大型真菌凝集素的結(jié)構(gòu)、糖特異性以及其在免疫調(diào)節(jié)中的研究進(jìn)展*

劉韻然，游金坤，鄧雅元，王 娟，楊璐敏，遲 蔚

（1.云南省供銷合作社科學(xué)研究所，云南 昆明 650221；2.中華全國(guó)供銷合作總社昆明食用菌研究所，云南 昆明 650221）

凝集素是一類不具有免疫原性和酶活性的蛋白質(zhì)，包含一個(gè)或多個(gè)糖識(shí)別域，可與多種不同類型的單糖及低聚糖糖結(jié)構(gòu)進(jìn)行高度選擇性和特異性的結(jié)合，而不改變其共價(jià)結(jié)構(gòu)[1]。通常凝集素因其可凝集紅細(xì)胞而被稱為血凝素，但隨著對(duì)凝集素研究的深入，發(fā)現(xiàn)并非所有血凝素均通過與細(xì)胞表面的糖可逆性結(jié)合來凝集紅細(xì)胞，而只有凝集素才具有這種活性[2]。此外，凝集素依靠定向選擇結(jié)合糖基從而特異性識(shí)別外源細(xì)胞，因此還具有免疫調(diào)節(jié)活性、促進(jìn)有絲分裂、抗腫瘤、抗菌、抗病毒、介導(dǎo)寄生生物與宿主間的相互作用[3]。目前，已經(jīng)從植物、動(dòng)物、微生物中分離純化得到凝集素，并因其所具備的多種生物活性，在生物醫(yī)學(xué)、免疫學(xué)中展現(xiàn)出廣闊的應(yīng)用前景。

大型真菌作為獲取凝集素的新來源，引起越來越多學(xué)者的關(guān)注。隨著對(duì)各類大型真菌藥理學(xué)研究的深入，凝集素、多糖、三萜類等活性物質(zhì)被提取和純化，大型真菌的免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗菌等多種生物活性也被相繼發(fā)現(xiàn)。目前，大型真菌凝集素因具有凝集細(xì)胞活性、激活淋巴細(xì)胞分裂、刺激分泌免疫細(xì)胞因子、可特異識(shí)別特定的腫瘤、抑制腫瘤生長(zhǎng)等免疫調(diào)節(jié)作用而在生化、臨床試劑開發(fā)領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用，并逐漸成為細(xì)胞癌變、細(xì)胞分化、細(xì)胞分子識(shí)別及病原菌檢測(cè)等生命過程中有用的工具[4-5]。

1 大型真菌凝集素的結(jié)構(gòu)

大型真菌凝集素通常由非共價(jià)相互作用結(jié)合2個(gè)到4個(gè)相同或不同的亞基組成[1]。目前，對(duì)于真菌凝集素結(jié)構(gòu)的分析數(shù)據(jù)還十分有限，一些菌類凝集素，如荷葉離褶傘（Lyophyllum decastes） 凝集素[6]等，顯示出獨(dú)特的結(jié)構(gòu)折疊。被鑒定出的大多凝集素可以按照其晶體結(jié)構(gòu)的折疊形式和特征大致分為4個(gè)折疊類型，包括β螺旋折疊、半乳凝集素樣折疊、β三葉折疊和類?？芗?xì)胞素折疊。通過總結(jié)發(fā)現(xiàn)，結(jié)構(gòu)相似的凝集素在一定程度上表現(xiàn)出部分相似的生物活性，為今后研究大型真菌凝集素的生物活性提供了思考方向。

1.1 凝集素β螺旋折疊結(jié)構(gòu)

β螺旋結(jié)構(gòu)家族中，以氈毛小脆柄菇（Psathyrella velutina） 凝集素[7]為代表，晶體結(jié)構(gòu)呈七葉β螺旋折疊。晶粒鬼傘（Coprinus micaceus） 凝集素和角斑鬼傘（Coprinellus angulatus） 凝集素結(jié)構(gòu)也被歸類為氈毛小脆柄菇凝集素樣結(jié)構(gòu)[8]。相同折疊形式的還有橙黃網(wǎng)胞盤菌（Aleuria aurantia） 凝集素，呈六葉β螺旋折疊結(jié)構(gòu)，具有與巖藻糖結(jié)合煙曲霉凝集素類似的多價(jià)糖識(shí)別結(jié)構(gòu)域[9]。

1.2 凝集素半乳凝集素樣折疊結(jié)構(gòu)

