劉 源,王民樂(lè),陳 靖,崔軼男,楊超沙,董 巖
(承德市農(nóng)林科學(xué)院,河北 承德 067000)
金耳(Tremella aurantialba Bandoni et Zang),因其子實(shí)體為金黃色耳瓣?duì)疃妹?,又因其酷似大腦,又名腦耳、腦形銀耳等[1-2],隸屬于真菌界(Fungi)擔(dān)子菌門 (Basidiomycota) 擔(dān)子菌綱 (Basidiomycetes) 銀耳目 (Tremellales) 銀耳科 (Tremella) 銀耳屬(Tremella)。金耳是珍貴的食(藥) 用菌,金耳味道清香、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富,市場(chǎng)需求量較大,經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高,但野生金耳年產(chǎn)量較少,因此人工栽培十分必要。商品金耳為金耳和毛韌革菌(Stereum hirsutum)的復(fù)合體,由2種菌共生而成,單一金耳菌菌絲體對(duì)基質(zhì)中粗纖維等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的分解能力很弱,自身幾乎完全沒(méi)有獨(dú)立生長(zhǎng)發(fā)育的能力,因此必須借助有親和性的伴生菌毛韌革菌(俗稱耳友菌)菌絲體的幫助,使其正常生長(zhǎng)發(fā)育,順利地完成生活史[3]。耳友菌菌絲生長(zhǎng)初期長(zhǎng)速很快,疏松,呈棉毛狀,白色,很快轉(zhuǎn)為黃色或橙黃色。金耳菌絲生長(zhǎng)初期細(xì)而短,透明無(wú)色,平伏于培養(yǎng)基表面,極少有堅(jiān)立的氣生菌絲。當(dāng)與耳友菌生長(zhǎng)在一起時(shí),可以長(zhǎng)成短而密的氣生菌絲,有效吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。20世紀(jì)80年代開(kāi)始研究金耳人工栽培[4],但由于金耳菌種制作要求較高,在實(shí)際產(chǎn)生過(guò)程中,菌種品質(zhì)參差不齊,加之金耳成功栽培必須有金耳菌和耳友菌的復(fù)合體共存及種質(zhì)等條件因素導(dǎo)致栽培后無(wú)法正常出菇的現(xiàn)象時(shí)常發(fā)生,子實(shí)體產(chǎn)量不穩(wěn)定,金耳工廠化栽培發(fā)展薄弱。
將2010年自云南引進(jìn)的金耳品種作為研究對(duì)象,從不同配方培養(yǎng)基、碳源、氮源、pH、溫度等幾個(gè)方面對(duì)金耳菌絲生長(zhǎng)進(jìn)行探究及出菇試驗(yàn),總結(jié)冀北地區(qū)冷棚栽培金耳關(guān)鍵技術(shù),以期為廣大菇農(nóng)開(kāi)展金耳生產(chǎn)提供借鑒與幫助。
金耳1號(hào)由平泉市希才應(yīng)用菌科技發(fā)展有限公司提供,金耳2號(hào)為分離材料。根據(jù)前期栽培試驗(yàn)表明[5],金耳1號(hào)在菌絲生長(zhǎng)速度、菌絲形態(tài)、出菇時(shí)間以及原種4℃保存2個(gè)月后的形態(tài)顏色等性狀上均優(yōu)于金耳2號(hào),因此選擇金耳1號(hào)菌種進(jìn)行后續(xù)栽培試驗(yàn)。
金耳原種的制備是金耳栽培過(guò)程中的重要環(huán)節(jié),原種的品質(zhì)直接影響栽培出菇率和子實(shí)體商品性狀。金耳作為食用菌珍稀品種,為保證其出菇率及商品性狀,需要選擇穩(wěn)定性高、長(zhǎng)勢(shì)好、品質(zhì)優(yōu)的金耳品種的菌種,才能為其人工栽培提供基礎(chǔ)保障。
金耳屬于中低溫型品種,根據(jù)菌絲溫度試驗(yàn)設(shè)置 5個(gè)梯度 (10℃、15℃、20℃、25℃、30℃),將金耳子實(shí)體接種在PDA培養(yǎng)基上,置于5個(gè)梯度的培養(yǎng)箱進(jìn)行劃線培養(yǎng),3次重復(fù)測(cè)定其生長(zhǎng)速度,其統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表1。
