2020年器官移植免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展

田倩川 吳昌鴻 徐亞男 趙勇

盡管2020年新型冠狀病毒肺炎疫情對(duì)人類生活和全球諸多領(lǐng)域帶來嚴(yán)重影響，生物醫(yī)學(xué)科技工作者和醫(yī)護(hù)人員投入大量時(shí)間精力進(jìn)行抗疫攻關(guān)，但是在過去的一年，移植免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)研究領(lǐng)域仍有許多重要科研突破和亮點(diǎn)。本文就2020年移植免疫學(xué)在免疫細(xì)胞亞群、免疫分子等方面的主要進(jìn)展和研究成果進(jìn)行簡(jiǎn)要?dú)w納。需要特別指出的是，由于移植免疫學(xué)領(lǐng)域的范圍廣泛、學(xué)科交叉等特點(diǎn)，許多重要研究進(jìn)展未能全部包括在此介紹中。

1 免疫細(xì)胞亞群在排斥反應(yīng)中的作用及其在誘導(dǎo)移植免疫耐受中的新嘗試

免疫耐受是機(jī)體對(duì)特定物質(zhì)產(chǎn)生的特異性免疫不應(yīng)答反應(yīng)，區(qū)別于免疫抑制劑介導(dǎo)的非特異性免疫抑制狀態(tài)（即對(duì)所有免疫原都表現(xiàn)出低反應(yīng)性狀態(tài)）。通過誘導(dǎo)建立受者對(duì)供者器官的免疫耐受被認(rèn)為是能有效減少免疫抑制劑所致各種不良反應(yīng)的最佳方案，也是移植免疫學(xué)研究的熱點(diǎn)。不同的免疫細(xì)胞在移植排斥反應(yīng)過程中發(fā)揮著各自不同的功能，也在免疫耐受的建立過程中扮演著不同的角色。

1.1 T 細(xì)胞

T細(xì)胞可以通過分泌直接或間接發(fā)揮殺傷作用的細(xì)胞因子參與移植器官的排斥反應(yīng)和免疫耐受的建立，其介導(dǎo)的排斥反應(yīng)是一個(gè)多因子共同發(fā)揮功能的復(fù)雜過程。Morris等[1]研究表明，抑制性受體FcγRⅡB與功能性配體纖維蛋白原樣2（fibrinogen like 2，F(xiàn)gl2）結(jié)合后，通過半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（cysteinyl aspartate specific proteinase，Caspase）-3/7介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡信號(hào)通路，誘導(dǎo)CD44highCD62LlowEomeslow效應(yīng)性CD8+T細(xì)胞凋亡，進(jìn)而緩解小鼠皮膚移植物的排斥反應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn)，表達(dá)抑制性受體FcγRⅡB的CD8+T細(xì)胞的水平與移植物排斥反應(yīng)強(qiáng)度呈負(fù)相關(guān)。過繼FcγRⅡB剔除的CD8+T細(xì)胞導(dǎo)致受體對(duì)供體反應(yīng)性記憶性T細(xì)胞增多，對(duì)二次反應(yīng)增強(qiáng)，介導(dǎo)對(duì)阻斷輔助分子誘導(dǎo)耐受具有抵抗性的排斥反應(yīng)[2]。該研究揭示了一個(gè)針對(duì)移植物反應(yīng)記憶性T細(xì)胞形成的T細(xì)胞內(nèi)源調(diào)控機(jī)制，提示調(diào)控效應(yīng)性CD8+T細(xì)胞凋亡相關(guān)的受體-配體相互作用具有應(yīng)用于器官移植排斥反應(yīng)治療的潛力。

研究發(fā)現(xiàn)，在T細(xì)胞活化過程中，N-辛?；喟桶罚∟-octanoyl dopamine，NOD）處理使T細(xì)胞產(chǎn)生腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）-α和干擾素（interferon，IFN）-γ的能力明顯降低，導(dǎo)致T細(xì)胞黏附能力減弱[3]。這個(gè)發(fā)現(xiàn)提示NOD在治療移植受體中具有潛在的臨床用途，但需要進(jìn)一步的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。Xie等[4]利用Balb/c皮膚預(yù)致敏的條件性敲除某個(gè)或某些基因[哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子（signal transducer and activator of transcription，STAT）3以及雙敲除mTOR和STAT3]的C57BL/6小鼠為受體，然后將Balb/c小鼠心臟分別移植至皮膚未致敏和預(yù)致敏的小鼠中進(jìn)行觀察。結(jié)果表明，在皮膚未致敏的情況下，單敲除mTOR的受體小鼠獲得了長(zhǎng)期的移植心臟存活；在皮膚預(yù)致敏的情況下，mTOR和STAT3雙敲除小鼠也實(shí)現(xiàn)了移植心臟的長(zhǎng)期存活，并且存活時(shí)間長(zhǎng)于mTOR單敲除小鼠。這表明mTOR和STAT3缺失消除了T細(xì)胞對(duì)移植心臟排斥反應(yīng)的記憶性，這些發(fā)現(xiàn)有助于我們更好地了解T細(xì)胞對(duì)移植器官免疫記憶的分子機(jī)制。

Fisher等[5]在大鼠后肢移植模型中，局部給予經(jīng)工程改造可持續(xù)釋放轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（transforming growth factor，TGF）-β1、白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-2和西羅莫司（雷帕霉素）的微粒，誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（regulatory T cell，Treg），可延長(zhǎng)同種異體移植物的存活而無需進(jìn)行長(zhǎng)期的全身免疫抑制。這種Treg誘導(dǎo)系統(tǒng)不僅可降低移植物組織中炎癥因子的表達(dá)，增強(qiáng)Treg相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)，還可增加移植后肢引流淋巴結(jié)中的Treg，并減少炎癥細(xì)胞輔助性T細(xì)胞（helper T cell，Th）1亞群。無獨(dú)有偶，另一個(gè)研究組在這個(gè)模型中利用釋放重組的CC趨化因子配體（CC chemokine ligand，CCL）22進(jìn)行研究，在不影響常規(guī)T細(xì)胞增殖的前提下，CCL22的釋放可特異性誘導(dǎo)Treg趨化遷移并增強(qiáng)其功能，進(jìn)而延長(zhǎng)同種異體移植物的存活時(shí)間，并誘導(dǎo)受體建立免疫耐受[6]。