與半乳糖凝集素同源的大型真菌凝集素從灰蓋鬼傘 （Coprinopsis cinerea）[10]和柱狀田頭菇 （Agrocybe cylindracea）[11-12]中分離得到。從同擔(dān)子菌亞綱的灰蓋鬼傘中分離出來的3個(gè)凝集素CGL1、CGL2、CGL3及柱狀田頭菇凝集素AAL和ACG在無配體或是含β半乳糖苷低聚糖復(fù)合體的狀態(tài)下，結(jié)構(gòu)與動(dòng)物半乳糖凝集素結(jié)構(gòu)基本重合，除了CGL3在結(jié)構(gòu)中一個(gè)色氨酸被精氨酸所取代而造成CGL3無法與乳糖結(jié)合。已經(jīng)有大量研究表明半乳糖凝集素在動(dòng)物中參與了免疫調(diào)節(jié)、細(xì)胞增殖與凋亡等生物調(diào)控過程[13]，大型真菌的半乳糖凝集素CGL2和ACG也都已經(jīng)被證實(shí)能與TF抗原結(jié)合，從而調(diào)控腫瘤細(xì)胞凋亡[10，12]。

1.3 凝集素β三葉折疊結(jié)構(gòu)

β三葉折疊家族凝集素與蓖麻毒素b鏈蛋白結(jié)構(gòu)域相似，由α、β和γ三個(gè)重復(fù)的亞結(jié)構(gòu)域組成，家族成員包括水粉杯傘（Clitocybe nebularis）凝集素CNL[14]、硫磺菌（Laetiporus sulphureus）凝集素LSL[15]、硬柄小皮傘（Marasmius oreades） 凝集素MOA[16]、寬鱗多孔菌 （Polyporus squamosus） 凝集素PSL[17]、高大環(huán)柄菇（Macrolepiota procera） 凝集素MPL[18]、核盤菌（Sclerotinia sclerotiorum） 凝集素SSA[19]和灰蓋鬼傘中分離純化的一種凝集素CCL2[20]及美味牛肝菌（Boletus edulis） 中的一種凝集素[21]。

有報(bào)道發(fā)現(xiàn)蓖麻毒素b鏈蛋白能與半乳糖/N-乙?；肴樘前诽囟ńY(jié)構(gòu)結(jié)合，具有調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞活化的作用，促進(jìn)小鼠脾臟淋巴細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞和小鼠RAW264.7巨噬細(xì)胞增殖活化[22]。多個(gè)具有蓖麻毒素b鏈蛋白結(jié)構(gòu)的大型真菌凝集素同樣被報(bào)道具有免疫調(diào)節(jié)活性[15-16，19，23]。Pohleven 等[23]研究證實(shí)水粉杯傘凝集素CNL是一種同型二聚體凝集素，每個(gè)單體包含一個(gè)蓖麻毒素b鏈蛋白結(jié)構(gòu)域，并且僅有一個(gè)單一的碳水化合物結(jié)合位點(diǎn)位于每個(gè)單體的α重復(fù)序列上，其二價(jià)碳水化合物結(jié)合特性決定了其生物活性，CNL具有活化樹突狀細(xì)胞（dendritic cells，DCs）、抗人白血病T細(xì)胞增殖等生物活性。核盤菌凝集素SSA與CNL相似，只有一個(gè)結(jié)合位點(diǎn)位于α重復(fù)序列上，而硫磺菌凝集素LSL、硬柄小皮傘凝集素MOA和寬鱗多孔菌凝集素PSL則不同，其是由非凝集素結(jié)構(gòu)域和凝集素結(jié)構(gòu)域構(gòu)成的模式蛋白，凝集素結(jié)構(gòu)域特異識(shí)別作用目標(biāo)，非凝集素結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)發(fā)揮其生物活性；PSL在β重復(fù)序列上有一個(gè)結(jié)合位點(diǎn)并與α重復(fù)序列上的氨基酸殘基一起發(fā)揮作用，LSL則有2個(gè)結(jié)合位點(diǎn)分別位于β和γ重復(fù)序列上，而MOA有3個(gè)結(jié)合位點(diǎn)分別位于α、β和γ 3個(gè)重復(fù)亞結(jié)構(gòu)域上。

1.4 凝集素類?？芗?xì)胞素折疊結(jié)構(gòu)

