TGFβ1-Smad/p38 MAPK信號通路與腎移植患者術(shù)后腎功能指標(biāo)的相關(guān)性

楊軍，石韶華，董塬，武小桐

(山西省第二人民醫(yī)院腎移植透析中心，山西 太原 030001)

腎臟功能衰竭是終末期腎病患者常見的臨床癥狀。目前腎臟移植是終末期腎病患者最佳治療方案，研究[1-2]指出，隨著腎臟移植術(shù)、新型免疫抑制劑等技術(shù)的逐步改進與飛速發(fā)展，腎臟移植患者圍術(shù)期并發(fā)癥發(fā)生率顯著降低，急性排斥反應(yīng)發(fā)生風(fēng)險得到有效控制，增加了腎臟移植患者術(shù)后生存率。但部分患者會出現(xiàn)慢性移植腎病，引起進行性腎纖維化及腎功能障礙，導(dǎo)致腎衰，危及患者生命安全，故分析腎移植術(shù)后患者腎功能影響因素十分重要[3-4]。有研究[5-6]報道，通過抑制轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)/絲/蘇氨酸激酶受體(sma and mad homologue，Smad)/p38絲裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase，p38 MAPK)通路活性能有效減輕終末期腎病患者腎損傷，但目前臨床還存在爭議[7]。本研究旨在探討TGFβ1-Smad/p38 MAPK信號通路與腎移植患者術(shù)后腎功能的相關(guān)性，為臨床診治提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至2021年1月山西省第二人民醫(yī)院收治的420例腎移植手術(shù)患者為研究對象，根據(jù)術(shù)后效果分為穩(wěn)定組(n=275)和腎纖維化組(n=145)。其中男性280例，女性140例；年齡18～69歲，平均(44.96±5.17)歲；疾病類型：腎小球腎炎79例，糖尿病腎病153例，多囊腎87例，其他101例。本研究獲本院倫理委員會批準(zhǔn)。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)經(jīng)腎臟B超確診且符合終末期腎病診斷標(biāo)準(zhǔn)者[8]；(2)符合腎移植診療指南[9]且均為首次腎移植患者；(3)年齡≥18歲；(4)腎小球濾過率≤15 mL/min·1.73 m2；(5)簽署知情同意書者。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)伴其他惡性腫瘤疾病者；(2)其他心、腦、肺、肝等重要臟器功能障礙者；(3)資料不全者。

1.2 方法

所有患者均采用經(jīng)皮腎穿刺活檢術(shù)，標(biāo)本常規(guī)固定，根據(jù)光鏡下腎皮質(zhì)區(qū)及皮髓交界處腎小管上皮細(xì)胞纖維化程度分為：0級為正常腎組織，無腎間質(zhì)纖維化；1級為腎間質(zhì)輕度纖維化，腎小管萎縮；2級為腎間質(zhì)中度纖維化，腎小管萎縮；3級為腎間質(zhì)重度纖維化，腎小管萎縮且數(shù)量減少。其中≥1級為腎纖維化，定義為腎纖維化組。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)腎功能及炎癥因子指標(biāo)：采用BK-600 全自動生化分析儀與配套試劑(博科)檢測腎功能能指標(biāo)血清肌酐(Scr)及尿素氮(BUN)水平；酶聯(lián)免疫吸附法檢測炎癥因子指標(biāo)血清腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細(xì)胞介素6(IL-6)及IL-10水平，操作嚴(yán)格按試劑盒說明進行；(2)TGF-β1與Smad 7、p38 MAPK水平：采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測TGF-β1水平；免疫組化法檢測smad 7水平；雙夾心抗體法檢測p38 MAPK水平，操作嚴(yán)格按試劑盒說明書進行；(3)TGFβ1-Smad/p38 MAPK信號通路與腎移植患者術(shù)后腎功能指標(biāo)的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 兩組患者腎功能及炎癥因子指標(biāo)比較

穩(wěn)定組Scr、BUN水平及TNF-α、IL-6、IL-10水平低于腎纖維化組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 患者腎功能及炎癥因子指標(biāo)比較

2.2 兩組患者血清TGF-β1、Smad7、p38 MAPK水平比較

穩(wěn)定組TGF-β1、p38 MAPK水平低于腎纖維化組(P<0.05)，Smad 7高于腎纖維化組(P<0.05)。見表2。

表2 兩組患者TGF-β1、Smad7、p38 MAPK水平比較

2.3 TGFβ1-Smad/p38 MAPK信號通路與腎移植患者術(shù)后腎功能指標(biāo)的相關(guān)性

相關(guān)性分析顯示，TGF-β1、p38 MAPK、TNF-α、IL-6、IL-10水平與腎移植患者術(shù)后Scr、BUN呈正相關(guān)(P<0.05)，Smad 7與Scr、BUN呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。見表3。