由表1可知,菌絲在20℃、25℃時(shí),較其他溫度菌絲粗壯、生長(zhǎng)速度相當(dāng)、長(zhǎng)滿培養(yǎng)基速度最快。冀北地區(qū)屬于溫帶大陸性季風(fēng)氣候,光照充足,晝夜溫差大,夏季炎熱多雨,根據(jù)氣候因素合理確定制袋和出耳時(shí)間對(duì)金耳的栽培非常重要??紤]到冀北氣候因素及菌絲的溫度試驗(yàn),應(yīng)在1月~4月進(jìn)行制袋,5月接種,6月~7月收獲。
表1 不同溫度對(duì)金耳菌絲生長(zhǎng)的影響Tab.1 Effect of different temperature on mycelial growth of Tremella aurantialba
1.3.1 栽培配方
金耳1號(hào)的生物學(xué)特性研究發(fā)現(xiàn)[5],不同碳源對(duì)金耳的生物學(xué)特性影響較大,添加碳源的培養(yǎng)基相較于未添加碳源及添加氮源的培養(yǎng)基,在菌絲生長(zhǎng)速率及菌絲強(qiáng)壯程度上有明顯區(qū)別,部分氮源培養(yǎng)基菌絲基本不生長(zhǎng)。不同碳源對(duì)金耳菌絲生長(zhǎng)的影響見(jiàn)表2。
表2 不同碳源對(duì)金耳菌絲生長(zhǎng)的影響Tab.2 Effect of different carborn sources on mycelial growth of Tremella aurantialba
由表2結(jié)果表明,添加蔗糖、乳糖時(shí),菌絲長(zhǎng)勢(shì)及生長(zhǎng)速率最好,葡萄糖、果糖等單糖效果次之,可溶性淀粉等復(fù)合糖最次。因此,根據(jù)其生物學(xué)特性試驗(yàn)以及生產(chǎn)實(shí)際應(yīng)用,在栽培配方中,在常規(guī)金耳出耳配方(細(xì)木屑99%、石灰0.5%、石膏0.5%)中適量的增加碳源,調(diào)整配方為雜木屑50%、棉籽殼30%、麥麩17%、石膏1.4%、磷酸二氫鉀0.2%、白糖1%有助于菌絲快速生長(zhǎng)[6]。但試驗(yàn)添加的氮源均為無(wú)機(jī)氮源,菌絲在有機(jī)氮源里的生長(zhǎng)情況還有待考證,原料的品質(zhì)也要得到保障,較差且發(fā)霉的栽培料嚴(yán)禁使用。
1.3.2 拌料裝袋
制作袋料時(shí)應(yīng)把原料按比例拌勻后再加水,含量在65%內(nèi)即可。不同pH對(duì)金耳菌絲生長(zhǎng)的影響結(jié)果見(jiàn)表3。
表3 不同pH對(duì)金耳菌絲生長(zhǎng)的影響Tab.3 Effect of different pH on mycelial growth of Tremella aurantialba
由表3可知,當(dāng)培養(yǎng)料pH為6時(shí),菌絲生長(zhǎng)速度最快,與pH為5時(shí)的生長(zhǎng)速度相差不大,當(dāng)培養(yǎng)料的pH為5~6時(shí),金耳的生長(zhǎng)速度最快,而在pH為8時(shí),生長(zhǎng)速度明顯下降。因此,需注意在裝袋時(shí)隨拌隨裝,松緊一致,當(dāng)天裝袋當(dāng)天滅菌,減少雜菌侵害。
1.3.3 滅菌及接種
將裝好的袋料[7]進(jìn)行滅菌,滅菌鍋在100℃保持6 h~8 h,高溫殺菌。