紅絨蓋牛肝菌（Xerocomus chrysenteron） 凝集素XCL[24]與?？芗?xì)胞素的結(jié)構(gòu)折疊形式高度相似，因此將XCL結(jié)構(gòu)折疊稱為類海葵溶細(xì)胞素折疊。在其他研究中，通過結(jié)構(gòu)比對(duì)和蛋白質(zhì)編碼基因序列比對(duì)，發(fā)現(xiàn)雙孢蘑菇（Agaricus bisporus） 凝集素ABL[25]和美味牛肝菌的一種凝集素BEL[21]與XCL的三維立體結(jié)構(gòu)基本相同，蛋白質(zhì)編碼基因序列高度相似，并與黃白側(cè)耳（Pleurotus cornucopiae） 凝集素[26]一起歸類為鹽溶性凝集素家族。此類凝集素晶體結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是有6個(gè)β折疊股和4個(gè)β折疊股分別構(gòu)成的2個(gè)β折疊片層，這兩個(gè)β折疊片層間通過螺旋-環(huán)-螺旋模體相連接。ABL中N-乙酰半乳糖胺與螺旋-環(huán)-螺旋模體上一側(cè)低陷部分的糖結(jié)合位點(diǎn)的結(jié)合與BEL中單糖的結(jié)合非常相似。在研究中發(fā)現(xiàn)，ABL、BEL和XCL蘑菇凝集素都能與T抗原特異性結(jié)合，且ABL的抗增殖活性可以通過結(jié)合TF抗原二糖Galβ1-3GalNAc進(jìn)行調(diào)節(jié)[27]。

2 大型真菌凝集素的糖特異性

凝集素作為大型真菌的一種貯藏蛋白，與植物凝集素相比分布范圍廣，且其表達(dá)水平高，表達(dá)隨著環(huán)境、生長(zhǎng)年齡等因素的改變而改變。目前已有許多研究發(fā)現(xiàn)，大多真菌凝集素從子實(shí)體中分離，還有部分僅在菌絲體中表達(dá)[28-30]。從不同品種的大型真菌中分離純化的凝集素分子質(zhì)量、亞基數(shù)量、糖特異性各不相同，有的大型真菌凝集素具有單一的糖特異性，有的則具有多個(gè)糖結(jié)合位點(diǎn)，這些結(jié)合位點(diǎn)使凝集素與外源細(xì)胞相互識(shí)別，進(jìn)而發(fā)揮其免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤等生物學(xué)活性功能。

Hassan等[30]綜合報(bào)道了國(guó)外大型真菌凝集素糖特異性的研究，國(guó)內(nèi)外近十年間新增報(bào)道的大型真菌凝集素糖特異性補(bǔ)充見表1。

表1 大型真菌凝集素的糖特異性Tab.1 Carbohydrate specificity of macrofungi lectin

由表1可知，通過對(duì)比國(guó)內(nèi)外已報(bào)道的大型真菌凝集素糖特異性，發(fā)現(xiàn)從不同產(chǎn)區(qū)同一品種大型真菌中分離得到的凝集素或是從同一菌株不同部位分離的凝集素，可能會(huì)有不同的糖特異性差異，也可能與試驗(yàn)所用紅細(xì)胞來源不同有關(guān)。如從靈芝中分離出的凝集素，在Thakur[31]和Kawagishi[32]的報(bào)道中具有去唾液酸胎球蛋白和胎球蛋白的糖蛋白特異性，而在郭棟等[32]的研究中還發(fā)現(xiàn)其凝血活性能被木糖和D-果糖抑制。柱狀田頭菇凝集素在報(bào)道中被乳糖、半乳糖和半乳糖胺抑制凝血活性[30]，但孫慧等[34]分離純化的一種新柱狀田頭菇凝集素卻不與乳糖、半乳糖等發(fā)生特異性結(jié)合，反而被豬胃黏蛋白強(qiáng)烈抑制其凝血活性。

另外，部分大型真菌凝集素的糖特異則表現(xiàn)出專一性及穩(wěn)定性。王文君等[35]發(fā)現(xiàn)了葡萄糖是姬松茸凝集素的專一結(jié)合糖。黃牛肝凝集素不與單糖和低聚糖發(fā)生特異性結(jié)合，而被胃粘蛋白強(qiáng)烈抑制凝血活性，與甲狀腺球蛋白、卵粘蛋白和卵清蛋白呈現(xiàn)濃度依賴性結(jié)合[36]；鱗柄小奧德蘑顯示出N-乙酰半乳糖胺特異性[37]；香菇凝集素被乳糖單一特異性結(jié)合[33]；乳菇凝集素的凝血活性被N-乙酰半乳糖胺抑制[38]。

