Hs-CRP、PCT、IL-6和NLR對肺部細(xì)菌及肺炎支原體感染的診斷價值

劉偉平 毛小倩

感染性疾病是臨床常見的多發(fā)病，主要是由細(xì)菌、病毒、真菌、支原體等侵入體內(nèi)引起的多伴有發(fā)熱癥狀的炎性反應(yīng)，嚴(yán)重感染是導(dǎo)致患者死亡的主要原因[1]。感染性疾病大多具有相似的臨床癥狀，抗菌藥物廣泛用于感染性疾病的治療中，在挽救多數(shù)患者生命的同時難免造成了一定的不合理應(yīng)用和濫用。如何運用更有效的檢測指標(biāo)對感染性疾病患者進(jìn)行早期的鑒別診斷、預(yù)后評估和治療監(jiān)測，對于降低疾病病死率尤為關(guān)鍵[2]。超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、降鈣素原(PCT)、中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值(NLR)、白細(xì)胞介素6(IL-6)均為反映機體炎癥的指標(biāo)，被臨床用于判斷感染性疾病的重要參考指標(biāo)[3～6]。細(xì)菌感染和支原體感染是引起肺部感染重要的致病菌，如何早期、快速、準(zhǔn)確鑒別診斷肺部細(xì)菌感染和肺炎支原體感染對于臨床合理用藥具有至關(guān)重要的作用[7,8]。本研究以細(xì)菌感染和肺炎支原體感染的初診入院患者作為研究對象，比較hs-CRP、PCT、IL-6和NLR4項檢測指標(biāo)在細(xì)菌感染和肺炎支原體感染鑒別診斷中的價值。

對象與方法

1.研究對象：于2020年12月～2021年2月在自貢市第一人民醫(yī)院初診的肺部感染性疾病患者131例。納入標(biāo)準(zhǔn): 具有明確的急性呼吸道感染癥狀且在出現(xiàn)癥狀后3～8h內(nèi)就診，就診前未服用任何藥物，未合并其他肺部感染性疾病或其他基礎(chǔ)性疾病，實驗室病原學(xué)檢測結(jié)果確定為肺部單一細(xì)菌感染或肺炎支原體感染，分別通過細(xì)菌培養(yǎng)和肺炎支原體核酸檢測確診。且完全符合肺部感染診斷標(biāo)準(zhǔn)的初診患者。肺部感染診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)《醫(yī)院感染診斷標(biāo)準(zhǔn)(試行)》[9]，具有下列5項中3項：①體溫升高(≥38.5℃)，伴外周血白細(xì)胞計數(shù)≥10.0×109/L; ②具有咳嗽、咳痰、呼吸深快等臨床癥狀; ③雙肺聽診有干、濕啰音; ④胸部X線或胸部CT檢查顯示肺部呈炎性改變; ⑤微生物學(xué)檢測、痰細(xì)菌培養(yǎng)陽性。排除標(biāo)準(zhǔn): 入院前已經(jīng)確診或處于潛伏期肺部感染的患者，同時排除各種腫瘤、自身免疫性疾病和慢性疾病。本研究經(jīng)筆者醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理學(xué)委員會審批通過，所有患者均簽署知情同意書。細(xì)菌感染組72例，其中男性34例，女性38例，患者年齡為6～80歲，中位數(shù)(四分位數(shù)間距)年齡為37(25，65)歲；肺炎支原體感染組59例，其中男性27例，女性32例，患者年齡為5～83歲，中位數(shù)(四分位數(shù)間距)年齡為28(17，64)歲。兩組研究對象在性別構(gòu)成比較采用χ2檢驗(χ2=0.132，P=0.988)，兩組間年齡分布采用非參數(shù)檢驗，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

2.主要儀器和試劑：HITACHI 008 AS全自動生化分析儀購自日本日立公司；時間分辨熒光免疫分析儀及配套PCT檢測試劑盒購自美國賽默飛世爾科技公司；i3000全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套IL-6檢測試劑盒購自四川邁克生物技術(shù)有限公司。XN-1000型全自動血液分析儀購自日本Sysmex公司。hs-CRP膠乳增強免疫透射比濁法檢測試劑盒購自四川邁克生物技術(shù)有限公司。