在皮膚移植模型中，移植前預(yù)先給C57BL/6小鼠過繼F1（B6×bm1）小鼠的脾細(xì)胞，促進(jìn)F1小鼠皮膚移植物被永久接受，實(shí)現(xiàn)免疫耐受。研究者認(rèn)為，此免疫耐受的建立與外周Foxp3+CD4+CD25+Treg的擴(kuò)增和移植物Foxp3表達(dá)的增加有關(guān)[7]。

阻斷輔助分子誘導(dǎo)移植免疫耐受是有希望的策略之一，但是僅僅應(yīng)用細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原（cytotoxic T lymphocyte-associated antigen，CTLA）4- 免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）仍伴有高頻率的排斥反應(yīng)，因此尋找聯(lián)合應(yīng)用很有必要。近期，Iglesias等[8]研究發(fā)現(xiàn)，Janus激酶（Janus kinase，JAK）/ STAT抑 制 劑 托 法 替 尼（tofacitinib） 與CTLA4-Ig聯(lián)合應(yīng)用可以降低樹突狀細(xì)胞（dendritic cell，DC）的炎癥因子產(chǎn)生核輔助分子的表達(dá)，誘導(dǎo)免疫耐受性DC表型，抑制T細(xì)胞活化，減少移植物效應(yīng)性T細(xì)胞浸潤(rùn)而增加Treg浸潤(rùn)，從而更有效誘導(dǎo)移植免疫耐受。Kawai等[9]的研究結(jié)果表明，IL-33擴(kuò)增的Treg向移植物遷移的能力增強(qiáng)，并且在體內(nèi)具有更加強(qiáng)大的免疫抑制作用和誘導(dǎo)移植免疫耐受的潛能。該研究提示IL-33可能是有希望輔助Treg治療的細(xì)胞因子。

應(yīng)用主要組織相容性復(fù)合體（major histocompatibility complex，MHC） Ⅰ b分 子 Qa-1突變[人類白細(xì)胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）-E的同源分子]的受體小鼠進(jìn)行CTLA4-Ig誘導(dǎo)心臟移植免疫耐受實(shí)驗(yàn)，從而缺失Qa-1與CD8+Treg 的T細(xì)胞受體（T cell receptor，TCR）作用[10]。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，CTLA4-Ig不能有效誘導(dǎo)Qa-1突變小鼠發(fā)生心臟移植免疫耐受，該小鼠表現(xiàn)出強(qiáng)烈的抗體介導(dǎo)的排斥反應(yīng)。該現(xiàn)象可能是由于Qa-1突變降低Qa-1限制的CD8+Treg對(duì)Th的抑制作用所致。該研究表明Qa-1/HLA-E依賴的免疫調(diào)節(jié)信號(hào)通路在移植免疫耐受中的重要作用，也為降低移植排斥反應(yīng)提供新思路。

受者體內(nèi)供者特異性抗體（donor specific antibody，DSA）可以觸發(fā)補(bǔ)體系統(tǒng)形成補(bǔ)體膜攻擊復(fù)合物（membrane attack complex， MAC），該復(fù)合物附著于移植物血管內(nèi)皮從而增強(qiáng)CD8+T細(xì)胞介導(dǎo)的急性排斥反應(yīng)。人體內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)吞MAC并轉(zhuǎn)移至具有Rab5蛋白的內(nèi)體（一種膜包裹的囊泡結(jié)構(gòu)）中，活化核因子（nuclear factor，NF）-κB通路，誘導(dǎo)產(chǎn)生IL-1β，從而招募和激活抗供者記憶性CD4+T細(xì)胞，排斥移植物。Xie等[11]近日研究表明，IFN-γ培養(yǎng)人內(nèi)皮細(xì)胞使其細(xì)胞核中表達(dá)IL-15/IL-15受體（receptor，R）α復(fù)合物，而MAC誘導(dǎo)的IL-1β刺激IL-15/IL-15Rα復(fù)合物在內(nèi)皮細(xì)胞表面表達(dá)，增加抗供者CD8+T細(xì)胞的活化和成熟，介導(dǎo)排斥反應(yīng)。此過程將DSA與細(xì)胞介導(dǎo)的排斥反應(yīng)聯(lián)系在一起。

1.2 B細(xì)胞

B細(xì)胞及其抗體在器官移植排斥反應(yīng)中的作用備受關(guān)注。2020年幾篇關(guān)于B細(xì)胞亞群及靶向漿細(xì)胞治療策略在器官移植中應(yīng)用的綜述在《American Journal of Transplantation》和《Transplantation》等雜志發(fā)表[12-15]。Marino等[16]發(fā)現(xiàn)B細(xì)胞耗竭增強(qiáng)了CD8+T細(xì)胞的記憶性和同種異體反應(yīng)性，但抑制了CD4+記憶性T細(xì)胞的同種異體反應(yīng)性。同樣，研究人員在腎移植相關(guān)的研究中發(fā)現(xiàn)，使用抗B細(xì)胞激活因子（B cell activating factor，BAFF）單克隆抗體，可減少腎移植物內(nèi)B細(xì)胞浸潤(rùn)，抑制B細(xì)胞的成熟和分化，從而阻礙了腎臟內(nèi)三級(jí)淋巴器官的形成[17]。這個(gè)發(fā)現(xiàn)有益于腎移植預(yù)后，也為抗BAFF單克隆抗體作為腎移植免疫抑制劑提供依據(jù)。