糖特異性是大型真菌凝集素調(diào)節(jié)機(jī)體免疫的決定性因素[12，21]。如柱狀田頭菇凝集素ACG與TF抗原的識(shí)別主要通過與N-乙酰半乳糖胺的交互，BEL也是通過與TF抗原雙糖Galβ1-3GalNAc結(jié)合抑制腫瘤細(xì)胞增殖。因此研究大型真菌的糖特異性，可為進(jìn)一步探究大型真菌凝集素活性功能的機(jī)理提供更多基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

3 大型真菌凝集素免疫調(diào)節(jié)作用的相關(guān)研究

大型真菌凝集素免疫調(diào)節(jié)作用的相關(guān)研究已經(jīng)是其生物活性中重要的一部分，大型真菌凝集素可以通過免疫監(jiān)視、激活巨噬細(xì)胞、致敏T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、促進(jìn)淋巴細(xì)胞有絲分裂、促細(xì)胞因子分泌等多種途徑來發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能。

3.1 大型真菌凝集素的免疫監(jiān)視作用

蛋白質(zhì)糖基化貫穿于細(xì)胞的識(shí)別、信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞活化等過程中，異常的糖基化修飾新產(chǎn)生的肽鏈結(jié)構(gòu)及位置，均會(huì)在免疫應(yīng)答中產(chǎn)生影響，導(dǎo)致腫瘤免疫監(jiān)視逃逸[49]。在關(guān)于糖基化與免疫監(jiān)視相關(guān)的報(bào)道中，已經(jīng)有大量研究證實(shí)腫瘤細(xì)胞表面表達(dá)出異常的糖基化修飾，如核心巖藻糖基化水平與胃癌細(xì)胞增殖程度呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)，當(dāng)核心巖藻糖基化水平下降時(shí)會(huì)導(dǎo)致胃癌細(xì)胞發(fā)生免疫逃避。另外N-乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶（GnT） 糖基化和氧連N-乙酰葡萄糖胺（O-GlcNAc） 糖基化也通常在腫瘤細(xì)胞表面表達(dá)，因此靶向結(jié)合聚糖的生物治療手段得以重視[50]。

如前面所述，大型真菌凝集素的結(jié)構(gòu)特征決定了其糖特異性，不同的大型真菌凝集素具有不同的糖特異性。而腫瘤的異常糖基化修飾是其癌變的重要特征，激活腫瘤免疫的有效手段之一即研究不同類型糖基化對(duì)腫瘤的影響。大型真菌凝集素的糖特異性特征在對(duì)腫瘤細(xì)胞的識(shí)別中可以發(fā)揮重要的作用，在細(xì)胞發(fā)生腫瘤惡變，或腫瘤細(xì)胞向正常組織浸潤(rùn)時(shí)，優(yōu)先對(duì)非正常細(xì)胞進(jìn)行識(shí)別，可以作為免疫監(jiān)視、靶向治療的重要佐劑。Kobayashi等[44]從翹鱗傘中分離純化的凝集素PhoSL對(duì)核心α1-6-巖藻糖基化N-聚糖穩(wěn)定特異性結(jié)合，對(duì)巖藻糖基化甲胎蛋白具有很高的識(shí)別和結(jié)合作用，而巖藻糖基化甲胎蛋白在肝癌細(xì)胞中大量表達(dá)，從而認(rèn)為PhoSL對(duì)肝癌細(xì)胞具有一定的免疫監(jiān)視作用。

3.2 大型真菌凝集素激活免疫細(xì)胞

目前，已有學(xué)者對(duì)大型真菌凝集素活化免疫細(xì)胞的信號(hào)通路進(jìn)行了研究，上游信號(hào)通路包括凝集素調(diào)節(jié)膜鈣離子通道或結(jié)合細(xì)胞表面Toll樣受體（toll-like receptors，TLRs） 通道均已經(jīng)被證實(shí)。

草菇（Volvariella volvacea） 凝集素VVL被報(bào)道可以通過作用于L型鈣離子信號(hào)通道對(duì)T細(xì)胞鈣離子內(nèi)流進(jìn)行有效調(diào)控，L型鈣通道在T細(xì)胞受體（T cell receptors，TCR） 介導(dǎo)T細(xì)胞活化和增殖中至關(guān)重要，進(jìn)而認(rèn)為VVL通過TCR信號(hào)通道實(shí)現(xiàn)T細(xì)胞增殖和免疫應(yīng)答[51]。