3.實驗方法：針對每個研究對象同時采集3管靜脈血標(biāo)本。第1管為EDTA抗凝的全血標(biāo)本，充分混勻后2h內(nèi)完成血細(xì)胞分析，通過NEUT和LYMPH值計算NLR值；第2管EDTA抗凝的全血標(biāo)本以3500r/min離心10min后分離出血漿置于-70℃凍存，用于測定血漿PCT。第3管為添加促凝劑的血清生化管標(biāo)本，離心分離出血清后于-70℃凍存，用于測定hs-CRP。所有病例標(biāo)本收集完成后在室溫下解凍，4h內(nèi)完成IL-6、PCT、hs-CRP。嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作。各種指標(biāo)的生物參考區(qū)間為：IL-6為 0～5.5pg/ml；hs-CRP為0～5mg/L；PCT為0～0.5ng/ml。

結(jié) 果

1.PCT、IL-6、hs-CRP、NLR檢測結(jié)果正態(tài)性檢驗：對各組的4項檢測指標(biāo)做正態(tài)性分析，得出細(xì)菌感染組和肺炎支原體感染組的PCT、IL-6、hs-CRP和NLR均為非正態(tài)性分布(表1)。

表1 細(xì)菌感染組和肺炎支原體感染組PCT、IL-6、hs-CRP、NLR的正態(tài)性檢驗

2.細(xì)菌感染組和肺炎支原體感染組PCT、IL-6、hs-CRP、NLR的比較：細(xì)菌感染組與肺炎支原體感染組比較，細(xì)菌感染組PCT、IL-6、hs-CRP、NLR水平顯著高于肺炎支原體感染組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01，表2)。

表2 細(xì)菌感染組和肺炎支原體感染組間PCT、IL-6、hs-CRP、NLR檢測結(jié)果[M(Q1,Q3)]

3.PCT、IL-6、hs-CRP、NLR診斷細(xì)菌感染和肺炎支原體感染的ROC曲線：PCT、IL-6、hs-CRP、NLR的ROC曲線下面積(AUC)分別為0.915、0.831、0.859、0.858，其中PCT的AUC最大，具有較高診斷價值；PCT、IL-6、hs-CRP與NLR最佳診斷界值分別是0.49ng/ml、19.50pg/ml、38.33mg/L與4.82。4項指標(biāo)聯(lián)合診斷的AUC為0.971(圖1)。

圖1 PCT、IL-6、hs-CRP、NLR鑒別診斷細(xì)菌感染和肺炎支原體感染的ROC曲線

4.PCT、IL-6、hs-CRP、NLR對肺部細(xì)菌感染與肺炎支原體感染的診斷效能：PCT、hs-CRP、IL-6、NLR對細(xì)菌感染和肺炎支原體感染的敏感度分別為88.9%、75.0%、79.2%和73.6%,特異性分別為86.4%、84.7%、79.7%和81.4%。聯(lián)合檢測的敏感度和特異性高于單一指標(biāo)，分別為98.0%和93.2%，詳見表3。

表3 PCT、IL-6、hs-CRP、NLR對細(xì)菌感染和肺炎支原體感染的診斷效能

討 論

感染性疾病(infection disease)是指細(xì)菌、真菌、病毒等病原微生物侵入人體組織并增殖，是由病原體及其產(chǎn)生的毒素等所引起的局部組織或全身性炎性反應(yīng)的一類疾病的統(tǒng)稱。目前，全球感染性疾病現(xiàn)狀嚴(yán)峻,已經(jīng)成為一種嚴(yán)重威脅人類健康的疾病[10,11]。細(xì)菌性感染和肺炎支原體感染均是人類呼吸道感染的常見病原之一?？焖勹b別細(xì)菌感染和支原體性肺炎，對于早期診斷和治療疾病具有重要的意義[12～14]。由于核酸檢測、培養(yǎng)等病原體金標(biāo)準(zhǔn)的檢測手段耗時費力，越來越多的炎性標(biāo)志物被用于輔助鑒別診斷感染性疾病的類型。近年來，臨床上出現(xiàn)的一些新的指標(biāo)如IL-6、NLR等成為研究熱點。