調(diào)節(jié)性B細(xì)胞（regulatory B cell，Breg）抗原識(shí)別在移植免疫耐受誘導(dǎo)的作用有待闡明。Kimura等[18]應(yīng)用特異表達(dá)B細(xì)胞受體（B cell receptor，BCR）的Breg過繼實(shí)驗(yàn)和心臟或胰島移植小鼠模型研究發(fā)現(xiàn)，Breg誘導(dǎo)移植免疫耐受依賴于B細(xì)胞的抗原識(shí)別，并由TGF-β介導(dǎo)。該研究有助于改善Breg誘導(dǎo)移植免疫耐受的方案。Dangi等[19]在預(yù)致敏的受體小鼠胰島移植模型中，應(yīng)用供體凋亡細(xì)胞、抗CD40L抗體和雷帕霉素聯(lián)合處理后進(jìn)行移植，結(jié)果發(fā)現(xiàn)移植物存活時(shí)間延長(zhǎng)，剔除B細(xì)胞后移植物長(zhǎng)期存活，提示移植物中浸潤(rùn)的B細(xì)胞可能作為抗原提呈細(xì)胞發(fā)揮作用。Khiew等[20]研究發(fā)現(xiàn)，抗CD154抗體與供者脾細(xì)胞聯(lián)合應(yīng)用可有效誘導(dǎo)小鼠心臟移植免疫耐受，從而使移植物長(zhǎng)期存活且無DSA產(chǎn)生。進(jìn)一步研究表明，上述這種處理能快速而有效地誘導(dǎo)B細(xì)胞免疫耐受，耐受的同種異體反應(yīng)性B細(xì)胞不能發(fā)育分化為產(chǎn)生DSA的B細(xì)胞，并且以抗原特異性的方式抑制其他幼稚 B細(xì)胞發(fā)育分化為產(chǎn)生DSA的B細(xì)胞。需要指出的是，該B細(xì)胞免疫耐受依賴于心臟移植物，因?yàn)閮H僅給予抗CD154抗體與供體脾細(xì)胞不足以誘導(dǎo)Breg的產(chǎn)生。研究者在CTLA-4Ig誘導(dǎo)心臟移植免疫耐受小鼠模型中亦可檢測(cè)到此群Breg的存在，提示CTLA-4Ig可以誘導(dǎo)B細(xì)胞免疫耐受。因此，B細(xì)胞在移植免疫耐受中的作用值得重視[13,21]。

1.3 單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞

關(guān)于供體巨噬細(xì)胞在移植物排斥反應(yīng)中的作用相關(guān)綜述在《American Journal of Transplantation》雜志發(fā)表[22]。供肺組織中的內(nèi)毒素與肺移植術(shù)后中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)和移植物失功相關(guān)，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)供肺組織中定居的巨噬細(xì)胞在此過程中發(fā)揮重要作用[23]。固定化血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）在一定剪切應(yīng)力作用下，以高特異性捕獲血液循環(huán)單核細(xì)胞。貼壁單核細(xì)胞分化為內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的混合表型，并進(jìn)一步分化為成熟的內(nèi)皮細(xì)胞。在體內(nèi)，血管管腔上新招募的細(xì)胞表達(dá)單核細(xì)胞標(biāo)志物，隨后它們共同表達(dá)單核細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞特異性蛋白并維持移植血管的通暢性。這表明循環(huán)單核細(xì)胞可以直接促進(jìn)移植血管的內(nèi)皮化[24]。研究者發(fā)現(xiàn)，在器官移植中巨噬細(xì)胞除了發(fā)揮其調(diào)控炎癥因子、提呈抗原等天然免疫細(xì)胞的作用，還顯示出適應(yīng)性免疫細(xì)胞的記憶性和特異性。2020年，筆者團(tuán)隊(duì)研究證明同種異基因細(xì)胞致敏后的巨噬細(xì)胞獲得了長(zhǎng)期記憶功能，并特異性介導(dǎo)同種異體移植排斥反應(yīng)[25]。另一項(xiàng)來自美國的研究報(bào)道，單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞能夠獲得MHC Ⅰ抗原特有的記憶，并識(shí)別成對(duì)的免疫球蛋白樣受體-A（paired Ig-like receptor A，PIR-A）作為記憶應(yīng)答所必需的MHC Ⅰ受體，敲除受體中的PIR-A或阻止PIR-A與供體MHC Ⅰ分子的結(jié)合，會(huì)阻止巨噬細(xì)胞的記憶性并減弱腎臟和心臟同種異體移植排斥反應(yīng)[26]。這項(xiàng)研究提示巨噬細(xì)胞的記憶性及其作為效應(yīng)細(xì)胞在排斥反應(yīng)中的重要性值得關(guān)注。

1.4 樹突狀細(xì)胞

DC在移植免疫中發(fā)揮了重要的免疫調(diào)控作用，其參與免疫調(diào)控的機(jī)制一直是研究的熱點(diǎn)。Hughes等[27]證明受體DC與供體MHC-肽復(fù)合物的交叉修飾是將供體抗原提呈給移植物中的受體效應(yīng)性T細(xì)胞的主要途徑。如果供體和受體共享一個(gè)或多個(gè)MHC基因座，則“cross-dressed”的DC可能會(huì)間接激活同種異體效應(yīng)性T細(xì)胞，該T細(xì)胞識(shí)別與自身MHC分子結(jié)合的同種肽。換句話說，一旦轉(zhuǎn)移到受體DC，供體和受體共有的MHC分子可以有效地將內(nèi)源性全肽提呈，并間接激活宿主的效應(yīng)性T細(xì)胞。這構(gòu)成了一種快速的機(jī)制，通過繞過宿主DC捕獲抗原和處理抗原來擴(kuò)大間接同種免疫應(yīng)答。此外，研究者發(fā)現(xiàn)在體外沉默了m6A甲基化酶METTL3的DC具有較低的MHCⅡ、共刺激分子（CD80、CD86）和DC相關(guān)細(xì)胞因子（IFN-γ、IL-12）表達(dá)水平，并且具有較弱的促進(jìn)T細(xì)胞增殖的能力，最終在體內(nèi)延長(zhǎng)了同種異體移植物的存活時(shí)間[28]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，m6A甲基化酶METTL3的敲低也減弱了成熟DC衍生的外泌體誘導(dǎo)排斥反應(yīng)[28]。因此使用METTL3敲除的DC可能是一種有望減輕同種異體心臟移植排斥反應(yīng)的有臨床應(yīng)用價(jià)值的方法。此外，研究者發(fā)現(xiàn)移植腎的耐受性受控于漿細(xì)胞樣DC（plasmacytoid DC，pDC）的數(shù)量或功能的差異。pDC可通過MEK/ERK、GSK-3β和NF-κB信號(hào)通路的激活誘導(dǎo)Foxp3+Treg生成，并且這種誘導(dǎo)能力具有品系依賴性[29]。研究者對(duì)同種異體腎移植誘導(dǎo)的同種異體心臟移植耐受性進(jìn)行研究并建立小鼠模型，發(fā)現(xiàn)C57BL/6小鼠接受DBA/2J小鼠腎臟移植物誘導(dǎo)免疫耐受以后，能夠長(zhǎng)期接受DBA/2J小鼠心臟移植物，但會(huì)排斥無關(guān)第3者心臟[29]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，腎臟移植物通過Foxp3+細(xì)胞誘導(dǎo)供體特異性的心臟移植耐受，并且該耐受不依賴于胸腺和腎臟移植物的持續(xù)存在[29]。該研究結(jié)果提示，臨床上多器官衰竭患者的器官移植手術(shù)順序的調(diào)整對(duì)誘導(dǎo)免疫耐受具有重要意義。