此外，由于凝集素具有的糖特異性，大多數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道中認(rèn)為大型真菌凝集素激活免疫細(xì)胞主要通過TLRs信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)[52-53]。TLRs是一類主要存在于免疫細(xì)胞表面的跨膜蛋白，不同的TLRs對(duì)不同的配體進(jìn)行識(shí)別，以傳遞信號(hào)產(chǎn)生適應(yīng)性免疫調(diào)節(jié)。TLRs通路活化包括2個(gè)主要信號(hào)過程，凝集素與免疫細(xì)胞表面受體的相互結(jié)合是激活細(xì)胞的第一信號(hào)，結(jié)合了的TLRs被觸發(fā)與細(xì)胞內(nèi)接頭蛋白分子相結(jié)合為第二信號(hào)。第二信號(hào)的識(shí)別與結(jié)合主要有2種途徑，髓樣細(xì)胞分化因子MyD88依賴途徑和非依賴途徑，而后激活下游信號(hào)表達(dá)。

目前已經(jīng)被證實(shí)是通過TLRs信號(hào)通路發(fā)揮免疫應(yīng)答的菌類凝集素主要有水粉杯傘凝集素CNL、糙皮側(cè)耳凝集素POL和硫磺菌凝集素LSL，其中CNL和LSL都屬于β三葉折疊凝集素家族。Svajger等[53]發(fā)現(xiàn)CNL在10 μg·mL-1濃度下對(duì)TLR4活化能力與細(xì)菌脂多糖的激活能力相似，通過培養(yǎng)人TLR4細(xì)胞系，采用MyD88抑制劑和TLR4小分子特異性抑制劑CLI-095，以及單克隆抗體標(biāo)記等方式，最終確定CNL通過TLR4/NF-κB方式介導(dǎo)激活DCs，產(chǎn)生TH1輔助細(xì)胞極化反應(yīng)引發(fā)免疫應(yīng)答。

Meina等[55]通過監(jiān)測(cè)POL作用后TLR6的表達(dá)和TLR6的敲除試驗(yàn)，證實(shí)POL與DCs表面TLR6特異性結(jié)合，刺激濾泡輔助性T細(xì)胞反應(yīng)，產(chǎn)生慢性乙型肝炎病毒特異性抗體，引起免疫應(yīng)答。Wang等[56]的研究則表明LSL主要通過TLR4信號(hào)通路作用于巨噬細(xì)胞。其他在凝集素與TLRs信號(hào)通路相關(guān)的綜合報(bào)道中提到的大型真菌凝集素則是通過凝集素的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及下游細(xì)胞因子的檢測(cè)來推斷其信號(hào)通路，而事實(shí)上是否是通過TLRs通路進(jìn)行免疫細(xì)胞激活還需要更多的研究依據(jù)。

3.3 大型真菌凝集素刺激細(xì)胞因子分泌

凝集素特異性結(jié)合受體能引起多種免疫細(xì)胞因子的分泌，如TLRs介導(dǎo)的促有絲分裂原活化蛋白激酶 （MAPK） 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路和核因子 κB（NF-κB）通路，或是細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶，巨噬細(xì)胞的經(jīng)典活化（M1） 和選擇性活化（M2） 等免疫調(diào)控相關(guān)途徑促進(jìn)細(xì)胞因子分泌。Cheung等[57]通過檢測(cè)MAPK通路的分支路線Erk、Jnk、p38、Akt的磷酸化狀態(tài)和p53的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)雙孢蘑菇凝集素ABL通過抑制Akt通路來抑制人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的增殖。此后Ditamo等[58]發(fā)現(xiàn)ABL作用于巨噬細(xì)胞，通過轉(zhuǎn)變AKt信號(hào)通路，抑制NO的產(chǎn)生，同時(shí)作用于T細(xì)胞，降低先天免疫和適應(yīng)性輔助性T細(xì)胞Th1反應(yīng)，可以控制炎癥性自身免疫。黃東等[59]的研究中發(fā)現(xiàn)黑木耳凝集素通過NF-κB信號(hào)通路激活RAW264.7細(xì)胞，促進(jìn)細(xì)胞因子分泌進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)。Svajger等[54]在確定了水粉杯傘凝集素CNL通過TLR4激活DCs后，同樣檢測(cè)了其下游信號(hào)通路NF-κB和p38 MAPK的激活水平，發(fā)現(xiàn)CNL通過下游信號(hào)通路NF-κB途徑調(diào)節(jié)免疫。