由于金耳為金耳菌和耳友菌的復(fù)合體,出菇試驗(yàn)時(shí)[8],分別采用3種方法。A組:組織塊接種法,用接種針鉤出黃豆大小的金耳子實(shí)體,接入試管內(nèi);B組:組織塊+菌絲體接種法,用接種針取部分組織塊和部分菌絲體一并接入試管;C組:菌絲體接種法,用接種針從母種瓶壁上刮取菌絲體接入試管內(nèi)。試驗(yàn)結(jié)果表明,A組菌絲生長(zhǎng)最快,但后期出菇結(jié)果不理想,大部分不能形成金耳子實(shí)體,雖少部分可以出菇,但子實(shí)體畸形嚴(yán)重;B組菌絲雖然前期菌絲萌發(fā)生長(zhǎng)勢(shì)較緩慢,但萌發(fā)生長(zhǎng)至7 d后生長(zhǎng)速度加快,與C組基本同時(shí)成熟,且B組菌絲形成的金耳子實(shí)體性狀良好,無(wú)畸形菇;C組菌絲的生長(zhǎng)速度一直相對(duì)于A組、B組慢,且成熟期較長(zhǎng),僅有部分可以出菇,其他由于生長(zhǎng)期過(guò)長(zhǎng)未能出菇。
試驗(yàn)表明,由于金耳為金耳菌和耳友菌的復(fù)合體[9],A組菌絲經(jīng)鏡檢顯示,絕大部分為耳友菌菌絲,少部分為金耳菌絲,耳友菌生長(zhǎng)速度快,造成前期菌絲生長(zhǎng)速度快發(fā)育好的假象,耳友菌抑制了金耳菌絲生長(zhǎng),因此不能形成正常子實(shí)體。C組菌絲經(jīng)鏡檢發(fā)現(xiàn)絕大部分為金耳菌絲,極少有耳友菌菌絲,金耳菌絲生長(zhǎng)速度慢,并且缺少耳友菌菌絲幫助,吃料艱難,整個(gè)生長(zhǎng)期加長(zhǎng),出菇效果差。B組顯示絕大部分為金耳菌絲,部分耳友菌菌絲,前期金耳菌絲生長(zhǎng)速度慢,經(jīng)過(guò)一段時(shí)間培養(yǎng),金耳菌絲由于先天優(yōu)勢(shì)且耳友菌菌絲生長(zhǎng)加快,可更好地形成菌絲復(fù)合體,從而促進(jìn)子實(shí)體生長(zhǎng)。因此在接種時(shí)應(yīng)選擇原種金耳子實(shí)體組織和下方少許培養(yǎng)基,同時(shí)接種到栽培袋中。
金耳接種后25 d~30 d菌絲長(zhǎng)滿栽培袋,溫度保持在20℃~25℃,約60 d開(kāi)始出耳[10]。金耳屬于好氧型真菌,應(yīng)及時(shí)解開(kāi)袋口,讓新鮮空氣充分進(jìn)入。并在菌袋上覆蓋整張報(bào)紙,紙上噴水保濕并遮光,每次向報(bào)紙上噴水時(shí),需掀動(dòng)幾次,讓空氣進(jìn)入袋內(nèi),并及時(shí)排空袋內(nèi)積水,防止污染。直至長(zhǎng)出幼耳時(shí)除去報(bào)紙,此時(shí)噴水切勿直接噴灑在幼耳上。每天保持菌袋約2 h的散射光照,有利于金耳轉(zhuǎn)色成熟。
當(dāng)金耳耳瓣充分展開(kāi),形似腦狀,呈金黃色,具有彈性,表面開(kāi)始產(chǎn)生霜狀擔(dān)孢子時(shí)采收[6]。注意采收前1天要停止?jié)菜?,及時(shí)采收,逾期采收耳瓣變薄,影響產(chǎn)量及品質(zhì)。分批采收結(jié)束后,按出耳期管理方式繼續(xù)管理。
(25±1)℃、空氣相對(duì)濕度65%,無(wú)光照條件下,在接種第2天菌絲開(kāi)始萌發(fā),3 d~5 d開(kāi)始吃料,經(jīng)過(guò)約30 d的培養(yǎng),菌絲長(zhǎng)滿菌袋。在菌包上采用環(huán)形開(kāi)口后覆蓋報(bào)紙,將菇房?jī)?nèi)空氣相對(duì)濕度控制在90%~95%,溫度調(diào)至(23±1)℃, 約40 d后在開(kāi)口處形成原基,給予散射光刺激進(jìn)行催蕾,約30 d原基分化形成成熟子實(shí)體。在上述栽培條件下,金耳在冀北地區(qū)順利栽培成功。
冀北地區(qū)自然資源豐富,為金耳特色產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供了優(yōu)質(zhì)的環(huán)境條件,金耳在冀北地區(qū)人工栽培成功,為金耳在冀北地區(qū)的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)、推廣、利用奠定了基礎(chǔ),為今后食用菌栽培品種增加了選擇,為農(nóng)戶脫貧增收指明了方向。因此冀北地區(qū)金耳栽培條件初探很有必要,需要注意在接種時(shí)要取有效部分接種(選取部分組織塊和部分菌絲體一并接入試管),否則很容易被耳友菌絲生長(zhǎng)覆蓋,無(wú)法形成金耳子實(shí)體。