1.5 嗜中性粒細(xì)胞

嗜中性粒細(xì)胞具有功能異質(zhì)性，可以參與多種疾病，發(fā)揮復(fù)雜的免疫調(diào)節(jié)作用。Tecchio等[30]對(duì)嗜中性粒細(xì)胞在骨髓移植中的作用進(jìn)行了較好的綜述。Wong等[31]研究發(fā)現(xiàn)，在Balb/c小鼠皮膚移植給C57BL/6小鼠的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭?，?yīng)用重組人血管性血友病因子裂解酶（recombinant human a disintegrin and metalloproteinase with a thrombospondin type 1 motif member 13，rhADAMTS13）處理受體可以明顯延長(zhǎng)皮膚移植物的存活時(shí)間，該作用可能是通過rhADAMTS13抑制移植物中嗜中性粒細(xì)胞胞外陷阱（neutrophil extracellular trap，NET）的產(chǎn)生。此研究提示嗜中性粒細(xì)胞在排斥反應(yīng)中的作用，也為應(yīng)用rhADAMTS13和抗NET的應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)[32]。在缺血-再灌注損傷（ischemic-reperfusion injury，IRI）和肺移植模型中，線粒體DNA通過Toll 樣受體（Toll-like receptor，TLR）9啟動(dòng)NET的形成[33]。

天然免疫細(xì)胞通過抗原提呈，共刺激因子和細(xì)胞因子產(chǎn)生、觸發(fā)并驅(qū)動(dòng)隨后的細(xì)胞和體液適應(yīng)性免疫反應(yīng)。因此，我們可以合理地假設(shè)，引發(fā)疾病的不同類型Th最初是由相同類型的細(xì)胞微環(huán)境（相同極化的先天性免疫細(xì)胞，如DC、巨噬細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、先天性淋巴細(xì)胞等）驅(qū)動(dòng)[34]。例如，Th1型免疫應(yīng)答由1型先天性免疫應(yīng)答協(xié)同驅(qū)動(dòng)，而Th2型免疫應(yīng)答始終由1型先天性炎癥反應(yīng)驅(qū)動(dòng)。因此，檢測(cè)先天性免疫細(xì)胞的極化趨勢(shì)，可以預(yù)測(cè)個(gè)體在早期可能患有的免疫性疾病類型。先天性免疫細(xì)胞分化的恢復(fù)或重新平衡可能對(duì)免疫性疾病和排斥反應(yīng)具有預(yù)防和治療意義，嗜中性粒細(xì)胞中新近鑒定出的N（IL-23）和N（IL-33）亞群可能是為此目的的靶細(xì)胞類型之一[34]。這些細(xì)胞亞群在器官移植排斥反應(yīng)和免疫耐受中的作用值得關(guān)注。

此外，訓(xùn)練免疫是最近發(fā)現(xiàn)的一種天然免疫系統(tǒng)的功能程序，其特點(diǎn)是巨噬細(xì)胞的非永久性表觀遺傳和代謝重編程。由于經(jīng)過訓(xùn)練的巨噬細(xì)胞上調(diào)共刺激分子（信號(hào)2）并產(chǎn)生促炎因子（信號(hào)3），這些信號(hào)可以促進(jìn)移植物反應(yīng)性免疫反應(yīng)和器官移植排斥反應(yīng)。Ochando等[35]總結(jié)了訓(xùn)練免疫在器官移植中的作用及誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞訓(xùn)練免疫的途徑與排斥反應(yīng)的相關(guān)性。

1.6 髓系抑制性細(xì)胞

Shao等[36]于2020年對(duì)髓系抑制性細(xì)胞（myeloidderived suppressor cell，MDSC）在排斥反應(yīng)和免疫耐受中的作用進(jìn)行了綜述并在《Transplantation》雜志發(fā)表。體外誘導(dǎo)MDSC后過繼到體內(nèi)檢驗(yàn)其功能是MDSC研究的主要方法[37]，研究者也一直在嘗試尋找高效的誘導(dǎo)方法。研究發(fā)現(xiàn)同種異基因移植導(dǎo)致MDSC累積，且這些MDSC能浸潤(rùn)到移植物中[38]。同時(shí)，與移植和腫瘤來源的MDSC相比，粒細(xì)胞集落刺激因子誘導(dǎo)的MDSC能更好地緩解小鼠同種異基因心臟移植排斥反應(yīng)。這3種MDSC與抗CD154抗體聯(lián)合使用后移植物存活時(shí)間大大延長(zhǎng)[38]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，在無免疫抑制劑處理的C57BL/6心臟移植至Balb/c受體的移植模型中，MDSC擴(kuò)增了1.7～4.6倍。過繼體外誘導(dǎo)的MDSC明顯延長(zhǎng)心臟移植物的存活時(shí)間，而與抗CD154抗體聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同作用[38]。

研究報(bào)道，用單克隆抗體阻斷SIRPα或CD47會(huì)導(dǎo)致MDSC的表型改變，MHCⅡ、CD86的表達(dá)增加，巨噬細(xì)胞招募性趨化因子[如單核細(xì)胞趨化蛋白（monocyte chemoattractant protein，MCP-1）]的分泌增加，進(jìn)而引起移植物功能障礙和排斥反應(yīng)。可見，SIRPα-CD47有助于MDSC誘導(dǎo)移植免疫耐受[39]。在角膜移植模型中，過繼體外誘導(dǎo)的MDSC可通過誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）依賴的信號(hào)通路抑制血管的形成和排斥反應(yīng)[40]。此MDSC過表達(dá)抗血管形成因子凝血酶敏感蛋白1而低表達(dá)VEGF-A和VEGF-C[40]。Cai等[41]報(bào)道，供體來源性MDSC可以在心臟移植模型中誘導(dǎo)受體MDSC的產(chǎn)生，從而誘導(dǎo)移植免疫耐受。目前，MDSC的研究主要是在動(dòng)物模型中進(jìn)行的，較少涉及人體器官移植。一項(xiàng)臨床研究評(píng)估了38例腎移植受者在不同時(shí)間點(diǎn)的不同MDSC亞型的表型和功能。在腎移植術(shù)后6個(gè)月和12個(gè)月，單核MDSC升高，而多形核MDSC和早期MDSC的比例不變。且應(yīng)用雷帕霉素的受者對(duì)單核細(xì)胞MDSC的抑制作用減弱，可能是由于吲哚胺2，3-雙加氧酶（indoleamine-2,3-dioxygenase，IDO）表達(dá)受阻造成的[42]。該研究提示雷帕霉素可能通過影響單核MDSC的功能而阻止移植免疫耐受的建立。