另外，雙孢蘑菇凝集素ABL和草菇凝集素VVL可以激活蛋白酪氨酸激酶p56lck進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)。p56lck屬于非受體型蛋白酪氨酸激酶，且VVL被證實(shí)通過TCR調(diào)控T細(xì)胞有絲分裂，因此ABL和VVL對(duì)p56lck的激活途徑是由TCR通道活化T細(xì)胞，而并非通過MAPK信號(hào)通路轉(zhuǎn)導(dǎo)[60]。很多受體分布于巨噬細(xì)胞的表面，不同的刺激源與不同的受體結(jié)合，通過下游信號(hào)通路如JAK-STAT信號(hào)通道、NF-κB信號(hào)通道等，刺激巨噬細(xì)胞M1或M2活化分泌不同的細(xì)胞因子。北蟲草（Cordyceps militaris）凝集素可以通過提高STAT1 S727位點(diǎn)的磷酸化水平或是p38-T180/Y182的磷酸化水平，激活巨噬細(xì)胞M1型分化[61]。除此之外，大量的研究報(bào)道為大型真菌凝集素促免疫細(xì)胞因子的分泌提供了重要的試驗(yàn)依據(jù)，見表2。

表2 大型真菌凝集素刺激細(xì)胞因子分泌Tab.2 Promoting cytokine secretory activity of macrofungal lectins

由表2可知，凝集素靶向作用于免疫細(xì)胞如巨噬細(xì)胞、DCs或輔助性T細(xì)胞，分別通過不同的信號(hào)通路刺激分泌細(xì)胞因子，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素 （IL-2、IL-6、IL-8、IL-1α、IL-1β）、乙型肝炎病毒抗體等，從而發(fā)揮免疫調(diào)控作用。

3.4 大型真菌凝集素促進(jìn)免疫細(xì)胞增殖

研究表明大型真菌凝集素能促進(jìn)免疫細(xì)胞的有絲分裂，部分真菌的促細(xì)胞增殖情況見表3。

表3 大型真菌凝集素促細(xì)胞增殖Tab.3 Proliferation effect of macrofungal lectin

如表3所示，柱狀田頭菇凝集素、毛木耳凝集素、黑管菌凝集素、金針菇凝集素、靈芝凝集素、梯棱羊肚菌凝集素、阿魏菇凝集素、草菇凝集素和磚紅絨蓋牛肝菌凝集素等均對(duì)小鼠脾細(xì)胞或脾淋巴細(xì)胞有增殖促進(jìn)作用。其中草菇凝集素被證實(shí)是通過TCR/鈣離子信號(hào)通道誘導(dǎo)細(xì)胞有絲分裂[72]。另外，靈芝凝集素、白茯苓凝集素能促進(jìn)人淋巴細(xì)胞有絲分裂。細(xì)網(wǎng)牛肝菌凝集素和草菇凝集素能促胸腺細(xì)胞增殖。通過促進(jìn)免疫細(xì)胞的增殖，調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫活性。

4 結(jié)語(yǔ)

與其他動(dòng)植物凝集素相似，大型真菌凝集素在結(jié)構(gòu)上包含一個(gè)或多個(gè)糖識(shí)別域，高度選擇性和特異性結(jié)合多種糖，可以在免疫系統(tǒng)中細(xì)胞間的相互識(shí)別、信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞分化等多個(gè)生物過程中發(fā)揮重要作用。通過研究大型真菌凝集素的晶體結(jié)構(gòu)和糖特異性，可發(fā)現(xiàn)結(jié)構(gòu)相似或可結(jié)合相同糖分子的大型真菌凝集素，有一部分表達(dá)出相似的生物活性。特異性識(shí)別是大型真菌凝集素發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能的主要方式，大型真菌凝集素可以通過免疫監(jiān)視、活化免疫細(xì)胞、刺激分泌免疫細(xì)胞因子以及促進(jìn)免疫細(xì)胞有絲分裂等方式來調(diào)節(jié)機(jī)體免疫，發(fā)揮免疫調(diào)控功能。大型真菌作為凝集素的新來源，成本經(jīng)濟(jì)，生長(zhǎng)周期短，在開發(fā)藥物靶向載體、免疫佐劑、定位識(shí)別等生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有廣闊的應(yīng)用前景。