PCT是一種無活性的糖蛋白,在細(xì)菌感染后PCT水平升高,4h開始,12～24h可達(dá)到高峰，已發(fā)展為早期診斷細(xì)菌性感染的新型標(biāo)志物[15,16]。Hs-CRP是機體在應(yīng)激情況下由肝臟產(chǎn)生的一種急性反應(yīng)蛋白，機體發(fā)生感染后6～8h開始升高，24～48h到達(dá)高峰，血清hs-CRP已經(jīng)作為臨床上診斷感染性疾病和觀察療效的重要指標(biāo)之一。中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值(neutrophil/lymphocyte ratio，NLR)已被證明是急性炎癥感染早期敏感的標(biāo)志物，同時也是炎性疾病活動性及預(yù)后的重要預(yù)測指標(biāo)[17]。IL-6是一種功能廣泛的多效性細(xì)胞因子，于機體感染細(xì)菌后 2～3h內(nèi)即達(dá)到峰值，是近年來常用的急慢性炎癥指標(biāo)[18,19]。研究表明，PCT對細(xì)菌感染的敏感度及特異性均高于CRP，兩者聯(lián)合檢測可提高對細(xì)菌感染診斷的特異性[20]。

細(xì)菌性肺炎診斷的金標(biāo)準(zhǔn)是微生物培養(yǎng)，支原體性肺炎診斷主要依賴PCR檢測技術(shù)和抗體檢測技術(shù)，存在費時、費力、技術(shù)要求高等缺點。本研究通過檢測肺部細(xì)菌性感染和肺炎支原體感染疾病初診患者的PCT、IL-6、hs-CRP、NLR的水平，得出細(xì)菌感染組的PCT、IL-6、hs-CRP、NLR水平均高于肺炎支原體感染組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，兩組間的ROC曲線分析得出在臨界值PCT>0.49ng/ml、hs-CRP>38.33mg/L、NLR>4.82、IL-6>19.50pg/ml時對于鑒別診斷細(xì)菌感染和肺炎支原體感染有臨床價值，在臨界值處的診斷敏感度分別為88.9%、75.0%、79.2%和73.6%；特異性分別為86.4%、84.7%、79.2%和81.4%；AUC值分別為0.915、0.859、0.858和0.831。聯(lián)合檢測的AUC值為0.971，敏感度和特異性分別為98.0%和93.2%。在診斷鑒別肺部細(xì)菌性感染和肺炎支原體感染中，4項檢測指標(biāo)均是鑒別細(xì)菌性感染和肺炎支原體早期感染的有效標(biāo)志物，其中PCT的單獨診斷價值最高，這可能與細(xì)菌多糖在較短時間內(nèi)誘導(dǎo)生成大量 PCT有關(guān)，這與文獻(xiàn)報道結(jié)果一致[21]。

PCT、CRP在肺部早期細(xì)菌性感染患者體內(nèi)呈異常高表達(dá)，采用PCT、CRP聯(lián)合檢測，可顯著提高肺部早期細(xì)菌性感染敏感度、準(zhǔn)確度[22]。多項炎癥指標(biāo)包括PCT、IL-6、hs-CRP、NLR聯(lián)合檢測與單獨檢測比較，具有更高的診斷效能，雖與文獻(xiàn)報道的AUC值、診斷臨界值、敏感度和特異性有一定差異性，但4項炎癥指標(biāo)單獨診斷和聯(lián)合診斷對于細(xì)菌感染和其他類型感染鑒別診斷具有較好的臨床價值[23,24]。進(jìn)一步分析可知，NLR是血液常規(guī)分析中的計算指標(biāo)，具有價格低廉、簡單實用的特點，它可作為一項新的組合指標(biāo)出具在血液分析檢測報告中，用于醫(yī)療機構(gòu)特別是基層醫(yī)療機構(gòu)協(xié)助鑒別診斷細(xì)菌感染和支原體感染，對于節(jié)約醫(yī)療費用具有一定的意義。

綜上所述，PCT、NLR、IL-6、hs-CRP4項檢測指標(biāo)均能鑒別診斷細(xì)菌性感染和支原體感染，PCT的診斷價值最高。本研究的不足之處在于樣本量不夠大，進(jìn)一步增大樣本量開展多中心深入研究，有望提高鑒別診斷截斷值的準(zhǔn)確性。同時，聯(lián)合檢測PCT、NLR、IL-6、hs-CRP并結(jié)合臨床進(jìn)行綜合分析，可能更有助于臨床對肺部細(xì)菌感染和支原體感染的診斷。