2 免疫分子在排斥反應(yīng)中的作用及其在誘導(dǎo)移植免疫耐受中的新嘗試

從分子（核酸和蛋白質(zhì)）水平誘導(dǎo)免疫耐受也是2020年一項(xiàng)研究熱點(diǎn)。隨著基因編輯（如CRISPRCas9）技術(shù)的日趨完善及其脫靶效應(yīng)和成本的降低，構(gòu)建基因敲除鼠越來越高效。同時(shí)，單細(xì)胞測(cè)序、大數(shù)據(jù)分析等技術(shù)的飛速進(jìn)步，加速了我們對(duì)移植免疫耐受和排斥反應(yīng)的分子機(jī)制的理解和操控技術(shù)研發(fā)，新型抑制劑或激動(dòng)劑的研發(fā)也為誘導(dǎo)移植免疫耐受提供了更多的選擇。

2.1 DNA

最近研究表明，線粒體DNA也參與排斥反應(yīng)。老年供體器官仍然具有開發(fā)的潛力，可以緩解供器官短缺，但也可加重排斥反應(yīng)，可能與年齡特異性炎癥反應(yīng)和免疫原性增加有關(guān)。Iske等[43]研究發(fā)現(xiàn)衰老細(xì)胞釋放的細(xì)胞游離線粒體DNA（cell-free mitochondrial DNA，cf-mt-DNA）隨著衰老而積累并增強(qiáng)免疫原性。IRI誘導(dǎo)cf-mt-DNA系統(tǒng)性增加，促進(jìn)DC介導(dǎo)的年齡特異性炎癥反應(yīng)。臨床上老年心臟死亡器官捐獻(xiàn)供者的cf-mt-DNA水平升高，分離的cf-mt-DNA能夠激活人類DC[43]。在實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭?，用抗衰老藥治療老年供體動(dòng)物可清除衰老細(xì)胞并減少cf-mt-DNA的釋放，從而抑制年齡特異性免疫反應(yīng)，延長(zhǎng)老年心臟同種異體移植物的存活時(shí)間[43]。積累的cf-mt-DNA是炎癥衰老的關(guān)鍵因素和排斥反應(yīng)增強(qiáng)的原因之一，用抗衰老藥治療可能是一種用以改善老年供體器官移植結(jié)局的潛在方法。

2.2 小干擾RNA和長(zhǎng)鏈非編碼RNA

2020年在《American Journal of Transplantation》雜志發(fā)表的一篇綜述，系統(tǒng)地介紹了RNA干擾的發(fā)現(xiàn)、作用原理、限制因素及RNA干擾技術(shù)策略在器官移植（如肝、腎、肺、心臟移植）中的應(yīng)用[44]。IRI仍然是心臟移植失敗的主要原因。環(huán)狀RNA（circular RNA，circRNA）在基因調(diào)控和疾病發(fā)生中發(fā)揮重要作用。Su等[45]利用體內(nèi)小鼠心臟移植模型和體外心肌細(xì)胞培養(yǎng)模型，證明circRNA Foxo3（circFoxo3）在IRI的心臟和心肌細(xì)胞中的表達(dá)顯著上調(diào)。通過小干擾RNA（small interfering RNA，siRNA）敲低circFoxo3，在體外可減少細(xì)胞凋亡或死亡、線粒體損傷和凋亡或死亡相關(guān)基因的表達(dá)，在體內(nèi)可保護(hù)心臟移植物免受IRI。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，circFoxo3與Foxo3蛋白相互作用，抑制Foxo3的磷酸化，并間接影響微小核糖核酸（microRNA，miRNA，miR）-433和miR-136的表達(dá)。本研究提示circRNA是一種新型的分子調(diào)控因子，是預(yù)防心臟移植物IRI的潛在靶點(diǎn)。

CD134是一種在T細(xì)胞表面特異性表達(dá)的膜分子，是TNF受體（TNF receptor，TNFR）超家族的成員。據(jù)報(bào)道，通過miR-744阻斷CD134L-CD134的相互作用可降低移植心臟中活化T細(xì)胞的比例，并防止效應(yīng)性T細(xì)胞介導(dǎo)的排斥反應(yīng)。miR-744激動(dòng)劑可顯著延長(zhǎng)小鼠移植心臟的存活時(shí)間并減輕其排斥反應(yīng)[46]。此外，研究發(fā)現(xiàn)在沒有外源性免疫抑制劑的情況下，miR-142缺失會(huì)促進(jìn)小鼠同種異體移植心臟無限期存活。從機(jī)制上講，miR-142直接靶向TGF-β受體1來抑制Treg，因此在miR-142缺失的情況下Treg對(duì)TGF-β的敏感性增加，并通過增強(qiáng)外周Treg的反應(yīng)提高移植免疫耐受性[47]。Zhang等[48]報(bào)道，miR-199a拮抗劑聯(lián)合缺氧預(yù)處理MSC（H-MSC）不僅能顯著降低肝移植術(shù)后丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，ALT）和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（aspartate aminotransferase，AST）水平，而且能抑制炎癥反應(yīng)，改善肝細(xì)胞凋亡水平。而miR-199a激動(dòng)劑降低了H-MSC輸注的保護(hù)作用。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，用VEGF中和抗體治療可消除miR-199a抑制引起的肝臟保護(hù)作用。miR-199a拮抗劑可通過激活缺氧誘導(dǎo)因子1α-VEGF軸增強(qiáng)H-MSC輸注的保護(hù)作用。

