一例雞傳染性法氏囊病與大腸桿菌病混合感染的診斷

庭國勛，周遠兵，鄭天靜，韋明武，羅登蕎

(1.黔南布依族苗族自治州養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展中心，貴州 都勻 558000；2.甕安縣養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展中心，貴州 甕安 550400)

1 發(fā)病情況

甕安縣某養(yǎng)殖場飼養(yǎng)雞4 000只，2019年10月雞(31日齡)出現(xiàn)死亡，病初每天死亡1～2只，隨著日齡增加，死亡數(shù)量逐漸增加，至41日齡時已死亡400余只。臨床癥狀主要表現(xiàn)：采食量下降、扎堆、垂翅、羽毛松亂、排白色或綠色稀糞。經(jīng)調查雞場獸醫(yī)曾用黃芪多糖拌料治療，效果不明顯。經(jīng)調查雞場僅進行了新城疫免疫。

2 病理變化

對10只病死雞進行剖檢，主要病理變化為：胸肌、腿肌有明顯的條狀或帶狀出血(8/10)；腺胃乳頭出血，肌胃與腺胃交界處有帶狀出血(6/10)；十二指腸黏膜有出血點(4/10)；腎臟腫大，輸尿管內有白色尿酸鹽沉積(8/10)；法氏囊黃色膠胨樣水腫、出血，嚴重者呈“紫葡萄”狀(7/10)(見圖1)；肝臟呈古銅色，部分表面有纖維素性滲出物及白色壞死灶(5/10)。

圖1 法氏囊呈“紫葡萄”狀

3 實驗室檢驗

3.1 瓊脂擴散試驗取5只病變明顯的病死雞法氏囊分別剪碎，加入適量PBS液研磨，3 500 r/min離心10 min，取上清液2 mL，與傳染性法氏囊病病毒標準抗原(對照)、陽性血清分別加入打孔的瓊脂平板，靜置5～10 min，待孔內液體吸收完全，放入濕盒，置于37 ℃溫箱中24 h，結果見圖2：1～7號孔均出現(xiàn)清晰的乳白色沉淀線，表明存在傳染性法氏囊病病毒。

1：標準抗原；2～6：檢測上清液；7：陽性血清圖2 瓊脂擴散試驗結果

3.2 細菌分離培養(yǎng)鑒定

3.2.1 細菌分離培養(yǎng)在無菌條件下，取病變明顯的1只病死雞肝臟，分別劃線接種于普通瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基，37 ℃溫箱培養(yǎng)24～48 h，觀察結果。挑取典型菌落分別接種于普通瓊脂培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基純化培養(yǎng)，觀察菌落生長情況。結果在普通瓊脂培養(yǎng)基上長出中等大小、圓形、隆起、光滑、濕潤、半透明的灰色菌落；在麥康凱培養(yǎng)基上長出邊緣整齊、稍凸起、表面光滑濕潤、直徑1.5～2 mm 的粉紅色菌落。挑取單個菌落涂片，革蘭氏染色鏡檢，可見兩端鈍圓、粗短的革蘭氏陰性桿菌(見圖3)。菌落及菌體符合大腸桿菌的特征。

圖3 細菌革蘭氏染色

3.2.2 生化實驗挑取純培養(yǎng)菌落分別接種至葡萄糖、蔗糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇、靛基質、枸櫞酸鹽、麥康凱、H2S、M.R微量發(fā)酵管中，37 ℃恒溫培養(yǎng)2～3 d，結果見表1：該分離菌可發(fā)酵葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇；葡萄糖、乳糖、麥芽糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣；靛基質產(chǎn)酸；蔗糖、H2S試驗陰性，不利用枸櫞酸鹽；M.R試驗陽性；在麥康凱培養(yǎng)基中生長呈紅色菌落；三糖鐵培養(yǎng)基變成黃色。生化試驗結果符合大腸桿菌的特征。

表1 細菌生化試驗結果

3.2.3 藥敏試驗挑取菌落劃線接種于普通瓊脂培養(yǎng)基，將藥敏試紙片貼于培養(yǎng)基，37 ℃培養(yǎng)24 h，測量抑菌圈直徑。結果見表2：該菌對新霉素高度敏感，對恩諾沙星中度敏感，對多西環(huán)素(強力霉素)、四環(huán)素低度敏感；對慶大霉素、氟苯尼考、鏈霉素、卡那霉素、紅霉素、桿菌肽耐藥。

表2 分離細菌藥敏試驗結果

4 診斷

根據(jù)臨床癥狀、病理變化和實驗室檢驗結果，綜合診斷該雞場病例為傳染性法氏囊病與大腸桿菌病混合感染。

5 防治措施

5.1 隔離免疫對場內病雞進行隔離，病死雞進行無害化處理，養(yǎng)殖場地進行清洗消毒，并對同群的健康雞進行雞傳染性法氏囊病疫苗緊急免疫。病雞肌肉注射高免血清(或高免卵黃抗體)1～2 mL/只。

5.2 控制細菌感染根據(jù)藥敏試驗結果，雞群中分離到的大腸桿菌對新霉素敏感性較高，選擇口服或者肌肉注射控制感染。同時對所有雞用板藍根沖劑、電解多維素、囊感清(按說明書用量)進行飲水，提高雞群抵抗力[1]。

5.3 加強飼養(yǎng)管理雞傳染性法氏囊病是由傳染性法氏囊病病毒引起的急性、高度接觸性傳染病，3～6周齡雛雞最易感[2]。感染后可導致雞免疫抑制，尤其是雞的體液免疫功能受到嚴重破壞，不僅降低機體對病原的抵抗力，還導致疫苗免疫效果差或免疫失敗，給養(yǎng)雞生產(chǎn)造成嚴重經(jīng)濟損失[3]。該病應以預防為主，治療為輔。一是制定合理的免疫程序，12～16日齡用傳染性法氏囊病弱毒疫苗進行首免，28～32日齡再補免1次[4]。二是做好飼養(yǎng)管理，養(yǎng)殖過程中做到“全進全出”，防止從場外將疫病傳入雞場。做好雞舍清潔衛(wèi)生和生物安全防護，定期開展有效的消毒工作。