定期其水平卻始終較低。自此之后，關(guān)于S100B蛋白作為腦損傷標(biāo)志物的相關(guān)研究開始延伸至腦脊液以外的其他生物液體，如羊水、尿液、外周血及唾液等，發(fā)現(xiàn)S100B的水平在多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病發(fā)生時(shí)均會(huì)表現(xiàn)出升高的趨勢(shì)。多項(xiàng)研究表明，由多種因素導(dǎo)致的中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷和退行性病變發(fā)生時(shí)，體液中S100B蛋白水平會(huì)大幅升高，且其水平增幅與病情嚴(yán)重程度有關(guān)[16]。相關(guān)研究的研究組提及，患兒入院時(shí)的血清S100B水平與患兒的腦損傷程度有著顯著的相關(guān)性，且在入院時(shí)及治療相同時(shí)間后，腦損傷嚴(yán)重組患兒的S100B蛋白水平均明顯高于病情較輕組[4]。相關(guān)研究經(jīng)對(duì)相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行匯總分析后，發(fā)現(xiàn)在腦損傷后0～2 h，血清中S100B蛋白水平變化迅速增高，經(jīng)12～48 h后，若腦損傷未繼續(xù)加重，即達(dá)到峰值。如損傷仍在加重，其水平將持續(xù)上升，出現(xiàn)二次高峰[6]。

該研究結(jié)果顯示,觀察組患兒S100B濃度（0.173±0.055）ng/mL顯著高于對(duì)照組（0.116±0.021）ng/mL（P＜0.05），熱性驚厥組S100B濃度（0.154±0.078）ng/mL明顯低于中樞神經(jīng)感染組患兒（0.196±0.043）ng/mL和癲癇組患兒（0.190±0.047）ng/mL（P＜0.05）；中樞神經(jīng)感染組與癲癇組對(duì)比，兩組患兒S100B濃度數(shù)據(jù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。這與崔甜甜等[17]研究結(jié)果中提及化膿性腦膜炎患兒及病毒性腦膜炎患兒血清中S100B水平分別為（0.275±0.107）ng/mL、（0.561±0.191）ng/mL均明顯高于健康兒童對(duì)照組（0.113±0.023）ng/mL。以及張闖等[18]研究結(jié)果熱性驚厥患兒S100B水平（0.238±0.036）ng/mL低于中樞神經(jīng)感染患兒（0.311±0.078）ng/mL、癲癇患兒（0.267±0.212）ng/mL。該研結(jié)果與以上研究所得出的結(jié)論基本一致。分析原因可能腦損傷后，腦脊液中S100B蛋白濃度升高，而升高的S100B蛋白可通過受損的血腦屏障進(jìn)入外周血液，使血清中S100B蛋白含量升高，其升高程度與腦損傷程度以及預(yù)后存在一定的聯(lián)系，因而可將血清S100B蛋白作為評(píng)估腦損傷程度和判斷患兒預(yù)后的新指標(biāo)。檢測(cè)血清S100B蛋白的免疫層析法的建立為快速地檢測(cè)提供便捷途徑。

綜上所述，血清S100B在中樞神經(jīng)損傷患兒中表達(dá)水平較高，且會(huì)隨著腦損傷程度加重而升高，具有一定的特異性，臨床可對(duì)其水平進(jìn)行監(jiān)測(cè)，用于初步評(píng)估患兒病情的嚴(yán)重程度，值得推廣應(yīng)用。