有研究表明，長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）可作為T細(xì)胞介導(dǎo)的急性排斥反應(yīng)的生物標(biāo)志物。與具有穩(wěn)定腎功能的受者相比，發(fā)生急性排斥反應(yīng)和微血管損傷受者的血液中LNCEPHA6（一種lncRNA）水平較高，該lncRNA具有作為急性排斥反應(yīng)標(biāo)志物的潛在價(jià)值[49]。Li等[50]報(bào)道，肺移植術(shù)后原發(fā)性移植物功能障礙（primary graft dysfunction，PGD）患者支氣管肺泡灌洗液中miR-21水平降低，lncRNA X非活性特異性轉(zhuǎn)錄物（X-inactive specific transcript，XIST） 和 IL-12A 升高。XIST以miR-21依賴的方式上調(diào)IL-12A的表達(dá)。XIST沉默通過上調(diào)miR-21而下調(diào)IL-12A促進(jìn)多形核白細(xì)胞（polymorphonuclear neutrophil， PMN）凋亡，抑制中性粒細(xì)胞NET的形成[50]。研究表明lncRNAXIST通過結(jié)合miR-21上調(diào)IL-12A，提示抑制XIST和NET可能有利于PGD的治療。

2.3 細(xì)胞因子

眾所周知，細(xì)胞因子在器官移植過程中調(diào)節(jié)機(jī)體免疫應(yīng)答、維持免疫穩(wěn)態(tài)。炎癥因子在炎癥損傷中促進(jìn)炎癥激活，而抑炎因子對(duì)移植物具有保護(hù)作用。研究者通過抑制或阻斷炎癥因子的信號(hào)，或者增加抑炎因子以及細(xì)胞因子與藥物聯(lián)合等手段，延長(zhǎng)移植物的存活時(shí)間。

IL-1/IL-1R是經(jīng)典的炎癥信號(hào)通路，使用IL-1R拮抗劑anakinra阻斷IL-1R的信號(hào)通路，可減少巨細(xì)胞病毒（cytomegalovirus，CMV）感染的供體心臟中CMV的病毒載量，減輕心臟移植受體的IRI[51]，為提高來自CMV感染供體心臟移植物的存活率提供一種新的治療方法。

IL-7是T細(xì)胞生成和存活的重要細(xì)胞因子。在小鼠移植模型中，阻斷IL-7信號(hào)通路可通過抑制T細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)和加強(qiáng)免疫調(diào)節(jié)，促進(jìn)移植物長(zhǎng)期存活或誘導(dǎo)免疫耐受。Mai等[52]評(píng)估了CD127單抗聯(lián)合低劑量他克莫司或抗胸腺細(xì)胞球蛋白在狒狒同種異體腎移植模型中的作用。研究發(fā)現(xiàn)，與單用小劑量他克莫司或抗胸腺細(xì)胞球蛋白相比，在治療方案中加入抗CD127單抗并不能延長(zhǎng)移植物的存活時(shí)間。給予抗CD127單抗導(dǎo)致在隨訪期間CD127受體被完全占據(jù)。然而，所有接受治療的動(dòng)物在腎移植術(shù)后1～2周內(nèi)都發(fā)生了移植物丟失[52]。與嚙齒動(dòng)物不同，在非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物中，抗CD127單抗治療沒有減少T細(xì)胞及其亞群的數(shù)量，也未能有效抑制消耗后的T細(xì)胞增殖和穩(wěn)態(tài)，表明IL-7不是靈長(zhǎng)類動(dòng)物T細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的限制因子[52]。

IL-21是一種具有多效作用的細(xì)胞因子，可在移植術(shù)后維持機(jī)體免疫穩(wěn)態(tài)。在腎移植受者血清中，未發(fā)生排斥反應(yīng)的腎移植受者其IL-21水平高于發(fā)生T細(xì)胞介導(dǎo)的排斥反應(yīng)和抗體介導(dǎo)的排斥反應(yīng)受者，并且IL-21與損傷標(biāo)志物肌酐的水平呈負(fù)相關(guān)[53]。然而，在小鼠腎移植模型中，尾靜脈過繼外源性IL-21反而加速了急性排斥反應(yīng)。進(jìn)一步分析表明，IL-21治療后脾臟中IL-21水平升高誘導(dǎo)了CD4+T細(xì)胞和CD19+B細(xì)胞增殖，從而加速急性排斥反應(yīng)[53]。在人源化皮膚移植模型中，使用IL-21受體拮抗劑阻斷IL-21的信號(hào)傳導(dǎo)后，可減輕同種異體皮膚移植排斥反應(yīng)[54]。

目前，對(duì)于移植物局部?jī)?nèi)源性保護(hù)性調(diào)節(jié)因子的了解仍甚少。Li等[55]發(fā)現(xiàn)同種異基因心臟移植物基質(zhì)細(xì)胞分泌的警報(bào)素IL-33可以直接負(fù)向調(diào)控移植物早期浸潤(rùn)的巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)，抑制慢性排斥反應(yīng)。IL-33主要通過調(diào)控巨噬細(xì)胞代謝特征使其向組織修復(fù)和調(diào)節(jié)功能偏移[55]。因此，IL-33可能是一個(gè)限制局部炎癥反應(yīng)和慢性排斥反應(yīng)的重要分子。

BAFF與DSA及腎移植不良預(yù)后相關(guān)。在大鼠腎移植模型中，抗BAFF治療可降低移植物和脾臟中B細(xì)胞的數(shù)量，生發(fā)中心面積減小，漿母細(xì)胞或漿細(xì)胞數(shù)量減少，某些IgG亞型的DSA減少[56]?？笲AFF治療組大鼠IL-6、共刺激分子CD40和誘導(dǎo)型T細(xì)胞共刺激配體的信使RNA表達(dá)顯著降低，提示抗BAFF治療可在多個(gè)水平上影響受體的體液反應(yīng)[56]。