表3 TGFβ1-Smad/p38 MAPK信號通路與腎移植患者術(shù)后腎功能指標(biāo)的相關(guān)性

3 討論

終末期腎病是臨床常見的一種腎功能衰竭疾病，有較高的發(fā)病率及病死率，隨著病情發(fā)展，及時進行腎臟移植可保障患者生命安全[10]。有學(xué)者[11-12]表示，部分腎臟移植患者術(shù)后會出現(xiàn)慢性移植腎病，使患者重返透析及再移植，而腎小管間質(zhì)、內(nèi)膜纖維化是引起慢性移植腎病的主要病因，若無及時干預(yù)，最終會導(dǎo)致患者腎衰竭，故分析終末期腎病患者腎臟移植術(shù)后腎纖維化的影響因素十分必要。移植腎纖維化作為腎移植術(shù)后常見并發(fā)癥，對腎移植效果影響極為關(guān)鍵。有研究[13]表明，通過檢測腎移植患者術(shù)后腎功能指標(biāo)變化，可反映患者腎纖維化程度，用以評價腎移植效果，但移植腎纖維化發(fā)生關(guān)鍵環(huán)節(jié)與發(fā)病學(xué)機制尚未完全闡述。既往有報道[14]指出，與腎移植患者術(shù)后腎功能的影響因素較多，如同型半胱氨酸、血脂等，這些臨床因素與腎移植患者術(shù)后腎功能的關(guān)系已獲得諸多研究成果。但目前TGFβ1-Smad/p38 MAPK信號通路及炎癥因子與腎移植患者術(shù)后腎功能指標(biāo)的關(guān)系還尚在爭議[15]。

結(jié)果顯示，穩(wěn)定組Scr、BUN水平低于腎纖維化組(P<0.05)，表明腎移植術(shù)后患者腎功能降低或與腎臟纖維化有關(guān)。Scr、BUN均是反映腎臟損傷及腎小球濾過功能的常見標(biāo)志物，腎臟移植患者術(shù)后Scr、BUN水平異常升高時，表明患者可能存在腎損傷。穩(wěn)定組TNF-α、IL-6、IL-10水平低于腎纖維化組(P<0.05)，進一步表明炎癥反應(yīng)或是引起移植腎纖維化并導(dǎo)致腎移植術(shù)失敗的危險因素，原因可能是移植腎的內(nèi)在細(xì)胞和免疫細(xì)胞凋亡、炎癥反應(yīng)、纖維化細(xì)胞因子失調(diào)、氧化應(yīng)激反應(yīng)等[16]引起腎纖維化。

本研究中，穩(wěn)定組血清TGF-β1、p38 MAPK水平低于腎纖維化組(P<0.05)，Smad 7高于腎纖維化組(P<0.05)，表明腎移植術(shù)后發(fā)生腎纖維化的患者TGF-β1、p38 MAPK水平高于移植成功者，Smad 7水平低于移植成功者，患者腎功能損傷嚴(yán)重。研究[17-18]指出，通過抑制TGF-β1/Smad/p38 MAPK信號通路可減輕終末期腎病患者腎移植術(shù)后腎損傷，避免腎纖維化。機體受炎癥細(xì)胞因子或多環(huán)境應(yīng)激反應(yīng)刺激時p38 MAPK被激活，p38 MAPK途徑可在高葡萄糖環(huán)境中直接激活，與上游因子TGF-β1相互作用，能增強TGF-β1活性，增加細(xì)胞外基質(zhì)中主要成分--纖維連接蛋白表達(dá)，且TGF-β1可使p38 MAPK自磷酸化并激活下游轉(zhuǎn)錄因子環(huán)狀單磷酸腺苷結(jié)合蛋白，與下游纖維連接蛋白結(jié)合，進一步上調(diào)下游纖維連接蛋白表達(dá)，進而加重腎纖維化程度，導(dǎo)致慢性移植腎病[19-20]。相關(guān)性分析顯示，TGF-β1、p38 MAPK、TNF-α、IL-6、IL-10水平與腎移植患者術(shù)后Scr、BUN呈正相關(guān)(P<0.05)，Smad 7與Scr、BUN呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，原因可能是TGFβ1-Smad/p 38 MAPK信號通路表達(dá)與移植腎纖維化密切相關(guān)，可加重腎移植術(shù)患者腎損傷程度，從而影響腎功能水平，而腎功能降低可反映腎臟移植術(shù)患者腎臟損傷程度，當(dāng)患者移植腎損傷越嚴(yán)重，腎功能越低；同時TGF-β1可通過TAK1-MKK6途徑活化下游p 38 MAPK通路，增多TNF-α、IL-6等炎性因子表達(dá)，引發(fā)腎臟炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致腎臟足細(xì)胞損傷，進一步活化細(xì)胞凋亡因子，促進近端小管纖維化，降低腎功能，介導(dǎo)慢性移植腎病發(fā)展。

綜上所述， TGFβ1-Smad/p38 MAPK信號通路與腎移植患者術(shù)后腎功能指標(biāo)有關(guān)，當(dāng)TGFβ1、p38 MAPK、TNF-α、IL-6、IL-10水平過高，Smad7水平過低時腎移植患者術(shù)后腎損傷程度越重，腎功能指標(biāo)越高，可作為臨床觀察患者預(yù)后效果及病情發(fā)展程度的有效指標(biāo)，但本研究所選樣本量過低、研究時間過短，估存在一定局限性，在今后可針對此方向進一步論證。