高純度尿促性素對(duì)不同年齡卵巢儲(chǔ)備功能減退患者體外受精的影響

趙海君 盧 靜 張一嬌▲ 王玉紅 陳 靜 景 麗 常月婷 張洪峰

1.河北省邯鄲市中心醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科，河北邯鄲 056000；2.河北省石家莊市第四醫(yī)院婦二科，河北石家莊 050000；3.河北省邯鄲市中心醫(yī)院科研科，河北邯鄲 056000

隨著生活節(jié)奏加快婚育年齡延遲，女性35 歲以后卵泡耗竭加快質(zhì)量下降，卵巢儲(chǔ)備功能減退（diminished ovarian reserve，DOR）增加，體外受精-胚胎移植（in vitro fertilization-embryo transfer，IVF-ET）時(shí)常有低反應(yīng)、胚胎質(zhì)量差、妊娠率低等[1-4]發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn)，高純度尿促性素（highly purified human menopausal gonadotrophin，HP-hMG）可降低正常卵巢儲(chǔ)備者扳機(jī)日孕激素和輸卵管胚胎移植（tubal embryo transfer，TET）取消率[5]，提高優(yōu)質(zhì)胚胎率和累積妊娠率[6]，增加高反應(yīng)者優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)[7]。有關(guān)HP-hMG 和DOR 研究偏少，本研究觀察DOR 者使用HP-hMG 超促排卵的效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2015 年7 月至2019 年12 月河北省邯鄲市中心醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科的133 例DOR 患者，根據(jù)治療方案將其分為重組促卵泡素（recombinant follicle stimulating hormone，r-FSH）組（A 組，67 例）和HPhMG 組（B 組，66 例）；將兩組根據(jù)年齡（＜35 歲或≥35 歲）繼續(xù)分組，其中A 組＜35 歲33 例，≥35 歲34 例；B 組＜35 歲共31 例，≥35 歲35 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①基礎(chǔ)FSH≥10 mIU/ml 或FSH/黃體生成素（luteinizing hormone，LH）＞3.6[8]，抗苗勒氏管激素（anti Mullerian hormone，AMH）＜（0.5～1.1）ng/ml，竇卵泡數(shù)＜（5～7）枚，符合上述任何一條[9-11]；②首次IVF；③使用拮抗劑方案。排除標(biāo)準(zhǔn)：①多囊卵巢綜合征；②夫婦有染色體異常；③嚴(yán)重子宮病變；④全身性疾病。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有患者均簽署知情同意書。

1.2 治療方法

受試者月經(jīng)第2～3 天給予促性腺激素（gonadotrophin，Gn），r-FSH（瑞士默克雪蘭諾公司，75 IU/支）或HP-hMG（德國(guó)輝凌公司，75 IU/支）150～300 IU/d 拮抗劑方案促排，卵泡直徑13～14 mm 時(shí)給予促性腺激素釋放激素拮抗劑（瑞士默克雪蘭諾公司，0.25 mg/支）0.25 mg/d 至扳機(jī)日。1～2 枚主導(dǎo)卵泡直徑達(dá)18 mm時(shí)，注射重組人絨促性素（瑞士默克雪蘭諾公司，250 μg/支）250 μg，34～36 h 取卵，受精培養(yǎng)后進(jìn)行TET 或凍融胚胎移植（frozen-thawed embryo transfer，F(xiàn)ET）。每次移植1～2 枚胚胎，至少含1 枚優(yōu)質(zhì)胚胎。

1.3 觀察指標(biāo)

比較不同年齡下兩組不孕年限、體重指數(shù)（body mass index，BMI）、AMH、基礎(chǔ)FSH 和LH、Gn 天數(shù)和用量、扳機(jī)日雌激素（estrogen，E2）、獲卵數(shù)、2 原核（pronucleus，PN）受精率、優(yōu)質(zhì)胚胎率、累積妊娠率和活產(chǎn)率等。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，兩組間比較采用t 檢驗(yàn)；不符合正態(tài)分布的采用中位數(shù)（M）和四分位數(shù)（P25，P75）表示，兩組間比較采用秩和檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料用例數(shù)或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者一般資料比較