2.4 細(xì)胞膜分子

細(xì)胞膜分子在移植免疫過程中起著調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞活化、控制免疫應(yīng)答進(jìn)程等作用。在小鼠胰島移植模型中，通過盲腸靜脈過繼同種異體胰島細(xì)胞至糖尿病小鼠的肝臟后，短期使用抗CD154 單抗（MR1）進(jìn)行治療，可將胰島移植物存活時(shí)間延長(zhǎng)至250 d以上[57]。同樣，MR1短期療法還可以適度緩解皮膚移植小鼠的排斥反應(yīng)，這是由于耐受小鼠的Treg對(duì)效應(yīng)性T細(xì)胞增殖具有更強(qiáng)的抑制作用[57]。應(yīng)用局部釋放嵌合鏈霉親和素（chimeric streptavidin，SA）-程序性細(xì)胞死亡蛋白配體1（programmed cell death proteinligand 1，PD-L1）的微凝膠與雷帕霉素聯(lián)合治療可改善胰島移植物的局部排斥反應(yīng)，增加局部Treg和無能T細(xì)胞，從而使移植物長(zhǎng)期存活[58]。該生物材料調(diào)控局部炎癥微環(huán)境可避免全身免疫抑制帶來的不良反應(yīng)。此外，研究發(fā)現(xiàn)敲除CD26可減少移植物壞死并緩解移植排斥反應(yīng)。皮膚移植后，敲除鼠中促炎因子IFN-γ、IL-2、IL-6、IL-4和IL-13的分泌水平顯著降低，而抑炎因子IL-10的水平升高，血清中的IL-17水平和小鼠外周血淋巴細(xì)胞中分泌IL-17的細(xì)胞比例均顯著降低，IgG水平也顯著降低，而Treg的比例則顯著增加，其移植組織中的浸潤(rùn)巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞較少[59]。人源化抗CD2單抗siplizumab已經(jīng)用于骨髓移植預(yù)處理和骨髓-腎臟聯(lián)合移植免疫耐受誘導(dǎo)方案中。在體外混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)（mixedlymphocyte reaction，MLR）體系中，siplizumab主要減少記憶性CD4+和CD8+T細(xì)胞，由于此群細(xì)胞較幼稚T細(xì)胞和靜息Treg表達(dá)更高的CD2分子，從而富集CD45RA-Foxp3+Treg[60]。siplizumab對(duì)免疫細(xì)胞亞群的不同作用可能是其誘導(dǎo)移植免疫耐受的原因之一。

2.5 抑制劑

DNA依賴性蛋白激酶催化亞基DNA-PKcs是細(xì)胞和體液免疫反應(yīng)的重要組成部分。DNA-PKcs抑制了 IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α 和 IFN-γ 的產(chǎn)生以及CD3+淋巴細(xì)胞向移植物中的浸潤(rùn)。此外，DNA-PKcs通過抑制p65亞基的表達(dá)進(jìn)而抑制NF-κB信號(hào)通路，有助于緩解同種異體移植排斥反應(yīng)[61]。在一項(xiàng)大鼠腎移植模型的研究中，氨基甲酸酯化的非造血型促紅細(xì)胞生成素（erythropoietin，EPO）衍生物——氨甲酰化EPO（carbamylated EPO，CEPO）通過激活磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶（phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase，PI3K/Akt）信號(hào)通路，調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答并促進(jìn)同種異體腎移植物存活。在體外實(shí)驗(yàn)中，CEPO抑制DC的分化和功能，調(diào)節(jié)DC促炎因子和抑炎因子的產(chǎn)生，并激活先天性免疫細(xì)胞的EPO受體（EPO receptor，EPOR）信使RNA轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)表達(dá)[62]。因此，CEPO可作為促進(jìn)同種異體腎移植物存活的潛在藥物。此外，研究發(fā)現(xiàn)CTLA4-Ig是一種融合蛋白，可阻斷抗原提呈細(xì)胞與T細(xì)胞之間的CD28信號(hào)傳導(dǎo)。有研究表明，CTLA4-Ig的抗排斥反應(yīng)效果具有年齡特異性。CTLA4-Ig可減少年輕小鼠受體體內(nèi)CD4+中央記憶性和效應(yīng)記憶性T細(xì)胞，無限延長(zhǎng)同種異體心臟移植物的存活時(shí)間；而老年小鼠中CD28+Treg表達(dá)水平較高，CTLA4-Ig的使用降低了Treg水平，導(dǎo)致老年受體排斥反應(yīng)加劇[63]。

β-catenin是重要的輔助因子，可結(jié)合多個(gè)轉(zhuǎn)錄因子并調(diào)控纖維化的信號(hào)通路。有研究證明，β-catenin與轉(zhuǎn)錄因子TCF1結(jié)合可緩解移植腎的纖維化[64]。另一項(xiàng)研究將β-catenin過表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到心臟細(xì)胞系HL-1細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，β-catenin的過表達(dá)可減弱Rho相關(guān)螺旋蛋白激酶（Rho-associated coiled-coil containing protein kinase，ROCK）1/ 磷酸酶與張力蛋白同源物（phosphatase and tensin homolog，PTEN）信號(hào)通路的激活，表明心臟移植誘發(fā)的IRI與β-catenin的下調(diào)以及ROCK1和PTEN表達(dá)上調(diào)密切相關(guān)[65]。

α-1抗胰蛋白酶（α-1 antitrypsin，AAT）在動(dòng)物胰島移植模型中具有保護(hù)作用。Gou等[66]在臨床胰島移植（通過門靜脈注射胰島細(xì)胞至患者肝內(nèi)）模型中研究了AAT的保護(hù)機(jī)制。在移植術(shù)后60 d，接受胰島移植和AAT治療的受體中，68.9%達(dá)到正常血糖水平，而僅接受胰島移植的受體為35.7%。與對(duì)照組相比，AAT治療組小鼠血清炎癥因子水平明顯降低，肝臟中M1巨噬細(xì)胞減少。AAT在體外通過抑制STAT1磷酸化和iNOS產(chǎn)生抑制IFN-γ誘導(dǎo)的M1巨噬細(xì)胞活化或極化[66]。AAT抑制由細(xì)胞因子或死亡胰島誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞活化，有助于胰島移植物的存活[66]。

2.6 激動(dòng)劑

腺苷（adenosine，A）是先天性和后天性免疫的有效調(diào)節(jié)劑，并具有4種亞型A1受體（A1 receptor，A1R）、A2R、A3R、A4R。A1R激動(dòng)劑的預(yù)先給藥導(dǎo)致A1R脫敏，隨后腺苷A2R表達(dá)上調(diào)。對(duì)小鼠預(yù)先使用A1R激動(dòng)劑，可減輕其肌肉移植和正常皮膚移植中的細(xì)胞浸潤(rùn)和缺血性損傷，且不會(huì)對(duì)T細(xì)胞增殖產(chǎn)生影響。同時(shí)，脾細(xì)胞的雙向混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)顯示受體T細(xì)胞反應(yīng)性降低[67]。另一項(xiàng)研究表明，在小鼠心臟移植模型中，抗氧化劑核因子E2相關(guān)因子 2（nuclear factor E 2-related factor 2，Nrf2）激動(dòng)劑的使用，可恢復(fù)Nrf2敲除鼠超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）1 / 2活性，降低因NF-κB信號(hào)通路激活產(chǎn)生的促炎因子信使RNA水平和Caspase-3水平，明確了Nrf2抑制NF-κB活化的作用[68]。

2.7 新材料

目前人們嘗試將生物工程改造的外泌體應(yīng)用于免疫耐受誘導(dǎo)、RNA和小分子遞送。使用生物工程方法設(shè)計(jì)的PD-L1/CTLA-4雙靶向的細(xì)胞外泌體樣納米囊泡，可特異性結(jié)合T細(xì)胞和DC表面的程序性細(xì)胞死亡蛋白1（programmed cell death-1，PD-1）和CD80配體，增強(qiáng)PD-1/PD-L1和CTLA-4/CD80免疫抑制途徑，從而減少T細(xì)胞的活化和增殖，降低CD8+T細(xì)胞的密度和細(xì)胞因子的產(chǎn)生，增加Treg數(shù)量，并延長(zhǎng)了小鼠皮膚和心臟移植物的存活時(shí)間[69]。同樣，一種全新的基于間充質(zhì)干細(xì)胞的靶向DC-外泌體的RNA遞送系統(tǒng)，可以特異性結(jié)合DC并以內(nèi)吞方式進(jìn)入細(xì)胞，在胞內(nèi)將包含的嵌合體酶切為mTOR siRNA，進(jìn)而抑制mTOR信號(hào)通路和免疫反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)快速誘導(dǎo)免疫耐受；同時(shí)，將外泌體進(jìn)行聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）-聚乙烯亞胺（polyethylenimine，PEI）多聚體修飾后， 可以維持其長(zhǎng)時(shí)間的穩(wěn)定性[70]。

3 生物信息學(xué)分析

急性排斥反應(yīng)的可靠生物標(biāo)志物和潛在的分子機(jī)制仍有待確定。有研究表明，在小鼠的心臟移植模型中，miR-669b-3p負(fù)性調(diào)控發(fā)揮免疫抑制作用的IDO[71]。同樣，miR-669b-3p可抑制CD4+T細(xì)胞凋亡，調(diào)節(jié)炎癥因子TNF-α和IL-10的表達(dá)，并有助于炎癥因子向Th2主導(dǎo)反應(yīng)轉(zhuǎn)變[72]。因此，miR-669b-3p可作為同種異體移植急性排斥反應(yīng)的潛在生物標(biāo)志物。有研究者通過對(duì)腎移植受者的血漿進(jìn)行DNA測(cè)序，檢測(cè)供者來源性細(xì)胞游離DNA（donor-derived cell-free DNA，dd-cfDNA）并進(jìn)行量化，發(fā)現(xiàn)受者血漿中dd-cfDNA相對(duì)含量的增加與腎移植物損傷加劇有關(guān)，指出dd-cfDNA可作為腎移植物損傷的新型生物標(biāo)志物[73]。

此外，研究者通過使用R包limma軟件篩選發(fā)生排斥反應(yīng)和穩(wěn)定的肺移植物樣品之間的差異表達(dá)基因（differentially expressed gene，DEG），并構(gòu)建了蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)，miRNA-轉(zhuǎn)錄因子（transcription factor，TF）-DEG相互作用的分子網(wǎng)絡(luò)。在發(fā)生排斥反應(yīng)和穩(wěn)定的肺移植物樣品之間重點(diǎn)篩選出6個(gè)差異表達(dá)基因（PTPRC、IL-6、ITGAM、CD86、TLR8和 TYROBP），8個(gè)轉(zhuǎn)錄因子（STAT1、SPIB、NFKB1、SPI1、STAT5A、RUNX1、VENTX 和BATF）及 5個(gè) miRNA（miR-335-5p、miR-26b-5p、miR-124-3p、miR-1-3p和miR-155-5p）[74]。同時(shí)，全面分析了肺移植中免疫細(xì)胞的浸潤(rùn)特性及調(diào)控機(jī)制，為肺移植排斥反應(yīng)的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)提供了一個(gè)全面的視角[74]。這些基因可能為預(yù)測(cè)肺移植排斥反應(yīng)的發(fā)生提供參考，值得進(jìn)一步研究。

4 展 望

綜上所述，2020年研究者從免疫細(xì)胞亞群和免疫分子方面進(jìn)行了大量研究，并取得了一系列重要的理論和科學(xué)問題的突破。在近期，天然免疫細(xì)胞和免疫細(xì)胞新亞群在器官移植排斥反應(yīng)和免疫耐受中的作用、調(diào)控器官移植排斥反應(yīng)的重要分子網(wǎng)絡(luò)的解析以及生物制劑和靶向藥物的研發(fā)仍是移植免疫學(xué)的重要研究?jī)?nèi)容。未來我們的目標(biāo)依舊是將基礎(chǔ)研究應(yīng)用于臨床，在不使用免疫抑制劑的前提下長(zhǎng)期誘導(dǎo)器官移植免疫耐受，提高器官移植受者的生活質(zhì)量。為了實(shí)現(xiàn)這個(gè)目標(biāo)，一方面我們要構(gòu)建人源化的動(dòng)物模型（例如人源化的免疫缺陷豬，人源化的大、小鼠）并優(yōu)化動(dòng)物移植模型（例如小鼠腎移植、小鼠心臟移植）使其技術(shù)難度降低并且更加普及；另一方面要推動(dòng)新型技術(shù)手段在器官移植基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用，如高通量測(cè)序技術(shù)、單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)、活體成像技術(shù)、體內(nèi)動(dòng)態(tài)示蹤技術(shù)等。最后，我們要重視跨學(xué)科與多學(xué)科合作，將3D打印、新型材料構(gòu)建體外器官再造、納米芯片靶向藥物遞送、人工智能及大數(shù)據(jù)分析等技術(shù)應(yīng)用到器官移植基礎(chǔ)研究中，為推動(dòng)未來器官移植的精準(zhǔn)診治和個(gè)性化醫(yī)療時(shí)代做必要準(zhǔn)備。