2.1.1 兩組<35 歲患者一般資料比較 兩組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05）。見表1。

表1 兩組＜35 歲患者一般資料比較

2.1.2 兩組≥35 歲患者一般資料比較 兩組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05）。見表2。

表2 兩組≥35 歲患者一般資料比較

2.2 兩組患者卵巢反應(yīng)性比較

2.2.1 兩組<35 歲患者卵巢反應(yīng)性比較 B 組Gn 用量多于A 組，扳機(jī)日E2水平低于A 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）。兩組Gn 天數(shù)、獲卵數(shù)、2PN 受精率、優(yōu)質(zhì)胚胎率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05）。見表3。

表3 兩組＜35 歲患者卵巢反應(yīng)性比較

2.2.2 兩組≥35 歲卵巢反應(yīng)性比較 B 組Gn 用量、優(yōu)質(zhì)胚胎率高于A 組，扳機(jī)日E2水平、獲卵數(shù)低于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）。兩組Gn 天數(shù)、2PN受精率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05）。見表4。

表4 兩組≥35 歲卵巢反應(yīng)性比較

2.3 兩組患者妊娠結(jié)局比較

2.3.1 兩組<35 歲患者妊娠結(jié)局比較 兩組累積妊娠率、累積活產(chǎn)率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05）。見表5。

表5 兩組＜35 歲患者妊娠結(jié)局比較[%（n1/n2）]

2.3.2 兩組≥35 歲患者妊娠結(jié)局比較 兩組累積妊娠率和累積活產(chǎn)率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05）。見表6。

表6 兩組≥35 歲患者妊娠結(jié)局比較[%（n1/n2）]

3 討論

女性35 歲后DOR 增加，妊娠率和活產(chǎn)率下降[12]。Leijdekkers 等[13]發(fā)現(xiàn)波塞冬標(biāo)準(zhǔn)預(yù)期反應(yīng)不良者，≥35 歲累積妊娠率比＜35 歲降低20%。研究發(fā)現(xiàn)，添加HP-hMG 可提高著床率、臨床妊娠率和活產(chǎn)率[14]，高反應(yīng)者TET 后流產(chǎn)減少、持續(xù)妊娠率升高，卵巢過(guò)度刺激降低[15-16]。目前HP-hMG 與DOR 相關(guān)研究很少，本研究觀察DOR 患者HP-hMG 的應(yīng)用效果，且本研究結(jié)果與其他研究[17-18]一致。

月經(jīng)中期垂體分泌少量人絨毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin，hCG）與LH 共用受體促進(jìn)卵泡成熟排卵。高齡LH 受體表達(dá)下降調(diào)節(jié)功能受損，影響LH 峰出現(xiàn)[19]和配子胚胎質(zhì)量。HP-hMG 含有FSH 和hCG 驅(qū)動(dòng)的LH[20]，半衰期長(zhǎng)、作用持久[21]。Santi 等[22]發(fā)現(xiàn)hMG 有助于獲得成熟卵母細(xì)胞和胚胎，提高著床率。本研究結(jié)果顯示，HP-hMG 可提高DOR 優(yōu)質(zhì)胚胎率，≥35 歲患者更明顯。hCG 和LH 分子特征不同觸發(fā)信號(hào)傳導(dǎo)不同，hCG 介導(dǎo)環(huán)磷酸腺苷生成更多[23-24]。hMG 特有hCG 活性有助于在體內(nèi)選擇高質(zhì)量卵母細(xì)胞，獲得優(yōu)質(zhì)胚胎并改善活產(chǎn)[25]。本研究結(jié)果顯示，≥35 歲患者HP-hMG 累積活產(chǎn)率有升高趨勢(shì)，而兩組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05），可能與樣本量較少有關(guān)。

綜上所述，HP-hMG 可改善≥35 歲DOR 優(yōu)質(zhì)胚胎率，后續(xù)擬擴(kuò)大樣本量進(jìn)行隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)，進(jìn)一步驗(yàn)證HP-hMG 應(yīng)用效果。